喉癌DNA倍体分析的临床意义

本文应用图像分析技术，研究３８例喉鳞癌和２９例喉部良性病变组织中，细胞ＤＮＡ倍体分布状况，分析了其临床意义，结果显示；（１）喉癌组２Ｃ细胞比良性病变组织明业减少，而３Ｃ－４Ｃ细胞，５Ｃ及５Ｃ以上，（以下简称ＤＮＡ５Ｃ－）细胞比后者明显增加，表明喉癌组织中细胞有较强的增殖活性；（２）以ＤＮＡ３Ｃ及３Ｃ以上（以下简称ＤＮＡ３Ｃ－）细胞百分率为指标，在喉癌的诊断和鉴别诊断中有较好的诊断性能，以ＤＮＡ３Ｃ     

喉癌线粒体DNA D-loop高变区突变与临床病理的相关性

目的 研究喉鳞状细胞癌(简称喉癌)线粒体DNA(Imitochondrial DNA,mtDNA)D-loop高变区(hypervariable region,HV)突变情况,及其与临床病理特性的关系.方法 选取40例喉癌、相应癌周组织的石蜡标本及对应患者外周静脉血,分别提取总DNA.取mtDNA的D-loop高变Ⅰ区(HV Ⅰ)和高变Ⅱ区(HVⅡ)为目的 片断,进行PCR扩增、纯化和测序,对比分析HV Ⅰ和HV Ⅱ序列突变情况,并分析突变与临床病理特征的关系.结果①40例喉癌中发现86个多态性改变,52.5%(21/40)患者有癌组织或癌周组织的体细胞突变34例次,在HV Ⅰ和HV Ⅱ区发生突变个数分别28(82.4%)和6个(17.6%),D310区是突变高发位点;②mtDNA突变与喉癌分化程度(P=0.028)及p53突变(P=0.041)关系有统计学意义.结论喉癌的mtDNA D-loop高变区区是一个具有高频突变率和高度多态性的不稳定区域,突变和多态性可能在喉癌的发生、发展过程中起着一定的作用.     

喉癌DNA倍体分析的临床意义

本文应用图像分析技术，研究３８例喉鳞癌和２９例喉部良性病变组织中，细胞ＤＮＡ倍体分布状况，分析了其临床意义。结果显示：①喉癌组２Ｃ细胞比良性病变组明显减少，而３Ｃ—４Ｃ细胞、５Ｃ及５Ｃ以上（以下简称ＤＮＡ５Ｃ—）细胞比后者明显增加，表明喉癌组织中细胞有较强的增殖活性；②以ＤＮＡ３Ｃ及３Ｃ以上（以下简称ＤＮＡ３Ｃ—）细胞百分率为指标，在喉癌的诊断和鉴别诊断中有较好的诊断性能，以ＤＮＡ３Ｃ—细胞百分率大于４９％为诊断标准，敏感度达９４．７４％，特异度达８９．６６％，使用图像分析仪，以ＤＮＡ倍体分布为依据，进行喉癌的病理诊断和鉴别诊断，具有一定实用价值；③ＤＮＡ５Ｃ—细胞百分率大于３３％的喉癌患者５年生存率比小于３３％的患者低。ＤＮＡ倍体分析对喉癌有一定预后价值。     

喉癌血清DBP异质性和癌组织PCNA表达检测及临床意义

应用环关免疫单扩散法及免疫组化技术对４４例喉癌病人血清及３２例癌组织进行血清ＤＢＰ异质性和组织ＰＣＮＡ表达检测，发现各期喉癌病人血清中均存在ＤＢＰ异常表达，并与化疗及复发有关；而与分型，淋巴细胞转移及病理分化无关；且血清ＤＢＰ阳性喉癌组织中ＰＣＮＡ的表达率较高。提示它有较刘的增殖活性，血清ＤＢＰ异质性与喉癌的发生发展有密切关系。     

晚期喉癌边缘DNA含量和增殖细胞核抗原表达

目的 探讨晚期喉癌边缘ＤＮＡ含量和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达与喉癌手术预后的关系。方法 通过ＰＣＮＡ表达和ＤＮＡ含量检测，对３４例晚期喉癌边缘进行观察。结果 肿瘤边缘１．０、０．５、０ｃｍ处粘膜，ＰＣＮＡ指数分别为８．６２％，１７．７６％和５０．３２％。ＤＮＡ指数分别为０．９８、１．０８２和１．４３６。统计学分析１．０、０．５ｃｍ处粘膜０ｃｍ处粘膜差异有显著性（Ｐ〈０．０１）。结论 中、重度非     

