改良双侧颈总动脉结扎法与传统法制备的大鼠慢性脑缺血模型比较

摘要 目的：比较改良的双侧颈总动脉结扎法与传统的双侧颈总动脉结扎法（2-VO法）制作的大鼠慢性灌注不足引起的血管性痴呆（VD）模型的学习记忆能力、海马区及纹状体形态学和大鼠术后的死亡率变化。验证是否改良的2-VO法优于传统的造模方法。 方法：采用双侧颈总动脉结扎法造成大鼠永久慢性大脑灌注不足导致的VD模型。雄性2月龄SD大鼠48只,随机分为传统2-VO组20只,改良2-VO组20只和假手术组8只。传统组同时结扎双侧颈总动脉;改良组先结扎右侧颈总动脉,1周后再次结扎左侧的颈总动脉。在术后48h和60d记录各组的存活率,2个月后进行水迷宫试验来测定大鼠的空间学习记忆和运动能力。水迷宫试验结束后处死大鼠,观察海马和纹状体的形态学变化。 结果：改良组与传统组大鼠术后48h及60d的死亡率比较都明显降低（P<0.05）。两种模型组大鼠学习记忆能力与假手术组比较差异有显著性（P<0.01）,而两种模型大鼠组间学习记忆功能差异无显著性（P>0.05）。各组大鼠的运动功能比较无明显差异性（P>0.05）。两种模型组大脑海马区及纹状体均发生明显病理形态学改变。 结论：改良2-VO法可以复制大鼠大脑永久性慢性灌注不足引起的VD模型,引起与记忆有关的海马及纹状体损害,而运动功能未见损害。改良2-VO法和传统的方法在VD造模上没有本质的区别,但大鼠的存活率明显提高。     

电针对血管性痴呆大鼠记忆力及海马BDNF、PSD-95蛋白表达的影响

目的:观察电针对血管性痴呆(VD)大鼠记忆力的影响,以及其对大鼠海马组织脑源性神经生长因子(BDNF)与突触后致密蛋白-95(PSD-95)蛋白表达的影响,探讨电针治疗血管性痴呆的可能分子机制。方法:将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和电针组,每组8只。假手术组暴露双侧颈总动脉,但不结扎;模型组和电针组采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD大鼠模型。治疗过程中3组大鼠均采用柔软型大鼠固定器固定。电针组选取百会、足三里穴,接通电流,每天1次,每次留针30min,连续治疗14天;模型组与假手术组只给予固定。治疗前后采用新事物识别实验对3组大鼠进行记忆力的检测。治疗结束后采用免疫印迹法检测大鼠海马组织BDNF与PSD-95的蛋白质表达情况,采用Image J图像分析系统对蛋白表达水平进行分析。结果:经过14天的治疗后,电针组大鼠对新物体的探索指数高于治疗前(P0.05),高于模型组大鼠(P0.05)。电针组大鼠海马组织的BDNF、PSD-95的蛋白质表达均高于模型组,差异有显著性意义(P0.05)。结论:电针血管性痴呆模型大鼠的百会穴、足三里穴能有效改善血管性痴呆大鼠的记忆能力,提高大鼠海马组织中PSD-95、BDNF蛋白的表达,电针对记忆力的改善可能与PSD-95、BDNF表达增加相关,有可能是通过影响BDNFGluA1-PSD95信号传导通路而发挥效用。     

