活络效灵丹通过抑制脑组织炎症反应对缺血性脑损伤的保护作用

[目的]观察活络效灵丹是否能抑制脑缺血后炎症反应。[方法]使用朗格（Longer）线栓塞法大鼠脑缺血再灌注损伤模型,90只成年雄性SD大鼠,体重200～250g。随机分为5组： A、B、C、D、E组,每组6只大鼠。A为假手术组(sham);B为损伤对照组（给予与药物等体积的生理盐水）;C、D,E组分别给与活络效灵丹（HLXLD ）0.5、2.0、6.0 g·kg-1。采用TTC染色脑梗塞范围测定观察活络效灵丹对大鼠脑缺血损伤的作用,采用实时定量反转录PCR观察活络效灵丹对脑组织炎症反应介质肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor-alpha,TNF-α）,白介素1（Interleukin-1 beta,IL-1β）的影响,采用蛋白质免疫印迹实验（Western Blot）及磷酸化p-65蛋白抗体观察p-65蛋白磷酸化水平改变。[结果]与生理盐水对照组比较,活络效灵丹可以明显抑制缺血再灌注大鼠脑组织炎性因子的表达水平,显著缩小大鼠脑缺血再灌注损伤脑梗塞范围,明显改善脑缺血神经功能缺失症状。活络效灵丹明显抑制脑组织炎症信号通路NF-κB磷酸化反应。[结论]活络效灵丹对大鼠脑缺血再灌注损伤起保护作用可能与其抑制脑组织炎症信号通路NF-κB磷酸化反应有关。     

AG490及5-Aza对大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响及分子机制

目的 探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490及DNA甲基化抑制剂5-Aza对血小板源性生长因子-BB(PDGF-BB)诱导的大鼠肺动脉平滑肌细胞(PASMCs)增殖的影响及意义.方法 采用CCK8检测不同浓度AG490及5-Aza对PDGF-BB诱导PASMCs增殖的影响;将细胞分为对照组(正常的PASMCs)、...     

AG490对实验性自身免疫性重症肌无力大鼠的治疗作用

目的探讨JAK2/STAT3通路抑制剂AG490对实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)大鼠的治疗作用。方法用人工合成的大鼠乙酰胆碱受体α亚基的97-116肽段免疫Lewis大鼠,建立EAMG模型,将12只大鼠随机、平均分为AG490治疗组及对照组,双盲法隔日评估大鼠临床症状并评分。流式细胞术检测淋巴结单个核细胞中细胞因子IL-6及IL-21的分泌;CCK-8及羟基荧光素琥珀酰亚胺酯(CFSE)检测淋巴结单个核细胞的增殖;ELISA检测大鼠血清中抗R97-116抗体水平。结果自免疫后第13天开始,AG490治疗组临床症状较对照组明显缓解,并且第27、29、31、33、37、39、41天时,两组肌力评分的差异有统计学意义(P<0.05);与对照组相比,AG490治疗组中的细胞因子IL-6、IL-21的分泌减少(P<0.01);AG490治疗组中抗R97-116抗体Ig G、Ig G2b的分泌减少(P<0.01);与对照组相比,AG490治疗组的淋巴细胞的增殖受到抑制。结论 AG490通过抑制细胞因子IL-6及IL-21的分泌,降低大鼠血清中抗R97-116抗体Ig G、Ig G2b水平,缓解EAM G大鼠病情。     

JAK激酶抑制剂AG490对乳腺癌细胞侵袭转移的影响

目的研究JAK激酶抑制剂AG490对乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭转移的影响,探讨JAK-STAT3信号转导通路在乳腺癌侵袭转移调控中的作用。方法以乳腺癌细胞MDA-MB-231为研究对象,应用JAK激酶抑制剂AG490处理细胞,用MTT法检测细胞对人工基底膜的粘附能力变化;Transwell小室进行人工重组基底膜侵袭和运动实验;Western blot检测细胞中P-STAT3水平。结果JAK激酶抑制剂AG490可使人乳腺癌细胞MDA-MB-231中P-STAT3表达减弱,同时可使细胞粘附、侵袭、迁移能力下降。结论JAK-STAT3信号转导通路参与乳腺癌细胞侵袭转移调控,阻断通路活化可以抑制乳腺癌细胞的侵袭转移。     

银杏内酯B对动脉粥样硬化大鼠炎症细胞因子的影响

目的 探讨银杏内酯B对动脉粥样硬化（AS）大鼠血清炎症细胞因子的影响.方法 采用高脂饲料喂养和维生素D3腹腔注射的方法建立大鼠AS模型,分为正常组、模型组、阳性组（辛伐他汀5mg/kg）、银杏内酯B3个剂量组（8、4、2mg/kg）,每组10只.灌胃给药4周后,各组取主动脉,光镜下观察病理改变,进行病变分级评分;取血清,ELISA法测定TNF-α、IL-1和IL-6水平.结果 银杏内酯B能改善AS大鼠的主动脉病变,高剂量组与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.银杏内酯B各剂量可明显降低血清TNF-α和IL-6水平,与模型组比较差异均有统计学意义（P＜0.01）.银杏内酯B高、中剂量可降低血清IL-1水平,与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 银杏内酯B对大鼠AS具有一定的治疗作用,可能与抑制炎症因子的表达有关.     

