RNA干扰技术及其在肝癌研究中的应用

RNA干扰 （ RNA inferference, RNAi）现象是指由与靶mRNA序列相互补的双链RNA介导的使mRNA降解，致转录后基因沉默的一种机制。RNA干扰技术可高效、特异地抑制癌相关基因的过度表达，从而达到抗肿瘤的目的，虽然这一技术应用于临床尚不成熟，但它在抗肿瘤治疗和基因药物的研发领域具有广阔的应用前景。本文主要就近些年RNA干扰现象的发现、作用机制和作用特征及其在肝癌研究中的进展、应用进行综述。     

基质金属蛋白酶2和缺氧诱导因子-1α在肝癌中的表达及意义

目的 研究基质金属蛋白酶2(MMP-2)和缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)在肝细胞癌中的表达及其临床意义.方法 采用实时荧光定量PCR检测33例新鲜肝癌及相应癌旁组织标本中MMP-2和HIF-1αmRNA水平,应用免疫组化检测MMP-2、HIF-1α在45例肝癌及相应33例癌旁组织中的表达,分析其与临床病理特征间的关系以及MMP-2和HIF-1α表达的相关性.应用Kaplan-Meier生存分析研究MMP-2、HIF-1蛋白表达对患者生存时间的影响.结果 实时荧光定量PCR结果 表明肝癌组织中的MMP-2、HIF-1αmRNA水平分别为0.80±0.19、0.91±O.11,显著高于癌旁组织(0.68 4±0.15、0.65±0.19,P<0.05);免疫组化结果 显示MMP-2、HIF-1α在肝癌组织中的表达率分别为62.22%和71.11%,显著高于癌旁组织(34.20%、36.8%,P<0.05),MMP-2和HIF-1α的表达与患者性别、年龄无关,而与肿瘤大小、转移、肿瘤包膜及临床TNM分期相关.MMP-2或HIF-1α阴性组患者的生存时间显著长于MMP-2或HIF-1α阳性组.结论 MMP-2、HIF-1α在肝癌中高表达,MMP-2信号通路可能和HIF-1信号通路共同促进了肝癌的进展.     

nm23-H 1基因在肝癌预后监测中的研究进展

肝细胞癌（HCC）是消化系统常见的恶性肿瘤,在我国人群中的发病率和病死率很高,nm23-H 1作为一种抑癌基因,其表达水平与肿瘤转移呈显著负相关。目前国内外主要通过免疫组织化学方法进行 nm23-H 1基因检测。有研究表明,在胃癌、肝癌、胆囊癌和结直肠癌等肿瘤中 nm23基因的高表达能有效抑制肿瘤转移。本文就 nm23-H 1基因及其在肝癌预后判断中的研究进展概述如下。     

DLC-1基因在原发性肝癌组织中表达的临床意义研究

目的研究DLC-1基因与肝癌发生、转移乃至复发的临床意义。方法收集南通大学附属肿瘤医院2005年3月-2006年10月间73例HCC及癌旁正常组织（其中12例含癌栓）和24例肝血管瘤手术切除标本，标本均经过病理证实。依据临床以及病理学特征分为高侵袭组币口低侵袭组，采用PCR对所有组织标本DLC-1基因表达进行分析。结果研究发现肝血管瘤、癌旁组织、部分肝癌组织中表达的DLC-1基因大约为450bp，肝癌组织、癌旁组织和肝血管瘤中DLC-1基因表达阳性率依次为69．86％，97．26％和100％，统计学分析这三种组织之间有明显差异（P〈0．05）。DLC-1基因表达在HCC高侵袭组明显低于低侵袭组，二者之间有明显的差异（P〈0．05）。短期随访发现DLC-1表达阴性者的HCC患者中住生存期低于表达阳性患者，且易复发（P〈0.05）。结论定期动态监测高危人群的DLC-1基因表达可能对肝癌患者早期转移复发有一定的临床诊断价值。     