电针对血管性痴呆大鼠海马组织GluA1和CaMKⅡ表达及其磷酸化的影响

目的观察电针对血管性痴呆（VD）大鼠海马组织GluA1与钙离子/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）蛋白表达及磷酸化的影响,探讨电针的治疗作用机制。 方法将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组、模拟针刺组和电针组,每组8只。假手术组暴露双侧颈总动脉,但不结扎;模型组、模拟针刺组和电针组采用双侧颈总动脉永久性结扎法建立VD大鼠模型,以新事物识别实验筛选造模成功大鼠。4组大鼠均采用柔软型大鼠固定器固定。电针组选取百会、足三里穴,接通电流,每日1次,每次留针30min,连续治疗7d;模拟针刺组在百会、足三里穴以毫针刺入皮下0.5mm;模型组与假手术组只给予固定,不做其它处理。治疗结束后,采用Western Blot法检测大鼠海马组织GluA1、磷酸化GluA1（pGluA1）、CaMKⅡ、磷酸化的CaMKⅡ（pCaMKⅡ）的表达情况,采用Image J图像分析系统对蛋白表达水平进行分析。 结果模型组、模拟电针组、电针组三组大鼠造模后的探索指数［（0.526±0.112）、（0.541±0.124）和（0.498±0.099）］均较假手术组（0.785±0.097）明显降低（P<0.05）;而模型组、模拟针刺组、电针组三组之间两两比较,差异无统计学意义（P&rt;0.05）。模型组大鼠海马组织GluA1、pGluA1、CaMKⅡ和pCaMKⅡ的表达水平［（1.216±0.102）、（1.502±0.419）、（1.516±0.392）和（0.394±0.227）］均较假手术组［（1.918±0.137）、（2.253±0.244）、（2.187±0.231）、（0.667±0.175）］明显降低（P<0.05）。电针组GluA1、pGluA1、CaMKⅡ和pCaMKⅡ的蛋白表达水平［（1.653±0.169）、（2.382±0.308）、（2.733±0.387）、（1.189±0.346）］明显高于模型组和模拟针刺组［（1.231±0.188）、（1.498±0.223）、（1.493±0.205）和（0.408±0.231）］,且组间差异均有统计学意义（P<0.05）。 结论电针可增加VD大鼠海马GluA1及CaMKⅡ的蛋白表达,并促使其发生磷酸化;电针大鼠百会和足三里穴易化LTP和改善VD大鼠学习记忆能力的机制可能是通过诱导沉默突触转化为功能性突触实现的。     

电针对血管性痴呆大鼠海马脑源性神经营养因子mRNA表达及学习记忆的影响

目的:通过观察电针后血管性痴呆(VD)大鼠不同时相海马脑源性神经营养因子(BDNF) mRNA表达的变化规律,探讨电针改善VD大鼠学习记忆的可能机制.方法:通过结扎大鼠双侧颈总动脉,制成VD模型,分为l周组,2周组,4周组和6周组,其中每一组又分为电针组和模型组,用RT-PCR法检测各组BDNF mRNA表达的变化规律,观察电针的影响,并通过Morris水迷宫来观察各组神经行为学的改变.结果:经统计分析发现同时相电针组与模型组相比,电针组海马BDNF mRNA随着时间的延长表达升高(P＜0.05),而且与模型组相比,电针组大鼠的学习记忆能力比模型组好(P＜ 0.01,P＜ 0.05).结论:电针能够促进海马BDNF mRNA的表达,可能是针灸治疗治疗VD,改善VD大鼠症状的可能机制之一.     

