硫辛酸抑制AIF 介导的非Caspase 凋亡通路对多巴胺能神经元的保护机制

目的：帕金森病（Parkinson’s disease,PD）最主要的病理变化是中脑黑质多巴胺（dopamine,DA）能神经元的变性死亡,但其病理机制仍然不清楚。硫辛酸是丙酮酸脱氢酶的辅助因子,具有抗氧化性和线粒体保护功能,对PD 具有一定的治疗效果。本研究旨在探索硫辛酸是否通过抑制致凋亡因子（apoptosis inducing factor,AIF）介导的非Caspase 凋亡通路对多巴胺能神经元发挥神经保护功能。方法：6-OHDA 诱导建立单侧损毁的PD 大鼠模型后,给予硫辛酸干预;通过行为学、NueN 和TH 免疫染色观察硫辛酸的保护作用;通过Western Blot、免疫组化、激光共聚焦检测硫辛酸是否可以抑制AIF 介导非Caspase 依赖性凋亡通路对DA 能神经元具有保护作用。6-OHDA 诱导PC-12 细胞损伤建立PD 细胞模型,给予LA 干预;通过CCK-8、流式和线粒体膜电位检测硫辛酸的保护作用;通过Western Blot 和激光共聚焦检测硫辛酸是否可以抑制AIF 介导非Caspase 依赖性凋亡通路对多巴胺能神经元具有保护作用。结果：在PD 模型大鼠上,硫辛酸能够显著缓解
PD 模型大鼠行为学的改变,显著减缓PD 模型大鼠黑质区神经元的丢失;同时,硫辛酸也显著抑制PD模型大鼠黑质区AIF 的线粒体释放和细胞核转移。在PD细胞模型上,硫辛酸能够抑制6-OHDA诱导的PC12 细胞凋亡,显著抑制6-OHDA 诱导的PC12 线粒体通透性转变;同时,硫辛酸也显著抑制PC12 细胞模型AIF 的线粒体释放和细胞核转移。结论：硫辛酸能够通过抑制AIF 介导的非Caspase 凋亡通路对多巴胺能神经元发挥神经保护功能。     

不同种类的腐植酸对大鼠胃酸分泌和胃泌素释放的影响

本工作观察六种腐植酸:泥炭腐植酸、斋堂腐植酸、吐鲁番腐植酸、吐鲁番黄腐酸、斋堂黄腐酸和巩县黄腐酸对胃酸分泌的影响及泥炭腐植酸对胃泌素释放的影响。用放射免疫法测定血浆胃泌素。结果表明,六种腐植酸(50mg/kg腹腔注射)对幽门结扎大鼠胃酸分泌均有明显的抑制作用,而且腐植酸的作用程度较黄腐酸者略强些。泥炭腐植酸对胃泌素的释放没有影响。     

泥炭腐植酸对实验性急性胰腺炎大鼠死亡率及存活时间的影响

据报导,泥炭腐植酸对某些消化系统疾病具有一定疗效。本室也观察到它有促进实验性胃溃疡愈合及抑制胃酸分泌的作用。本工作试图观察泥炭腐植酸对急性胰腺炎的影响,探索它对胰腺炎是否具有疗效。     

人参皂甙抗缺血缺氧性脑损伤作用与抑制谷氨酸的释放有关

目的：探讨人参皂甙抗缺血缺氧性脑损伤作用是否与抑制谷氨酸的释放有关,为临床应用人参皂甙防治缺血缺氧性脑损伤提供理论依据。方法：超微观察大鼠离体海马脑片缺氧时ＣＡ１Ａ区锥体细胞结核及含谷氨酸的突触小泡;并在培养的小鼠皮质细胞观察模拟缺血时谷氨酸的释放。同时,观察人参皂甙对上述谷氨酸释放的影响。结果：缺氧时海马ＣＡ１区含谷氨酸的突触小泡明显减少甚至耗竭,培养的小鼠皮质神经细胞缺血时谷氨酸释放明显增加。     

灵芝多糖肽对人肺癌细胞侵袭的影响

目的:研究灵芝多糖肽(Ganoderma lucidum polysaccharides peptide, Gl-PP)对人肺癌PG细胞侵袭性的影响.方法:在体外用不同浓度Gl-PP处理PG细胞后,应用细胞增殖实验、细胞划痕运动实验、细胞黏附实验、金属蛋白酶活性测定实验及RT-PCR法测定金属蛋白酶MMP-9mRNA的表达,观察Gl-PP对肿瘤生长、运动、黏附及金属蛋白酶MMP-9活性和mRNA表达的影响.结果:Gl-PP对人肺癌PG细胞增殖无直接抑制作用;Gl-PP作用后的PG细胞,其运动性明显受抑制,并具一定的量效关系;其黏附性受不同程度的抑制;金属蛋白酶MMP-9活性呈剂量依赖性下降,100 mg/L Gl-PP对MMP-9活性抑制率可达41.53%,MMP-9mRNA的表达也受到不同程度的抑制.结论:Gl-PP在体外可抑制人肺癌PG细胞的侵袭性.     

