电镜样品半薄切片HE染色前脱树脂的技术处理

为了克服电子显微镜样品超薄切片的盲目性和电镜视野的局限性，我们首先对样品半薄切片，(其厚度0.5~2μm)，进行HE染色，然后光学显微镜下观察，定位，再超薄切片。由于电镜样品是由树脂包埋的，半薄切片直接采用常规的甲苯胺兰染色使观察视野呈现单一的蓝色，细胞内各种结构分辨不清，给半薄切片定位和筛选带来一定的困难，效果不理想。我们根据多年来实践经验，总结出一种半薄切片的HE染 色及染色前脱树脂处理的新方法。 1 半薄切片制备的步骤与方法 ①用上海产KCQ—2型切片机进行半薄切片或超薄切片，常规手工制做硬质玻璃刀，切出2…     

人体活检穿刺组织、实验动物组织荧光制片、HE制片中的技术改进

目的人体活体行肺、肝、肾穿刺及实验用动物的肺、肝、肾组织制作免疫荧光切片、石蜡HE切片,用以明确疾病的性质以及做科研时动物试验的组织进行科学病理分析。方法我院患者的活检组织标本、试验室的动物组织标本取1/4及1/3用普通胶水代替OCT包埋剂,冰冻机下行冰冻切片用以制作直接免疫荧光染色。剩余标本组织在脱水机改进时间后进行脱水处理,行石蜡包埋切片做HE染色。结果组织荧光制片效果好,无背景着色,切片完整,组织结构清晰。组织石蜡HE切片染色胞浆分明,切片完整。两种制片镜下观察定位准确。结论采用改进后方法制片,节约资金,制片的阳性强度及阳性检出率与未改进前相比效果好,定位准确。     

石蜡切片HE染色的体会

目的探讨病理组织HE制片中,组织经过取材固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、石蜡切片之后,通过严格苏木素、伊红染色这一环节的技术操作、提高石蜡切片的HE染色质量为准确的病理诊断提供优质的HE切片。方法临床工作中,经过常规取材的病理组织,通过一系列的组织处理,病理专用仪器的切片再经过染色剂苏木素、伊红的染色,二甲苯透明,中性树胶封固制作成优质的HE片。结果 HE切片色彩鲜艳透明,细胞核呈蓝色,间质呈深浅不等的橙红色,核、质对比清晰。结论通过对石蜡切片苏木素、伊红染色过程技术的改进,组织细胞核、细胞质染色清晰度得到显著提高,使HE切片质量的优质率达90%以上。     

甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究

目的探讨骨组织经不同浓度的甲酸脱钙液24小时脱钙后切片染色效果,选择最佳甲酸脱钙工作液。方法350例骨组织标本每例取材3份,分别用40％、30％、20％的甲酸脱钙液常温下脱钙24小时,观察三种不同浓度的甲酸脱钙液脱钙后骨组织的切片和HE染色情况。结果骨组织经40％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,但HE染色核质偏浅,胞浆偏红;30％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,HE染色核质清晰,胞浆鲜艳;20％甲酸脱钙液脱钙后,切片不够完整,HE染色核质偏浅,胞浆偏浅。结论脱钙液脱钙后应保持组织切片完整,染色效果良好,且30％的甲酸脱钙液是较理想的工作液。     

冰冻切片HE染色对肾脏疾病的快速诊断

我们自1998年6月至2002年6月对46例原发性肾小球疾病患者肾组织进行了冰冻切片HE染色，以石蜡连续切片HE染色进行验证，结果表明冰冻切片HE染色对肾小球疾病的诊断快速、简单、可靠，报告如下。     

石蜡切片HE染色的体会

目的探讨病理组织HE制片中,组织经过取材固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、石蜡切片之后,通过严格苏木素、伊红染色这一环节的技术操作、提高石蜡切片的HE染色质量为准确的病理诊断提供优质的HE切片。方法临床工作中,经过常规取材的病理组织,通过一系列的组织处理,病理专用仪器的切片再经过染色剂苏木素、伊红的染色,二甲苯透明,中性树胶封固制作成优质的HE片。结果 HE切片色彩鲜艳透明,细胞核呈蓝色,间质呈深浅不等的橙红色,核、质对比清晰。结论通过对石蜡切片苏木素、伊红染色过程技术的改进,组织细胞核、细胞质染色清晰度得到显著提高,使HE切片质量的优质率达90%以上。     

