脑益康对阿尔茨海默病大鼠tau蛋白过度磷酸化及其相关酶类表达的影响

目的探讨脑益康对阿尔茨海默病（AD）模型大鼠海马神经元tau蛋白过度磷酸化及其相关酶类表达的影响。方法采用β-淀粉样蛋白1-40（Aβ1-40）右侧海马注射制备AD大鼠模型,免疫组化法和Western blot法检测大鼠海马神经元tau蛋白在Ser404位点的磷酸化水平、蛋白磷酸酯酶2A（PP-2A）的表达情况,ELISA法检测糖原合酶激酶-3β（GSK-3β）蛋白的水平。结果AD模型组大鼠海马组织p-tau（Ser404）、GSK-3β表达增加,PP-2A表达减少,与假手术组的差异有高度统计学意义（P〈0.01）;脑益康治疗组大鼠的p-tau（Ser404）、GSK-3β表达显著减少,PP-2A表达显著增加,差异均有高度统计学意义（均P〈0.01）。结论脑益康可通过增加PP-2A的表达和抑制GSK-3β的表达减轻AD模型大鼠tau蛋白的过度磷酸化。     

阿尔茨海默病的非血浆铜蓝蛋白血清铜过量与MMSE、CSF β-淀粉样蛋白和h-tau水平相关

目的:评价阿尔茨海默病(AD)时血清铜水平是否与认知评分、β-淀粉样蛋白和CSF其他神经变性标记物相关。方法:检测28例A D患者和25例健康对照者血清中的铜、血浆铜蓝蛋白、总过氧化物和抗氧化物水平(TRA P)、血浆中的β-淀粉样蛋白及CSF中的铜、β-淀粉样蛋白、h-tau和P-tau水平     

CSF淀粉样蛋白β42和tau水平与AIDS痴呆综合征有关

AIDS痴呆综合征(AD C)可以并发阿尔茨海默病(AD)。因为AD的发病和风险与CSF的β淀粉样蛋白(1-42)(Aβ42)、总tau(t-tau)、磷酸化tau(p-tau)水平有关,因此对ADC、A D和对照者的上述指标进行检测。AD C患者CSF的Aβ42明显降低,而t-tau和p-tau的浓度升高,与A D患者相似,结果表明AD     

不同月龄APP/PS1双转基因AD小鼠海马神经元线粒体的动态变化

目的:检测不同月龄APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)模型小鼠海马神经元中线粒体自噬的动态变化,并探讨其意义.方法:选取20只雄性APP/PS1双转基因AD小鼠为研究对象,分为3月龄组、6月龄组、9月龄组和12月龄组,以C57小鼠为对照组.获取海马组织,通过电镜观察海马区神经元中线粒体的形态变化,用Western blot检测自噬相关蛋白LC3和P62的表达水平;线粒体自噬相关蛋白PINK1、Parkin和Miro1的表达水平;线粒体外膜蛋白Tom20的表达水平.结果:电镜观察结果显示:随着月龄增大,APP/PS1双转基因AD小鼠海马区神经元中线粒体损伤的病理变化呈逐渐加重的过程,即线粒体明显水肿、透明,嵴排列不规则,断裂,甚至消失.Western blot结果显示,与野生小鼠组比较,LC3、P62、PINK1和Parkin蛋白表达水平在6月龄组、9月龄组和12月龄组小鼠中明显增高(P＜0.05),而Miro1蛋白却明显降低(P＜0.05),Tom20的表达水平无明显差异(P＞0.05).结论:随着APP/PS1双转基因AD小鼠月龄的增加,其海马区神经元线粒体病理改变呈动态,线粒体自噬呈动态增强但伴随线粒体清除障碍.     

