获得性大疱性表皮松解症基底膜自身抗体靶抗原的定位研究

目的 探讨获得性大疱性表皮松解症(EBA)基底膜带自身抗体(BMZ—Ab)的靶抗原及其定位情况。方法 用免疫印迹(IB)、盐裂皮肤间接免疫荧光(IIF)、间接免疫电镜(IIEM)等方法检测6例EBA血清中。IgG型及IgA型BMZ—Ab识别的真表皮抗原以及抗原定位情况。结果 6例EBA血清中IgG型BMZ—Ab均结合真皮提取物中290ku蛋白，3例同时伴有结合290ku蛋白的IgA型BMZ—Ab。盐裂皮肤IIF显示BMZ真皮侧IgG线状沉积，IIEM示金颗粒沉积于BMZ致密下层，即真皮锚原纤维的Ⅶ型胶原处。结论 位于BMZ致密下层的Ⅶ型胶原是EBA中BMZ-Ab的特异性靶抗原，Ⅶ型胶原上的抗原表位可被EBA血清中IgG及IgA型BMZ—Ab识别。     

盐裂皮肤免疫荧光技术诊断大疱性类天疱疮的研究

目的:探讨盐裂皮肤直接免疫荧光技术(DIF)和间接免疫荧光技术(IIF)诊断大疱性类天疱疮(BP)的敏感性。方法:取13例BP患者皮损周围皮肤做盐裂皮肤DIF检测,取其血清做盐裂皮肤IIF检测。结果:盐裂皮肤DIF检测BP阳性率为92.3%(12/13),盐裂皮肤IIF检测BP阳性率为76.9%(10/13),两种方法诊断BP的阳性率比较差异无统计学意义(P0.05)。两种方法显示免疫复合物沉积的部位基本一致,位于基底膜带的表皮侧。结论:盐裂皮肤DIF检测和IIF检测均可对BP进行诊断,盐裂皮肤IIF检测可对鉴别诊断起到补充作用。     

伴抗-p200类天疱疮自身抗体及剥脱性食管炎的获得性大疱性表皮松解症1例

背景:已报道证实一些表皮下疱病患者自身抗体与2种以上抗原相关。观察:1位52岁的日本女性表现为全身泛发的瘙痒性大疱以及口腔、食管内糜烂。组织学检查示表皮下大疱。直接免疫荧光(IF)检测示IgG、IgM和C3在表皮基底膜带(BM Z)呈线状沉积。用1M的NaCl做盐裂皮肤间接免疫荧光检测示IgG沉积于真皮侧。用正常人真皮提取物行免疫印迹检测到位于200-kDa和290-kDa的带。用隐性营养不良性大疱性表皮松解患者皮肤基底层作间接免疫荧光未显示任何抗-BM Z抗体的活性。结论:作者认为此病例是伴抗-p200类天疱疮抗体的获得性大疱性表皮松解症。此…     

获得性大疱性表皮松解症及线性IgA大疱病混和性大疱病1例

1例75岁日本男性患者因四肢大疱性皮损于我院就诊。体格检查发现手、足和小腿均有大疱,口腔黏膜受累。组织学检查示,表皮下疱、真皮内炎细胞浸润。直接免疫荧光检查示基底膜带IgG与IgA沉积。1M盐裂皮肤间接免疫荧光检测示IgG抗体沉积于真皮侧,IgA抗体沉积于表皮侧。免疫印迹法示患者血清与Ⅶ型胶原(290Kda的获得性大疱性表皮松解症胶原)的NC1结构域及120Kda的线性IgA大疱病胶原LA D-1均发生反应。全身应用强的松龙反应好。根据临床病理学检查,本例既不能诊断为获得性大疱性表皮松解症,也不能诊断为线性IgA大疱病。因此,应为获得性大…     

伴有抗网蛋白IgA抗体的获得性炎性大疱性表皮松解症

作者报道1例伴有抗网蛋白IgA抗体获得性炎性大疱性表皮松解症(EBA)患者。用电子显微镜对其皮损活检标本进行分析显示,在基底膜带的致密板下带有一裂隙,符合EBA的诊断。皮损周围直接免疫荧光法检查证实有IgG和IgA锯齿状沉积,免疫电镜显示定位于致密板下带。相反,盐裂法皮肤间接免疫荧光试验显示在水疱顶部而非底部有IgA抗体着色。免疫印迹法显示这些血清抗体对抗的是细胞质的半桥粒抗原网蛋白。这些抗体的抗网蛋白特性经“敲除法”免疫荧光分析证实;血清IgA未与网蛋白缺陷性大疱性表皮松解症患者的皮肤切片结合。作者认为这一病例首次…     

