高压氧对脑缺血再灌注小鼠脑组织细胞粘附分子的表达及血脑屏障通透性的影响

目的：探讨高压氧（HBO）对缺血再灌注72h小鼠脑组织中细胞粘附分子（ICAM-1，VCAM-1）的表达及血脑屏障（BBB）通透性的影响。方法：昆明种小鼠220只，随机分为A、B、C、D4组各55只，A、B组均为假手术组，C、D组制作为脑缺血再灌注模型。术后B、C组即给予HBO治疗5次，术后2、9、21、45及69h的5个时点，各组分别取10只小鼠经尾静脉注射2％伊文思兰（EB）后处死，采用逆转录多聚酶链反应（RT-PCR）方法及比色法分别检测脑组织中ICAM-1、VCAM-1mRNA的表达及EB的含量。结果：脑缺血再灌注后各时点C、D组小鼠EB渗出含量及ICAM-1、VCAM-1mRNA的表达均明显高于A、B组（P％0．01）；C、D组间比较，C组ICAM-1mRNA的表达及EB的含量均低于D组（P％0．01），VCAM-1mRNA的表达变化不明显。A、B组间比较各项指标均差异无显著性意义。结论：HBO具有降低脑缺血再灌注72h过程中细胞粘附分子ICAM-1的表达，从而对BBB具有保护作用。     

高压氧对脑缺血大鼠凝血因素的影响

目的：观察缺血性脑血管病的凝血、抗凝及纤溶变化及高压氧（HBO）对其的影响,探讨HBO治疗缺血性脑血管病的作用和机理。方法：72只W istar大鼠被随机分成正常对照组、缺血组、高压氧组。制作缺血再灌注模型,高压氧组每日行HBO处理。分别于缺血再灌注后1、3、7、14d采血用酶免法测血浆蛋白C（PC）、蛋白S（PS）、D-二聚体（D-dimer）,血清抗心磷脂抗体（ACA）。观察HBO治疗前后以上指标变化。结果：缺血再灌注后,血浆PC、PS活性下降,D-dimer含量迅速升高,血清ACA变化不明显。高压氧组各数值较缺血组更快恢复正常。结论：HBO对缺血性脑血管病有治疗作用,可减少因缺血、血管损伤引起的凝血、抗凝及纤溶系统异常,减轻神经系统损伤,预防复发。     

高压氧对急性损伤期全脑缺血再灌注大鼠脑内兴奋性氨基酸水平的影响

目的：探讨高压氧（HBO）对缺血再灌注脑内兴奋性氨基酸水平的影响。方法：将SD大鼠分为缺血再灌注组（I／R组）、高压氧处理组（HBO组）及似手术对照组（Sham—O组），以四动脉阻断法建立全脑缺血再灌注大鼠模型。动物缺血20min后分别再灌注6h、24h、48h和96h，各HBO组在再灌注后分别行不同次数的高压氧处理。取动物的全脑测定谷氨酸（Glu）和天门冬氨酸（Asp）含量。结果：24h和48hHBO组Glu水平明显低于对应时间点的I／R组（P＜0．01），且24hHBO组Asp含量也低于I／R组（P〈0．05），而各时间点I／R组的Glu水平均高于Sham—O组（P〈0．01）。结论：在一定时间内进行高压氧处理町抑制由全脑缺血再灌注所诱导的兴奋性氨基酸的过度释放，这可能是高压氧治疗缺血再灌注脑损伤的机制之一     

高压氧对脑外伤大鼠额叶皮质和海马胆碱乙酰转移酶阳性神经元数目的影响

目的观察高压氧（HBO）对脑外伤大鼠额叶皮质和海马胆碱乙酰转移酶（ChAT）阳性神经元数目的影响。方法采用自由落体撞击法造模。将30只大鼠随机分为假手术对照组（A组）、脑外伤组（B组）和脑外伤加HBO治疗组（C组），各组大鼠在造模24d后同时进行ChAT阳性细胞数及相关参数的定量分析。结果C组大鼠额叶皮质和海马ChAT阳性神经元数目比B组明显增多（P〈0．01）。结论HBO治疗能抑制乙酰胆碱能神经元的退行性变，从而使损伤大鼠海马区ChAT阳性纤维增生。这可能是HBO治疗改善颅脑损伤大鼠学习记忆功能障碍的原因。     