AG490对支气管哮喘小鼠气道重塑的干预作用及相关机制

目的:探讨Janus激酶/信号转导与活化蛋白6(JAK/STAT6)在支气管哮喘小鼠气道重塑中作用及AG490影响气道重塑的可能机制.方法:将32只雌性BALB/c小鼠随机分为4组,正常对照组(A)、慢性哮喘模型组(B)、AG490干预组(C)和布地奈德干预组(D),每组8只.应用鸡卵清蛋白致敏和激发建立慢性哮喘气道重...     

JAK抑制剂AG490对卵巢上皮癌Survivin基因表达的影响

目的:通过Janus激酶(JAK)抑制剂AG490在卵巢上皮癌SKOV3细胞中对Survivin基因表达的影响,探讨Survivin基因对肿瘤细胞增殖、凋亡的作用机制,了解Survivin在卵巢上皮癌发展中的作用.方法:不同浓度的AG490作用于SKOv3后,流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化的情况,并以免疫组化法检...     

Crohn病唾液中炎症因子的研究

目的:分析炎症因子白细胞介素1β(Interleukin 1β,IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin 6,IL-6)、肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα,TNF-α)与活动期CD患者相关性,为疾病的诊断提供检测指标。方法:选取本院2011-2013年克罗恩病(Crohn’s disease,CD)患者,其中48例为活动期CD组患者和42例非活动期CD组患者,并选择45例正常健康人作为正常对照组,所有患者抽取静脉血进行血细胞计数和CRP检测,采用R&D SYSTEMS检测唾液中IL-1β、IL-6和TNF-α浓度,比较分析三组患者的差异。结果:与正常对照组比较,活动期CD组与缓解期CD组患者的BMI、RBC和Hb减低,而WBC、CRP和PLT增高,比较差异均有统计学意义(P<0.05);活动期CD组和缓解期CD组患者的相关指标比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。活动期CD组患者IL-1β(282.3±52.1)pg/m L;IL-6(13.1±4.3)pg/m L;TNF-α(32.9±8.6)pg/m L。缓解期CD组患者IL-1β(192.1±42.1)pg/m L;IL-6(7.1±3.1)pg/m L;TNF-α(10.3±6.2)pg/m L;正常对照组IL-1β(180.0±37.1)pg/m L;IL-6(6.2±1.2)pg/m L;TNF-α(8.6±2.9)pg/m L。活动期CD组患者唾液中IL-1β,IL-6和TNF-α比缓解期CD组患者和正常对照组显著升高,差异均有统计学意义(P<0.01);但是缓解期CD组患者与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:活动期CD组患者口腔特异性损害与血红蛋白、血小板、CRP、BMI相关,唾液IL-6和TNF-α与特异性口腔损伤有关,这些炎症因子可作为活动期CD患者的检测指标。     

血必净对心肺复苏后全身炎症反应的影响研究

[目的]观察血必净注射液对心肺复苏后全身炎症反应综合征（SIRS）患者血浆TNF-α和IL-6的影响。[方法]将45例心肺复苏后患者随机分为对照组和治疗组，均给予西医常规治疗，治疗组在西医常规治疗基础上给予血必净注射液，观察比较两组入院时、入院第24h、第48h血浆TNF-α和IL-6水平。[结果]治疗组治疗后血浆TNF-α和IL-6水平显著低于对照组。[结论]血必净注射液可明显降低心肺复苏后SIRS患者血浆TNF-α和IL-6水平，阻断SIRS进程，对心肺复苏后SIRS有治疗作用。     

大黄素甲醚对大鼠脑缺血预处理后缺血再灌注损伤作用的探讨

目的探讨脑缺血预处理联合大黄素甲醚(Phy)治疗对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法SD大鼠随机分为四组,分别为假手术组、脑缺血再灌注组、脑缺血预处理组和Ply治疗组。各组采用Zea-longa等的大脑中动脉线栓法并加以改进,制备缺血预处理及缺血再灌注损伤实验动物模型。比较各组神经功能缺失评分、脑梗死体积、血清神经元烯醇化酯(NSE)含量及脑组织白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。结果脑缺血预处理联合Phy可使神经功能缺损减轻、脑梗死体积缩小、血清NSE含量降低,均较缺血预处理组更为明显。脑组织IL-1β和TNF-α含量降低亦更为明显。结论Phy可增强缺血预处理诱导的脑缺血耐受作用,下调脑组织再灌注损伤时IL-1β和TNF-α的表达,二者具有叠加作用。     