中国人视神经脊髓炎疾病谱NMO-IgG/anti-AQP4抗体检测方法学的比较

[目的]建立NMO-IgG/anti-AQP4抗体检测的间接免疫荧光法(IIF),细胞分析法(CBA)和荧光免疫沉淀法(FIPA)法;研究并比较不同的检测方法对中国人群NMO疾病谱的检测效率.[方法]建立3种检测NMO-IgG/anti-AQP4抗体的方法,包括IIF、CBA和FIPA.应用盲法检测病人血清106例,其中视神经脊髓炎(NMO)组24例,纵形扩展性脊髓炎(LETM)组22例,多发性硬化(MS)组30例,健康对照(HC)组30例;对其检测的阳性率进行分析.[结果]通过3种方法检测,发现NMO组NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率分别为IIF(62.5%,15/24),CBA(91.7%,22/24)及FIPA(75.0%,18/22),LETM组为IIF(59.1%,13/22),CBA(86.4%,19/22)及FIPA(72.3%,16/22),MS组IIF、CBA及FIPA均为(3.3%,1/30).正常对照组未见该抗体阳性表达.NMO组及LETM组血清NMO-IgG/anti-AQP4抗体阳性率明显高于Ms和健康对照组.[结论]在中国人群NMO疾病谱患者中,IIF、CBA和FIPA的检测效率基本和美欧报道一致.IIF是该抗体检测的基础方法;CBA法看起来最为敏感;FIPA检测可以量化该抗体,可用于临床高通量大样品筛查.     

系统性红斑狼疮患者血清中ANA、抗ds-DNA、抗ENA的水平

目的:通过检测系统性红斑狼疮(SLE)患者血清中的ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体谱的水平,探讨三种抗体对SLE的诊断应用价值。方法:将收集到的68例SLE患者血清(试验组)和40例健康人血清(对照组)分别采用间接免疫荧光(IIF)方法检测ANA、抗ds-DNA,用免疫印迹法(IBT)检测抗ENA多肽抗体。结果:在SLE患者血清(试验组)中检出ANA的阳性率最高为88.2%、抗ds-DNA的阳性率为67.6%、Sm抗体的阳性率为30.9%、nRNP/Sm抗体的阳性抗体的阳性率为47.1%、SS-A抗体的阳性率为51.5%、SS-B抗体的阳性率为38.2%、Scl-70抗体的阳性率为4.4%、Jo-1抗体的阳性率为5.9%,ANA的阳性率与其他各项阳性率进行比较差异有统计学意义(P<0.05)。健康人血清(对照组)中只有ANA的阳性率为2.5%,其他抗体均为阴性。与试验组进行比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论:血清中的ANA、抗ds-DNA、抗ENA抗体联合测试可明显提高SLE患者的诊断率。     

抗内皮细胞抗体与抗中性粒细胞胞浆抗体联合检测在诊断血管炎中的应用

目的:探讨抗内皮细胞抗体(AECA)与抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)在诊断系统性血管炎中的作用.方法:用间接免疫荧光法(IIF)检测系统性血管炎患者血清中的ANCA和 AECA.结果:168例系统性血管炎中ANCA检出60例,阳性率为35.7%,AECA检出64例,阳性率为38.1%;ANCA与AECA联合检测,AN...     

原发性干燥综合征患者血清 ANA、抗－SSA 抗体、抗－SSB 抗体检测分析

目的：探讨原发性干燥综合征（PSS）患者血清抗核抗体（ANA）、抗干燥综合征 A 抗体（抗－SSA）及抗干燥综合征 B 抗体（抗－SSB）检测的临床意义。方法：采用间接免疫荧光法（IIF）检测血清 ANA,免疫印迹法检测血清抗－SSA、抗－SSB 抗体。收集80例 PSS 患者为疾病组,100例健康人群为对照组,并对结果进行分析。结果：疾病组血清抗－SSA 抗体、抗－SSB 抗体、ANA 阳性率均高于对照组;年龄≥50岁的 PSS 患者抗－SSA、抗－SSB 抗体及 ANA 的阳性率均较高;疾病组 ANA 滴度为1∶100的阳性率较高。结论：血清 ANA、抗－SSA 及抗－SSB 抗体测定对 PSS 的诊断有重要参考价值,是判断病情和评价预后的重要手段。     