高压氧对缺血再灌注小鼠脑组织中细胞因子和血脑屏障的影响

目的 探讨高压氧（HBO）对缺血再灌注小鼠脑组织中细胞因子和血脑屏蔽的影响。方法 复制清上鼠脑缺血再灌注模型，并于再灌注期间行0.25MPa(ATA)HBO治疗5次，在处死动物前1h经尾静脉注射2％伊文思蓝（Evans)，采用ABC－ELISA法检测脑组织中IL－1β，TNF－α，IL－6，IL－8的含量及分光光度计法检测脑组织中Evans蓝的含量。结果 脑缺血再灌注组脑组织中细胞因子及Evans蓝的含量较假手术组显著升高（P＜0．05）。高压氧组与假手术组相比细胞因子及Evans蓝的含量变化不显著（P＞0．05）。HBO＋缺血再灌注组脑组织中细胞因子及Evans蓝的含量较缺血再灌注组显著降低（分别为P＜0．05，P＜0．01）。结论 HBO可明显减少脑缺血再灌注损伤中脑部细胞因子的含量，降低血脑屏障的通透性，而对正常脑组织的作用很小。     

L-精氨酸对在体兔肺缺血-再灌注损伤影响的实验研究

【目的】探讨L精氨酸对兔肺缺血-再灌注损伤的影响。【方法】建立在体兔肺缺血-再灌注模型，随机分成三组：A组为假手术组、B组为缺血-再灌注组、C组为缺血-再灌注＋L-精氨酸处理组，每组7只。在再灌注60min行肺组织湿干比W／D值、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）含量测定和肺组织病理学检查。【结果】再灌注60min后C组肺组织W／D值、MDA含量较B组均明显降低（P〈0．05），而SOD、NO含量较B组明显升高（P〈0．05）；肺组织病理学检查示B、C组兔肺均有部分肺泡结构破坏，不同程度的炎症反应，其中C组炎症积分显著低于B组（P〈0．01）。【结论】L-精氨酸预处理，可减轻随后的缺血再灌注损伤。     

高压氧对急性损伤期缺血再灌注大鼠脑内水通道蛋白-4表达的影响

【目的】研究水通道蛋白－4（AQP4）在缺血／再灌注脑损伤大鼠脑内的表达,及高压氧（hyperbaric oxygen,HBO）对其表达的影响。【方法】将135只SD大鼠分为假手术对照组（Sham组）、缺血再灌注组（I／R组）和高压氧处理组（HBO组）,以四动脉阻断法建立全脑缺血再灌注大鼠模型。I／R组和HBO组按再灌注的时间不同分为四个亚组,每组15只,即动物缺血20min后分别再灌注6h、24h、3d和5d,HBO各亚组在再灌注后分别行不同次数的高压氧处理。测定脑组织含水量及伊文斯蓝含量,并采用免疫组织化学技术检测AQP4的表达。同时观察HB0对脑水肿和AQP4表达的影响。【结果]Sham组AQP4表达较低,在缺血损伤后表达升高,脑组织含水量及伊文斯蓝含量增加,给予HB0后AQP4的表达和脑组织含水量降低。【结论】缺血／再灌注脑损伤后AQP4表达上升,脑水肿明显,给予HB0可抑制AQP4的表达,减轻脑水肿。     

