马桑内酯对星形胶质细胞细胞周期变化的影响

胶质细胞细胞周期的改变,会导致细胞自身功能的改变．从而引发一些疾病的形成。研究致痫时星形胶质细胞细胞周期的变化,可能对癫痫的形成机制提供新的思路。用马桑内酯（CL）刺激体外纯化培养的海马星形胶质细胞2、4、6、8h后．应用流式细胞技术测定越形胶喷细胞细胞周期各时期细胞的变化．结果显示：CL作用4h后,G1期细胞数较对照组和2h组明显下降（P〈0．05）,S期和G2＋M期比对照组明显增高（P〈0．05）。同时细胞凋亡也随着时间的延长而增加（P〈0．05）。本实验结果提示致痫时星形胶质细胞细胞周期会发生改变．即细胞由G1／G0期向S和G2＋M期快速转化。     

Mettl9基因过表达促进氧糖剥夺大鼠离体星形胶质细胞损伤

目的:探讨甲基转移酶样蛋白9(Mettl9)基因过表达对氧糖剥夺(OGD)大鼠离体星形胶质细胞损伤的影响及机制.方法:体外原代培养SD大鼠大脑皮层星形胶质细胞,建立OGD诱导的星形胶质细胞损伤模型.实验分为正常对照(Con)组、慢病毒空载体转染(NC)组、慢病毒重组载体pLenti6.3-Mettl9转染组(Mettl...     

地塞米松干预大鼠星形胶质细胞周期素的表达及细胞周期进程

背景：有研究表明地塞米松可引起星形胶质细胞凋亡,但其机制不清,有关地塞米松干扰星形胶质细胞的周期素表达的作用未见报道。 目的：观察地塞米松引起大鼠星形胶质细胞凋亡与周期素表达的关系。 方法：将不同浓度的地塞米松(0,10-5,10-4,10-3 mol/L)与纯化培养的大鼠大脑皮质星形胶质细胞共同孵育24 h后,经流式细胞仪检测细胞周期,并用免疫细胞化学方法检测周期素A和E在星形胶质细胞内的表达。 结果与结论：地塞米松10-5,10-4 mol/L浓度组G1期细胞指数较对照组增加(P < 0.05,P < 0.01),10-3 mol/L组的S期细胞指数较对照组明显升高(P < 0.01);周期素A的表达随着地塞米松浓度的升高而减弱(P < 0.05)。周期素E的表达在地塞米松0,10-5,10-4 mol/L组随着地塞米松浓度的升高而减弱(P < 0.05),但在10-3 mol/L浓度组反而表达增强(P < 0.01)。说明地塞米松10-5,10-4 mol/L干预的星形胶质细胞周期进程受阻于G1期且与周期素A和E表达降低有关,地塞米松10-3 mol/L干预的星形胶质细胞周期进程受阻于S期主要与周期素A表达降低有关。       

氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞miR-21的表达变化

目的研究原代大鼠星形胶质细胞氧糖剥夺不同时间miR-21的表达,探讨miR-21是否参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的活性变化。方法原代大鼠星形胶质细胞随机分为正常组和氧糖剥夺组,分别培养3、6、9和12h。CCK-8法检测各组星形胶质细胞的活力,real-time PCR方法检测各组星形胶质细胞miR-21的表达。结果氧糖剥夺组miR-21的表达水平随培养时间延长呈先升高后降低的动态变化,3h开始高于对照组水平(P<0.05),6h达高峰(P<0.05),随后下降,9h与对照组无差异(P>0.05),12h显著低于对照组(P<0.05)。氧糖剥夺不同时间星形胶质细胞活力变化与miR-21的变化趋势一致。结论 miR-21可能参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的活性变化,发挥促增殖和抗凋亡的作用。     