促红细胞生成素对缺血海马CA1区神经元Bcl-xl和细胞色素C作用的相关性研究

目的探讨促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)的神经保护机制.方法采用4-vO法制作大鼠全脑缺血模型.将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组、EPO预处理组.全脑缺血前3 h,EPO组大鼠脑室立体定向注射重组人促红细胞生成素(rHu-EPO),生理盐水组则给予生理盐水,假手术组只进行假手术处理.观察缺血后24 h各组海马CA1区bcl-xl和细胞色素C(Cytochrome C,CytC)表达是否有相关性.结果bcl-xl和CytC预处理可以抑制缺血后大鼠海马CA1区神经元CytC从线粒体释放入胞浆,这种作用可能与促进bcl-xl表达相关.     

阿巍酸对大鼠冠状动脉环及血压作用的研究

目的:探讨阿巍酸对正常大鼠冠状动脉环及血压的影响。方法:观察阿巍酸对去甲肾上腺素(NE)和KCl致冠状动脉收缩的影响,分析其对受体操纵性外钙内流和内钙释放的影响。并以直接测压法测定大鼠在给予阿巍酸前及后0.5、1、2、4h股动脉血压(收缩压:SBP、舒张压:DBP)的变化。结果:阿巍酸剂量依赖性地抑制NE和KCl引起的冠脉收缩。可降低大鼠SBP、DBP,单次给药效应持续至4h以上,作用以1～2h最强。结论:阿巍酸抑制NE和KCl引起的冠脉收缩,对正常大鼠有明显的降压作用,但不影响心脏做功。其作用机制可能是抑制冠脉平滑肌细胞电压依赖性钙通道和受体操纵钙通道介导的外钙内流和内钙释放有关。     

Vit C,Trolox对阿霉素损伤鼠培养心肌细胞的作用

在原代培养的大鼠心肌细胞受阿霉素损伤的模型上,观察到合适浓度的维生素C(Vit C)能显著减少受损心肌细胞乳酸脱氢酶释放、减少细胞内丙二醛的形成,并改善细胞超微结构的变化,显示其具有抑制脂质过氧化,保护心肌细胞的作用.该作用与Vit c浓度密切相关,高浓度时反而加重细胞损伤.维生素E的水溶性类似物Trelox则没有上述作用。     

大鼠羊水与RBL-2H3肥大细胞共培养后脱颗粒的检测

[目的]探讨大鼠羊水与 RBL-2H3肥大细胞共培养后是否有脱颗粒现象发生。[方法]取大鼠不同稀释度的羊水与大鼠来源的RBL-2H3肥大细胞系共培养,用酶联免疫法测定不同时间样品上清的组胺、自发释放的组胺和总组胺,计算组胺释放率。对细胞用阿利新蓝染色,计算脱颗粒指数。用流式细胞仪测定RBL-2H3细胞Annexin Ⅴ标记后的阳性细胞率。[结果]与不同稀释度的羊水共培养后,细胞的组胺释放率有显著差异,组胺的释放和羊水浓度正相关。阿利新蓝染色后计算的脱颗粒指数与组胺释放率测定结果一致。细胞Annexin Ⅴ标记后的阳性率在羊水刺激后明显上升,进一步证明了脱颗粒的发生。[结论]羊水中的物质可以通过直接作用导致RBL-2H3肥大细胞脱颗粒,为羊水栓塞时肥大细胞脱颗粒机制的研究提供了一定的实验依据。     

月见草油防治大鼠胃粘膜损伤的研究

本文观察了月见草油对无水乙醇、束缚-冷应激引起的大鼠胃粘膜损伤的影响及对慢性实验性胃溃疡的治疗作用,并初步探讨了其机制。结果表明,月见草油可阻止无水乙醇和束缚-冷应激对大鼠胃粘膜的急性损伤作用和促进慢性胃溃疡的愈合。其机理可能与促进胃内前列腺素(PG)合成与释放有关。     

