薯莨总鞣质的提取工艺优选

目的： 优选薯莨总鞣质的提取工艺。 方法： 以总鞣质含量与转移率为评价指标,通过单因素试验筛选提取方法、药材粉碎度、润湿时间等因素,采用L₉（3⁴）正交试验考察乙醇体积分数、渗漉液收集量、渗漉流速对薯莨总鞣质提取工艺的影响。 结果： 选用乙醇渗漉法,最佳工艺条件为渗漉前浸泡时间24 h,药材粉碎粒度为粗粉,润湿时间2 h,乙醇体积分数80%,收集8倍量渗漉液,渗漉流速4 mL·kg^-1·min^-1。 结论： 该工艺稳定可行,适用于薯莨片的工业化生产。     

肾石消片提取工艺优选研究

目的针对肾石消片的提取工艺进行研究。方法通过正交试验以处方中金钱草中所含总黄酮的提取量和出膏率为定量指标,确定合理的醇提取工艺。结果醇提取最佳工艺条件是:乙醇浓度为60%,加醇量为10,8,8倍,提取3次,第1次提取1.5h,第2次、第3次分别提取1 h,出膏率及有效成分提取率均较高,且重现性较好。结论优选得到的工艺稳定可行,适合工业大生产要求。     

复方必清片的提取工艺优选

目的: 优选复方必清片的提取工艺。 方法: 在单因素试验基础上,以薯蓣皂苷元、秋水仙碱含量和浸膏得率的综合评分为指标,通过正交试验优选菝葜等7味药材的乙醇提取工艺;以总多酚含量和浸膏得率为综合评价指标,通过正交试验优选余甘子等5味药材的水提取工艺。采用HPLC测定薯蓣皂苷元和秋水仙碱的含量,色谱条件为Cosmosil C₁₈色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),柱温35 ℃,流速1.0 mL·min^-1,进样量10 μL,检测波长分别为203,350 nm,流动相分别为甲醇-水(90:10),甲醇-水(37:63);采用紫外分光光度法测定总多酚含量。 结果: 菝葜等7味药材的最佳提取工艺为加10倍量70%乙醇提取2次,每次1.0 h;余甘子等5味药材的最佳提取工艺为加10倍量水提取3次,每次1.0 h。 结论: 优选的提取工艺稳定可行,为复方必清片的质量控制提供实验依据。     

正交试验优选山豆根有效部位的提取工艺

目的:优选山豆根有效部位的提取工艺。方法:采用L9(34)正交试验法,以总生物碱含量为指标,选取乙醇体积分数、加醇量、提取时间及提取次数为考察因素,优选山豆根中总生物碱的提取工艺;以总多糖含量为指标,选取加水倍量、提取时间及提取次数为考察因素,优选山豆根中总多糖的提取工艺。结果:总生物碱最佳提取工艺为加6倍量70%乙醇提取2次,每次1 h;总多糖最佳提取工艺为加6倍量水提取3次,每次1 h。结论:优选的提取工艺操作简单、稳定可行,适合于产业化生产,具有良好的应用前景。     

浙贝母提取工艺的优化选择

以总生物碱含量为指标,采用正交试验法考察提取溶媒,溶媒浓度,药材处理方法、提取次数等因素对总生物碱提取效果的影响。结果表明,浙贝母的最佳提取工艺条件为９５％乙醇提取２次,每次１ｈ,整粒提取,溶媒量６倍,药材不需碱处理。     

寒痹贴的提取工艺优选

目的:优选寒痹贴的最佳提取工艺。方法:草乌以总生物碱的提取量为考察指标,采用正交试验优选醇提工艺;赤芍等6味中药以芍药苷的提取量为考察指标,采用正交试验优选水煎工艺。结果:寒痹贴的最佳提取工艺为草乌加70%乙醇6倍,回流2次,每次2 h;赤芍等药材加水8倍量,煎煮3次,每次1 h。结论:优选出的提取工艺合理、可行,为其生产提供了科学依据。     

蔓茎堇菜总三萜的提取工艺优选

目的优选蔓茎堇菜总三萜的提取工艺。方法以蔓茎堇菜总三萜量为考察指标,采用单因素及L9(34)正交试验优选蔓茎堇菜总三萜的提取工艺。结果蔓茎堇菜总三萜的最佳提取条件为80%乙醇提取2次,每次1.5 h,此条件下总三萜量达16.87 mg/g。结论筛选出的提取工艺稳定可行,适用于蔓茎堇菜总三萜的提取。     

