冬虫夏草对小鼠红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法探讨冬虫夏草结晶制剂（CS-Cr)对小鼠骨髓红系祖细胞（CFU-E和BFU-E）增殖的影响。实验结果表明，CS-Cr明显提高骨髓CFU-E和BFU-E产率、自杀率，并能对抗三尖杉酯碱对造血机能的损害，采用液体培养技术发现CS-Cr促进骨髓成纤维祖细胞（CFU-F）增殖，其产率变化与CFU-E和BFU-E产率变化一致。     

冬虫夏草对小鼠红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法探讨冬虫夏草结晶制剂(CS-Cr)对小鼠骨髓红系祖细胞(CFU-E和BFU-E)增殖的影响。实验结果表明,CS-Cr明显提高骨髓CFU-E和BFU-E产率、自杀率,并能对抗三尖杉酯碱对造血机能的损害。采用液体培养技术发现CS-Cr促进骨髓成纤维祖细胞(CFU-F)增殖,其产率变化与CFU-E和BFU-E产率变化一致。     

三尖杉酯碱对红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法检测三尖杉酯碱(Harringtonine,Ha)促进小鼠骨髓红系祖细胞CFU-E和BFU-E增殖的作用。结果表明,适当剂量的Ha能增强骨髓红系造血机能;如剂量过大反而起抑制作用。双盲实验也表明Ha有促进骨髓CFU-E和BFU-E增殖的作用。     

三尖杉酯碱对红系造血机能的影响

用微量甲基纤维素培养方法检测三尖杉酯碱（Harringtonine,Ha)促进小鼠骨髓红系祖细胞CFU-E和BFU-E增殖的作用。结果表明。适当剂量的Ha能增强骨髓红系造血机能；如剂量过大反而起抑制作用。双盲实验也表明Ha有促进骨髓CFU-E和BFU-E增殖的作用。     

红系造血祖细胞BFU-E、CFU-E体外培养观察

造血祖细胞培养测定是研究造血干细胞增殖情况的重要方法。BFU-E 和CFU-E 是只能向红系分化的红系造血祖细胞的不同亚群,体外培养时需要添加外源性红细胞生成素(EPO)。1971年Stephenson 以血浆凝块为支持物,首次培养成功人的骨髓红系祖细胞。我们采用甲基纤维素为支持物,培养了人的骨髓红系造血祖细胞BFU-E 和CFU-E,并作了定量测定。光学和透射电子显微镜对BFU-E 和CFU-E 的形态进行了观察,此项工作目前国内尚未见报道。     

~(60)COγ线照射后小鼠骨髓红系祖细胞的变化

通过骨髓细胞体外培养法观察了受次致死剂量~(60)C0γ线照射后小鼠骨髓红系造血祖细胞的变化规律。实验测得正常小鼠的每根股骨中BFU-E和CFU-E的总数分別为3.23×10~3和3.97×10~4,经6Gy~(60)C0γ线照后3天,两者分别下降到0.3%和0.5%,骨髓有核细胞数降到正常值的4.6%;照后5天,开始出现回升。发现CFU-GM、CFU-E、BFU-E和骨髓有核细胞数量的降落与增长规律是一致的。因此,用CFU-E和BFU-E同样能够反映机体的造血功能。     

儿童再生障碍性贫血骨髓祖细胞的测定和意义

目的通过对再生障碍性贫血(AA)患儿红系(BFU-E、CFU-E)、粒单核系(CFU-GM)及巨核系(CFU-Meg)祖细胞培养,了解骨髓祖细胞增殖情况.方法抽取47例AA患儿骨髓分别作四类祖细胞培养,在7、14 d测定其集落数.结果 47例AA患儿中,四类集落数均值与对照组比较均有显著下降(P<0.05,P<0.01),且四类集落数均值在AA三种类型中,基本上随病情加重均值逐步下降,其中四类集落数低于对照组下限的患儿分别为BFU-E 36.17%、CFU-E 85.11%、CFU-GM 74.47%、CFU-Meg 91.49%.BFU-E、CFU-GM和CFU-Meg随着患儿疾病的加重,低于对照组下限的患儿百分比同步上升,且三者的表现与外周血三系表现一致,而CFU-E却未见上述现象.结论在部分AA患儿中存在着四类祖细胞培养集落数的下降,且基本上与患儿病情成正比;BFU-E的变化较CFU-E更能代表患儿骨髓红系祖细胞的变化.     