Aβ_(25～35)诱导大鼠AD模型及HSP_(70)的表达

目的 :探讨 β 淀粉样蛋白 (β amyloid ,Aβ2 5～ 3 5毒性作用能否诱导大鼠AD模型 ,以及热休克蛋白 70(heatshockproteins ,HSP70 )在海马神经元损伤中的表达。方法 :将 4 8只大鼠 ,随机分为 3组 (每组 16只 ) :AD模型组、溶媒体组、假手术组 ,前两组在双侧海马分别注射 2 μ1(10 μg2 )Aβ2 5～ 3 5、2 μl生理盐水 ,假手术组不注射任何溶液 ;于手术后 1、7、14及 2 1d采用免疫组织化学、积分光密度分析等手段对各组大鼠脑HSP70 的表达进行研究。结果 :AD模型组手术 7d后大鼠记忆明显减退 (P <0 .0 5 ) ,且HSP70 在海马神经元内表达ld时最高 ,7d锐减 ,14d和2 1d则逐渐减少。结论 :Aβ2 5～ 3 5可诱导大鼠AD模型 ,并对热休克蛋白 70在海马神经元损伤中的表达产生显著影响 ,HSP70 的表达是阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease ,AD)大鼠脑内神经元存活的重要标志。     

天麻素对阿尔茨海默病小鼠的脑内氧化应激及tau蛋白磷酸化的影响

目的研究天麻素对AD模型小鼠脑内氧化应激及tau蛋白磷酸化水平的影响。方法实验分为正常对照组、AD模型组(tau转基因小鼠)和天麻素治疗组,治疗组小鼠选取tau转基因小鼠,隔日给予天麻素[5 mg/(kg·d)]灌胃处理3个月,对照组和模型组小鼠(tau转基因小鼠)则均给予生理盐水灌胃处理。通过分子生物学及形态学相关技术检测各组小鼠脑内p-tau202磷酸化水平及CHAT的表达;并考察氧化应激相关指标的变化。结果 Western blot及免疫荧光结果显示,模型组小鼠脑内p-tau202的表达高于对照组小鼠,而天麻素治疗组小鼠脑内p-tau202的表达水平较模型组小鼠降低;氧化应激结果显示,天麻素干预处理后,小鼠脑内的MDA含量降低,SOD活性明显升高;Western blot结果显示,与模型组小鼠相比较,天麻素治疗组小鼠脑内CHAT表达水平降低。结论天麻素能够通过减少氧化应激进而降低AD模型小鼠脑内tau蛋白的磷酸化水平,最终起到对神经元的保护作用。     

MTH2蛋白与8-氧鸟嘌呤脱氧核苷在阿尔茨海默病患者海马组织中的表达变化

目的:观察8-氧鸟嘌呤脱氧核苷三磷酸酶同源蛋白2(MTH2)及8-氧鸟嘌呤脱氧核苷(8-oxodG)在阿尔茨海默病(AD)患者海马组织标本中的表达变化,探讨在AD患者海马中二者表达的相关性.方法:选用临床及病理均诊断为AD的尸检海马组织石蜡切片作为实验组,年龄匹配且临床及病理诊断均排除AD的尸检海马组织石蜡切片作为对照组,每组各3例,用免疫组化的方法分别检测人脑海马中8-oxo-dG的含量及MTH2蛋白的表达.结果:免疫组化定量结果显示,在人脑海马组织CAl及CA3区.AD患者8-oxo-dC的表达显著高于年龄匹配对照组,而AD患者MTH2的表达显著低于年龄匹配的对照组.结论:在人脑海马组织中,DNA氧化产物8-oxo-dc含量在AD患者比年龄匹配对照组有显著提高,抗氧化修复蛋白MTH2的表达量却显著降低,提示人脑海马组织中MTH2蛋白表达量的减少及8-oxo-dG含量的增加与AD的发病过程相关.     

胰岛素对阿尔茨海默病患者血浆β-淀粉样蛋白的差异调节

背景:高胰岛素血症和胰岛素抵抗是记忆功能损害和阿尔茨海默病(AD)的危险因素。胰岛素调节体外神经元培养和正常老年人CSF内的β-淀粉样蛋白(Aβ)水平。目的:确定胰岛素是否影响血浆Aβ水平及其对AD患者和正常老年人的影响效应是否不同。方法:59例AD患者和50例健康老年受试者各     