血清ANCA检测在原发性小血管炎中的临床意义

目的 检测原发性小血管炎患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)并探讨其临床意义.方法 应用间接免疫荧光(IIF)法检测50例原发性小血管炎疾病患者血清中ANCA的检出率.结果 50例原发性小血管炎血清中,韦格纳肉芽肿(WG)阳性率95%,为C-ANCA阳性;显微镜下多血管炎(MPA)阳性率50%,为P-ANCA阳性;过敏性紫癜(AP)阳性率37.5%,为P-ANCA阳性;白塞病(BD)3例,ANCA均为阴性;未分型原发性小血管炎(UCPSV)阳性率66.67%,其中C-ANCA 4例,P-ANCA 6例.结论 抗中性粒细胞胞浆抗体在原发性小血管炎中,部分疾病与抗中性粒细胞胞浆抗体密切相关,尤其是韦格纳肉芽肿阳性率95%,提示C-ANCA可作为韦格纳肉芽肿血清学标志性抗体,ANCA检测对血管炎的发病及诊断具有一定的作用.     

丙型肝炎患者血清中丙型肝炎病毒交叉中和抗体的检测

[摘要]目的分析HCV感染者血清中是否存在交叉反应性中和抗体。 方法以分泌表达HCV包膜E2蛋白真核表达质粒转染的293T 细胞培养上清液中的HCV E2蛋白作为检测抗原,建立检测HCV E2抗体的ELISA方法,检测32份HCV抗体阳性的慢性丙肝患者血清,然后用免疫荧光分析血清与HCV全长包膜蛋白表达质粒转染的293T细胞的结合反应,再用5株HCV假病毒(HCVpp)及两株细胞培养产生的HCV(HCVcc)为模型分析血清的病毒中和活性。 结果32份HCV抗体阳性血清中,26份血清可检测出E2抗体,阳性率81.3%。其中HCV RNA阳性的12份血清均为E2抗体阳性,E2抗体水平与HCV RNA水平负相关。HCV E2抗体阳性血清对5株HCVpp以及两株HCVcc的感染性均有不同程度的中和作用,中和活性与E2抗体水平相平行。结论HCV感染可诱导保护性体液免疫应答,丙肝患者血清中存在交叉中和抗体,提示开发能诱导广泛交叉中和抗体的丙肝疫苗具有可行性。     

SARS患者血清特异性抗体的检测及临床诊断意义

目的 :评估临床诊断SARS患者血清特异性抗体产生规律对疾病诊断的意义。方法 :随机选取不同病程临床诊断为SARS的患者 15 6例 ,通过酶联免疫吸附的方法分别检测患者血清中特异性IgG型和IgM型抗体水平 ,分析SARS特异性抗体的产生与疾病病程的关系及对临床诊断的意义。结果 :血清IgG型抗体阳性 118例 ,阳性率为 75 .6 %。IgM型抗体阳性 6 5例 ,阳性率为 4 1.7%。IgG、IgM均为阴性 37例 ,占 2 3.7%。IgG型抗体产生阳性率随病程延长而逐渐增高 ,病程为 5 0～ 6 0d组阳性率最高达到了 94 .5 %。IgM型抗体阳性率也随病程延长而逐渐增高 ,但在病程 4 0～ 5 0d抗体阳性率即达最高 ,随后迅速下降。IgG与IgM抗体阳性率在其各自不同病程差异均十分显著 (P <0 .0 1)结论 :SARS患者血清特异性抗体检测可以作为SARS临床诊断的重要参考指标 ,但目前尚不宜作为诊断的金标准 ,SARS特异性IgG、IgM抗体同为阴性不能完全排除SARS诊断     

