病毒性造血祖细胞损伤的实验研究进展

临床研究已表明许多病毒感染可引起骨髓造血功能衰竭,其作用机制尚不明。近年随着造血祖细胞体外培养体系的建立与完善,为研究病毒对造血祖细胞的影响提供了重要的实验室依据,本文概括介绍近年研究的新进展。一、人巨细胞病毒(ｈｕｍａｎｃｙｔｏｍｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ,ＨＣＭＶ)ＨＣＭＶ是一种在人群中广泛存在的感染因子,在正常人群中ＨＣＭＶ感染可超过50%,是引起小儿各种畸形和病残的主要原因之一[1]。近年又发现ＨＣＭＶ感染还可导致患儿严重的造血功能紊乱,主要表现为:异常淋巴细胞增多、肝脾肿大、血小板减少、粒细胞减少及贫血等[2…     

造血祖细胞集落染色体的研究进展

随着造血祖细胞培养技术的发展与完善，近年一些学者进一步研究造血祖细胞集落染色体，以揭示某些血液病及病毒与骨髓衰竭的发病机理。本文就造血祖细胞集落染色体制备及其应用的情况进行综述。一、造血祖细胞集落染色体的制备７０年代初Ｐｉｋｅ和Ｒｏｂｉｎｓｏｎ开始体...     

脐血造血干/祖细胞移植研究进展

人类脐血富含造血干/祖细胞,作为骨髓和外周血以外的一种重要造血干细胞来源日益受到重视.脐血造血干/祖细胞移植用于临床已有十余年历史,本文就脐血在采集、纯化、保存、体外扩增、临床应用的研究现状及进展作一介绍.     

造血干/祖细胞的受训后免疫机制研究进展

天然免疫细胞(如单核/巨噬细胞)能够针对相同或无关病原体再刺激产生增强或减弱的免疫反应,这种现象被定义为受训后免疫(trained immunity,TI)。TI虽不像适应性免疫那样具有长期的记忆性,但可持续数周或数月。鉴于天然免疫细胞的短寿性,如何维持TI的长期性记忆是当前免疫学研究的前沿。由于造血干/祖细胞(hematopoietic stem/progenitor cells,HSPC)能向髓系祖细胞分化并不断产生天然免疫细胞,故认为HSPC可能也存在受训现象。目前,对这一新观点的机制研究还较少,但深入探究该科学问题将为免疫调控机制及人类疾病发病机理研究提供新的见解。最新证据表明,类似单核/巨噬细胞,HSPC也存在TI现象,其机制涉及表观遗传学和代谢重编程等,本文就此进行综述。     

腺相关病毒载体介导造血干/祖细胞的基因转导

造血干细胞 (HSCs)具有自我更新、分化和增殖的独特特性，并可用自体移植法移植给病人,这使其成为基因治疗中引人注目的靶点。到目前为止尚未发现腺相关病毒（AAV）载体与任何恶性疾病有明确的关系。在利用造血干细胞的基因治疗中，AAV载体受到人们的广泛关注。既往的AAV转导HSCs的研究结果不完全一致,现将该方面的研究进展作一概述。     

脐血造血干/祖细胞移植SCID小鼠的实验研究

目的 :检测扩增后脐血造血干 祖细胞的体内移植能力和造血活性 ,建立脐血细胞体外扩增优化方案和体内移植的SCID小鼠模型。方法 :采用无基质接触的液体悬浮培养方法扩增脐血CD34 细胞 ,将扩增前后的细胞移植给预先经过亚致死量辐照的SCID小鼠 ,4w后通过免疫荧光标记、PCR等检测存活小鼠体内的人源细胞。结果 :连续培养一定时间后 ,FL TPO SCF IL 6组脐血细胞得到持续扩增 ,并能维持一定比例的CD34 细胞 ;SCF IL 3 IL 6 GM CSF EPO组在第 2周时集落形成数已降低 ,第 4周时集落形成的细胞、CD34 细胞已基本检测不到。移植至少 4w后 ,在存活小鼠体内检测到人CD4 5 细胞和Alu基因。结论 :因子组合FL TPO CSF IL 6可以有效扩增脐血CD34 细胞 ,而且扩增后的细胞具有较高的移植效率和造血活性     

软骨干/祖细胞修复软骨损伤的研究进展

关节软骨损伤是临床常见的运动损伤,然而关节软骨缺乏血管、神经支配,损伤后难以自身完全再生修复,缺乏有效的治疗会导致骨关节炎(OA)的发生。随着组织工程学的发展,近期研究发现,软骨组织中存在具有多向分化潜能的软骨干/祖细胞(CSPC),可以分化成高度同质化的软骨细胞。这种细胞在软骨损伤后自发迁移并参与软骨损伤组织修复和再生,有望成为治疗软骨损伤的新方法。本文对CSPC的分布、特征及其在软骨损伤和OA中的作用和应用进行综述,旨在为CSPC的研究应用及软骨损伤的治疗提供理论基础,为临床上治疗软骨损伤开拓新方向。     

微重力影响造血干/祖细胞生物学特性及其机制研究进展

造血干/祖细胞具有自我更新、增殖及多向分化的功能,从而使机体维持正常的造血.机体在微重力环境下会出现外周血细胞数量和功能的改变,其中有多方面的原因,而在微重力环境下造血干/祖细胞生物学特性的改变是这一改变的主要因素.对微重力如何影响造血干/祖细胞的迁移、增殖及分化等生物学特性进行了综合评述.     