高压氧干预后局灶性脑缺血再灌注损伤模型大鼠c-fos的表达

背景：高压氧可增加氧弥散能力,从而改善脑水肿和脑组织缺氧,促进病灶区脑细胞的生理功能恢复、侧支循环的建立和脑细胞再生修复。 目的：观察高压氧对大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤后不同时间点c-fos癌基因表达的影响。 设计：随机分组动物实验。单位：解放军第四军医大学唐都医院急诊科、西安高新医院检验中心、解放军空军总医院、解放军第四军医大学航空航天医学系高压氧治疗中心。 材料：实验于2002-04在解放军第四军医大学航空航天医学系高压氧治疗中心完成,选用65只生后2个月健康雄性SD大鼠。 方法：随机摸球法将大鼠分为4组,模型组（n=20）：参照Koizumi等设计的方法,制备大鼠大脑中动脉缺血模型;正常对照组（n=5）：手术方式同模型组,但不阻断动脉血流;纯氧治疗组（n=20）：手术过程同模型组,动物缺血1h后抽出栓子,分别在插入栓子后2,9,21,45,69h将动物置于高压舱内,常压下吸100%纯氧。高压氧治疗组（n=20）：手术过程同模型组,动物缺血1h后抽出栓子,分别在插入栓子后2,9,21,45,69h将动物置于高压氧舱内,0.25MPa吸纯氧1h。主要观察指标：利用免疫组织化学和病理组织学法观察各组大鼠脑缺血再灌注5,12,24,72h脑皮质、视前区与纹状体中性白细胞浸润及c-fos癌基因蛋白及阳性细胞表达的变化;计算脑缺血再灌注72h皮质、纹状体内侧区与视前区神经元坏死程度、大鼠左侧半球脑血管渗漏面积。 结果：纳入大鼠65只均进入结果分析。①视前区c-fos阳性产物主要集中于中部。对侧皮质少见c-fos阳性反应,视前区有轻度表达,纹状体呈中等强度的反应。缺血12h,c-fos阳性产物在上述区域开始减弱,24h强度明显减弱!高压氧治疗组皮质和视前区较单纯缺血组c-fos阳性产物强度明显减弱!缺血再灌注12h,高压氧治疗组视前区、纹状体中性白细胞数明显低于模型组（P〈0.05）;缺血再灌注24h,脑皮质、视前区、纹状体中性白细胞低于模型组（P〈0.05）。②高压氧治疗组血管渗漏面积与单纯模型组相比明显缩小（P〈0.05）;缺血再灌注72h,高压氧治疗组视交叉平面皮质、纹状体内侧区与视前区神经细胞损伤数目较模型组明显减轻（P〈0.05）,假手术组未见神经元损伤。 结论：高压氧可明显缩小大鼠急性局灶性脑缺血再灌注损伤的血管渗漏面积,减轻神经系统症状,抑制中性白细胞浸润,抑制梗塞区c-fos癌基因表达,减少“半影区”神经元坏死。     

高压氧治疗对海马区急性脑缺血再灌注损伤的远期疗效

目的 探讨高压氧（hyperbaric oxygen,HBO)治疗对海马区急性脑缺血再灌注损伤的远期疗效。方法 沙土鼠脑缺血20min后再灌注，同时应用24．52kPa HBO治疗，连续3d，停止治疗2d后，应用TUNEL标记神经元凋亡，观察HBO治疗停止后神经元凋亡的变化。结果 24.52kPa HBO治疗停止2d后，海马神经元凋亡数比24．52kPa HBO治疗结束时显减少（P＜0．01），比单纯缺血再灌注5d组亦显减少（P＜0．01）。结论 24.52kPa HBO治疗急性脑缺血损伤具有良好的疗效，未见“反跳”现象。     

卡托普利对老年大鼠肾缺血/再灌注损伤的影响

目的 探讨卡托普利（CAP）对老年大鼠急性缺血／再灌注损伤的保护机制。方法 将60只老年大鼠（20-22月龄）随机等分为假手术组（A组）、缺血／再灌注组（B组）和CAP治疗组（C组，预先两周喂服卡托普利）。检测各组在急性缺血1h、再灌注1h及24h，肾组织匀浆中的超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量变化，并观察肾组织形态学改变。结果 与A组对比，B、C组中肾组织的SOD活性显著下降，MDA的含量明显增高。C组在再灌注期肾皮质中的MDA浓度明显低于B组（P〈0.01），SOD活性明显高于B组（P〈0．01）。B组电镜可见明显急性肾小管损伤和坏死，而C组肾小管损伤轻微。结论 老年大鼠缺血／再灌注损伤中，氧自由基参与了肾脏的损伤过程。卡托普利可以降低MDA含量，增加SOD活性．通过抑制氧自由基的产生．减轻脂盾过氧化反应．对肾脏有保护作用。     

高压氧对大鼠脑缺血后NOS阳性神经元的影响

目的　探讨一氧化氮合酶 (NOS)阳性细胞在大鼠急性局灶性脑缺血 /再灌注损伤和高压氧 (HBO)治疗后表达的变化。方法　应用血管内细丝栓堵大脑中动脉 (MCA)的局灶性脑缺血大鼠模型 ,利用黄递酶 -NADPH组织化学方法 ,观察MCA缺血 1h ,再灌注 4、11、2 3、71hNOS阳性细胞在视交叉平面梗死区皮层、视前区、纹状体外侧区和纹状体内侧区域分布的变化 ,在以上期间应用 0 2 5MPaHBO于开始缺血后 2、9、2 1、4 5和 6 9h分别治疗 1次 (1h)。结果　脑缺血后 ,在上述区域形态改变的NOS阳性细胞数随着再灌注时间的延长逐渐增多。HBO治疗后 ,各时间点在皮层、视前区和纹状体内侧区 ,形态改变的NOS阳性细胞数明显减少 (P <0 0 5 ) ,而纹状体外侧区无明显变化 (P >0 0 5 )。结论　HBO可明显抑制大鼠急性局灶性脑缺血 /再灌注损伤区NOS阳性细胞的变性     

