内分泌和神经相互作用对大鼠痛阈、脊神经节及脊髓后角CGRP免疫反应的影响

采用免疫组化的方法,选取地塞米松和P物质分别代表内分泌和神经因素,研究了它们单独作用及共同作用时对L4、L5脊神经节和脊髓后角Ⅰ、Ⅱ层CGRP免疫反应性的影响,并用显微图像分析系统进行相对定量分析处理;同时用热板测痛法测量了痛阈的变化。结果表明①地塞米松尾静脉注射后痛阈升高,L4、L5脊神经节和脊髓后角Ⅰ、Ⅱ层CGRP免疫反应减弱,提示地塞米松可能有抑制痛觉信息一级传入的作用;②P物质鞘内注射后痛阈降低,L4、L5脊神经节和脊髓后角Ⅰ、Ⅱ层CGRP免疫反应增强,P物质可能有促进痛觉信息一级传入的作用;③地塞米松和P物质共同作用后痛阈有所降低,L4、L5脊神经节和脊髓后角Ⅰ、Ⅱ层CGRP免疫反应强度介于二物质单独作用之间,似乎二者的作用发生了“中和”,但免疫反应仍较对照组增强。结果提示痛觉的一级传入可能受神经-内分泌相互作用的影响。     

内分泌和神经相互作用对大尽善尽美能阈、脊神经及脊髓后角CGRP免疫反应的影

采用免疫组化的方法，选取地塞米松和P物质分别代表内分泌和神经因素，研究了它们单独作用及共同作用时对L4、L5脊神经节和脊髓后角I、Ⅱ层CGRP免疫反应性的影响，并用显微图像分析系统进行相对定量分析处理；同时用热板测痛法测量了痛阈的变化。结果表明：①地塞米松尾静脉注射后痛阈升高，L4、L5脊神经节和脊髓后角I、Ⅱ层CGRP免疫反应减弱，提示地塞米松可能有抑制痛觉信息一级传入的作用；②P物质鞘内注射后痛阈降低，L4、L5脊神经节和脊髓后角I、Ⅱ层CGRP免疫反应增强，P物质可能有促进痛觉信息一级传入的作用；③地塞米松和P物质共同作用后痛阈有所降低，L4、L5脊神经节和脊髓后角I、Ⅱ层CGRP免疫反应强度价入二物质单独作用之间，似乎二者的作用发生了“中和”，但免疫反应仍较对照组增加。结果提示：痛觉的一级传入可能受神经-内分泌相互作用的影响。     

鞘内注射神经生长因子对大鼠痛阈、脊神经节脊髓后角CGRP免疫反应的影响

目的：研究鞘内注射神经生长因子（NGF）后，对大鼠痛阈、脊神经节及脊髓后角降钙素基因相关肽（CGRP）免疫反应的影响。方法：将36只大鼠分为实验组及对照组，分别进行鞘内注射NGF和生理盐水。测定大鼠痛阈，同时采用免疫组化方法，比较两组脊神经节及脊髓后角CGRP的反应强度。结果：实验组的痛阈低于对照组，CGRP免疫反应强度强于对照组。结论：鞘内注射神经生长因子后，可引起大鼠痛阈降低，脊神经节及脊髓后角CGRP免疫反应增强。     

肢体负压对周围动脉闭塞犬脊髓及背根神经节CGRP免疫反应性神经的影响

目的 :观察肢体负压对周围动脉闭塞性病变犬脊髓及背根神经节中CGRP免疫反应阳性神经纤维的影响 .方法 :犬 17只 ,随机分为治疗组 10只、非治疗组 5只和正常对照组 2只 ,治疗组和非治疗组均将动物制作左后肢缺血模型 ,治疗组在模型制作后 14d ,开始行患肢负压治疗 10d(1次 /d ,15min/次 ) ;非治疗组不做负压治疗 .3组均行脊髓及背根神经节免疫组化染色 ,检测CGRP免疫反应阳性纤维 .结果 :非治疗组脊髓及背根神经节中 ,患侧CGRP ,SP免疫反应阳性纤维均较正常组染色明显加深 ,而治疗组较非治疗组染色变浅 ,但仍较正常组加深 (P <0 .0 1) .结论 :提示肢体负压疗法可减少肢体动脉闭塞性病变伤害性刺激的传入 ,缓解肢体疼痛     