正交试验优选地龙水提取工艺

目的:优选地龙的水提取工艺条件。方法:以次黄嘌呤含量为指标,HPLC测定指标成分含量,在单因素试验基础上,采用L9(34)正交试验考察加水量、提取次数、提取时间对次黄嘌呤含量的影响,优选地龙的水提取工艺。结果:各因素对水提取工艺的影响顺序为提取次数>提取时间>加水量;最佳水提取工艺为地龙药材加10倍量水回流提取1次,提取时间1 h。结论:优选的水提取工艺稳定可行。     

正交试验优选宣木瓜总皂苷的提取工艺

目的:优选宣木瓜总皂苷的提取工艺。方法:以宣木瓜总皂苷得率为评价指标,通过单因素试验筛选提取方法,利用正交试验考察乙醇体积分数、提取温度、料液比及提取时间对宣木瓜总皂苷提取工艺的影响。采用UV测定总皂苷含量,检测波长550 nm。结果:最佳乙醇提取工艺为加20倍量80%乙醇于90℃提取3 h;宣木瓜总皂苷得率1.69%。结论:优选的提取工艺稳定可行,为宣木瓜系列产品的开发提供参考。     

正交试验法优选从豆制品下脚料中提取大豆皂苷的工艺

目的 优选从豆制品下脚料中提取大豆皂苷的最佳提取工艺条件。方法 通过正交试验,以紫外分光光度法测定总皂苷含量为指标,对提取工艺进行考察。结果 影响回流提取的主要因素对乙醇浓度;影响渗漉提取的因素依次为乙醇浓度、溶媒量和渗漉速度。结论 最佳提取工艺条件为8倍量60％乙醇,热回流1次2．5h。     

川贝母与其他贝母类药材总生物碱和总皂苷的含量测定与比较

目的 :通过测定和比较川贝母与其他贝母类药材在总生物碱和总皂苷的含量上的区别 ,探讨建立合理的川贝母有效成分含量测定标准的途径。方法 :用两相滴定法测定各种贝母的总生物碱含量 ;用重量法测定各种贝母的总皂苷含量。结果 :测定了 4种川贝母 (2000年版《中国药典》收载品种)各3个样品和浙贝母、伊贝母和平贝母各 2个样品中总生物碱含量和总皂苷含量。结论 :川贝母的总生物碱含量在 0.05 %～0.1% ,总皂苷含量在2.0%～4.0% ;浙贝母、伊贝母和平贝母的总生物碱含量在0.1%～0.2% ,总皂苷含量在 1.0%～2.0%。这种主要成分含量的差异为解释川贝母的独特药理活性和制定合理的质量标准提供了新的思路。     

我国川贝母的质量分析

 目的 通过对2013年72批川贝母药材及饮片全国抽验情况,总结我国川贝母的质量问题,并探讨聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性方法在检验中应注意的问题。方法 参照《中国药典》2010年版一部标准方法,对所抽取的样品进行检验和研究,发现并探讨其质量问题和检测方法。结果 抽验结果表明,市场上川贝母的不合格率为25.4%,聚合酶链式反应-限制性内切酶长度多态性方法在检验中对取样环节应予以明确规定。结论 应进一步完善和提高标准,加强质量监管,并建立专项抽验的长效机制,保证中药材及饮片的质量和安全。     

基于ITS2序列鉴定川贝母及其混伪品基原植物

本研究对川贝母5种不同基原植物ITS2序列进行PCR扩增和测序;同时扩大研究范围,从GenBank上下载川贝母及其常见混伪品共10个物种13个样本的ITS2序列。用MEGA4.1计算其种间、种内的K-2-P距离,并分析各样本间ITS2序列二级结构的差异,最后利用ITS2序列重构其系统发育树。结果显示川贝母基原植物种内最大K-2-P距离为0.0276,与混伪品的种间最小K-2-P距离为0.0583;川贝母及其混伪品的ITS2二级结构存在明显差异;重构的系统发育树显示川贝母不同基原物种聚为一支,能较好与混伪品区分。研究结果表明ITS2条形码序列能够成功鉴定川贝母及其混伪品的原植物,为川贝母混伪鉴别提供了新工具。     

浙贝母总生物碱提取工艺优化研究

目的:优化浙贝母中总生物碱提取工艺.方法:以总生物碱含量为指标,采用酸性染料比色法测定浙贝母总生物碱含量,以乙醇用量、乙醇浓度、回流时间为主要影响因素开展正交试验,以回流次数单因素考察优化提取工艺.结果:最佳提取工艺为70%乙醇,6 倍量溶媒,提取2 次,每次2 h.结论:所优选出的提取工艺方法合理可行,稳定可靠.     