AG490和糖皮质激素对急性呼吸窘迫综合征大鼠炎症因子的调控及其抗炎机制研究

目的探讨油酸型急性呼吸窘迫综合征(acute respiratory distress syndrome,ARDS)大鼠中肿瘤坏死因子(TNF-α)和白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的表达情况,以及检测应用氰-3,4-二羟基-N-苄基肉桂酰胺(AG490)和糖皮质激素(GCs)干预下这两种因子的变化,以探明AG490和GCs对ARDS的治疗效果和作用机制,进而阐明ARDS的发生和治疗机制。方法成年健康雄性SD大鼠72只,随机分为Ⅰ(ARDS)组、Ⅱ(ARDS+AG490)组、Ⅲ(ARDS+GCs)组、Ⅳ(正常对照)组,每组又分为2、4、8 h三个时间点,收集血清和肺组织,采用酶联免疫法(ELISA)分别检测LIF、TNF-α的表达水平,同时肺组织HE染色并进行病理学观察。结果Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组各时间点的促炎细胞因子TNF-α和LIF均高于正常对照组(P<0.05),Ⅱ、Ⅲ组各时间点的促炎细胞因子水平均低于Ⅰ(ARDS)组(P<0.05);病理学观察显示,Ⅱ、Ⅲ药物干预组肺损伤程度介于Ⅰ和Ⅳ组之间。结论 TNF-α和LIF是ARDS发生发展过程中重要的促炎细胞因子,AG490和GCs能抑制这两种因子的表达,并能减轻肺损伤,且两种药物作用效果无显著差异,表明二者对ARDS的治疗可能存在共同的作用途径。     

AG490对人外周血NK细胞活性及淋巴细胞转化功能的影响

目的　研究 AG490对正常人外周血 NK细胞杀伤活性及淋巴细胞转化功能的影响。方法　采用体外实验 ,MTT比色法检测细胞存活、NK细胞杀伤活性及细胞增殖情况。结果　 AG490能抑制 IL - 2及 PHA诱导外周血单核细胞增殖的作用 ,并抑制 NK细胞杀伤活性。结论　 AG490作为一种酪氨酸激酶抑制剂 ,能影响正常细胞的功能。     

重度烧伤早期肺组织炎症因子的表达

目的:观察重度烧伤后肺组织几种炎症相关基因表达变化,探讨其与肺损害的关系。方法:采用大鼠40%体表面积,深Ⅱ~Ⅲ度烫伤模型,于伤后0(正常组),3,6,12,48,72h,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测肺组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白介素-6(IL-6),白介素-10(IL-10)。结果:烫伤后3 h,TNF-α表达显著上调(P<0.01),此后一直维持高表达状态,于伤后48 h降至正常;IL-6于伤后6 h表达明显升高(P<0.01),伤后48h降至正常水平;IL-10于伤后下调并维持低水平。结论:炎症相关基因TNF-α、IL-6、IL-10参与了烧伤后肺组织局部失控性炎症反应,TNF-αI、L-6上调及IL-10表达下调可能是烧伤后早期肺组织损害的重要原因之一。     

细胞因子在颅脑损伤中的表达及临床意义

目的：探讨血清TNF-α、IL-1β在颅脑损伤中的表达,为颅脑损伤的诊断和治疗提供理论依据。方法：60例颅脑损伤患者中,中型颅脑损伤30例（中型损伤组）,重型颅脑损伤30例（重型损伤组）。测定两组患者肿瘤坏死因子（TNF—α）和白介素-1β（IL—1β）含量。结果：重型颅脑损伤组术后第24h、3d、7d血清中TNF-α、IL-1β含量显著高于中型损伤组,相比较有显著性差异（P〈0．05）;TNF-α、IL-1β含量在术后3d达到高峰。结论：血清TNF-α、IL-1β可作为颅脑损伤程度的早期指标,搞清颅脑损伤血清TNF-α、IL-1β水平的表达情况,通过抑制炎症反应的方法治疗颅脑外伤成为可能。     

电针对急性饮酒抑郁大鼠海马 TLR2/4及炎性细胞因子表达的影响

目的：观察电针对急性酒精灌胃后抑郁大鼠海马TLR2/4及炎性细胞因子表达的影响。方法：将48只SD雄性大鼠,随机分成2组,为生理盐水对照组（ Control,生理盐水灌胃）和酒精模型组（ Ethanol,50％酒精5 g/kg灌胃）,通过强迫游泳实验和旷场实验观察两组的行为学改变,若出现抑郁样症状提示造模成功;再随机从Control组和Ethanol组各抽取12只大鼠,为生理盐水加电针组（ Control﹢EA）和酒精模型加电针组（ Ethanol﹢EA）,均予电针刺激（1次/d）,分别于实验24 h和72 h取大鼠海马组织,用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测其中Toll样受体2/4（TLR2/4）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）mRNA的表达。结果：急性酒精灌胃24 h和72 h后,与Control组比较,Ethanol组大鼠TLR2/4、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达明显增加,差异有统计学意义（ P＜0.05）,Control﹢EA组无明显变化,差异无统计学意义（ P＞0.05）;与Ethanol组相比,Ethanol﹢EA组 TLR2/4、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA 的表达显著减少,差异有统计学意义（ P ＜0.05）;Control﹢EA与Ethanol﹢EA两组间比较,差异无统计学意义（ P＞0.05）。结论：电针能下调急性饮酒后24 h、72 h抑郁样行为大鼠海马组织中TLR2/4、IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达,这可能参与了电针抗抑郁的机制。