SEROEPIDEMIOLOGIC STUDY OF EPIDEMIC HEMORRHAGIC FEVER WITH RENAL SYNDROME IN CHINA

Sera from 193 cases of epidemic hemorrhagic fever renal syndrome (EHFRS) and 173 normal persons and patients with other diseases in endemic and nonendemic areas were examined for immunofluorescent (IF) antibodies to Korean hemorrhagic fever (KHF) antigen by indirect immunofluorescent antibody (lFA) test. 76 0f 78 (97.4470) paired sera from EHFRS patients were KHF' antibody positive in l or both samples. Of 109 acute stage sera samples 81 (74.31To) were KHF IgM antibody positive whereas of 162 con- valescent sera samples 156 (96.2970) were KHF IgG antibody positive, indicating that the EHFRS agent is immunologically related, if not identical with KHF. The earliest date of IF IgM antibody ap- pearance was l day after onset of illness a.nd IF IgG antibodies could be found in the patient convalescent serum 16 years after the acute at- tack. There was no immunologic relationship between the EHFRS agent and Japanese B en- cephalitis (JBE) or influenza A3 viruses.     

抗中性粒细胞胞浆抗体在肾炎综合征中的检测及临床意义

目的 探讨抗中性粒细胞胞浆抗体（ANCA）及其靶抗原检测在肾炎综合征中的临床意义。方法 应用间接免疫荧光（IIF）检测100例肾炎综合征患者血清抗中性粒细胞胞浆抗体,对其阳性的29例用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测靶抗原髓过氧化物酶（MPO）和蛋白酶3（PR3）。结果 ⅡF检测肾炎综合征ANCA阳性率为29％,其中胞浆型10％、核周型19％。急性型肾炎、狼疮性肾炎、紫癜性肾炎阳性率分别为56％、20％和15％。ELISA检测在急进性肾炎和紫癜性肾炎大多数识别靶抗原MPO,狼疮性肾炎ANCA不识别MPO或PR3。结论 ANCA在急性性肾炎和狼疮性肾炎中阳性率高,有重要诊断意义,对狼疮性肾炎活动及疗效判断也具有参考价值。     

SPA-ELISA检测棕果蝠血清冠状病毒抗体的研究

目的 建立一种敏感、简便的检测蝙蝠血清冠状病毒抗体的方法.方法 利用葡萄球菌A蛋白(SPA)能够与某些哺乳动物IgG抗体Fc段非特异性结合的特点,对市售人冠状病毒抗体ELISA试剂盒进行改造,建立SPA-ELISA法,使其适用于蝙蝠血清冠状病毒抗体的检测,并对采集到的55份棕果蝠血清冠状病毒抗体进行检测.结果 用SPA-ELISA方法对人冠状病毒试剂盒中阳性与阴性对照、SARS病人恢复期血清、空白对照的检测都得到理想的结果,并从55份棕果蝠血清中检测出2例阳性,阳性率为3.64％(2/55),中和试验进一步证实了结果的真实性.结论 所建立的方式适用于检测棕果蝠血清冠状病毒抗体.     

An Immunohistochemical study of Antikeratin Autoantibodies in Human Sera

With frozen sections of normal human skin as antigens,the antikeratinautoantibodies (AK auto Abs) in the sera of 161 normal persons and 184 patients of variousdiseases were studied immunohistochemically by means of indirect immunofluorescence(IIF) staining technique.The positive rates of IgG,IgM,and IgA AK auto Abs in normalsera examined were 66.67%,96.43% and 100% respectively.In psoriasis and other skindisorders,as well as in various types of carcinomas,the positive rates were much lower,while in internal diseases and nonepithelial tumors they were very similar to those ofnormal persons.There is no definite correlation either between different AK auto ABs orbetween AK auto Abs and Ig levels in the sera.These phenomena indicate that the AKauto Abs react to different antigens,and that their increases and decreases are notinfluenced by Ig levels in the sera,but are probably related to keratin polypeptides.     