改良大鼠双侧颈总动脉结扎方式建立血管性痴呆模型的评价研究

目的:通过比较不同造模方法建立的血管性痴呆模型大鼠在学习记忆能力、术后死亡率、海马组织学检查等方面变化,探讨改良颈部小切口双侧颈总动脉永久性双重结扎血管性痴呆模型建立的可行性,为建立操作简单、死亡率低的血管性痴呆模型提供客观依据。方法:将经水迷宫筛选的36只雄性SD大鼠随机分为假手术组、小切口双重永久性结扎模型组及分期永久性结扎模型对照组,每组各12只。小切口双重永久性结扎模型组在麻醉下一次性结扎后剪断大鼠双侧颈总动脉;分期永久性结扎模型对照组在麻醉下先分离结扎大鼠一侧颈总动脉,1周后再次在麻醉下行另一侧颈总动脉结扎;假手术组操作基本同模型组,但分离颈总动脉后不予以结扎。在术后48h及30d内记录各组大鼠死亡率,30d后对各组大鼠行水迷宫测试检测大鼠学习记忆能力,水迷宫测试结束后处死大鼠,观察大鼠脑海马组织的形态学变化。结果:小切口双重永久性结扎模型组与分期永久性结扎模型对照组术后48h内死亡率比较无明显差异(P0.05),但前者大鼠死亡数量较后者少;术后30d内小切口双重永久性结扎模型组与对照组比较死亡率明显降低,差异有显著性意义(P0.05);两种模型组大鼠与假手术组比较,学习记忆能力明显下降,差异有显著性意义(P0.05),而两种模型组大鼠学习记忆能力比较,差异无显著性意义(P0.05);两种模型组大鼠大脑海马组织较假手术组大鼠均发生明显病理形态学改变。结论:小切口双重永久性结扎方法可以较好地复制大鼠大脑永久性慢性灌注不足引起的血管性痴呆模型,引起与记忆相关的大鼠脑海马组织损害;小切口双重永久性结扎方法与分期永久性结扎方法在造模效果上没有本质的区别,但大鼠的死亡率却显著性降低。     

电针“百会”“神庭”穴对血管性认知障碍大鼠海马泛素化修饰蛋白质组学的影响

目的：探讨电针“百会”“神庭”穴对血管性认知障碍（vascular cognitive impairment,VCI）大鼠空间学习记忆和海马组织泛素化修饰蛋白质组学的影响。方法：18只健康雄性Sprague-Dawley大鼠随机取12只结扎双侧颈总动脉制备VCI模型,6只进行假手术不结扎。术后第15天造模大鼠随机分为模型组（n=6）和电针组（n=6）。电针组电针百会、神庭穴4周。干预后用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力;通过泛素化修饰定量蛋白质组学鉴定泛素化蛋白质并进行生物信息学分析。结果：水迷宫结果显示,模型组相比于假手术组逃避潜伏期延长（P<0.01）,目标象限停留时间缩短（P<0.01）,穿越平台次数减少（P<0.01）;电针组相比于模型组逃避潜伏期缩短（P<0.01）,目标象限停留时间延长（P<0.05）,穿越平台次数增加（P<0.05）。泛素化修饰蛋白组学结果显示,模型组相比于假手术组有53种蛋白质上55个位点的泛素化水平上调,14种蛋白质上15个位点的泛素化水平下调（差异倍数>1.5,P<0.05）;电针组相比于模...     

电针长强穴对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马CA1区细胞凋亡的影响

目的:观察电针长强穴对血管性痴呆(VD)大鼠学习记忆能力及海马CA1区细胞凋亡的影响。方法:将水迷宫筛得的60只雄性大鼠按照随机数字表分为空白组9只、假手术组9只和手术组42只。手术组采用双侧颈总动脉永久性结扎法制备模型,术后1周筛得27只,随机分为模型组9只、电针长强穴组9只、电针非穴组9只,干预后行水迷宫测试及原位末端转移酶标记技术检测。结果:空白组和电针长强穴组的逃避潜伏期、CA1区细胞凋亡数低于模型组(P0.05),穿越平台次数多于模型组(P0.05);电针长强穴组CA1区细胞凋亡数与逃避潜伏期正相关,与穿越平台次数负相关(P0.05)。结论:电针长强穴能够提高VD大鼠学习记忆能力及抑制海马CA1区细胞凋亡,且两者相关。     