精芪双参胶囊对心肌缺血再灌注损伤的影响

目的观察精芪双参胶囊对心肌缺血再灌注损伤的保护作用,为精芪双参胶囊的开发和应用提供药效学依据。方法采用手术结扎冠状动脉后再灌注方法制备急性心肌缺血动物模型。通过小鼠常压下密闭于250 mL的广口瓶内,记录小鼠存活时间。用体内血栓电刺激法观察大鼠体内血栓形成情况。结果精芪双参胶囊可明显抑制心脏指数及心电图ST段的位移变化(P0.05),明显抑制心肌梗死面积扩大,保护心肌细胞、减少心肌纤维间质中红细胞沉积及炎细胞浸润,可明显抑制大鼠血清中CK、AST、LDH、MDA含量的释放,并提高SOD活力变化(P0.05),促进血浆中PGI2释放并抑制TXA2的释放,同时升高PGI2/TXA2比值(P0.05);明显延长小鼠常压耐缺氧时间(P0.05);明显抑制成栓100%的时间和血栓长度增加(P0.05)。结论精芪双参胶囊可以明显改善大鼠缺血缺氧,对心肌缺血有较好的保护作用,并可以抑制血小板聚集,抑制栓塞。     

大鼠羊水与RBL—2H3肥大细胞共培养后脱颗粒的检测

[目的]探讨大鼠羊水与RBL-2H3肥大细胞共培养后是否有脱颗粒现象发生。[方法]取大鼠不同稀释度的羊水与大鼠来源的RBL-2H3肥大细胞系共培养，用酶联免疫法测定不同时间样品上清的组胺。自发释放的组胺和总组胺，计算组胺释放率。对细胞用阿利新蓝染色。计算脱颗粒指数，用流式细胞仪测定RBL-2H3细胞AnnexinV标记后的阳性细胞率。[结果]与不同稀释度的羊水共培养后，细胞的组胺释放率有显差异。组胺的释放和羊水浓度正相关。阿利新蓝染色后计算的脱颗粒指数与组胺释放率测定结果一致。细胞AnexinV标记后的阳性率在羊水刺激后明显上升，进一步证明了脱颗粒的发生。[结论]羊水中的物质可以通过直接作用导致RBL-2H3肥大细胞脱颗粒，为羊水栓塞时肥大细胞脱颗粒机制的研究提供了一定的实验依据。     

威麦宁对PG细胞与HUVEC黏附作用的影响

目的研究威麦宁体外对人高转移肺癌细胞(PG)与血管内皮细胞(HUVEC)黏附作用的影响,探讨其抗肿瘤转移作用机制。方法MTT法检测威麦宁对PG、HUVEC活力的影响;虎红染色法检测威麦宁对PG细胞与HUVEC黏附作用的影响,检测对肿瘤坏死因子(TNF-α)活化的HU-VEC与PG细胞黏附作用的影响。结果威麦宁(31.25、62.5 mg/L)作用PG、HUVEC 24 h后,对两种细胞的存活率即活力皆没有影响(P>0.05)。威麦宁(31.25、62.5mg/L)作用PG细胞24 h后,对HUVEC的黏附有明显抑制作用(P<0.05,P<0.01);作用HUVEC 6、12 h后,能明显降低TNF-α诱导的HUVEC对PG细胞的黏附作用(P<0.01)。结论威麦宁可能通过对PG细胞和HUVEC双重作用,抑制PG-HUVEC间的黏附,从而抑制肿瘤细胞的血道转移。     

不同施灸方向对寒凝血瘀证大鼠血浆内皮素-1及前列环素的影响

目的：观察不同施灸方向对寒凝血瘀证模型大鼠血浆内皮素-1（Endothelin-1,ET-1）及前列环素（Prostacyc-lin,PG12）的影响,探索艾灸获效的影响因素,完善艾灸的标准化治疗方案。方法：将Wistar大鼠随机分为四组：正常组、模型组、顺灸组和逆灸组,每组8只,制作寒凝血瘀证大鼠模型,并对顺灸组和逆灸组大鼠足太阳膀胱经分别行“自上至下”及“自下至上”单向艾灸治疗,股动脉取血采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测各组大鼠血浆ET-1、PG12的浓度。结果：与正常组比较,模型组大鼠血浆ET-1浓度明显升高（P〈0．05）,PG12浓度明显下降（P〈0．05）;而与模型组比较,顺灸组大鼠血浆ET-1浓度明显下降（P〈0．05）,PG12浓度明显升高（P〈0．05）,逆灸组大鼠血浆ET-1浓度下降（P〉0．05）。PG12浓度升高（P〈0．05）。结论：顺灸与逆灸足太阳膀胱经均能明显促进寒凝血瘀证大鼠血浆PG12的释放。且顺灸组优于逆灸组,顺灸能明显抑制寒凝血瘀证大鼠血浆ET-1的释放。     