针刺对AD大鼠海马CA1区内质网应激及凋亡的影响

目的:探讨针刺对阿尔茨海默病(AD)大鼠海马神经元内质网应激及凋亡的影响。方法:36只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、假手术组和针刺组,模型组和针刺组通过双侧海马CA1区注射Aβ_(1-42)建立AD模型,假手术组以等体积的无菌双氧水注射,空白组不做处置。针刺组于造模后2 d起给予针刺干预,空白组、模型组和假手术组不予针刺仅背侧位捆绑固定,1次/d,连续治疗14 d。疗程结束后通过HE染色观察大鼠海马CA1区神经元形态,Tunel法检测海马CA1区神经元凋亡水平,免疫组化法检测海马CA1区Aβ_(1-42)、GRP78蛋白的表达,Western blot法检测海马CA1区GRP78、Caspase-12蛋白的水平。结果:与空白组大鼠相比,模型组大鼠海马CA1区神经元细胞明显减少,凋亡水平、Aβ_(1-42)、GRP78和Caspase-12蛋白表达水平明显增高,差异具有统计学义(P<0.01)。与模型组相比,针刺组大鼠海马CA1区神经元形态较模型组明显改善,细胞数量明显增多,凋亡水平、Aβ_(1-42)、GRP78和Caspase-12蛋白的表达明显降低,差异具有统计学义(P<0.01)。结论:针刺治疗能够通过抑制内质网应激和细胞凋水平,进而改善海马CA1区神经元形态和抑制Aβ_(1-42)的堆积。     

额颞叶变性的CSF生物学标记物:临床特征、载脂蛋白E基因型和神经影像学的关系

为了更好地理解额颞叶变性(FTLD)患者脑脊液(CSF)中tau蛋白和淀粉样蛋白β1-42(Aβ42)的变化,本研究对31例FTLD患者(包括16例额叶变性和15例颞叶变性患者)的上述2种生物学标记物与临床参数、神经影像特征及载脂蛋白E(A poE)基因型的关系进行研究。CSF中的tau蛋白在颞叶变性为主的FTLD中含量最高。在额叶变性亚组中,CSF中的tau蛋白水平受ApoE e3等位基因数量所影响。在颞叶变性亚组中,CSF中的tau蛋白水平由CSF中的Aβ42水平、年龄、病程和疾病严重程度共同决定,萎缩程度与神经影像的不对称不相关,CSF中Aβ42的变异性尚不清楚…     

电针调控p38MAPK通路降低AD大鼠海马磷酸化tau蛋白表达的研究

目的 通过测定海马内磷酸化p38MAPK和tau蛋白的表达,探讨针灸治疗阿尔茨海默病模型大鼠的作用机理。方法 实验动物采用海马内注射Aβ_1-40复制AD动物造模,分为正常组、假手术组、模型组和电针组。电针组取百会穴和双侧肾俞进行电针治疗。Morris水迷宫检测各组大鼠记忆能力,免疫组化、Western blot检测大鼠海马内p-p38MAPK和p-tau Thr181蛋白表达情况。结果 电针组大鼠学习记忆能力显著提高,有统计学意义（P<0.05）;模型组大鼠海马内p-p38MAPK和p-tau Thr181蛋白表达明显高于正常组,经电针治疗后表达显著减少,均有统计学意义（P<0.05）。结论 针灸治疗可调控p38MAPK通路,降低AD大鼠海马p-tau蛋白表达,改善学习记忆能力。      

ALS时脑脊液中轴突损伤标记物水平升高

目的:检测轴突变性的生物学标记物是否与临床亚型相关,是否可被用于预测ALS的进展。方法:ALS患者(n=69)、阿尔茨海默病(AD,n=73)患者和年龄相匹配的对照者(n=33)纳入本项前瞻性的研究。采用ELISA法检测CSF中tau蛋白和神经微丝(NfH SMI35)水平。获得49例ALS患者的随访资料(中位随访7个月)。结果:ALS患者CSF中的NfH SMI35水平(1.7μg/L)较对照者(0.3μg/L,P<0.001)高5倍,较AD患者(0.14μg/L,P<0.001)高10倍。上运动神经元型ALS患者的NfH SMI35值较典型ALS(上运动神经元+下运动神经元)患者高(P=0.02)。病情进展更快ALS…     