疼痛模型大鼠下丘脑和脊髓CGRP的含量变化

目的通过测定疼痛模型大鼠下丘脑和脊髓降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)的含量变化,以探讨疼痛产生机制。方法动物随机分成空白对照组,生理盐水对照组和疼痛模型组,左足跖皮下注射5%甲醛50μl建立大鼠疼痛模型,采用放射免疫分析法测定股动脉血、下丘脑和脊髓中CGRP的含量。结果疼痛模型组SD大鼠血浆中及下丘脑和脊髓CGRP含量分别与空白对照组、生理盐水对照组差别有统计学意义(p<0.05);而空白对照组与生理盐水对照组差别无统计学意义(p>0.05)。结论皮下注射5%甲醛可致疼痛症状产生;提示皮下注射甲醛所致疼痛可引起下丘脑和脊髓组织中的CGRP释放增加,结果导致无菌性炎症反应而引起疼痛症状。     

He-Ne激光照射对大鼠神经损伤后脊髓CGRP表达的影响

目的 研究１０mW氦氖（Ｈe-Ne)激光照射对大鼠坐骨损伤神经后脊髓ＣＧＲＰ表达的影响。方法 ９６只ＳＤ大鼠制成坐骨神经损伤模型。Ｈe-Ne激光照射损伤的坐骨神龙,免疫组化方法观察脊髓内ＣＧＲＰ的变化。结果 神经损伤后１d脊髓内ＣＧＲＰ表达即增加;载wk及４wk时激光照射组ＣＧＲＰ的表达高于对照组,阳性表达主要存在于脊髓灰质内前角运动神经元和脊根感觉纤维;８wk时ＣＧＲＰ仍保持较高水平的表达,二组无明显差异。结论 １０mW-He-Ne激光照射大鼠损伤的坐骨神经可引起脊髓内神经元ＣＧＲＰ表达的变化,有促进完成神经再生的作用。     

两种慢性痛大鼠脊髓和脊神经节一氧化氮合酶的表达及电针的影响

目的：观察福尔马林试验和去传入神经两种慢性痛模型大鼠脊神经节和脊髓一氧化氮合酶的改变。方法：还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸组织化学方法。结果：福尔马林试验和去传入神经均可导致大鼠手术侧脊神经节阳性神经元增加；手术侧脊髓后角浅层NOS阳性终末增加。结论：电针可能改变两种模型大鼠脊神经节一氧化氮合酶的表达。     

康复训练对大鼠脑梗死后CGRP表达的影响

目的 研究康复功能训练对脑梗死大鼠大脑降钙素基因相关肽（CGRP）表达的影响。方法 采用60只SD大鼠制作脑梗死模型;24h后随机分为康复组和制动组;康复组每日给予平衡、抓握、旋转、行走等功能训练,制动组置于网状笼内固定,各组在24h,1,2,3和4wk检测CGRP表达。结果 康复组和制动组大鼠中枢神经系统中皮质、脊髓前角均出现CGRP阳性神经元,康复组反应比制动组强。结论 康复功能训练可引起CGRP表达增加,有促进神经功能恢复的作用。     

CGRP对离体脊髓运动神经元突触传递的影响

目的:观察降钙素基因相关肽(CGRP)对新生大鼠离体脊髓运动神经元(MN)突触传递的影响。方法:选取8～12日龄的新生SD大鼠制备离体脊髓横切片,运用细胞内记录技术进行MN生物电记录,在同侧腹外侧索(iVLF)和同侧背根(iDR)施加电刺激(单脉冲,0.1～0.2 ms, 0.1 Hz, 10～100 V)以诱发兴奋性突触后电位(EPSP),即iVLF-EPSP和iDR-EPSP。给予CGRP灌流,观察其对脊髓MN突触传递的影响。结果:(1)在7个稳定记录的MN,诱导出iVLF-EPSP并灌流1μmol/L CGRP 15 min,在其中的5个MN上观察到iVLF-EPSP的时程被缩短(P<0.05)。(2)在5个稳定记录的MN,诱导出iDR-EPSP并灌流1μmol/L CGRP 15 min,在其中的3个MN上观察到iDR-EPSP的曲线下面积被抑制(P<0.05)、上升时间被缩短(P<0.01)。(3)在2个稳定记录的MN中,诱导出iDR-EPSP并灌流1、5μmol/L CGRP各15 min,观察到iDR-EPSP幅度的平均抑制率分别为6%、36%。结论:C...     