促红细胞生成素对缺血海马CA1区神经元Bcl—x1和细胞色素C作用的相关性研究

目的探讨促红细胞生成素（Erythropoietin，EPO）的神经保护机制。方法采用4-VO法制作大鼠全脑缺血模型。将SD大鼠随机分为假手术组、生理盐水对照组、EPO预处理组。全脑缺血前3h，EPO组大鼠脑室立体定向注射重组人促红细胞生成素（rHu—EPO），生理盐水组则给予生理盐水，假手术组只进行假手术处理。观察缺血后24h各组海马CAl区bcl-x和细胞色素c（cytochmmeC，CytC）表达是否有相关性。结果bcl—x1和CytC预处理可以抑制缺血后大鼠海马CAl区神经元CytC从线粒体释放入胞浆，这种作用可能与促进bcl-x1表达相关。     

利多卡因对LPS致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤的保护作用

目的：观察利多卡因（lidocaine,Lido）抗LPS所致的大鼠肺泡Ⅱ型上皮（AT-Ⅱ）细胞凋亡作用。方法：体外培养的大鼠AT-Ⅱ细胞暴露到LPS和Lido中24h后,采用流式细胞仪（FCM）及电镜检测AT-Ⅱ细胞凋亡和坏死率;乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒检测LDH活性。结果：LPS可直接导致AT-Ⅱ细胞损伤,表现为AT-Ⅱ细胞坏死和凋亡发生率增高,LDH释放量增多。Lido能降低AT-Ⅱ细胞凋亡率。结论：Lido对LPS所致的AT-Ⅱ细胞凋亡和坏死有直接的抑制作用。     

阿托品和腐植酸对大鼠颈髓横断性胃损伤的保护作用

本工作研究了阿托品、腐植酸和cAMP对颈髓横断后大鼠胃粘膜损伤的保护作用。实验表明,阿托品和腐植酸对胃粘膜细胞有明显的保护作用,而cAMP则无此作用。阿托品的细胞保护作用可能与增加胃粘膜屏障粘液量有关,而腐植酸的作用机理尚不清楚。     

油酸的胃粘膜保护作用与抑制胃酸分泌的关系

我们曾观察到,油酸能对抗消炎痛引起的胃粘膜损伤。本工作用急性大鼠胃灌流制备探讨了这种保护作用是否由抑制胃酸分泌所致。肌肉注射消炎痛对大鼠基础胃酸分泌无影响。油酸1 ml在小肠可抑制胃酸分泌,但0.5ml却无作用;而油酸0.25～0.5ml即有很强的抑制胃粘膜损伤作用。结果提示,油酸不是通过抑制胃酸分泌实现其细胞保护作用的。     

大豆油对乙醇引起的大鼠胃粘膜损伤的影响

本工作观察了大豆油对无水乙醇引起的大鼠胃粘膜损伤的影响。给大鼠灌胃1ml无水乙醇前4h灌胃1ml豆油或生理盐水或甘油(后两者均为对照),分别于给乙醇后1、3、5和12h处死;检查胃粘膜和胃酸变化,发现豆油可明显减轻乙醇引起的胃粘膜出血性坏死损伤,这一作用可被预先口服消炎痛(5mg/Kg)——前列腺素(PG)合成的抑制剂——所阻止,提示豆油可能是通过转化为PG起作用的。豆油组的胃酸度或酸排出量比对照组高,可能是由于前者的壁细胞受损较少或恢复了分泌功能所致。     

沙丁胺醇对大鼠支气管平滑肌细胞容量性钙内流的影响

目的:观察沙丁胺醇对正常和IL-13刺激的大鼠支气管平滑肌细胞(rBSMC)胞质Ca2+信号的影响,探讨沙丁胺醇治疗哮喘的作用机制。方法:体外培养大鼠支气管平滑肌细胞,利用共聚焦显微镜测定胞质Ca2+水平,观察沙丁胺醇作用后正常和IL-13刺激后的rBSMC的钙池Ca2+释放和容量性Ca2+内流(CCE)的变化。结果:IL-13 10μg/L处理24 h后,rASMC的Ca2+释放和Ca2+内流均高于正常对照组;10μmol/L沙丁胺醇不影响正常rASMC的Ca2+释放,但是显著抑制CCE;10μmol/L沙丁胺醇对IL-13刺激后的Ca2+释放和CCE的上升均有抑制作用。结论:沙丁胺醇可以抑制Th2细胞因子刺激后的气道平滑肌细胞的容量性Ca2+内流,从而降低胞质Ca2+水平。提示容量性CCE在气道高反应性的发生以及beta 2受体激动剂的治疗效应中具有重要作用。