甲酸脱钙液的浓度对骨组织脱钙后切片染色效果的研究

目的探讨骨组织经不同浓度的甲酸脱钙液24小时脱钙后切片染色效果,选择最佳甲酸脱钙工作液。方法350例骨组织标本每例取材3份,分别用40％、30％、20％的甲酸脱钙液常温下脱钙24小时,观察三种不同浓度的甲酸脱钙液脱钙后骨组织的切片和HE染色情况。结果骨组织经40％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,但HE染色核质偏浅,胞浆偏红;30％甲酸脱钙液脱钙后,切片完整,HE染色核质清晰,胞浆鲜艳;20％甲酸脱钙液脱钙后,切片不够完整,HE染色核质偏浅,胞浆偏浅。结论脱钙液脱钙后应保持组织切片完整,染色效果良好,且30％的甲酸脱钙液是较理想的工作液。     

快速冷冻切片制备方法的改进及结果观察

目的 探讨快速冷冻切片技术改进方法在病理诊断中的应用价值.方法 对我院2010年手术切除的乳腺、甲状腺、子宫、喉、脑组织等600例新鲜组织标本,采用医用耦合剂包埋,恒温式冰冻切片机切片,苏木素加热伊红快速染色后封片观察.结果 此方法制片时间约8 min,镜下组织结构和组织切面完整,细胞形态清晰,染色佳,组织无冰晶形成及...     

应用超声波快速组织处理仪制备快速石蜡切片的体会

笔者２００１年应用ＹＴＧ -５Ｅ型生物组织快速处理机(湖北孝感亚光医用电子技术研究所 )制作了１２０例病理组织学切片 ,其制片快且能弥补冰冻切片和石蜡切片的不足 ,介绍如下。１制片过程１ １内窥镜及针吸活检的小组织ＡＡＦ液中固定３ｍｉｎ ,ＡＣ液中脱水３ｍｉｎ ,ＳＰ液中浸蜡１０ｍｉｎ ,包埋切片。１ ２大组织２０%甲醛中固定５ｍｉｎ ,组织重新取材后修正厚薄０ １ｃｍ ,ＡＡＦ液中固定３ｍｉｎ ,ＡＣ液中脱水３ｍｉｎ ,丙酮苯中脱水兼透明５ｍｉｎ，ＳＰ液中浸蜡１０ｍｉｎ ,包埋切片。１ ３骨组织１５%硝酸中脱钙２０ｍｉｎ ,…     

不同的脱钙液在骨组织制片中的比较应用

目的比较不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力的差异,探讨其对HE染色的影响。方法选取50例手术切除的新鲜骨标本,运用4种常用的脱钙液(14%硝酸、10%盐酸、20%甲盐酸和EDTA脱钙液)进行脱钙,比较其脱钙效果和对HE染色的影响。结果不同的脱钙液对骨组织的脱钙能力、HE染色效果影响有显著区别。结论 14%硝酸脱钙能力最强,用时间最短,染色的效果最差;10%盐酸对骨组织的损伤小,HE染色的效果最好,但用时较长;20%甲盐酸脱钙能力和HE染色效果都介于10%盐酸和EDTA脱钙液之间;EDTA脱钙液脱钙用时最长,对骨组织的损伤最小。     

6种固定液短时间固定对冰冻切片制片效果影响

目的通过探讨6种不同固定液短时间固定对冰冻切片制片效果的影响,以便在快速冰冻切片制片中选择较好的固定液。方法收集新鲜活体组织,取材冷冻包埋后,经恒温式冰冻切片机切片,以6种不同固定液固定6s,进行HE染色。结果经乙醚酒精固定后冰冻切片质量较好,染色鲜艳,镜下组织结构细胞形态清晰,细胞核浆对比分明。结论乙醚酒精固定是一种较为理想的冰冻切片快速固定液。     

吸入类药物临床前研究中鼻组织脱钙技术优化：用于大鼠鼻黏膜组织病理学检查

目的 研究不同脱钙液对大鼠鼻组织的脱钙作用及其病理切片染色效果。方法 选择10%乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）、10%甲酸、5%硝酸脱钙液3种不同脱钙液，在室温静置及微波条件下，对大鼠鼻组织的脱钙时间和脱钙效果进行比较分析，综合评估骨组织经不同脱钙方法后制成病理切片质量。结果 常温条件下鼻组织经过EDTA脱钙液所需脱钙时间最长，微波条件下鼻组织经硝酸脱钙液所需脱钙时间最短，经EDTA脱钙液的鼻组织切片质量、HE染色、MASSON染色和免疫组化染色中质量最佳，硝酸脱钙液的鼻组织的切片质量最差，甲酸脱钙液的鼻组织HE染色效果较佳，MASSON和免疫组化染色质量略差。结论 EDTA脱钙液配合微波进行的鼻组织脱钙，脱钙效率明显提升，且切片和染色效果俱佳。     

冰水混合物在病理组织制片中的应用研究

目的 探讨冰水混合物在病理组织制片中的应用价值,以寻求提高HE切片质量的方法.方法 手术切除的人体标本经脱水、浸蜡后包埋成蜡块,蜡块分别用自来水、冰块、冰水混合物处理后切片,常规HE染色,光学显微镜观察.结果 经冰水混合物处理的组织蜡块,切出的蜡片成带完整、厚薄均匀,无重叠、皱褶、脱片、空洞、龟裂或波浪样改变;HE染色...     