活化小胶质细胞致星形胶质细胞激活

目的探讨活化小胶质细胞培养液对星形胶质细胞的影响。方法 LPS激活原代培养小胶质细胞,采用活化的小胶质细胞条件培养液刺激星形胶质细胞,观察星形胶质细胞GFAP及IL-1β和TNFα的表达。结果 LPS刺激后,小胶质细胞OX42表达量上升,IL-1β和TNFα的表达量增高;小胶质细胞条件培养液可致星形胶质细胞激活,GFAP表达量上升,IL-1β和TNFα的表达量增加。结论活化小胶质细胞的条件培养液可致星形胶质细胞激活,激活的小胶质细胞和星形胶质细胞表达前炎症介质IL-1β和TNFα。     

氧气葡萄糖剥夺诱导原代培养的星形胶质细胞释放谷氨酸

目的观察氧气葡萄糖剥夺(OGD)对原代培养的星形胶质细胞谷氨酸释放的影响,并探讨其释放机制。方法原代培养SD大鼠海马区星形胶质细胞,将其分为OGD组和对照组。OGD组的细胞置于不含糖和氧的培养基,37℃,950 mL/L N2和50 mL/L CO2,饱和湿度的培养环境下培养,而对照组细胞则正常培养。缺糖缺氧刺激时长分别为0、15、30、60、90、120 min,采用高效液相色谱,测定细胞外液的谷氨酸浓度。分别选用连接子蛋白43(Cx43)特异性反义寡核苷酸(Cx43-ASODN)和Cx43半通道的阻断剂Gap26预处理星形胶质细胞,采用高效液相色谱,测定细胞外液谷氨酸浓度,观察OGD对其谷氨酸释放的影响。结果与对照组相比较,OGD刺激后,细胞外液谷氨酸浓度升高,并在刺激90 min后,达到峰值,为(5.00±0.30)nmol/mL,显著高于对照组的(2.36±0.15)nmol/mL(P0.05);而OGD条件下,Cx43-ASODN或Cx43半通道阻断剂均可抑制细胞外液谷氨酸浓度的升高,刺激90 min后,细胞外液谷氨酸浓度分别为(4.02±0.18)nmol/mL和(3.93±0.32)nmol/mL,显著低于单纯OGD刺激组(P0.05)。结论 OGD可以诱导星形胶质细胞通过Cx43半通道释放谷氨酸。     

星形胶质细胞谱系及星形细胞瘤起源的研究

各种神经胶质细胞中数目最多、分布最广的星形细胞担负了神经胶质细胞的大部分功能。根据对两种神经组织标志物─ＧＦＡＰ、Ａ－２Ｂ－５抗体的反应不同，将星形细胞分为１型（ＧＦＡＰ＋Ａ－２Ｂ－５－）和２型（ＧＦＡＰ＋、Ａ－２Ｂ－５＋）。研究指出两型星细胞来源于不同祖细胞，而存在两个谱系，星形细胞胶质瘤与星形细胞具有同样的谱系源。对小胶质细胞在星形细胞发生和分化中的作用亦予以阐述。     

星形胶质细胞的可塑性

星形胶质细胞具有可塑性 ,即指其在内外环境变化刺激下 ,在整个生命过程中 ,能改变其自身特性 ,而在表型上呈现出很大程度的可变性。主要表现为细胞大小、形态及数目的变化 ,其中以细胞突起变化最明显。不同发育阶段 ,不同区域的星形胶质细胞可塑性不同。星形胶质细胞可塑性的机制 ,目前认为主要是递质刺激相应的星形胶质细胞受体来实现的     

星形胶质细胞的异质性及胶质网络

星形胶质细胞（Ａｓｔ）在脑功能活动中具有重要作用，异质性和胶质网络是Ａｓｔ新近引起重视的特性，Ａｓｔ的异质性包括Ａｓｔ形态结构、膜受体、胞质活性物质、对创伤的反应及其胶质网络等的差异。胶质网络是指Ａｓｔ之间、少突胶质细胞（Ｏｌｉｇ）之间以及Ａｓｔ与Ｏｌｉｇ之间通过缝隙连接形成的网络，水、无机离子以及小分子物质可以在网络中双相或单相扩散，网络活动以钙波为主要特征，钙波受神经递质（神经元电活动）影响，并能反馈影响钙波范围内的神经元     

氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞增殖反应中microRNA-125b的表达变化

目的研究氧糖剥夺诱导原代大鼠星形胶质细胞增殖过程中microRNA-125b的表达,探讨microRNA-125b是否参与了缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的增殖。方法原代大鼠星形胶质细胞随机分为正常组和氧糖剥夺组,分别培养3、6和9h。EdU掺入法检测各组星形胶质细胞的增殖,real-timePCR方法检测各组星形胶质细胞microRNA-125b的表达。结果氧糖剥夺组microRNA-125b的表达水平随培养时间延长呈先升高后降低的动态变化,3h开始高于对照组水平(P0.05);6h达高峰(P0.01),随后下降,9h与对照组无差异(P0.05)。氧糖剥夺不同时间星形胶质细胞增殖变化与microRNA-125b的变化趋势一致。结论 miroRNA-125b可能参与缺氧缺血性脑损伤后星形胶质细胞的增殖。     

葡萄糖调节蛋白75在缺糖损伤PC12细胞中的表达

目的观察葡萄糖调节蛋白75(GRP75)在缺糖条件下在PC12细胞中的表达。方法体外模拟能量代谢障碍建立细胞缺糖模型,MTT检测PC12细胞活率;LDH测定细胞膜损伤程度;流式细胞仪PI单染色法和An-nexinV/PI双染色法检测细胞的损伤形式;RT-PCR和W estern b lot分别检测GRP75基因在RNA和蛋白水平上的表达。结果随着缺糖时间的延长细胞活力逐渐降低,LDH释放率明显增加,缺糖死亡的细胞有部分凋亡细胞,并出现明显的凋亡峰,GRP75 mRNA在24 h内表达上调,同时蛋白表达上调。结论GRP75在缺糖损伤PC12细胞中有一定的保护作用。     

腺苷预处理对氧糖剥夺/复氧糖诱导的星形胶质细胞及脂质运载蛋白-2表达的影响

目的:探讨在氧糖剥夺/复氧糖(OGD/R)情况下腺苷预处理对体外培养星形胶质细胞的影响和脂质运载蛋白-2(LCN-2)表达的影响及其意义。方法:原代培养的大鼠星形胶质细胞随机分为腺苷预处理对照组(Ado-treated control)、对照组(Control)、实验组(ADO/R)和模型组(OGD/R)。用MTT法检测各组细胞活力,ELISA检测各组OGD/R后细胞培养基中乳酸脱氢酶(LDH)的浓度,免疫荧光及免疫印迹检测各组LCN-2的相对表达。结果:腺苷预处理对照组与对照组的细胞活力、LDH浓度和LCN-2的表达量均无明显差别。与腺苷预处理对照组、对照组相比,模型组细胞损伤程度和LCN-2的表达量均明显升高。与模型组相比,实验组细胞损伤程度和LCN-2的表达量均明显降低。结论:腺苷可以通过减少LCN-2的释放明显改善OGD/R所引起的星形胶质细胞的损伤,从而增强脑组织对缺血再灌注损伤的耐受。     

Neuroglobin-overexpression alters hypoxic response gene expression in primary neuron culture following oxygen glucose deprivation

Neuroglobin (Ngb) is a tissue globin specifically expressed in neurons. Our laboratory and others have shown that Ngb overexpression protects neurons against hypoxia/ischemia, but the underlying mechanisms remain poorly understood. Recent studies demonstrate that hypoxia/ischemia induces a multitude of spatially and temporally regulated responses in gene expression, and initial evidence suggested that Ngb might function in altering biological processes of gene expression. In this study, we asked how Ngb may help regulate genes responsive to hypoxia. Expression of hypoxic response genes following oxygen–glucose deprivation (OGD) was examined using mRNA arrays in neuroglobin-overexpressing transgenic (Ngb-Tg) and wild type (WT) mouse neurons. From a total of 113 genes on the microarray, mRNA expression of 65 genes was detected. Under rest condition, 14 genes were downregulated in Ngb-Tg neurons compared to WT. In WT neurons, after 4-h OGD followed by 4-h reoxygenation (O4/R4), 20 genes were significantly downregulated, and only Fos mRNA was significantly increased. However, out of the 20 downregulated genes in WT neurons, 12 of them were no longer significantly changed in Ngb-Tg neurons: Add1, Arnt2, Camk2g, Cstb, Dr1, Epas1, Gna11, Hif1a, Il6st, Khsrp, Mars and Rara. Among these 12 genes, 8 (Add1, Camk2g, Cstb, Dr1, Epas1, Gna11, Hif1a, Khsrp) were already reduced in Ngb-Tg neurons compared to WT under rest conditions. Additionally, three genes that initially showed no changes in WT neurons (Ctgf, Egfr and Pea15) were downregulated after OGD in the Ngb-Tg neurons. These findings suggest that Ngb overexpression modulates mRNA expression of multiple hypoxic response genes in the early phase after OGD/reoxygenation. Further studies on these gene networks and interactions may lead to better understanding of Ngb in signaling pathways that contribute to neuroprotection.     