促肾上腺皮质激素对改进的炎性痛大鼠脑、脊髓内CGRP的影响

目的 观察腹腔注射促肾上腺皮质激素（ＡＣＴＨ）对改进的完全佐剂性关节炎慢痛大鼠脊髓腰膨大,海马和纹状体内降钙素基因相关肽（Ｃａｌｃｉｔｏｎｉｎ ｇｅｎｅ－ｒｅｌａｔｅｄ ｐｅｐｔｉｄｅ,ＣＧＲＰ）的影响。方法 （１）肾上腺摘除术。（２）ＣＧＲＰ放射免疫法。结果 （１）大鼠踝关节周围皮下注射自制的油包水型完全福氏佐剂成功地制备成一种全身反应较轻的慢性疼痛模型。（２）脊髓腰膨大中的ＣＧＲＰ在关节炎大鼠     

后根切断术及辣椒素对大鼠脊髓后角δ阿片受体免疫反应性的影响

应用免疫组织化学方法观察大鼠单侧脊髓后根切断后和蛛网膜下腔注射辣椒素后,脊髓后角浅层δ阿片受体(DOR)免疫反应性的变化。结果显示:①在单侧后根切断术后第5d,所有大鼠术侧脊髓后角I～Ⅲ层内DOR的免疫反应性均较对照侧明显减弱(P<0.01);②在所有辣椒素处理大鼠中,其脊髓后角浅层DOR免疫反应性均较对照组明显下降(P<0.01)。结果提示,脊髓后角浅层内部分DOR来源于一级传入神经元,其中部分为传入伤害性信息的神经元。     

Caveoline-1蛋白在慢性神经痛大鼠背根神经节和脊髓背角表达的变化

目的 观察Caveolin-1蛋白在神经痛大鼠中不同作用时间脊髓背角和背根神经节表达量的变化。方法 实验动物分组和动物模型制作：对照组28只,神经痛模型组（L5脊神经结扎）28只,按处理时间不同又各分为1、3、5、7、10、14、21天共7组,每组各4只,制备动物模型。痛行为学检测：术后1、3、5、7、10、14、21天,测定各组机械撤足阈值和热撤足潜伏期,神经痛模型组和对照组对比,确定疼痛模型制作成功。神经痛模型组和对照组大鼠均在第22天处死,按同侧和对侧分别提取L5脊髓和背根神经节组织总蛋白,利用蛋白印迹法检测Caveolin-1在各实验分组脊髓背角和背根神经节同侧和对侧的表达量。结果 同侧背根神经节Caveolin-1的表达量在L5脊神经结扎后的第5、7、10、14、21天与对照组比较,分别升高了40.4%±3.67%、126.9%±5.46%、159.7%±4.89%、119.1%±5.77%和91.4%±5.31%,其中术后第10天差异有统计学意义（P<0.01）,同侧脊髓背角Caveolin-1的表达量在L5脊神经结扎后的第5、7、10、14、21天与对照组相比分别升高了33.3%±4.89%、152.8%±3.56%、142.1%±5.43%、103.2%±6.21%、175.6%±4.81%,其中第10、14、21天差异有统计学意义（P<0.05）。对照组之间Caveolin-1的表达无明显变化。结论 慢性神经痛可诱导Caveolin-1在同侧脊髓背角和背根神经节表达量的增加。     

大鼠脊髓背角中NT样免疫反应物的光镜和电镜研究

用免疫细胞化学和电镜相结合的方法研究 NT-LI 在鼠脊髓背角中的分布和超微结构。光镜下 NT 样免疫反应细胞、纤维和终末主要分布于背角Ⅱ_b 层相Ⅲ层背侧部。也镜下 NT-LI可见于核周体、树突、轴突和有髓纤维内。除大多数标记轴突与未标记树突构成轴-树突触外,部分标记轴突与未标记轴突和未标记胞体构成轴。轴和轴-体突触。未标记轴突亦可与标记树突构成轴-树突触。结果提示背角浅层中 NT 神经元可能参与构成调节痛觉传递回路。     

推拿对坐骨神经损伤大鼠背根神经节降钙素基因相关肽表达的影响

目的:观察推拿对坐骨神经损伤后背根神经节神经元降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)表达的影响。方法:48只大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、模型对照组、推拿组,采用坐骨神经损伤(chronic constriction injury,SNI)模型,以按摩推拿手法模拟仪进行推拿手法干预,观察各组大鼠光热耐痛阈、痛敏分数变化及L3-5节段右侧背根神经节CGRP的表达情况。结果:造模7 d后,与同期正常组比较,模型组大鼠的耐痛阈值及痛敏分数均明显升高(P0.01);模型组CGRP在背根神经节的表达升高(P0.01)。在推拿治疗20次之后,与同期模型组比较,推拿组耐痛阈值及痛敏分数明显降低(P0.05);与同期模型组和模型对照组比较,推拿组CGRP在背根神经节的表达明显升高(P0.01)。结论:推拿可以提高周围神经损伤大鼠背根神经节内CGRP的表达,参与神经损伤修复过程,最终改善周围神经损伤大鼠的感觉功能。     

