用PCR／RFLP方法对康氏立克次体基因型的分析

用ＲａｓＩ及ＰｓｔＩ限制性核酸内切酶对７株康氏立克次体进行分析。这些菌株分离自南非、埃塞俄比亚、摩洛哥、印度及俄罗斯等地。结果７株康氏立克次体被分成４种不同的ＲＦＬＰ图谱：Ｍ－１和Ｂａｒｂａｓｈ株相同；Ｉｎｄｉａｎ、Ｅｔｈｉｏｐｉａｎ和Ｓ７株相同；Ｍｏｒｏｃｃａｎ与Ｓｉｍｋｏ株的ＲＦＬＰ图谱各不相同，也不同于其它实验株。上述结果证实，康氏立克次体株间存在基因型的差异。     

B群脑膜炎奈瑟氏菌外膜蛋白抗原性分析

挑选了１０株具有代表性的菌株，提取了它们的外膜蛋白（ＯＭＰｓ），ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析发现：１０株菌的ＯＭＰｓ带谱不完全相同，但都含有１，２／３，４和５类外膜蛋白，而且纯化的１类外膜蛋白（ＯＭＰ１）显示一条分子量为（４１或４３）×１０＾３的蛋白带。从中选两株菌５４２８５２（Ｂ：ＮＴ：Ｐ１．２：Ｌ３，７，９：克隆Ｉ：ＲＦＬＰ－ｂ２０）和３４０７（Ｂ：１５：Ｐ１．２：Ｌ３，７，９，克隆群Ｉ：ＲＦＬＰ－ｂ     

福建省斑点热群立克次体的检测,分离及鉴定

作者用ＰＣＲ／ＲＦＬＰ分型系统首次对福建省宁化县和漳州市的蜱和啮齿动物进行了斑点热群立克次体的检测。并从宁化县收集的越原血蜱中分离到一株斑点热群立克次体，命名为ＮＨ－９５株，分别用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ、Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ及ＰＣＲ／ＲＦＬＰ进行了鉴定。结果显示：宁化县的越原血蜱、微小血蜱、金泽革蜱和漳州市的黄胸鼠可能感染西伯利亚立克次体；ＮＨ－９５株在蛋白多肽、抗原多肽和ＰＣＲ／ＲＦＬＰ图谱上均与西伯利亚立克次体一致，在中国南方地区首次从病原学证明存在北亚蜱传斑点热的自然疫源地。     

COMPARISON OF BREAST MASS SIZE ON ULTRASONOGRAPHY,CUT-SURFACE OF RESECTED SPECIMEN,AND PALPATION

ＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＯＦＢＲＥＡＳＴＭＡＳＳＳＩＺＥＯＮＵＬＴＲＡＳＯＮＯＧＲＡＰＨＹ，ＣＵＴ－ＳＵＲＦＡＣＥＯＦＲＥＳＥＣＴＥＤＳＰＥＣＩＭＥＮ，ＡＮＤＰＡＬＰＡＴＩＯＮＣＯＭＰＡＲＩＳＯＮＯＦＢＲＥＡＳＴＭＡＳＳＳＩＺＥＯＮＵＬＴＲＡＳＯＮＯＧＲ...     

用SSLP连锁分析进行成人多囊肾病快速基因诊断的研究

目的为了探索一种简便、快速的成人多囊肾病（ａｄｕｌｔｐｏｌｙｃｙｓｔｉｃｋｉｄｎｅｙｄｉｓｅａｓｅ，ＡＰＫＤ）基因诊断方法。方法应用ＰＣＲ技术结合ＳＲＳ－ＳＳＬＰ，对成人多囊肾病进行研究。结果ＰＣＲ扩增ＰＫＤ１近端微卫星序列ＳＭ７，观察了中国人群ＳＭ７的多态性，在６７名非血缘关系正常人中发现７种等位片段，杂合子频率５２．２％，ＰＩＣ值０．６２。以ＳＭ７为遗传标记，对２个ＡＰＫＤ家系进行ＳＳＬＰ连锁分析，和３′ＨＶＲ／ＰｖｕⅡＲＦＬＰ连锁分析进行对照，结果二者相符。结论ＳＭ７在中国人中具有较高的多态性，用ＳＳＬＰ连锁分析进行成人多囊肾病的基因诊断切实可行。     