表达谱芯片筛查非小细胞肺癌细胞系A549放疗抵抗差异基因

目的 建立非小细胞肺癌（NSCLC）A549放疗抵抗模型,表达谱芯片技术筛查放疗抵抗差异基因。 方法 A549细胞系长期间歇照射诱导建立的放疗抵抗细胞模型;表达谱基因芯片筛查放疗抵抗细胞株与敏感株全基因组RNA表达差异;分析2倍以上差异的基因（P<0.05）,分别进行生物学信息基因分类(GO)和信息通路（Pathway）分析。 结果 表达谱芯片显示,抵抗株与敏感株相比,差异表达基因为1410个（733个上调,677个下调）;GO分析显示,主要与细胞周期、DNA修复有关;通路显著性富集分析显示,丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）和磷脂酰肌醇-3-激酶（PI3K）等多条信号通路激酶出现显著性差异。 结论 多种基因和信号通路参与了放疗抵抗过程。     

Zebrafish churchill regulates developmental gene expression and cell migration

Background: Regulation of developmental signaling pathways is essential for embryogenesis. The small putative zinc finger protein, Churchill (ChCh) has been implicated in modulation of both TGF‐β and FGF signaling. Results: We used zinc finger nuclease (ZFN) mediated gene targeting to disrupt the zebrafish chch locus and generate the first chch mutations. Three induced lesions produce frameshift mutations that truncate the protein in the third of five β‐strands that comprise the protein. Surprisingly, zygotic and maternal zygotic chch mutants are viable. Mutants have elevated expression of mesodermal markers, but progress normally through early development. chch mutants are sensitive to exogenous Nodal. However, neither misregulation of FGF targets nor sensitivity to exogenous FGF was detected. Finally, chch mutant cells were found to undergo inappropriate migration in cell transplant assays. Conclusions: Together, these results suggest that chch is not essential for survival, but functions to modulate early mesendodermal gene expression and limit cell migration. Developmental Dynamics 242:614–621, 2013. © 2013 Wiley Periodicals, Inc.?     

慢病毒介导的RNA干扰通过下调白细胞介素6抑制损伤后 星形胶质细胞中波形蛋白的表达

目的：探讨用慢病毒介导的RNAi方法抑制白细胞介素6（ IL-6）,观察其对损伤后星形胶质细胞中波形蛋 白（ Vim）表达的影响。方法：选取3 日龄SD大鼠的大脑皮质,体外培养星形胶质细胞,分为载体组和病毒组, 2 组均制备细胞划伤模型,采用qRT-PCR 检测Vim mRNA的表达,免疫印迹检测Vim蛋白表达,用免疫荧光检测 Vim的定位,MTT检测划伤模型中星形胶质细胞增殖率,免疫荧光检测GFAP用于观察划伤模型中星形胶质细胞 活性。结果：划伤细胞2 d 后,病毒组的Vim mRNA和蛋白表达量较载体组明显下降。Vim主要在星形胶质细胞 胞质中表达。病毒组中星形胶质细胞增殖情况和活性低于载体组。结论：用慢病毒介导的RNAi方法抑制炎症因 子IL-6,可以下调反应性胶质化细胞中Vim的表达,影响星形胶质细胞胶质化反应,可能抑制胶质瘢痕形成,对 神经细胞的再生具有积极作用。