抑癌基因PTEN和血管内皮生长因子在喉癌中的表达及临床意义

目的 探讨抑癌基因PTEN（phosphates and tension homolog deleted on chromosome ten）和血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）在喉鳞状细胞癌（Iaryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）中的表达及临床意义.方法 采用免疫组化SP法检测10例远处癌旁组织（距癌组织1.5cm）,20例癌旁组织（距癌组织0.5 cm）和60例LSCC组织中PTEN、VEGF基因的表达情况.结果 PTEN在LSCC、癌旁组织及远处癌旁组织中阳性表达率分别为70.0%、95.0%、100.0%,有显著性差异（P＜0.01）.LSCC组织中PTEN蛋白表达在TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、高中分化癌、无转移、生存率＞3年的患者中表达水平较Ⅲ～Ⅳ期、低分化和有转移、生存率＜3年的患者高,有显著性差异（P＜0.05）.VEGF在LSCC、癌旁喉组织及远处癌旁组织中阳性表达率分别为73.3%、55.0%、20.0%,有显著性差异（P＜0.05）.LSCC组织中VEGF蛋白表达在TNM分期Ⅰ～Ⅱ期、高中分化癌、无转移、生存率＞3年的患者中表达水平较Ⅲ～Ⅳ期、低分化和有转移、生存率＜3年的患者低,差异有显著性（P＜0.05）.PTEN、VEGF蛋白表达与年龄、性别、肿瘤部位无关（P＜0.05）.Spearman相关分析发现PTEN与VEGF表达呈负相关（γ=-03948,P=0.0018）结论 PTEN、VEGF的异常表达可能与LSCC的发生、发展和预后有关.     

p73和PCNA的表达与喉鳞状细胞癌的预后

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）中p73、增殖细胞核抗原（PCNA）基因的表达与患者临床、病理参数和预后的关系。方法：采用免疫组织化学SABC技术检测65例LSCC组织及23例癌旁组织中p73、PCNA基因的表达情况。结果：p73、PCNA蛋自在65例LSCC组织中的表达水平较23例癌旁组织明显增强（均P〈0．05）。65例LSCC组织中,p73蛋自在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期、远处转移及复发患者中的表达水平较Ⅰ～Ⅱ期、无转移及初发患者表达增强（P〈O．05）。PCNA蛋自在TNM分期Ⅲ～Ⅳ期患者、低分化癌、复发患者和有颈淋巴结转移及远处转移患者中的表达水平较Ⅰ～Ⅱ期、高中分化、初发患者和无转移患者中的表达增强（P〈O,05）。PCNA蛋白的表达与患者预后明显相关。经Cox比例风险模型进行分析,PCNA表达是患者预后不良的重要指标（其相对危险度RR=2.43,P〈0．05）。LSCC组织中p73、PCNA的基因表达存在正相关性（P〈0、05）。结论：p73蛋自在LSCC的发生、发展过程中可能扮演了癌基因的角色。PCNA蛋白的表达与LSCC的危险性存在密切关系,可作为判断LSCC患者预后的重要指标。LSCC中p73、PCNA的表达存在正相关关系。     

MDM2与p16在喉癌中的表达及其临床病理意义

目的:探讨喉癌中MDM2和p16基因的表达与喉病变组织的关系,并对MDM2和p16基因在喉癌中表达的关系进行初步研究。方法:应用鼠抗人MDM2单克隆抗体和鼠抗人p16单抗,采用SP免疫组织化学对35例喉鳞状细胞癌(LSCC)、21例喉不典型增生、20例正常喉组织中MDM2蛋白和p16蛋白进行检测。结果:癌周正常喉组织、不典型增生组织和LSCC组织中MDM2蛋白的表达率分别为10.0%、38.1%和54.3%(P<0.05),MDM2蛋白阳性表达率在病理Ⅰ～Ⅲ级肿瘤之间分别为38.1%、66.7%、100.0%,呈明显升高趋势(P<0.05);p16在喉正常组织、不典型增生组织和LSCC组织中的阳性表达率分别为85.1%、52.4%、34.3%(P<0.05),在Ⅰ～Ⅲ级LSCC中的表达分别为52.4%、11.1%和0(P<0.05);MDM2蛋白表达与p16蛋白表达呈负相关(P<0.05)。结论:MDM2蛋白的表达阳性率伴随组织分化程度降低而明显提高,对LSCC诊断有重要辅助意义;p16蛋白的表达伴随组织分化程度的降低而明显降低,在低分化LSCC中不表达,这对于判断LSCC预后有重要意义;MDM2和p16呈相反的表达趋势,两者呈现一定程度的负相关。     