新生大鼠HIBD后海马p-Tau蛋白与脑神经元凋亡表达变化

目的:观察微管相关蛋白磷酸Tau( p-tau)在缺氧缺血性脑损伤( HIBD)新生大鼠脑组织中的表达变化. 方法:将80只7日龄SD清洁级大鼠随机分为假手术组40 只和HIBD组(均按处死时间点分为3、6、12、24、48 小时5 个亚组)40只. 参照Rice法建立HIBD动物模型,假手术组仅暴露左颈总动脉,不作缺氧处理,2 组均于HIBD手术结束后3、6、12、24、48小时5个时间点断头取脑. 并分别取其脑组织切片,采用免疫组化S-P法检测其脑室周围白质区 p-tau 的表达,末端脱氧核苷酸转移酶缺口标志 ( TUNEL) 法检测其神经细胞凋亡. 结果:假手术组海马区有部分 p-tau蛋白表达及少量凋亡细胞, 各时间点无明显变化. HIBD组 p-tau的表达在3 小时后开始增加,12 小时达表达高峰后即开始呈下降趋势,与假手术组比较差异均有统计学意义 (F=95.67,p=0.000 <0.05) ;细胞凋亡在处理后3 小时即开始增加,至24小时小时达表达高峰,与假手术组比较差异均有统计学意义(F=18.829,p=0.001 <0.05). 结论:HIBD可造成新生大鼠海马区p-tau蛋白及神经元凋亡表达增加.     

巨细胞病毒宫内感染对子代豚鼠海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响

目的:研究巨细胞病毒(CMV)宫内感染对子代豚鼠海马神经元Tau蛋白磷酸化的影响。方法:建立豚鼠CMV宫内感染动物模型,PCR法筛选CMV DNA阴性豚鼠,雌雄同笼受孕;孕龄1-20d时,随机分成两组:感染组腹腔内接种CMV病毒悬液,对照组接种生理盐水,足月分娩的子代豚鼠喂养至3月龄后无菌采集脑组织,应用免疫组织化学法和免疫印迹法检测各组子代豚鼠海马神经元Tau、p-Tau(Ser 404)、PKA及PP2A蛋白表达水平。结果:与对照组相比,感染组子代豚鼠海马神经元Tau、p-Tau(Ser 404)及PKA蛋白的表达水平明显上升,而PP2A蛋白的表达水平明显下降,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:CMV宫内感染导致子代豚鼠海马神经元Tau蛋白磷酸化水平增加,可能与PKA及PP2A蛋白的表达异常相关。     

“嗅三针”对AD小鼠海马iNOS和磷酸化tau蛋白表达的影响

目的观察嗅三针对阿尔茨海默病(AD)小鼠海马i NOS和磷酸化tau蛋白表达的影响,探讨其治疗AD的作用机制。方法将40只AD小鼠随机分为模型组、嗅三针组、嗅神经切断嗅三针组和盐酸多奈哌齐组,10只同窝阴性小鼠组成对照组。对照组和模型组于每日同一时段进行同种程度抓取,不干预,嗅三针组采用电针刺激,选取"印堂"和双侧"迎香"三穴为干预穴位,留针20min,盐酸多奈哌齐组采用盐酸多奈哌齐灌胃,每周干预5次,间歇2天,共干预4周。干预结束后,运用Western blot法检测小鼠海马p-tau Thr181蛋白表达,运用免疫组化法检测小鼠海马i NOS蛋白表达。结果模型组与对照组比较,小鼠海马p-tau Thr181和i NOS蛋白表达显著增加(P 0. 01);与模型组比较,嗅三针电刺激和盐酸多奈哌齐灌胃能够显著降低小鼠海马p-tau Thr181和i NOS蛋白表达(P 0. 05),嗅神经切断嗅三针组对其无明显影响(P 0. 05);嗅三针组与盐酸多奈哌齐组比较,无显著性差异(P 0. 05)。结论嗅三针可能基于嗅觉通路的完整性,发挥降低AD小鼠海马炎症因子i NOS和磷酸化tau蛋白的表达的作用。     

海马注射Aβ_(1～40)诱导大鼠记忆减退及其脑内细胞周期蛋白A的异常表达

目的 :探讨 β -淀粉样蛋白 (β -amyloid ,Aβ1～ 40 )毒性作用能否导致成年大鼠脑内神经元表达细胞周期相关蛋白 ,以及细胞周期相关蛋白表达与神经损伤及记忆减退之间的关系。方法 :运用行为学测试、免疫组化、积分光密度分析等手段对Aβ1～ 40 多肽片段双侧海马注射的大鼠脑进行研究。结果 :Aβ1～ 40 注射 7d后大鼠记忆明显减退 (P <0 .0 5 ) ,且大鼠脑内细胞周期蛋白A(cyclinA)在神经元异常表达 ,但术后 2 1d时cyclinA的表达有所降低。结论 :Aβ1～ 40 可导致成年大鼠脑神经元表达细胞周期相关蛋白 ,大鼠脑内神经元细胞周期相关蛋白的异常表达与阿尔茨海默病 (Alzheimer’sdisease,AD)相关病理改变存在关联     