中药川贝母定量分析方法研究

目的:研究常用中药川贝母的定量分析方法。方法:应用高效液相色谱法。以4种川贝母共有的有效成分贝母辛为指标;采用AgilentHypersilBDS C₁₈(4. 0mm×2 5 0mm ,5 μm)色谱柱,以乙腈水 二乙胺(37∶6 3∶0 .0 3)为流动相,流速1 0mL·min^-1;Alltech 2 0 0 0蒸发光散射检测器检测,外标两点法定量。结果:贝母辛在0 . 0 3188～1. 0 2 0mg·mL^-1呈线性,回收率为10 2. 1% (n=5 ) ,RSD 3. 86 %。根据33批不同产地或来源的川贝母药材中贝母辛的含量结果,确定贝母辛的含量限度为0 . 0 0 70 %。结论:本法为良好的贝母辛的定量分析方法,可用于川贝母药材的质量控制。     

川贝母转录组中SSR位点信息分析

目的:通过分析川贝母转录组简单重复序列标记(SSR)信息,为其分子标记辅助育种及种质资源保护提供技术支撑。方法:采用Illumina Hi Seq2000技术平台对川贝母鳞茎及叶片进行高通量测序,采用MISA对Unigene进行SSR位点分析。结果:从转录组得到44 973条,Unigene中共检测到3 817个SSR位点,分布于3 367条Unigene序列中,出现频率为8.49%,平均每10.37 kb序列出现1个SSR位点。其中重复类型最多的为三核苷酸和二核苷酸,所占比分别为56.51%和27.06%。三核苷酸重复基序CCG/CGG所占比率最大,其次为二核苷酸重复基序AG/CT。6种SSR重复类型的重复次数主要集中于4~12次,24.55%SSR的序列长度20 bp。结论:川贝母SSR位点出现频率较高,类型丰富,多态性较高,为其遗传多样性分析和遗传图谱构建及分子辅助育种提供了丰富的候选分子标记。     

川贝母采后加工贮藏包装环节的调查

目的:通过调查不同产地川贝母采后的加工贮藏包装现状,深入了解从采收到饮片的各个环节中影响其质量的因素,为其规范化加工、合理贮藏、现代化包装提供参考。方法:在现有的研究基础上,以药材市场、道地产区的实地调查为主,文献检索和分析为辅,综合分析影响川贝母质量的各种因素。结果:通过调查,归纳总结了川贝母的采后初加工方法、贮藏条件与包装方面的现状和存在的问题。结论:川贝母以野生为主,采挖的农户分散,采收时间不统一,初加工环节的干燥是一个关键的环节但传统技术原始,贮藏过程中容易出现油子、黄子的现象,包装环节容易出现虫蛀现象,各环节尚缺乏科学统一的标准,影响着产品的品质。为了保证川贝母的质量和临床用药安全,需要采用多种技术从多个环节进行质量的全过程控制,建立合理的质量评价方法和指标,制定科学的标准操作规程。     

电子鼻技术应用于川贝母真伪及规格辨识的可行性分析

目的 基于电子鼻技术,建立一种快速而准确的川贝母真伪及规格辨识新方法,并探讨该技术用于中药饮片鉴定的可行性。方法 以川贝母为研究对象,收集80批待测样品,以电子鼻嗅觉感官数据为自变量X,以2020年版《中华人民共和国药典》所载方法结果为主,并参考传统经验辨识结果作为标杆辨识信息Y,利用判别分析（DA）,最小二乘支持向量机（LS-SVM）,主成分分析-判别分析（PCA-DA）,偏最小二乘法-判别分析（PLS-DA）4种化学计量学方法分别建立川贝母饮片真伪及商品规格辨识模型Y=F（X）;以辨识准确率、耗时为指标,对结果进行探讨。结果 经留一法交互验证,在真伪辨识中,上述4种模型正确率分别为93.75%,91.25%,95.00%和95.00%,以PCA-DA与PLS-DA辨识模型为最优;在规格辨识中,4种模型辨识正确率分别为86.67%,88.00%,89.33%和68.00%,以PCA-DA辨识模型为最优。电子鼻辨识真伪及规格模型的准确率均较高,耗时相对较短。结论 电子鼻技术可准确、快速地对川贝母进行鉴别,在时效性和正判率方面均具有显著优势。     