Hsa_circ_0128298在肝癌中的表达及其参与肿瘤生长的功能

目的检测环状RNA hsa_circ_0128298在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinama,HCC)中的表达,评价其参与HCC生长过程中的功能。方法 qPCR法检测50例HCC癌组织与相应的癌旁组织以及HCC细胞中hsa_circ_0128298的表达水平;采用CCK-8试验、流式细胞术、western blot等方法分析hsa_circ_0128298对HCC细胞增殖的影响;ROC曲线及生存曲线分析其在HCC诊断及预后中的价值。结果与癌旁组织比较,hsa_circ_0128298在HCC癌组织中的表达显著升高(U=846.0,P=0.005);hsa_circ_0128298筛查HCC的ROC曲线下面积(AUC~(ROC))为0.661,95%置信区间(CI)为0.560～0.753,敏感性为80.0%,特异性为50.0%。hsa_circ_0128298高表达的HCC患者总生存时间明显低于hsa_circ_0128298低表达者(χ~2=6.294,P=0.012)。RNA干扰hsa_circ_0128298(si-hsa_circ_0128298)可显著抑制HCC细胞增殖,诱导细胞周期G_0/G_1期阻滞,同时可诱导细胞周期蛋白p21 mRNA及蛋白质表达上调;而si-p21可逆转si-hsa_circ_0128298引起的HCC细胞增殖抑制及细胞周期阻滞,恢复其生长增殖潜能。结论 hsa_circ_0128298在HCC中高表达,可通过调节p21的表达促进HCC的生长,有望成为HCC诊断与治疗的新靶点。     

长链非编码RNA在肝细胞肝癌中的研究进展

肝细胞肝癌(HCC)是肝癌最常见的病理类型,患者病死率高。对HCC发生发展机制的认知局限是其不良预后的重要原因。长链非编码RNA(lncRNA)是基因调控的重要组成部分,在不同疾病患者和不同组织中的表达具有特异性。近年来,lncRNA在癌症发生发展中作用的研究逐渐深入,这为HCC早期诊断、病情控制和预后评估提供了新的方法和思路。本文就长链非编码RNA在HCC中的研究进展作一综述。     

c-met基因在肝细胞性肝癌的表达及其意义

c—met原癌基因最初发现时被认为是化学致癌物诱导的人类骨肉瘤细胞链中的一种转基因。c-met原癌基因编码蛋白为一种跨膜生长因子受体。该蛋白为一杂二聚体，由二硫化物连接的50kDa大小α链和145kDa大小的β链组成，并且β链的胞浆侧具有酪氨酸激酶活性。由于其被证实为肝细胞生长因子的特异性受体，因此许多研究者对于c—met在肿瘤发生机制中所起的作用进行了探索，现就其在原发性肝细胞件肝癌(HCC)中的研究现状做一综述。     

基底膜相关基因联合检测在肝细胞性肝癌患者预后中 的作用

摘要：目的 探讨基底膜（ｂａｓｅｍｅｎｔ ｍｅｍｂｒａｎｅ,ＢＭ）相关基因能否作为肝细胞性肝癌预后的生物学标志物。方法 通过分析 癌症基因组图谱（Ｔｈｅ Ｃａｎｃｅｒ Ｇｅｎｏｍｅ Ａｔｌａｓ,ＴＣＧＡ）中肝细胞性肝癌患者的 ｍＲＮＡ 表达谱和相应的临床数据,从中筛选出 １０９ 个与 ＢＭ 相关的且在肝细胞性肝癌组织中有异常表达的基因,筛选并分析其中可作为肝细胞性肝癌预后的生物学标志物。结 果 １０９ 个差异基因经单因素 Ｃｏｘ 回归和 Ｌａｓｓｏ 回归分析后,最终筛选出 ３ 个有意义的模型基因：ＣＴＳＡ、ＬＡＭＢ１ 和 ＭＥＰ１Ａ。基 于模型基因的风险评分可将肝细胞性肝癌患者分成高、低风险组,且高风险组的生存率显著低于低风险组（Ｐ＜０．００１）;风险评 分在１ 年、２ 年和３ 年的生存评价中的 ＲＯＣ 曲线下面积（ＡＵＣＲＯＣ ）分别为０．７３０、０．６４６ 和０．６２２。外部数据库验证结果与 ＴＣＧＡ 数据库结论相一致。将风险评分与临床因素纳入单因素和多因素 Ｃｏｘ 回归分析,结果发现风险评分可作为影响患者生存率的 独立预后因素（ＨＲ＝ ２．０６３,Ｐ＝ ０．００４）。根据年龄、性别、肿瘤分级、肿瘤分期、Ｔ 分期、Ｍ 分期、Ｎ 分期和风险评分,对肝细胞性 肝癌患者进行列线图预测模型（Ｎｏｍｏｇｒａｍ）的构建,可达到预测肝细胞性肝癌患者１ 年、３ 年和５ 年生存率的目的,校准曲线拟 合线与参考线重合率极高,表明该预测模型准确可信。结论 ＢＭ 相关基因可作为肝细胞性肝癌预后的生物学标志物。 ＣＴＳＡ、ＬＡＭＢ１ 和 ＭＥＰ１Ａ 基因构建的风险模型对肝细胞性肝癌具有重要的预后参考价值。     