电针对血管性痴呆大鼠脑白质纤维和学习记忆功能的效果

目的 观察电针百会、神庭对血管性痴呆(VD)大鼠脑白质纤维和学习记忆能力的影响。 方法 Sprague-Dawley大鼠32只分离双侧颈总动脉,假手术组(n = 8)不结扎,其余造模成功后随机分为模型组(n = 8)、非穴组(n = 8)和电针组(n = 8)。电针组电针百会和神庭穴,非穴组刺激腋下非经非穴点,每天1次,共28 d。干预前后采用新物体识别试验进行评定,弥散张量成像观察大鼠脑白质纤维。 结果 干预前,与假手术组相比,模型组、非穴组和电针组新物体偏爱系数降低(P< 0.05),后三组间无显著性差异(P> 0.05);干预后,电针组新物体偏爱系数较模型组增高(P < 0.05)。干预前,与假手术组相比,模型组、非穴组和电针组胼胝体、扣带回、海马白质纤维各向异性分数(FA)降低;干预后,电针组海马、扣带回、胼胝体、外囊白质纤维FA较模型组增加。 结论 电针百会、神庭能改善VD大鼠记忆功能,可能与前额叶皮质、海马等脑区白质纤维修复有关。     

慢性脑缺血大鼠脑组织T4-5＇-脱碘酶及甲状腺激素的变化

目的：观察慢性脑缺血大鼠脑组织甲状腺激素T3、T4含量及T4-5＇-脱碘酶活性的变化.方法：实验于2005-03/08在南方医科大学南方医院神经内科实验室进行.选取雄性成年清洁级SD大鼠28只,随机数字表法分为假手术组（n=8）、模型组（n=10）和甲状腺激素治疗组（n=10）.采用双侧颈总动脉永久性结扎.制备脑缺血动物模型.假手术组仅做颈前切口,钝性分离双侧颈总动脉,不行结扎甲状腺激素治疗组在双侧颈总动脉结扎术后次日给予甲状腺素片灌胃,剂量20 mg/只、1次/d、持续5周.造模成功后行水迷宫测试.取脑组织匀浆,提取纯化并采用放射免疫法测定T3、T4的含量.按CHOPRA法放射免疫测定T4-5＇-脱碘酶活性.结果：在模型制作过程中模型组及甲状腺激素治疗组在各死亡4只大鼠,剩余20只进行结果分析.①模型组定位航行实验潜伏期较假手术组、甲状腺激素治疗组明显延长（P＜0.05）;假手术组空间探索实验成绩明显优于模型组、甲状腺激素治疗组（P＜0.05）;假手术组与甲状腺激素治疗组工作记忆成绩明显优于模型组（P＜0.05）.②模型组、甲状腺激素治疗组脱碘酶活性均比假手术组显著降低,差异均有显著性意义[（1.63&;#177;0.88）,（3.11&;#177;0.88）,P＜0.05];[（1.93&;#177;029）,（3.11&;#177;0.88）,P＜0.05],以模型组最低;模型组、甲状腺激素治疗组T3浓度较假手术组显著下降（P＜0.01）,甲状腺激素治疗组较模型组明显增高,差异有显著性意义（P＜0.01）;模型组T4浓度与假手术组相比呈显著性下降（P＜0.01）,甲状腺激素治疗组较模型组明显升高（P＜0.01）.结论：慢性脑缺血大鼠脑组织甲状腺激素浓度及代谢异常,其变化可能与认知功能相关.     

三羟异黄酮对血管性痴呆大鼠学习记忆及脑内氧化损伤的影响

目的：研究植物雌激素三羟异黄酮（GST）对血管性痴呆模型大鼠学习记忆的影响及其作用机制.方法：采用双侧颈总动脉结扎再灌注合并硝普钠降压法制作大鼠血管性痴呆模型,所有大鼠被分为模型对照组（O组）、假手术对照组（C 组）、三羟异黄酮组（GST组）和苯甲雌二醇组（BE2组）4组,采用大鼠跳台法、Morris水迷宫法检测各组大鼠学习记忆能力,并测定大鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧物酶（GSHPx）的含量.结果：GST组与O组相比,GST明显提高模型大鼠学习记忆能力,降低MDA,提高SOD、GSHPx的含量.结论：GST可能通过抗氧化损伤、清除自由基的作用,从而改善模型大鼠的学习记忆能力.     