喉癌组织中Survivin和p63的表达及临床意义

目的：探讨Survivin、p63在喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中的表达及与LSCC发生、发展的关系和生物学意义。方法：应用原位分子杂交方法,检测Survivin mRNA、p63 mRNA在47例LSCC组织、癌旁组织及14例正常喉组织中的表达。结果：①Survivin mRNA在正常喉组织中不表达;在LSCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为59．6％（28／47）、25．5％（12／47）,其差异有统计学意义（P〈0．05）;组织分化程度越低、TNM分期越晚、淋巴结转移率越高,则Survivin mRNA表达越强（均P〈0．05）。②p63mRNA在LSCC组织、癌旁组织中的阳性表达率分别为91.5％（43／47）、93．6％（44／47）,分别与正常喉组织（57．1％）比较,差异有统计学意义（P〈0．05）;p63 mRNA与喉癌临床病理特征无关。结论：Survivin在LSCC中表达上调,提示其通过抑制细胞凋亡在LSCC的发生、发展过程中起重要作用,可能成为LSCC基因治疗的新靶点;其高表达预示肿瘤有较高的侵袭性和不良预后。p63对LSCC生物学行为的影响较小。     

喉癌线粒体DNA D-loop高变区突变与临床病理的相关性

目的 研究喉鳞状细胞癌(简称喉癌)线粒体DNA(Imitochondrial DNA,mtDNA)D-loop高变区(hypervariable region,HV)突变情况,及其与临床病理特性的关系.方法 选取40例喉癌、相应癌周组织的石蜡标本及对应患者外周静脉血,分别提取总DNA.取mtDNA的D-loop高变Ⅰ区(HV Ⅰ)和高变Ⅱ区(HVⅡ)为目的 片断,进行PCR扩增、纯化和测序,对比分析HV Ⅰ和HV Ⅱ序列突变情况,并分析突变与临床病理特征的关系.结果①40例喉癌中发现86个多态性改变,52.5%(21/40)患者有癌组织或癌周组织的体细胞突变34例次,在HV Ⅰ和HV Ⅱ区发生突变个数分别28(82.4%)和6个(17.6%),D310区是突变高发位点;②mtDNA突变与喉癌分化程度(P=0.028)及p53突变(P=0.041)关系有统计学意义.结论喉癌的mtDNA D-loop高变区区是一个具有高频突变率和高度多态性的不稳定区域,突变和多态性可能在喉癌的发生、发展过程中起着一定的作用.     

凋亡抑制基因Livin在喉癌组织中的表达及其与p53、Bcl-2表达的相关性研究

目的　探讨凋亡抑制基因Livin在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织中的表达及其与p53和Bcl-2表达的关系,探讨Livin在LSCC 中的作用机制。方法　收集LSCC标本42例,声带息肉组织20例,采用免疫组织化学SP法检测LSCC组织和声带息肉组织中Livin、p53和Bcl-2蛋白的表达。结果　LSCC中Livin表达阳性率为71.4%（30/42）,显著高于声带息肉组织（χ 2=27.679,P <0.01）。临床分期Ⅲ+Ⅳ期Livin阳性表达率显著高于Ⅰ+Ⅱ期（χ 2=7.087,P <0.01）;有淋巴结转移者的Livin阳性表达率高于无淋巴结转移者（χ 2=5.458,P <0.05）。Livin蛋白的表达与p53蛋白表达呈正相关（r =0.665,P <0.05）,与Bcl-2蛋白表达呈正相关（r =0.657,P <0.05）。结论　Livin在LSCC组织中异常表达,有望成为LSCC诊断和基因治疗的新靶点。凋亡相关基因p53与Bcl-2基因的异常表达在喉癌癌变中起协调作用。     