双链RNA介导的转录后基因沉默及其在血液系统肿瘤中的应用

双链RNA(dsRNA)介导的转录后基因沉默(PTGS)普遍存在于生物界中。PTGS是通过向细胞内引入核酸为起始,激发dsRNA的产生、小干扰(siRNA)的形成和mRNA特异性降解,从而阻断蛋白质的翻译而引起的基因沉默。它具有特异、高效等特点。研究表明,PTGS与细胞的生长发育、维持遗传稳定性和抵抗外来核酸的入侵有关,故用于血液系统肿瘤病因、发生发展和治疗的研究具有重要的价值。     

外泌体在肝癌发生发展中的研究新进展

<正>肝细胞肝癌是全球第六大最常见的癌症,也是全球第四大癌症相关死亡原因。据统计肝癌在2018年全世界肝癌新发病例约84.2万人,死亡病例78.2万人。而中国是肝癌高发国家,中国肝癌死亡病例占了世界死亡病例的一半以上~([1])。由于早期肝癌患者并没有明显临床症状,肝癌的早期诊断十分困难。目前肝癌的筛查方法主要依靠影像学和肿瘤标志物,临床     

UHRF1在肝细胞肝癌中的表达及意义

目的:探讨UHRF1(Ubiquitin-like,containing PHD and RING finger domains 1)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达及其与临床病理特征的关系。方法:采用免疫组织化学方法检测556例HCC组织及其癌旁组织中UHRF1的表达,分析其与HCC患者临床病理特征的关系。结果:免疫组织化学结果显示,UHRF1蛋白阳性表达定位于HCC细胞核,UHRF1蛋白在HCC组织中的表达显著高于癌旁组织。HCC组织中UHRF1蛋白阳性表达率为59%,其表达与肿瘤大小(P0.01)、肿瘤分化(P0.05)和微血管侵犯(P0.01)相关。结论:HCC中UHRF1的表达与其恶性表型相关,UHRF1可能参与HCC的侵袭和转移。     

癌症高表达蛋白在原发性肝癌中的表达及意义

【目的】研究癌症高表达蛋白（Hec 1）在原发性肝细胞肝癌（HCC）中的表达和意义。【方法】采用免疫组化sABc的方法检测15例正常肝组织、20例癌旁组织及30例HCC组织中Hec1蛋白的表达水平并进行比较。【结果】在正常肝、癌旁组织及HCC组织中,Hec1蛋白的阳性表达率分别为0％、25％、66．7％,各组织中Hec1蛋白的表达相比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。Hec1蛋白的表达与HCC的Ed—mondson分级、侵袭转移显著相关。差异有统计学意义（P〈0．05）。【结论】Hec1的表达与HCC的Ed—mondson分级、侵袭转移显著相关,Hec1蛋白的过度表达可能在HCC的发生和发展中起重要作用,且对HCC的诊断及预后有重要的参考价值。     

原发性肝癌中多药耐药基因表达及其对介入治疗疗效的影响

目的探讨原发性肝癌中多药耐药基因编码的P-糖蛋白(Pgp)表达对介入治疗疗效的影响. 方法 47例原发性肝癌介入治疗前穿刺活检,采用SABC免疫组化方法检测Pgp表达.依肿瘤分期及病人状况,应用常规剂量及半剂量化疗药物进行栓塞治疗. 结果 Pgp 阳性率为72.3%(34/47).常规剂量组Pgp阴性患者有效率明显高于阳性患者(P<0.05),半剂量组二者无显著差异(P>0.05);Pgp阳性患者应用不同药物剂量疗效间无显著差别(P>0.05),Pgp阴性患者疗效与剂量呈正相关. 结论多药耐药是影响介入治疗疗效的重要因素,治疗前检测Pgp表达对制定个体化治疗方案有重要意义.     

HIF-1α、Angiopoietin-2在原发性肝细胞癌中的表达及意义

[目的]探讨HIF-1α、Angiopoietin-2（Ang-2）在原发性肝细胞癌（HCC）中的表达及意义.[方法]检测43例HCC中HIF-1α、Ang-2的表达情况,探讨其与肝癌血管生成等临床病理因素的关系.[结果]在43例肝癌标本中,HIF-1α、Ang-2蛋白阳性表达分别为：60.5%、79.1%.而7例正常的肝组织阳性表达分别为：14.2%、14.2%,两者相比差异具有显著性（ P 〈0.05）.HIF-1α表达与肿瘤的大小、分化程度有关, Ang-2表达与肿瘤的大小、有无门静脉、胆道癌栓有关.HIF-1α、Ang-2阳性表达呈正相关性.[结论]①HIF-1α在HCC中表达强于正常组织,且与肿瘤的大小、分化程度有关;而与HBsAg、门静脉癌栓无明显相关性.②Ang-2仅在HCC中表达.其表达与分化程度、门静脉癌栓有关;而与肿瘤的大小、HBsAg检测结果无明显相关性.③HCC组织存在着HIF-1α, Ang-2蛋白的表达上调并与MVD相关;三者协同作用,调节HCC的血管新生,共同促进HCC的发展.     