美术颜料对儿童铅暴露水平的影响及预防

目的：通过调查深圳市3～6岁学习绘画儿童血铅水平及生活习惯、状况等,了解该群儿童血铅暴露情况,为开展健康教育和环境干预提供依据。方法选择不同文化层次2个社区学习绘画1～3年儿童作为观察组,同年龄未参加绘画儿童作为对照组,各270名,检测静脉血铅,采用多元回归分析方法进行分析。结果对照组血铅总体均值为35．27μg/L ,观察组血铅总体均值为42．15μg/L,差异有统计学意义（P ＜0．05）;不同接触时间血铅含量差异有统计学意义（P ＜0．05）。接触时间长短与血铅不存在线性正相关性（r＝0．84）。多元回归分析表明：观察组儿童血铅高于对照组,主要与父母文化水平偏低、儿童不良卫生习惯有关。结论进行铅污染健康知识的普及,养成良好卫生习惯,注重手卫生,掌握六步洗手法,可以降低儿童铅暴露的风险。     

聚己双胍对压疮创面细菌的影响研究

摘要 目的：探究聚己双胍对压力性损伤患者的创面管理作用。方法：收集3期、4期压力性损伤患者共114例、伤口130处,分两组均追踪一个月。对照组用生理盐水清洗后更换水胶体敷料,实验组用聚己双胍清洁湿敷换药,追踪首末次创面面积愈合情况、创面PH值及创面病原菌。结果：经过治疗实验组压力性损伤创面面积平均愈合率为61.58%,对照组创面面积愈合率为39.47%。实验组PH值减小率为9.06%,对照组PH值减小率为6.17%。实验组接诊时病原菌检出率78.79%,四周末病原菌阳性检出率为45.45%;对照组接诊时病原菌检出率78.13%,四周末病原菌阳性检出率为68.75%。结论：聚己双胍对压力性损伤创面疗效及创面细菌均有明显效果。     

影响护生术前访视效果的调查

目的调查影响护生术前访视效果的因素,提高护生整体护理质量。方法36名护生在老师指导下对636例住院手术病人进行术前访视,师生对术前访视的影响因素进行观察和总结。结果访视中护患合作好,无护患纠纷发生。结论心理健康、身体状况、交流技巧、环境适应、角色适应是影响护生术前访视质量的主要因素。     

移植骨髓间充质干细胞后的脑脊液促进神经干细胞的分化

目的观察骨髓间充质干细胞（BMSC）移植于损伤脊髓后,所提取的脑脊液（BMSCs-CSF）对体外培养的神经干细胞向神经元细胞分化的影响,探讨BMSCs促进神经干细胞分化的机制。方法培养BMSCs及神经干细胞;制作大鼠脊髓损伤模型;将体外培养的BMSCs注入脊髓损伤区,于术后3d、5W分别提取脑脊液,并注入神经干细胞培养液中,观察神经干细胞向神经元细胞的分化。试验分为五组,A：无脊髓损伤组脑脊液;B1：脊髓损伤3天后收集的脑脊液;B2：脊髓损伤组5周后收集的脑脊液;C1：脊髓损伤并行BMSCs移植,在3天后收集的脑脊液;Q2：脊髓损伤并进行BMSCs移植,在5周后收集的脑脊液。结果加入脑脊液培养72小时后在倒置显微镜下观察细胞形态结果显示A、B1、B2各组神经干细胞球无贴壁,悬浮于培养基中,神经干细胞无细胞突形成;C1组显示神经干细胞球贴于培养板底部,并有细胞突生长。C2组显示仅有少量的神经干细胞球贴壁,细胞突短小少见。结论BMSCs移植于损伤的脊髓后所提取的脑脊液（BMSCs-CSF）具有促进神经干细胞向神经元细胞分化的作用。     