免疫抑制酸性蛋白在头颈部恶性肿瘤中的分布及其意义

本文以抗免疫抑制酸性蛋白（IAP）单克隆抗体、ABC免疫酶标组化技术，对55例头颈部恶性肿瘤和24例头颈部良性病变组织中IAP进行了定位研究。结果表明，良性病变的IAP表达均为阴性，恶性肿瘤的阳性表达率为94.6%，其中高分化癌（Ⅰ、Ⅱ级）、低分化癌（Ⅲ级）、未分化癌（Ⅳ级）的阳性率分别为66.7%、90.0%、100.0%和100.0%。IAP表达阳性率的高低及表达程度的强弱与头颈癌的分化程度有密切关系。IAP可望成为一种有用的种瘤标记物。     

乳腺癌转移抑制基因1 mRNA在声门上型喉癌中的表达及临床意义

目的:探讨乳腺癌转移抑制基因1(BRMSl)mRNA在声门上型喉鳞状细胞癌组织中的表达及其临床意义.方法:以β-actin基因为参照,应用RT-PCR方法,检测66例声门上型喉癌组织(肿瘤组)及其相邻的癌旁正常喉黏膜组织(对照组)中BRMSl mRNA表达.结果:肿瘤组中BRMSl mRNA与β-actin平均密度(ADV)比值为0.69±0.56,明显低于对照组(P＜0.05).且肿瘤组织中BRMSl mRNA在病理高分化组中表达明显高于中、低分化组(P＜0.05);在临床Ⅱ期标本表达明显高于Ⅲ～Ⅳ期标本;颈部淋巴结N.组明显高于N 组(P＜0.05);BRMSl mRNA表达与患者性别、年龄无关(均P＞0.05).结论:BRMSl mRNA在声门上型喉癌组织中低表达,且其低表达可能与声门上型喉癌的临床分期、病理分化以及颈部淋巴结转移有关.     

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在喉鳞状细胞癌组织中的表达

目的：了解细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在喉鳞状细胞癌(LSCC)及喉癌前病变的表达情况,探讨其与LSCC浸润和转移的关系。方法：用免疫组织化学SP法对42例LSCC、28例喉癌前病变和20例正常喉组织中的EMMPRIN表达情况进行检测。结果：EMMPRIN在LSCC和喉癌前病变的阳性表达率分别为88．1％和57．1％,明显高于正常喉组织的5．0％,Ⅲ～Ⅳ期LSCC组织的强阳性表达率为76．0％,高于Ⅰ～Ⅱ期的强阳性表达率17．6％。伴有颈淋巴结转移的LSCC组织的EMMPRIN强阳性表达率高于无淋巴结转移组。结论：EMMPRIN在LSCC有较高的阳性表达。EMMPRIN的表达与LSCC的分期和是否存在淋巴结转移有关。LSCC组织EMMPRIN的表达影响LSCC的浸润和转移。     

D2—40标记的喉鳞状细胞癌组织淋巴管密度测定及其临床意义

目的：探讨喉鳞状细胞癌（LSCC）组织中淋巴管密度（LVD）与临床病理因素的关系。方法：采用SABC免疫组织化学技术,利用淋巴管内皮特异性标记物D2—40计数40例LSCC组织及相应的喉正常黏膜组织中的淋巴管数目。结果：LSCC组织中癌周D2—40（＋）管腔密度高于正常组织,差异有统计学意义（P〈0．01）;T1/2组癌周D240（＋）管腔密度低于T3/4组,差异有统计学意义（P〈0．05）;颈淋巴结转移组癌周D2—40（＋）管腔密度高于非转移组,差异有统计学意义（P〈0．05）;声门型组癌周D2-40（＋）管腔密度低于声门上型组,差异有统计学意义（P〈0．01）;癌周D2—40（＋）管腔密度在高、中、低不同分化组中差异无统计学意义（P〉0．05）。结论：肿瘤淋巴管主要是指癌周淋巴管,癌周LVD与LSCC的进展和侵袭性密切相关。