用于研究DLA－DRB1基因分型的寡核苷酸引物对的选择

我们用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法研究ＤＬＡⅡ类基因。为寻找合适的引物，用四对不同的引物：ＤＬＡ－ＤＲ－ＳＰ／Ｓｔｏｐ，ＤＬＡ－ＤＲ－ＳＰ／Ｐ３，ＨＬＡ－ＤＲＢ－ＧＨ４６／５０及ＨＤＡ－ＤＲＢ－ＡＭＰ－Ａ／Ｂ进行了一系列扩增。只有引物对ＨＬＡ－ＤＲＢ－ＡＭＰ－Ａ／Ｂ获得了满意的结果。其类似核苷酸序列在ＤＬＡ－ＤＲＢｃＤＮＡ的核苷酸序列内被发现，特异性也为Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析所证实。内切酶ＨａｅⅢ和ＨｉｎｆⅠ酶解后显示出ＤＬＡ－ＤⅡ类基因高度的多态性和等位基因特异的多态性带型。揭示该引物对是目前用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法研究ＤＬＡ－ＤＲＢ１基因较理想的、实用的引物。     

胃癌组织DCC,APC／MCC基因杂合性缺失研究

对胃癌组织中结直肠癌缺失基因（ＤＣＣ）腺瘤性息肉病基因／结直肠癌突变基因（ＡＰＣ／ＭＣＣ）基因杂合性缺失（ＬＯＨ）进行分析，以探讨其在胃癌发生发展中的作用。采用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术，对４５例手术切除胃癌组织ＤＣＣ、ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ进行检测。结果表明ＤＣＣ基因ＬＯＨ率为３３．３％（１５／４５）、ＡＰＣ／ＭＣＣ为３０．０％（９／３０），ＬＯＨ率在肠型及胃型胃癌中无明显差异，与肿瘤大小、组织学分类、浸润深度、淋巴结转移无关。ＤＣＣ基因ＬＯＨ率在Ⅲ、Ⅳ期胃癌组（４８．０％）显著高于Ⅰ、Ⅱ期组（１５．０％）（Ｐ＜０．０５）．ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ在早期及进展期均可见到，与ＤＣＣ基因ＬＯＨ无相关性。结果提示ＤＣＣ、ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ对两型胃癌的发生发展均有一定作用。ＡＰＣ／ＭＣＣ基因ＬＯＨ在胃癌的早期发生及发展中起作用，而ＤＣＣ基因ＬＯＨ则是晚期改变，可能与临床预后相关。     

中国正常人及类风湿关节炎病人MHC－Ⅱ类DR＿4亚型基因核苷酸序列初步分析

对中国人群正常人及类风湿关节炎病人ＤＲ＿４亚型基因决定型别特异性的第二个外显子进行体外扩增、克隆及序列分析显示，６例正常人及３例类风湿关节炎病人存在三种ＤＲ＿４亚型（ＤＲＢｌ０４０２，ＤＲＢｌ０４０５，ＤＲＢｌ．０４０６），中国人这三种亚型第二个外显子核苷酸序列与白种人一致。序列分析结果为进一步应用常规ＰＣＲ－ＳＳＯ法及ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法进行中国人ＤＲ＿４基因定型提供了依据。此外，还将序列分析结果与ＰＣＲ－ＳＳＯ杂交分析结果进行了比较，具备较全面的覆盖各亚型多态性区域的探针可以减少等位基因同源性干扰，减少分型误差     

用于研究DLA—DRB1基因分型的寡核苷酸引物对的选择

我们用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法研究了ＤＬＡⅡ类基因。为寻找合适的引物，用四对不同的引物：ＤＬＡ－ＤＲ－ＳＰ／Ｓｔｏｐ，ＤＬＡ－ＳＰ／Ｐ３，ＨＬＡ－ＤＲＢ－ＧＨ４６／５０及ＨＤＡ－ＤＲＢ－ＡＭＰ－Ａ／Ｂ进行了一系列扩增，只有引物对ＨＬＡ－ＤＲＢ－ＡＭＰ－Ａ／Ｂ获得了满意的结果，其类似核苷酸序列在ＤＬＡ－ＤＲＢｃＤＮＡ的核苷酸序列内被发现，特异性也为Ｓｏｕｔｈｅｒｎｂｌｏｔ杂交分析所证实，内切酶ＨａｅⅡ类基     

唾液口腔粘膜上皮细胞FMR1基因突变的PCR检测

本文采用ＰＣＲ技术对５个已确诊为脆性Ｘ综合征〗Ｆｒａ（Ｘ）【家系的１５名成员唾液中口腔粘上皮细胞ＦＭＲ１基因进行了分析，并与其外周血ＰＣＲ结果进行了比较，发现６例全突变患者有３例两种组织的结果出现了明显关 ，而５全本、４例前突变携带者及另３例全突变患者两种组织的ＰＣＲ结果完全一致，提示唾液中口腔粘膜上皮细胞同样可用于检测ＦＭＲ１基因突变，同时也表明Ｆｒａ（Ｘ）患者体内ＦＭＲ１基因突变存在着组织间的     

维吾尔族人群抗原处理相关转运体（TAP）基因多态性及与类风湿...