磷脂酰肌醇蛋白聚糖3在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican-3,GPC3)在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达及临床意义。方法 采用免疫组织化学法检测2011年6月～2015年3月期间的54例HCC组织、46例癌旁组织、22例肝硬化组织、12例正常肝组织中的GPC3表达情况,分析GPC3表达与临床和病理因素的相关性。结果 正常肝组织中不表达GPC3蛋白,肝癌组织GPC3评分(7.39±3.64)和阳性率(81.48%)均显著高于癌旁组织(1.15±0.99,13.04%)、肝硬化组织(0.32±0.56,4.54%),差异有统计学意义(P<0.05); 随着肝癌临床分期的增高,GPC3评分逐步升高,Ⅲ/Ⅳ期(10.05±3.59)与Ⅰ期(4.31±3.41)、Ⅱ期(7.14±3.63)比较,差异有统计学意义(P<0.05),GPC3阳性率也升高(Ⅰ期69.23%,Ⅱ期81.81%,Ⅲ/Ⅳ期89.47%),但差异无统计学意义(P>0.05); 肝癌组织GPC3阳性率与性别、年龄、血清HBsAg、甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)、肿瘤直径、转移情况、临床分期无关(P>0.05),与是否并发肝硬化相关(P<0.05),GPC3高表达率与血清AFP、肿瘤直径、是否并发肝硬化、转移情况、临床分期均相关(P<0.05)。结论 GPC3在HCC的诊断方面具有重要的临床意义,其表达水平与HCC的病情进展相关。     

凋亡抑制蛋白XIAP在肝细胞癌中的表达及其对肝细胞癌肝移植患者预后的影响

目的：研究凋亡抑制蛋白XIAP在肝细胞癌中的表达并探讨其对肝细胞癌肝移植患者预后的影响。方法：用免疫组化方法检测组织芯片中192例肝细胞癌及癌旁组织中XIAP的表达,分析其与其他临床病理因素的相关性及对肝细胞癌肝移植患者预后的影响。结果：XIAP在肝细胞癌组织中的阳性表达率高达89.6%,显著高于癌旁组织（45.8%,P=0.000）。以XI-AP表达对肝细胞癌患者肝移植术后生存情况进行分层分析显示,XIAP阳性组3年总体生存率明显低于阴性组（P=0.021）,复发率显著高于阴性组（P=0.001）。Cox多因素分析提示XIAP是影响肝细胞癌肝移植术后患者总体生存率的独立预后因素。结论：XIAP在肝细胞癌中阳性表达率较高,XIAP的表达水平是肝细胞癌肝移植患者预后的独立相关因素。     

肝细胞癌组织中miR-218的表达及其临床意义

[目的]研究miR-218在肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma,HCC)组织中的表达并探讨其临床意义.[方法]收集HCC手术组织标本54例,30例癌旁正常组织作为对照,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测HCC组织及对照组织中miR-218的表达情况,分析miR-218表达水平与HCC临床病理参数之间的关系.[结果]与癌旁对照组织相比,miR-218在HCC组织表达普遍下调,差异具有统计学意义(P＜0.01),癌旁对照组织中miR-218平均表达量约为HCC的2.90倍;miR-218下调表达程度与HCC恶性程度、肿瘤分化程度、肝内和肝外转移及门静脉癌栓有关,miR-218的表达水平与HCC患者年龄、性别、饮酒史、HBsAg、肿瘤大小、是否合并肝硬化等无关.[结论]miR-218与HCC的发生、临床进展密切相关,其可能成为HCC新的潜在的治疗靶点及诊断和预后的分子标志物.     

NF-κB 在肝细胞肝癌组织中的表达及其意义

目的：探讨核转录因子-κB（NF-xB）在肝细胞肝癌（HCC）组织的表达意义及NF-κB与HCC病人临床病理特征的关系。方法：采用免疫组织化学S—P法检测30例HCC组织NF-κB的表达，以30例相应癌旁肝组织作为对照，所得结果行卡方检验及相关分析进行比较。结果：NF—κB蛋白在HCC组织、癌旁肝组织阳性表达率分别为63．3％（19／30）、16．7％（5／30），有显著差异（P〈0．05）；NF-κB表达与性别、年龄、HBsAg、Child分级、肝硬化背景、肿块大小无相关（P〉0．05），与HCC分化程度、AFP水平相关（P〈0．05）。结论：NF-κB对肿瘤的发生起重要作用。