甲状腺乳头状癌细胞线粒体DNA D环区的突变

目的研究线粒体DNAD环（D—loop）区在甲状腺乳头状癌中的突变情况。方法对35例甲状腺乳头状癌患者的癌组织和外周血淋巴细胞抽提线粒体DNA，再行PCR产物直接测序的方法对线粒体D环区的两个高变区（HVR—I和HVR-Ⅱ）进行突变检测。结果在35例甲状腺乳头状癌患者中有2例发现突变，突变率为5．7％。突变位点5个，都在HVR-Ⅱ区，均为同质性突变，其中2个属于微卫星不稳定，其余3个属于碱基替代突变。研究同时发现2个尚未报道的新的多态位点（nt324：C→G，ntl6092：T→A）。结论与其他上皮来源肿瘤相比，线粒体DNAD环区在甲状腺乳头状癌中的突变率不高，其与甲状腺乳头状癌发生的关系仍有待于进一步研究。     

喉癌EGFR和PCNA表达及DNA含量的研究

研究喉鳞癌中表皮生长因子受体、增殖细胞核抗原的表达和ＤＮＡ含量,分析各指标间的相关性及与喉癌临床生物学行为和预后的关系。方法：用免疫组化ＳＰ法和图像分析仪检测正常喉粘膜、喉鳞癌的ＥＧＦＲ、ＰＣＮＡ和ＤＮＡ指数,结合临床资料进行分析。结果：喉鳞癌的ＥＧＦＲ的阳性表达率为５４．８％,与正常喉组织的差异有统计学意义,但ＥＧＦＲ的阳性表达与喉癌的病理分级和５年生丰率无显著相关,而ＰＣＮＡ阳性表达和ＤＩ则随     

晚期喉癌边缘DNA含量和增殖细胞核抗原表达

目的探讨晚期喉癌边缘ＤＮＡ含量和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达与喉癌手术预后的关系。方法通过ＰＣＮＡ表达和ＤＮＡ含量检测，对３４例晚期喉癌边缘进行观察。结果肿瘤边缘１．０、０．５、０ｃｍ处粘膜，ＰＣＮＡ指数分别为８．６２％、１７．７６％和５０．３２％。ＤＮＡ指数分别为０．９８、１．０８２和１．４３６。统计学分析，１．０、０．５ｃｍ处粘膜与０ｃｍ处粘膜差异有显著性（Ｐ＜０．０１）。结论中、重度非典型增生的上皮在分裂，增殖等生物学行为方面已与轻度非典型增生和单纯性增生的上皮细胞不同，手术切缘应在中度非典型性增生的粘膜上皮以外，即０．５ｃｍ以外。     

线粒体DNA突变与遗传性耳聋

由于线粒体ＤＮＡ研究方法的限制，线粒体ＤＮＡ突变与人类疾病关系的研究远远落后于核遗传病的认识。近年来由于ＰＣＲ及分子杂交等新技术的应用使线粒体疾病的研究取得了较大的进展，本简要综述了线粒体ＤＮＡ突变与多种遗传性耳聋症的最新分子遗传学研究进展。     

线粒体基因组单倍型类群与喉鳞状细胞癌的相关性研究

目的检测常见线粒体基因组（mtDNA）单倍型A、B、C、D、F、G、M在正常人群及喉癌患者中的分布频率,探讨mtDNA单倍型与喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC）发病的相关性。方法选取2013年12月~2015年12月80例LSCC患者作为实验组,同期选取健康体检者74例作为对照组（normal control, NC）,提取两组病例的全血DNA,经PCR-扩增、基因测序,划分单倍型及其子单倍型,计算mtDNA单倍型及其子单倍型在不同组的分布频率,运用SPSS 20.0统计学软件进行统计分析,P<0.05为有统计学意义。结果mtDNA单倍型B及D4在LSCC组的分布频率高于NC组(P﹤0.05),且与临床分期无关（P>0.05）。结论mtDNA单倍型B和D4可能是LSCC的风险因素,可以作为LSCC发病的基因筛查参考指标。     

Clinical significance of neuropilin-2 expression in laryngeal squamous cell carcinoma

PurposeThe purpose of the study is to evaluate the expression of NRP-2 and explore its role in Laryngeal squamous cell carcinoma (LSCC).Materials and methodsNRP-2 expression in 70 primary LSCC tissue specimens were analyzed by immunohistochemistry and correlated with clinicopathological parameters and patients´ survival rate. Additionally, 9 paired LSCC tissues were evaluated for NRP-2 expression by Western blotting.ResultsThe Western blotting indicated that NRP-2 expression levels in LSCC were significantly higher than those in the paraneoplastic tissues (P < 0.05). Immunohistochemistry staining revealed that NRP-2 was detected in all primary tumor samples, moreover, high expression of NRP-2 was significantly correlated with TNM stage (P < 0.05), clinical stage (P < 0.05), histological classification (P < 0.05), lymph node metastasis (P < 0.05) and recurrence (P = 0.001). Survival curves determined by the Kaplan-Meier method showed that high expression of NRP-2 can reduce overall survival (both group P < 0.05). Then we combined the NRP-2 expression and lymph node status, and Kaplan–Meier survival showed patients with high expression of NRP-2 or lymph node metastasis (+) had both shorter disease-free and overall survival than others (both P < 0.05). Multivariate Cox proportional hazards model analysis confirmed that histological grade (P = 0.045), lymph node metastasis (P = 0.020) and high expression of NRP-2 (P = 0.033) were statistically significant, independent predictor of prognosis.ConclusionsNRP-2 may contribute to LSCC progression and represents as a novel prognostic indicator as well as a potential therapeutic target for LSCC.     