胚胎大鼠背根神经节神经元的原代培养

目的 原代培养胚胎大鼠背根神经节神经元(DRGn),并观察其生长特性。方法 取E15 SD胎鼠的背根神经节,用胰蛋白酶消化法分离成单细胞,通过密度梯度离心法和差速贴壁法进行分离纯化,在无血清培养基中培养,用抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体鉴定神经元。结果 纯化培养神经元生长状态良好,纯度可达93%左右。结论 该方法具有较好的可操作性和可重复性,用于DRGn的相关实验研究。     

大鼠脊髓内L-ENK阳性胞体及切断背根对其免疫反应性的影响

本文对大鼠切断单侧背根及(或)注射秋水仙素后,观察脊髓内亮氨酸脑啡肽(L-ENK)的免疫组织化学改变。发现:脊髓Ⅰ层内存在一种水平位较大的L-ENK阳性神经元胞体(简称阳性胞体),及少量中等大的豆形阳性胞体。Ⅱ层内阳性胞体较小,呈圆形或梭形。Ⅳ～Ⅵ层的外侧区,阳性胞体较Ⅰ～Ⅱ层内者大,成群分布或交错排列,其突起走向腹内侧,与中央管背外侧的胞体联系。单侧切断背根后,Ⅰ～Ⅱ层内L-ENK免疫反应性增强明显,胞体数增多。     

压力负荷对大鼠血浆CGRP的改变及鹿角方的影响

为研究压力负荷增加大鼠血浆降钙素基因相关肽（CGRP）的改变及鹿角方的影响。36只大鼠建立腹主动脉狭窄所致压力负荷增加大鼠充血性心力衰竭（CHF）心肌肥厚模型,随机分为3组,假手术组（A）、模型组（B）和鹿角方组（C）,观察左室重复指数（LVMI）,并检测血浆CGRP。结果：B组LVMI明显高于A组（P＜0．001）,C组LVMI与B组比较有明显下降（P＜0．01）;B组血浆CGRP水平明显低于A组（P＜0．05）,C组血浆CGRP较B组显上升（P＜0．05）。提示压力负荷增加所致充血性心力衰竭心肌肥厚大鼠血浆降钙素基因相关肽水平是降低的;鹿角方具有升高该大鼠血浆CGRP水平,逆转心肌肥厚的作用。     

两种切片法对脊髓Ⅱ板层BDNF免疫组化反应的影响

目的：为比较不同组织切片方法对免疫组织化学结果的影响。方法：用成年SD大鼠L5脊髓分别制成冰冻（20μm）和石蜡（5μm）切片，用兔抗BDNF多克隆抗体作ABC免疫组化染色。结果：冰冻切片组背角Ⅱ板层除有大量BDNF阳性神经膨体外，尚可见一些阳性神经元，石蜡切片组则仅有大量阳性神经膨体，而几乎未见阳性神经元。结论：不同制片法对免疫组织化学结果有影响，即冰冻切片可能较石蜡切片具有更高的免疫反应敏感性。本文中石蜡切片较低的BDNF免疫活性可能与其制作过程中有机溶剂（酒精、二甲苯）的使用和/或包埋过程中加热处理所致的BDNF抗原丢失有关。     

部分背根切断对备用背根节和脊髓NT-4表达的影响

目的探讨NT-4在正常猫和部分去背根猫的L6背根节(手术侧和非手术侧)和脊髓Ⅱ板层与背核表达的变化。方法成年健康雄猫15只分为正常组、备用根术后7d组和14d组(动物行单侧部分去背根手术,即切除一侧L1-L5、L7-S2背根节,保留L6为备用根),采用免疫组化ABC法,观察、计数各组背根节、脊髓实验侧Ⅱ板层(L3、L5、L6)和背核(L3)中NT-4的分布及含量。结果①去部分背根后7d,备用背根节(术侧)中NT-4阳性神经元数比正常组显著减少（P＜0．05),但较非术侧明显增多(P＜0．05);至术后14d,术侧备用背根节NT-4阳性神经元比正常组、7d组和非术侧均减少(P＜0．05)。②正常组、术后两时相L3、L5、L6术侧脊髓Ⅱ板层和L3背核内NT-4阳性神经元数均无明显变化。结论去部分背根主要导致备用背根节NT-4的表达发生变化。