基于传统性状客观化分析的川贝母质量评价

目的对川贝母的外观性状进行客观量化,完善其质量评价方法。方法用游标卡尺测定高度和直径,在人眼对外观色泽观察的基础上用色差仪对粉末色泽进行客观量化,通过紫外分光光度法测定总生物碱的含量,对高度、直径、△E值与总生物碱含量测定结果进行统计学分析,确定外观性状与内在成分之间的相关程度。结果高度与总生物碱的含量呈极显著负相关(P <0. 01)、直径与总生物碱的含量呈负相关,综合来看随着川贝母鳞茎的增大,总生物碱含量呈降低趋势。△E值与总生物碱含量之间的相关性不显著。结论由于总生物碱含量可以客观地反映川贝母的质量,本实验的结果为川贝母传统以"个小为佳"、"碎贝、破贝不可入药"的观点赋予了科学的依据,肯定了川贝母"不得水洗"的传统加工方法。不同规格的川贝母中以松贝为优。     

基于空间代谢组学探究川贝母抗肺纤维化的作用机制

目的 基于空间代谢组学技术结合药理指标,解析川贝母粉改善博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化的作用机制。方法 将60只SD大鼠随机分为空白组、模型组及川贝母高、中、低剂量组,每组12只。除空白组外,其他组大鼠均采用气管注射博莱霉素建立肺纤维化模型。术后川贝母高、中、低剂量组分别给予0.36、0.18、0.09 g·kg^-1川贝母粉的水溶液,连续给药28 d,空白组和模型组灌胃给予等量蒸馏水。末次给药后收集肺组织及血液,通过苏木素-伊红（HE）、马松（Masson）染色综合评估大鼠肺组织病理状况,利用空气动力辅助解吸电喷雾离子化质谱成像技术对不同实验组大鼠肺组织进行质谱成像分析,依据HE染色图选择模型组和川贝母高剂量组肺组织纤维化区域进行空间代谢组学分析,采用有监督的正交偏最小二乘法-判别分析（OPLS-DA）获得的变量重要性投影（VIP）值>1、t检验P<0.05及变异倍数分析来筛选组间差异代谢产物;采用京都基因与基因组百科全书（KEGG）数据库对筛选出的差异代谢物进行代谢通路分析。采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测大鼠肺组织中核转录因子-κB p65（NF-κB p65）和血红素加氧酶-1（HO-1）蛋白表达;生化检测大鼠肺组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）和谷胱甘肽（GSH）水平;采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠血清中白细胞介素（IL）-1β、IL-6、核因子E₂相关因子2（Nrf2）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平,对筛选出的部分相关性强的信号通路进行验证。结果 质谱成像实验结果显示,肺纤维化大鼠在灌胃川贝母粉28 d后,其肺组织纤维化区域的L-精氨酸含量与模型组大鼠比较具有明显差异,磷脂酰胆碱含量低于模型组大鼠肺纤维化区域中磷脂酰胆碱含量。Western blot结果表明,与模型组比较,在灌胃给药川贝母粉28 d后,可以抑制肺纤维化大鼠肺组织中NF-κB p65蛋白表达量上升,高剂量川贝母粉灌胃给药后能够明显抑制HO-1表达量降低（P<0.05）。细胞因子检测结果显示,与模型组比较,川贝母高、中、低剂量组大鼠血清中IL-1β、IL-6及TNF-α的含量均降低,高剂量川贝母粉灌胃后能够明显抑制由博莱霉素引起的SOD、GSH、Nrf2含量降低及MDA含量升高的趋势。结论 川贝母粉灌胃给药可一定程度改善博莱霉素诱导的大鼠肺纤维化,其作用机制可能与调控炎症（NF-κB p65）、氧化应激（Nrf2/HO-1）等相关途径有关。