中药脑复聪对缺血性痴呆小鼠脑内NMDA受体的影响

目的观察中药脑复聪对脑缺血小鼠学习记忆的影响 ,探讨其作用机理。方法采用脑缺血再灌注法建立痴呆小鼠模型。给予实验动物中药脑复聪灌胃 ,并以当归芍药散作对照 ,观察脑复聪对脑缺血再灌注小鼠学习记忆障碍的作用和对脑兴奋性氨基酸NMDA受体的影响。结果脑复聪治疗组动物的水迷宫潜伏期明显短于缺血模型组 (P <0 0 1) ,大脑皮层与海马NMDA受体基本接近正常组 ,但明显低于模型组 (P <0 0 1)。结论脑复聪对脑缺血小鼠学习记忆的改善作用与其抑制NMDA受体活性有关。     

肌苷对大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞巢蛋白表达的影响

背景肌苷参与机体多方面的代谢过程并对缺血性脑损伤有一定的保护作用,但其机制尚需做进一步研究.目的研究大鼠缺血性脑损伤后巢蛋白(Nestin)基因表达的变化规律,探讨肌苷治疗中枢神经缺血性损伤的作用机制.设计随机对照的基础研究.地点和材料实验地点青岛大学医学院脑血管病研究所和山东省脑血管病防治重点实验室完成.实验材料成年健康雌性SD大鼠68只,以线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型.随机分为治疗组和对照组,每组再随机分为缺血1.5 h再灌注2,6,12,24 h,2,3,7,14 d组(n=4),另外4只作假手术组.干预所有治疗均由作者亲自操作.治疗组大鼠于缺血1.5 h再灌注前给予空腹注射肌苷注射液100 mg/kg,2次/d.对照组大鼠同步注射相同剂量的生理盐水.所有大鼠置于同样的空间笼养.主要观察指标应用原位杂交技术检测脑缺血再灌注后脑组织NestinmRNA的表达.结果对照组缺血侧NestinmRNA表达皮质除2h以外、纹状体除2,6 h以外、室旁区除2,6 h,14 d以外各时间点均明显高于假手术组.治疗组NesfinmRNA表达较对照组于2,6 h,7,14d在皮质,14 d在纹状体有所降低,3 d在皮质、纹状体及室旁区均显著升高,7 d仅在纹状体、室旁区显著升高.结论肌苷可以促进大鼠脑缺血再灌注后Nestin mRNA的表达,从而达到神经组织结构和功能恢复的目的.     

肌苷对脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和细胞色素C基因表达的影响

背景细胞色素C(chromosome C,CytC)的释放是细胞凋亡的重要环节之一.肌苷对脑缺血损伤神经细胞凋亡可能具有一定的抑制作用,但其机制尚不十分清楚.目的研究肌苷对大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和CytC基因表达的影响.设计随机对照的实验研究.地点和材料本实验在青岛大学医学院脑血管病研究所和山东省脑血管病防治重点实验室完成.成年健康雌性SD大鼠68只,体质量230～280 g,清洁级,由中国科学院上海实验动物中心提供.干预应用线栓法建立大鼠大脑中动脉阻塞再灌注模型,随机分为治疗组(腹腔注射肌苷,100mg/kg)32只和对照组(腹腔注射生理盐水)32只,每组再随机分为缺血1.5 h再灌注2,6,12,24 h,2,3,7,14 d组(n=4),另外4只作假手术组.原位末端标记和原位杂交技术分别观察神经细胞凋亡和CytC mRNA表达.主要观察指标脑缺血再灌注后神经细胞凋亡和CytC mRNA表达.结果脑缺血再灌注后2 h皮质区与纹状体区即出现凋亡细胞并逐渐增加,分别于1 d和2 d达高峰,之后逐渐减少,至14 d接近于假手术组水平;经肌苷治疗后凋亡神经细胞减少,其中再灌注12 h～7 d较对照组有显著性差异.CytC mRNA于脑缺血再灌注2h开始表达,皮质区12 h达高峰,纹状体区1 d达高峰,以后逐渐下降;肌苷治疗组CytC mRNA表达于再灌注12 h～7 d在皮质区、12 h～14d在纹状体区较对照组显著降低.结论肌苷可能通过抑制细胞凋亡及相关基因表达而发挥其神经保护作用,对治疗脑血管病有潜在的应用价值.     