脐带血造血干祖细胞移植的基础

1 什么是造血干祖细胞最佳的移植物造血干祖细胞移植(HSPCT)用于治疗造血干祖细胞缺陷性血液病、先天性免疫缺损、先天性贫血、各类自身免疫病等,也用于实体瘤的治疗,是一种重要的生物治疗或细胞治疗。实际上,不论来自骨髓、脐带血或动员的外周血,移植物中含的不仅是造血干细胞,还包括更多的早期造血祖细胞,所谓“造血干细胞移植(HSCT)”实际上是造血干祖细胞移植(HSPCT)。这是当前对“造血干细胞移植”含义崭新的理解。CD34 细胞中90%以上是早期和晚期祖细胞,干细胞只是很小一部分。永久重建造血所需要的造血干细胞为数很少…     

造血干祖细胞移植的生物学基础

一、什么是造血干祖细胞最佳的移植物造血干祖细胞移植 (ＨＳＰＣＴ)用于治疗造血干祖细胞缺陷性血液病、先天性免疫缺损、先天性贫血、各类自身免疫病等 ,也用于实体瘤的治疗 ,是一种重要的生物治疗或细胞治疗。实际上 ,不论来自骨髓、脐带血或动员的外周血 ,移植物中含的不仅是造血干细胞 ,还包括更多的早期造血祖细胞 ,所谓“造血干细胞移植 (ＨＳＣＴ)”实际上是造血干祖细胞移植 (ＨＳＰＣＴ)。这是当前对“造血干细胞移植”含义崭新的理解。ＣＤ34 细胞中 90 %以上是早期和晚期祖细胞 ,干细胞只是很小一部分。ＣＤ 34 细胞移植更应该…     

儿童造血系统疾病与细小病毒B19感染及实验诊断的研究进展

人类细小病毒B19（PVB19）是目前唯一认知的具有独立复制能力的存在于人类体液中的病毒，是引起造血系统疾病和造血危象的病原体之一。已知它可引起再障危象、慢性纯红再生障碍性贫血、血小板减少性紫癜和免疫损害或缺陷者的慢性贫血等多种儿童血液系统疾病。本文对B19病毒的生物学特性、血液病的临床表现、实验室诊断技术的研究进展做一综述     

微重力对造血干／祖细胞生物学特性的影响

随着空间技术的发展，人们开始关注空间飞行给生物体带来的影响。在空间环境下机体会发生一系列的改变，如外周血中红细胞形态发生改变以及数量的减少，淋巴细胞数量减少及功能受到抑制，粒细胞和单核细胞的增加；体液容量的减少及分布改变，肌肉萎缩和骨质疏松，以及激素分泌失调等。     

元参组方对粒系造血祖细胞的增殖作用

目的研究中药方剂对急性骨髓型放射病的治疗效果和对造血系统的作用及其作用机理。方法选用元参等11种中药组成元参组方,小鼠一次皮下注射后,观察不同时间外周血细胞、胸腺重量、骨髓有核细胞、粒系造血祖细胞、胸腺细胞与骨髓细胞混合培养后粒系造血祖细胞的变化。结果元参组方早期加速粒细胞的成熟和释放,第6天约为注射前的1．5倍。给药8d后,试验组胸腺重量、骨髓有核细胞、脾指数分别为（85．9±5．6）mg、（8．9±1．3）×10^6／每根股骨、1．42,对照组胸腺重量、骨髓有核细胞、脾指数分别为（74．2±6．2）mg、（6．8±0．5）×10^6／每根股骨、1．0,试验组明显高于对照组。试验组小鼠胸腺细胞与对照组小鼠骨髓细胞按20：1混合培养,骨髓CFU-G约为加入未注射元参组方的小鼠胸腺细胞的1．5倍。未注射元参组方则未见有放大作用。结论元参组方对外周血白细胞、骨髓有核细胞、胸腺重量和粒系造血祖细胞有明显的升高作用,激活胸腺细胞对粒系造血祖细胞的增殖有明显的放大作用。这种放大作用通过元参组方激活胸腺细胞实现。     