严重急性呼吸综合征病毒基因检测和特异性抗体检测的诊断意义分析

目的探讨严重急性呼吸综合征病毒基因检测和特异性抗体检测的诊断意义和价值。方法采用巢式反转录PCR和ELISA法分别检测健康人、普通发热患者、SARS密切接触医务人员及不同时期SARS患者痰标本中SARS病毒核酸和血清标本中特异性抗体IgG和IgM。结果SARS患者住院1～58d期间,采用巢式RT-PCR检测痰SARS病毒基因,52例患者中33例阳性,阳性率63.5%;而采用间接ELISA检测血清抗SARS病毒抗体,52例患者中30例阳性,阳性率为57.7%。2种方法均阳性的有15例,均阴性的有6例。2种病原学诊断方法检测20例正常人、15例发热非SARS患者和20例SARS密切接触医务人员,结果均为阴性。住院1～13d组(92.9%)巢式RT-PCR基因阳性率明显高于ELISA特异性抗体阳性率(7.1%);住院37～58d组巢式RT-PCR基因阳性率(47.4%)则明显低于ELISA特异性抗体阳性率(94.7%)(P<0.01)。结论痰中SARS病毒基因检测可用于SARS的早期诊断,这对于提前确诊和治疗SARS患者,尽早排除疑似病例具有非常关键和现实的意义。血清特异性抗体检测可用于流行病学调查,但对SARS早期诊断和鉴别没有意义。     

Comparison of two commercially available avidity tests for toxoplasma-specific IgG antibodies

BACKGROUND: IgG anti-Toxoplasma avidity tests have proven useful to discriminate between recent and distant infection in management of pregnant women with anti-Toxoplasma-IgM antibodies. This study was performed to compare two commercially available IgG anti-Toxoplasma avidity test kits. METHODS: Sixty-four samples positive for IgM and IgG anti-Toxoplasma antibodies were analyzed with two IgG anti-Toxoplasma avidity tests: VIDAS Toxo IgG avidity kit (BioMérieux, Marcy-l'Etoile, France) and Toxoplasma gondii IgG avidity EIA kit (Labsystems, Helsinki, Finland). Samples were obtained from both pregnant women and subjects in different clinical settings. RESULTS: Of 64 sera positive in both VIDAS Toxo IgG and VIDAS Toxo IgM tests, 19 (29.7%) had high avidity antibodies in VIDAS and 17 (26.6%), high avidity antibodies in Labsystems kit. A total of 48 (75.0%) of 64 sera showed concordant results between VIDAS and Labsystems Toxo IgG avidity tests; one (1.2%) serum sample showed discordant results and in 15 (23.4%) sera, results were high or low in one test and borderline in the other. Overall correlation coefficient for results obtained in both tests was 0.80 (0.60 in sera of pregnant women and 0.88 in sera of other patients, respectively). CONCLUSIONS: Correlation between results obtained in BioMérieux and Labsystems Toxo IgG avidity kits in sera from pregnant women as well other individuals was high. BioMérieux assay possesses the advantage of automatization but requires the VIDAS machine; in contrast, Labsystems assay is less costly but requires time-intensive manual performance and calculation of test results.     

人血清抗角蛋白自身抗体的免疫组织化学研究

作者以正常人皮肤冰冻切片抗原,用IIF法检测了161份正常人、184份患者血清抗角蛋白自身抗体(AK auto Ab)。正常人阳性率IgG66.7％,IgM96.4％。IgA100.0％。牛皮癣,其它皮肤病以及癌肿患者血清AK auto Ab阳性率明显降低(P<0.01),而内科疾病和非上皮性肿瘤患者则接近正常人。各AK auto Ab之间以及与血清Ig含量间均无相关性(P>0.05),表明AK auto Ab针对不同的抗原,其消长不受血清Ig影响,可能主要与角蛋白多肽有关。     

抗中性粒细胞胞浆抗体3种检测方法的比较

目的:寻找敏感性、特异性较高又适宜我国目前推广、普及的抗中性粒细胞胞浆抗体(antineutrophilcytoplasmicantibodies,ANCA)的检测方法。方法:对598份血清应用间接免疫荧光(indirectimmunofluorescence,IIF)、总抗原ELISA、抗原特异性ELISA(MPO和PR3ELISA)等3种方法进行ANCA检测。结果:IIF法最为敏感,但IIF法易受抗核抗体的影响,故不宜单独应用。MPO和PR3ELISA检测,对于原发性小血管炎的诊断特异性高,但由于需要价格昂贵的特异性纯化抗原,目前难以在我国普及推广。总抗原ELISA对于抗MPO和抗PR3抗体阳性血清检测的敏感性可达92%。结论:IIF法与MPO和PR3ELISA联合应用是较为理想的检测方案;IIF法与总抗原ELISA联合应用也具有较好的敏感性和特异性,且价格便宜,适于现阶段在我国推广应用。