四种血小板制品滤除白细胞效果的实验研究

目的观察过滤对血小板的影响,遴选适于过滤的血小板制品。方法对机采血小板、手工浓缩血小板和相应的两种冰冻血小板进行过滤,观察血小板回收率、白细胞去除率和血小板聚集率等多项血小板功能指标。结果机采血小板回收率为86．81％,手工浓缩血小板回收率仅为73．08％;两种冰冻血小板制品损失量达60%～70％;过滤后机采血小板达到去白细胞标准,而手工血小板未达到去白细胞标准;过滤对液态保存血小板制品的功能无明显影响,但手工浓缩血小板功能低于机采血小板。结论冰冻保存的血小板制品不适于去白细胞过滤;手工浓缩血小板制备工艺尚需进一步改进和提高,并研制与之相适应的去白细胞滤器;机采血小板质董拔好．国产滤器可达到去白细胞标准．是当前适于滤除白细胞的血小板制品。     

抚触对婴儿身高影响的临床研究

目的:探讨抚触对婴儿身高的影响.方法:选取在我院住院分娩的足月正常体重儿360例,随机分为观察组与对照组各180例.对观察组婴儿每天抚触至少3次,每次不少于15～20 min,并教会家长学会婴儿抚触技术,要求坚持不少于6个月,出院后由婴儿母亲或亲属操作,学会测量婴儿体重、身高、头围.对照组婴儿不进行抚触.结果:观察组婴儿身高增长值、体重及头围增长值高于对照组(P＜0.05).结论:抚触能使婴儿身高、头围、体重明显增长.     

Systematic review on the effectiveness of caffeine abstinence on the quality of sleep

Aim. The aim of the present study is to review the effects of caffeine abstinence on the quality of sleep. Background. Insomnia is a common problem and abstinence from caffeine is the most popular component in sleep hygiene advice. However, there have been inconsistent results relating to the effectiveness of caffeine abstinence in improving sleep. Design. Systematic review. Methods. We browsed several electronic databases and reference lists of articles about the correlation of caffeine consumption and sleep deprivation. We selected the articles according to predefined inclusion and exclusion criteria. Two reviewers assessed the quality of trials, which were selected according to the Jadad quality assessment scale. We included the trials scoring three or above in the systematic review and extracted their data. We assessed the heterogeneity of the studies before we considered whether or not to combine the studies’ results. Results. Three randomised control trials fulfilled the selection criteria among which two trials scored ≥3 on the Jadad scale. We included these two trials in our systematic review. The designs and outcome measurements of these two trials were not homogeneous, therefore, we did not combine their results. Instead, we conducted a critical appraisal. In one trial, caffeine abstinence was associated with significant lengthening of sleep duration (p < 0·01) and better sleep quality (p < 0·05). In another trial, subjects had less difficulty falling asleep on days when they drank decaffeinated coffee (p < 0·05). Conclusions. The results showed that caffeine abstinence for a whole day could improve sleep quality. Thus, health practitioners were recommended to include caffeine abstinence in the instructions for sleep hygiene. Relevance to clinical practice. This study demonstrates the effectiveness of caffeine abstinence in improving sleep quality. It provides evidence for the practice of including caffeine abstinence in sleep hygiene advice.     

血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶对肝癌诊断价值的探讨

目的检测血清甘氨酰脯氨酸二肽氨基肽酶（GPDA）并探讨其对肝癌的诊断价值。方法采用连续监测法分别对30例原发性肝癌、胆石症、肺癌、肝硬化、慢性肝炎及15例胃癌患者血清GPDA进行测定。结果原发性肝癌患者的GPDA活性和阳性率比胆石症、肺癌、肝硬化、慢性肝炎及胃癌患者显著增高（P〈0．01）。结论血清GPDA活性测定对原发性肝癌有一定辅助诊断价值。