过氧亚硝基阴离子对实验小鼠骨髓源内皮祖细胞的损伤作用

目的:观察过氧亚硝基阴离子(ONOO-)对实验小鼠骨髓源内皮祖细胞(EPCs)的体外损伤作用。方法:无菌抽取4周龄雄性C57小鼠骨髓,密度梯度离心法分离获取单个核细胞,EGM-2培养基诱导培养EPCs。用免疫荧光染色法进行EPCs表面标志物检测和功能试验鉴定EPCs,培养2～3代后用于实验。通过不同浓度的3-吗啉斯德酮亚胺(SIN-1,CONOO- 供体)作用于EPCs 24h,确定SIN-1的有效作用剂量。将EPCs分为空白对照组、SIN-1组和FeTMPyP(ONOO- 清除剂)干预组,分别用MTT法检测各组EPCs存活率,TUNEL法检测EPCs凋亡,免疫荧光染色法检测细胞内ONOO- 生成印记——3-硝基酪氨酸(NT)表达情况。结果:上述培养细胞表面标记物和功能试验均阳性,是EPCs。800μM SIN-1刺激24h后EPCs存活率较空白对照组明显下降(P<0.05),10μM FeTMPyP干预能抑制这种作用。SIN-1刺激后EPCs凋亡率较空白对照组明显增加(P<0.05),FeTMPyP干预能抑制SIN-1诱导的EPCs凋亡。SIN-1刺激EPCs后细胞内NT表达较空白对照组明显增加(P<0.05),FeTMPyP干预能减少NT的表达。结论:SIN-1能够介导硝化应激,诱导EPCs凋亡,造成EPCs损伤,FeTMPyP干预能抑制SIN-1的上述作用。     

微小病毒B19与造血危象的研究进展

微小病毒Ｂ１９（ＰＶＢ１９）是目前唯一认知的具有独立复制能力的存在于人类体液中的病毒，是引起造血危象的病原体之一，该病毒易引起原有慢性贫血患者发生造血危象，也可引起正常健康者发生造血危象。红细胞Ｐ抗原是ＰＶＢ１９的细胞受体，前红造血细胞是ＰＶＢ１９复制的主要场所，但不是唯一的靶细胞，其它造血系统也可受累，ＰＶＢ１９感染诊断依赖于病毒抗原，抗体和核酸的检测。ＰＶＢ１９引起的造血危象是可治的。     

骨髓基质细胞层对红系造血祖细胞扩增的影响

造血干细胞是一切血细胞的最原始细胞。通过体外纯化、扩增来获得大量的、纯度较高的、增殖能力强的造血干细胞,并使之向某一方向定向分化,已日渐成为目前骨髓移植中,造血干细胞来源所面临的关键问题之一。本实验采用提前在体外培养兔骨髓基质细胞层的基础上,建立了一种适于造血干细胞增殖、分化的微环境,即依靠细胞与细胞的相互作用,或通过骨髓基质细胞产生的细胞因子维持造血干细胞的增殖和分化。在骨髓基质细胞层上,即使在没有任何细胞因子的情况下,造血干细胞亦可存活较长时间。为进一步观察骨髓基质细胞层对红系造血祖细胞增殖、分化中…     

脐血清对培养人造血祖细胞集落生长的影响

目的：研究脐血清对培养人造血祖细胞集落生长的影响。方法：采用半固体细胞培养法。结果：在正常足月胎儿脐血清中有较高粒细胞集落刺激因子（Ｇ－ＣＳＦ）和粒－巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ）活性，单用脐血清作刺激因子来源，在体外进行粒系造血祖细胞培养，可产生１４８１±８８７个粒系集落（ＣＦＵ－Ｇ），而植物血凝素刺激的单个核细胞条件培养液为５９０±２８８个ＣＦＵ－Ｇ，差别非常显著（Ｐ＜０００１）。脐血清组与３０ｎｇｒｈＧ－ＣＳＦ组所产生１５２０±３４５个ＣＦＵ－Ｇ相比，差别无显著（Ｐ＞００５）。并且我们还观察到脐血清组培养随时间延长有较多粒－巨噬细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）生长，有些可出现混合爆式集落。结论：脐血清富含多种造血生长因子，并且Ｇ－ＣＳＦ水平较高     

造血干/祖细胞与肿瘤的关系

新近研究发现，骨髓衍生的造血干/祖细胞（bone marrow-derived hematopoietic stem/ progenitor cells）可以不断植入肿瘤，参与肿瘤间质和血管生成;持续存在的炎症环境提供了潜在的致癌性条件，使骨髓衍生干细胞可能成为恶性肿瘤起源细胞。VEGFR1+造血祖细胞(vascular endothelial growth factor receptor 1 positive hematopoietic progenitor cell, VEGFR1+ HPC)在肿瘤转移中可能具有决定性作用，肿瘤细胞先突破原发病灶，进入血流，然后停留在另一个预转移场所，在这个场所中，肿瘤细胞先建立造血干祖细胞簇后生长成瘤。     

造血祖细胞基因转染在造血细胞体外扩增中的应用

如何有效地扩增早期造血祖细胞而避免其过度分化,是造血细胞体外扩增领域中急待解决的问题之一。应用基因转染技术促进早期造血祖细胞体外扩增是一种新方法,该方面的研究已日益受到重视。