MRP8和亲环素A在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的:研究MRP8和亲环素A(CypA)在喉鳞状细胞癌(LSCC)组织(标本)中的表达及其与LSCC发生、发展的关系。方法:应用免疫组织化学(SP法)染色技术对41例LSCC组织及41例配对癌旁正常组织石蜡标本进行MRP8和CypA的检测,并结合临床资料分析其意义。结果:MRP8和CypA在LSCC和癌旁正常组织表达均差异有统计学意义(P<0.01),在不同阳性等级的构成差异有统计学意义(P<0.01)。MRP8在不同年龄段、不同性别和有无颈淋巴结转移的LSCC组织中表达差异无统计学意义(P>0.05),在不同分化程度的LSCC患者组织中表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:MRP8的表达与LSCC组织的病理分化程度关系密切。MRP8和CypA在LSCC的发生、发展过程中起重要作用。     

喉鳞状细胞癌组织FLIP和PTEN蛋白的表达及其临床意义

目的：研究FLIP和PTEN在喉鳞状细胞癌组织中的表达,探讨FLIP在喉鳞状细胞癌发生发展中的作用及与PTEN的关系。方法：采用免疫组织化学SP法检测45例喉癌组织以及15例癌旁组织中的FLIP和PTEN的表达。结果：FLIP在喉癌中的表达阳性率（77．8％）高于癌旁组织（33．3％）（P〈0．05）,FLIP的表达与喉鳞状细胞癌患者的临床分期及颈淋巴结转移和预后均有关。PTEN在喉癌中的表达阳性率（65．0％）高于癌旁组织（0）,（P〈0．01）,PTEN的表达与喉鳞状细胞癌的肿瘤临床分期及分化程度、颈淋巴结转移和预后有关。FLIP与PTEN在喉鳞状细胞癌中的表达呈负相关。结论：FLIP可能是喉鳞状细胞癌的一个重要的预后标记物。PTEN的表达与肿瘤临床分期、肿瘤分化和淋巴结转移有关,也可能是判断预后的一个有意义的指标。     

uPA基因启动子甲基化与喉鳞状细胞癌的关系

目的：探讨尿激酶型纤溶酶原激活剂（uPA）基因启动子甲基化状况与喉癌侵袭转移的关系。方法：采用RT-PCR法检测40例喉癌组织中uPAmRNA表达;同时用甲基化特异性PCR（MSP）法检测uPA基因启动子甲基化状况。结果：uPA基因表达率为65．0％（26／40）;有颈淋巴结转移的喉癌与无颈淋巴结转移的喉癌比较,uPA基因表达率显著增高（P〈0．01）。uPA基因启动子甲基化率为20．0％（8／40）;有颈淋巴结转移的喉癌与无颈淋巴结转移的喉癌比较,uPA基因启动子甲基化率显著降低（P〈0．01）。甲基化的喉癌组织中均无uPA基因表达。结论：uPA基因启动子甲基化是uPA基因表达缺失的机制之一,uPA基因启动子的去甲基化机制可能与喉癌颈淋巴结转移有关。     

Raf-1激酶抑制蛋白在喉鳞癌中的表达及意义

目的探讨Raf-1激酶抑制蛋白（Raf-1kinase inhibitor protein,RKIP）在喉鳞癌以及正常喉黏膜中的表达及意义。方法采用免疫组化方法检测41例喉鳞癌及8例正常喉黏膜组织中RKIP、磷酸化的细胞外信号调节激酶（Phospho-extracellular signal-regulated kinase,P-ERK）的表达情况。结果喉鳞癌中RKIP表达比正常喉黏膜组织明显降低,差异有统计学意义（P=0.012）。RKIP在有淋巴结转移的喉癌中阳性率低于无转移的喉癌,差异有统计学意义（P=0.016）。有淋巴结转移的喉癌原发灶与其本身淋巴结转移灶间RKIP表达无显著差异。41例喉癌患者的原发灶标本中,RKIP与P-ERK的表达呈正相关性（P=0.003,r=0.456）。结论RKIP低表达的喉癌更容易发生转移。丝裂原活化蛋白激酶（Mitogen-activated protein kinase,MAPK）通路受许多复杂的上游信号活化,喉癌中RKIP不能完全抑制该通路的活性。