目的：探讨新疆维吾尔族人群抗原处理相关转运体（ＴＡＰ）基因多态性及与类风湿关节炎（ＲＡ）的相关性。方法：采用ＰＣＲ－ＡＲＭＳ，－ＲＦＬＰ，－ＳＳＯＰ检测ＲＡ患者３９例及健康献血者４１例ＴＡＰ１－３３３和６３７位，ＴＡＰ２－３７９、５６５、６５１、６６５、６８７等位氨基酸等位基因多态性。结果：健康维吾尔族人群ＴＡＰ１－３３３位和６３７位等位基因基因型分别以Ｉ和Ｄ为主，表现型以Ｉ和Ｄ为主，表现型主要为     

用PCR单链构象多态性快速判别个体间HLA－DP相容性并检出新等位基因

先确定和比较ＨＬＡ纯合细胞ＤＰＡＩ和ＤＰＢＩ基因ＰＣＲ扩增产物的单链构象多态性（ＰＣＲ－ＳＳＣＰ），然后分析了２０对无血缘关系个体单链ＤＮＡ及其两两混合状态下的构象多态性变化，在分子水平测定异体间ＤＰ匹配性，并和已有的ＤＰ基因分型（ＰＣＲ－ＲＦＬＰ）格局相比较，结果表明，ＲＦＬＰ不同的个体其ＳＳＣＰ必定不同；而ＲＦＬＰ相同的个体，ＳＳＣＰ一般相同，但有例外。从例外个体异常的ＳＳＣＰ格局中发现了新ＤＰ等位基因。本研究证实ＰＣＲ－ＳＳＣＰ在检测等位基因之间微小差异方面十分敏感，并具有简单、快速、经济等优点，对移植中的ＤＰ交叉配型有实际应用价值。     

T细胞识别HLA—DRB1＊0901分子显示TCR BV基因取用的高 …

目的 分析ＤＲ９纯合细胞刺激下ＤＲ９阴性正常人ＴＣＲ ＢＶ基因片段的取用格局,确定和分离出ＤＲ９关联性疾病中的自身反应性Ｔ细胞史隆。方法 常规方法获取ＰＢＭＣ经ＰＣＲ－ＳＳＯ和ＰＣＲ－ＲＦＬＰ ＤＮＡ分型,确定ＤＲ、ＤＱ、ＤＰ等位基因后,进行单向混合淋巴细胞培养,抽提总ＲＮＡ并合成北一链ｃＤＮＡ,定量ＰＣＲ检测２２种ＴＣＲ ＢＶ 基因片段的取用格局。结果 Ｔ细胞对ＤＲ９分子的识别和扩增具有寡克隆笥     

外周血单核细胞中HCV RNA与急慢性丙型肝炎关系的研究(简报)

丙型肝炎易发生慢性化，目前致病机制尚不清楚。我们采用逆转录－巢式ＰＣＲ技术对急慢性丙型肝炎患者血清及外周血单核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＣＶＲＮＡ进行检测，同时对ＰＢＭＣ中的ＨＣＶＲＮＡ进行限制性酶切片段长度多态性分析（ＲＦＬＰ）。结果１０例急性丙型肝炎患...     

HLA－DPB131个等位基因的PCR－RFLP高分辨分型

本文报道建立了一种基于ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术的ＨＬＡ－ＤＰＢ１分型方法。经计算机分析而选出１０个限制性内切酶，在３１个ＤＰＢ１等位基因组成的４９６个ＤＰＢ１基因型中，可唯一性分辨４８４个。用于确定ＤＰＢ１基因型的３３个多态性酶切片段有２９个在８种纯合／杂合子分型细胞ＤＮＡ的ＤＰＢ１分型中得到验证。经研究来自十个家系２３人的ＤＰＢ１等位基因分布，证实在等位基因和杂合性多态片段的分布上均符合孟德尔分离律。与目前其他ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＳＳＯＤＰＢ１分型系统比较，本分型系统在分辨的ＤＰＢ１等位基因数目和唯一性反应格局率方面居于领先，特别适用于异基因骨髓移植供者的选择。     