火绒草对2型糖尿病大鼠海马神经元tau蛋白磷酸化及学习记忆的影响

目的观察火绒草水提取物对2型糖尿病(T2DM)大鼠海马区神经元tau蛋白过度磷酸化水平和学习记忆的影响。方法采用高糖高脂饮食诱导联合链脲佐菌素(STZ)腹腔注射建立T2DM大鼠模型。将健康Wistar雄性大鼠30只,随机均分为对照组、T2DM组和火绒草组。水迷宫实验检测大鼠学习记忆功能;免疫组化法检测海马CA1,CA3,DG区神经元磷酸化tau蛋白p-tau(ser396)表达水平。结果与对照组比较,T2DM组水迷宫逃避潜伏期延长(P<0.01),跨过原平台位置次数减少(P<0.01);免疫组织化学检测海马CA1,CA3,DG区神经元胞浆内ser396表达水平显著上调。与T2DM组比较,火绒草组水迷宫逃避潜伏期缩短(P<0.05),跨过原平台位置次数增多(P<0.05);海马区神经元ser396表达水平下降。结论火绒草能减少海马区神经元过度磷酸化tau蛋白的表达,改善学习记忆功能。     

AD7C-NTP在老年痴呆患者及不同种属动物脑内的存在和意义

目的研究Alzheimer相关的神经丝蛋白(Alzheimer-associated neuronal thread protein,AD7C-NTP)在老年痴呆(Alzheimer’s disease,AD)患者脑内、猪脑和小鼠脑内的表达,初步确定一种AD7C-NTP蛋白含量丰富的组织来源。方法采用免疫组织化学染色方法观察猪脑、小鼠脑内AD7C-NTP的分布,采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和蛋白印迹(Western blot)的方法检测AD患者脑内、猪脑、小鼠脑内AD7C-NTP的表达水平。结果免疫组化结果显示,猪大脑皮质、小鼠海马内有AD7C-NTP免疫反应阳性神经元分布;Western blot的结果显示,以AD7C-NTP C端抗体作为检测抗体时,AD患者脑和猪脑内可见相对分子质量为41000bp的免疫反应阳性条带,小鼠脑内未见免疫反应阳性条带。结论AD患者脑内、猪脑内存在AD7C-NTP,可作为提取AD7C-NTP蛋白纯品的来源之一,为研制AD7C-NTP诊断试剂盒提供实验材料。     

雷公藤内酯对海人酸致痫大鼠神经元caspase3和caspase9蛋白表达的影响

目的 :通过检测海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达,探讨雷公藤内酯抑制神经元凋亡的机制。方法 :结晶紫染色观察海马神经元形态,免疫组化法检测海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达水平。结果 :结晶紫染色结果显示,海人酸组中,海马神经元变性或丢失,胞体皱缩,形态不规则。雷公藤内酯干预组中海马神经元的数量和形态与对照组相似,胞浆清晰淡染,核仁清楚。免疫组化染色显示,与对照组比较,海人酸组海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达水平显著增高(P<0.05);与海人酸组相比,雷公藤内酯干预组神经元caspase3和caspase9蛋白表达水平显著减少(P<0.05)。结论 :雷公藤内酯可下调海人酸致痫大鼠海马神经元caspase3和caspase9蛋白表达,从而抑制神经元凋亡。     

成年人单纯疱疹病毒性脑炎后临床复发的发病率和发病机制

目的:研究单纯疱疹病毒性脑炎(H SE)的复发率,并寻找脑脊液(CSF)中的可溶性活性标记物是否可提示直接的病毒感染或免疫介导事件。方法:对32例连续的H SE存活者进行随访,以确定H SE的临床复发率。4例有神经功能恶化的患者被认为是复发型H SE,4例非复发型H SE患者作为相匹配的对照组。从8例H SE患者中提取59个配对的CSF和血清样本,分别分析其中的可溶性活性标记物,主要是细胞因子和介质(干扰素γ、可溶性CD8、肿瘤坏死因子α和白介素10),H SV-DNA及胶质细胞和神经元破坏性标记物(神经丝蛋白、胶质纤维酸性蛋白、S-100β及神经元…