Hyperbaric oxygen therapy given 30 minutes after spinal cord ischemia attenuates selective motor neuron death in rabbits

OBJECTIVE: Spinal cord ischemia sometimes causes paraplegia because the spinal motor neuron cells are vulnerable to ischemia. Although various protective remedies for spinal cord injury have been reported, there have been few established clinical methods. Although hyperbaric oxygen (HBO) has been used clinically as a treatment for ischemia, the reason for its effectiveness is still uncertain because sufficient experimental data are lacking. DESIGN: Prospective, randomized, controlled study. SETTING: Experimental animal research laboratory in a university research center. SUBJECTS: Twenty-three Japanese white rabbits, weighing 2-3 kg. INTERVENTIONS: A modified rabbit spinal cord ischemia model of infrarenal aortic occlusion for 15 mins was employed. Rabbits were randomly assigned to four groups; the rabbits in group A did not undergo ischemic insults (n = 5). The rabbits in groups B and C underwent ischemic insult for 15 mins, followed by 1 hr of HBO treatment at 3 atm absolute with 100% oxygen at 30 mins (n = 6) or 6 hrs (n = 7) after reperfusion, respectively. The rabbits in group D underwent ischemic insult for 15 mins without HBO treatment (n = 5). MEASUREMENTS AND MAIN RESULTS: We observed neurologic functions for 14 days. The sections of the spinal cords were stained with hematoxylin and eosin, and the number of spinal motor neurons in ventral region was counted by light microscopy. All rabbits in groups A and B could stand, whereas all rabbits in groups C and D showed irreversible paraplegia on days 2 and 14 after reperfusion. Spinal motor neurons in ventral gray matter in groups C and D decreased significantly compared with those in groups A and B. CONCLUSIONS: HBO therapy shortly after ischemic insult had protective effects against ischemic spinal cord damage. However, delayed treatment with HBO did not change the prognosis.     

小鼠脑缺血再灌注损伤不同时间点基因表达谱的 变化研究

目的：通过生物信息学方法研究小鼠脑缺血再灌注损伤（CIRI）所致的损伤模型的基因表达谱变化,寻 找疾病相关的关键基因。方法：从Gene Expression Omnibus（GEO）中下载关于小鼠脑损伤GSE23160时间 序列基因表达谱芯片的原始数据,分析皮质脑组织样本和纹状体脑组织样本在缺血再灌注不同时间点基因 表达谱的差异,并对差异表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。再通过聚类分析挑取表达趋势明显的 差异基因进行免疫细胞浸润分析和关键基因分析。并在大鼠CIRI模型上对显著差异基因进行验证。结果： 免疫细胞浸润分析发现CIRI过程中出现肥大细胞和巨噬细胞浸润。CIRI过程中的差异基因主要参与愈伤 反应、炎性反应和信号转导通路等。在2个组织样本的不同再灌注时间点Timp1和Gpr84基因表达都发生 了显著上调。大鼠CIRI模型进一步验证了Timp1和Gpr84基因的上调表达。结论：Timp1和Gpr84基因可 能是脑缺血再灌注过程中的关键基因。     

脑缺血再灌注损伤后神经细胞巢蛋白和干细胞因子基因表达

目的研究大鼠脑缺血再灌注损伤后神经细胞巢蛋白(nestin)和干细胞因子(SCF)基因表达的变化。方法成年健康雌性SD大鼠36只，以线栓法建立大脑中动脉缺血再灌注模型，随机分为缺血1．5h再灌注2h、6h、12h、24h、2d、3d、7d、14d组和假手术组，每组4只。应用原位杂交技术检测脑缺血再灌注后脑组织nestin和SCF mRNA的表达。结果假手术组皮质、纹状体和室旁区nestin mRNA表达很弱。缺血再灌注后nestin mRNA表达，皮质除2h以外、纹状体除2h、6h以外、室旁区除2h、6h、14d以外各时间点均明显高于假手术组。假手术组皮质、纹状体和室旁区SCF表达很弱。缺血再灌注后SCF mRNA表达，皮质除2h、6h、12h以外、纹状体除2h、6h以外、室旁区除2h、14d以外各时间点均明显高于假手术组。结论脑缺血再灌注后SCF mRNA表达可能具有促进神经干细胞增殖作用。