一种快速简便的缺失突变方法

为了构建能表达稳定的、不易降解的ＴＭ－ＴＮＦ突变体（ＴＭ－ＴＮＦｍ）的基因，本文用改良的Ｓ－ＰＣＲ和ＯＥ－ＰＣＲ两种定位突变技术，成功地构建了缺失３６个碱基的ｐＢＳＫ－ＴＭ－ＴＮＦ突变重组体。与ＯＥ－ＰＣＲ技术（用两对引物进行两次ＰＣＲ反应）相比较，Ｓ－ＰＣＲ技术（用一对引物做一次ＰＣＲ反应）具有快速、经济、简便等优点，但其突变率较ＯＥ－ＰＣＲ低。     

RT-PCR结合限制性片段长度多态性分析对我国汉坦病毒进行基因分型的研究

用电脑软件分析ＨＦＲＳＶ 囊膜糖蛋白编码基因的Ｍ 节段,寻找不同型别间病毒株Ｍ 节段的限制性内切酶酶切位点的差异。结果发现,ＨＴＮ 型７６１１８ 株和ＳＥＯ 型Ｒ２２ 株Ｍ 节段１１９９～１４９７ 间的酶切位点,可用于进行限制性内切酶基因多态性分析,以确定ＨＦＲＳＶ 的型别。根据上述结果,合成一对引物,建立ＲＴ／ＰＣＲ 方法,分别用Ｒｓａｌ、Ｔａｑ １ 和ＨｉｎｄＩＩＩ３ 种内切酶对扩增片段进行酶切分型。用此方法分析了从我国不同地区、不同宿主分离的毒株１９ 株,及国际标准毒株１ 株。结果表明,９ 株可定为ＨＴＮ 型,８ 株可定为ＳＥＯ 型,３ 株无法确定其型别。此２０ 个毒株曾用血清学方法分型,仅１１ 株分型成功。分型成功率ＲＴＰＣＲ／ＲＦＬＰ法与血清学方法分别为８５％ 和５５％ ,前者比后者高３０ ％ 。     

上海地区多发性硬化症与HLAⅡ类基因和抗原处理相？…

探讨上海人群中ＨＬＡⅡ类基因和抗原处理相关基因与多发性硬化症的相关性。方法,用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ和ＰＣＲ－ＳＳＯ技术对２１名上海地区无血缘关系的ＭＳ患者和８９名正常人作ＨＬＡⅡ类（ＨＬＡ－ＤＲＢ１,－ＤＱＡ１和－ＤＱＢ１）和抗原处理相关基因（ＴＡＰ１,ＴＡＰ２和ＬＭＰ２）分型。结果患者组ＤＲＢ１＊０４０５、Ｔ 克＊０５０２（Ｐ＝０．００２５）等位基因ＤＲＢ１＊０４０５－ＤＱＡ１＊０３０１－ＤＱＢ１＊     

16S—23S rDNA间隔区序列PCR和RFLP分析对分枝杆？…

目的 对结构分枝杆菌复合菌群、岛、胞内分枝杆菌复合菌群以及龟分枝杆菌龟亚种及脓肿亚种等几种快速生长分枝杆菌进行鉴定。方法 应用通用引物ａ及结核分枝杆菌特异的引物ｂ,对受试菌种的１６Ｓ－２３Ｓ ｒＤＮＡ间隔区序列进行ＰＣＲ扩增,并对引物ａ扩增产物进行限制性内切酶ＨａｅⅢ、ＭＳＰⅠ消化反应。结果 应用引物ａ ＰＣＲ护增及ＲＦＬＰ分析能将除结核分枝杆菌复合菌群外的受试的其它菌群中的各种区别开;而引物ｂ对     

SYNTHESIS AND FINE STRUCTURE-PROPERTY RELATIONSHIPS OF ION-CONTAINING BIOMEDICAL POLYETHERURETHANES

ＳＹＮＴＨＥＳＩＳＡＮＤＦＩＮＥＳＴＲＵＣＴＵＲＥ－ＰＲＯＰＥＲＴＹＲＥＬＡＴＩＯＮＳＨＩＰＳＯＦＩＯＮ－ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧＢＩＯＭＥＤＩＣＡＬＰＯＬＹＥＴＨＥＲＵＲＥＴＨＡＮＥＳＳＹＮＴＨＥＳＩＳＡＮＤＦＩＮＥＳＴＲＵＣＴＵＲＥ－ＰＲＯＰＥＲＴＹ...