3种不同脱钙液对牙齿标本切片免疫组化染色效果的研究

在口腔组织病理的研究中,常常需要通过切片对牙齿组织相关细胞进行观察和对比分析,由于牙釉质是体内硬度最高的组织,如果不能很好地进行脱钙处理,就很难制得优良的切片并获得满意的染色结果.目前尚无公认的用于牙齿组织的理想方法,因此进行了两种配方的酸类脱钙液和EDTA螫合剂脱钙液的脱钙时间和染色效果的研究.     

病理学教学切片染色方法的改进

目的解决病理教学切片因染色方法而出现褪色的问题。方法对传统的HE染色染液的配制方法和染色方法进行改良。结果 HE染色方法改良后切片色彩鲜艳,对比度清晰。结论改良后的染色方法效果良好,避免教学切片短时间内因染色方法的问题而出现褪色的现象,延长了使用周期,很多年后仍能用于教学。     

石蜡火棉胶双重浸透包埋法制作皮肤与瘢痕组织切片

皮肤和瘢痕组织的结构具有自身的特殊性，尤其瘢痕组织的纤维成份多，细胞成份少，结构致密，与石蜡的相融性差，按常规制片技术难获满意结果。近年来，我们改进设计了石蜡火棉胶双重浸透包埋法制作皮肤与瘢痕组织切片，使操作容易，切片完整，厚薄均匀，染色清晰，提高了制片质量，并可制作连续切片。现介绍如下。     

骨髓穿刺组织石蜡制片方法改进的探讨

由于骨髓组织含有大量的钙盐而非常坚硬,不能直接进行石蜡制片,而经过脱钙处理后,才能进行切片、HE染色、特殊染色和免疫组化染色。脱钙过度或不当均可影响上述染色。因此,脱钙时间和脱钙液的选择十分重要。传统的方法用14％硝酸脱钙液脱钙常出现脱钙过度或不足,难以掌握,常造成组织切片不完整、组织结构破坏、细胞模糊不清,     

51O例股骨头标本常规脱水与超声波快速脱水对切片效果的比较研究

目的通过510例股骨头标本HE制片结果的分析,比较常规脱水与超声波快速脱水的效果。方法股骨头标本用锯锯成2cm×2cm×0.3cm的薄片二份,用30％的甲酸脱钙液进行脱钙16～18小时,分别用常规脱水的方法及超声波快速脱水的方法脱水处理后,经石蜡包埋、切片、染色制成HE切片,观察染色后的组织结构的清晰度及完整性。结果股骨头标本经二种脱水方法处理后制成的HE切片,阅片比较发现超声波快速脱水法优良率略高于常规脱水法,两种方法比较,P〉0．05,差异无统计学意义。但超声波组织处理仪能明显缩短病理制片工作时间。结论骨组织脱钙后采用超声波快速脱水的方法可以代替常规脱水,HE切片效果良好,缩短了病理检验报告时间,更好地满足了临床工作的需求。     

冰水混合物在病理组织制片中的应用研究

目的 探讨冰水混合物在病理组织制片中的应用价值,以寻求提高HE切片质量的方法.方法 手术切除的人体标本经脱水、浸蜡后包埋成蜡块,蜡块分别用自来水、冰块、冰水混合物处理后切片,常规HE染色,光学显微镜观察.结果 经冰水混合物处理的组织蜡块,切出的蜡片成带完整、厚薄均匀,无重叠、皱褶、脱片、空洞、龟裂或波浪样改变;HE染色鲜艳,组织结构清晰,细胞形态完整.与经自来水、冰块处理的蜡块制作的切片有明显差异.结论 切片前用冰水混合物处理蜡块的方法是可行的,可明显提高HE制片质量.     

免疫组化染色质量控制在组织切片中的应用

目的 探讨组织HE染色切片及免疫组化染色切片的质量控制与标准化.方法 按照质控标准化组织行HE制片和免疫组化染色,盲法比较标准化前后病理诊断结果.结果 100例肝脏穿刺组织中,标准化后常规HE染色切片和免疫组化染色切片的优良率分别为92.3％,91.1％;明显高于标准化前78.9％,74.9％(x2=3.841,3.801,均P＜0.05);标准化后100例肝脏穿刺组织中诊断率86.0％,明显高于标准化前73.0％(x2=3.741,P＜0.05).结论 标准化后提高了常规HE染色和组织免疫组化的质量.