再生障碍性贫血发病机制的初步研究

目的:探讨再生障碍性贫血(再障)的发病机制.方法:采用甲基纤维素半固体培养法及胶原半固体培养法对56例再障患者的骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK进行培养;采用APAAP法及双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)对再障患者外周血T细胞亚群、血清sIL-2R进行检测.结果:再障患者CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK集落数均明显低于对照组(P＜0.01),且严重型再障CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-MK、BFU-MK集落数减少程度较慢性再障更明显;再障患者CD3亚群细胞无变化,CD4亚群细胞减低,CD8亚群细胞增高,CD4/CD8降低,重型再障患者血清sIL-2R中水平明显高于对照组(均P＜0.01). 结论:骨髓造血祖细胞数量减少是再障发病的重要因素,其减少程度与再障的病情有关;细胞免疫功能异常及造血负调控因子可能在再障发病中起一定的作用.     

当归多糖对人红系造血祖细胞增殖的影响及其机理研究

采用造血祖细胞体外培养、造血生长因子生物活性检测等实验血液学技术，研究当归多糖（AP）对人红系造血祖细胞（BFU-E，CFU-E）增殖调控的影响及其机理，结果表明，AP能显著促进BFU-E，CFU-E的集落形成/经AP诱导制备的脾细胞，胸腺细胞和骨髓基质细胞培养上清液能提高BFU-E的集落产率；AP能协同IL-3和红细胞生长素（Epo)促进BFU-E生长，研究提示，AP有可能直接刺激BFU-E，CFU-ZE增殖。亦可能通过促进机体产生红系造敌国生长因子和/或协同这些因子的作用等途径。进而促进机体的红系血发生。     

再生障碍性贫血患者造血祖细胞及免疫机制的研究

目的探讨再生障碍性贫血(再障)的发病机制。方法采用甲基纤维素及胶原半固体培养法对56例再障骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-M K、BFU-M K进行培养;采用APAAP法及双抗体夹心酶联免疫吸附法(EL ISA)对再障患者外周血T细胞亚群、血清sIL-2R进行检测。结果再障患者CFU-GM、CFU-E、BFU-E及CFU-M K、BFU-M K集落数均低于对照组,且严重型再障集落数减少程度与慢性再障相近;再障患者CD 3亚群细胞无变化,CD 4亚群细胞减低,CD 8亚群细胞增高,CD 4/CD 8降低,重型再障患者血清sIL-2R中水平高于正常对照组与慢性再障。结论骨髓造血祖细胞数量减少是再障发病的重要因素,其减少程度与再障的病情有关;细胞免疫功能异常及造血负调控因子可能在再障发病中起一定的作用。     

不同部位的巨噬细胞培养上清液对小鼠红系血细胞发生的影响

目的:探讨腹腔、肺泡和肝脏的巨噬细胞培养上清液对小鼠早期红系造血祖细胞[用红系爆式集落形成单位(BFU-E)表示]和晚期红系造血祖细胞[用晚期红系集落形成单位(CFU-E)表示]发生的影响.方法:采用造血祖细胞体外培养技术观察3种不同部位的巨噬细胞培养上清液对BFU-E和CFU-E集落数的影响.结果与结论:3种培养上清液均能促进BFU-E和CFU-E的分化与增殖,而肺泡巨噬细胞培养上清液的上述作用更明显.     

Effect of Cordyceps sinensis on erythropoiesis in mouse bone marrow.

The effect of Cordyceps sinensis crystal (CS-Cr) on stimulating proliferation of erythroid progenitor cells (CFU-E and BFU-E) in LACA mouse marrow in vivo and in vitro by methyl cellulose gel culture system is reported. The numbers of CFU-E and BFU-E were increased after 5 consecutive daily treatment with 100, 150 and 200 mg/kg of CS-Cr with a peak at 150 mg/kg. Higher doses (> 150 mg/kg) of CS-Cr resulted in a reduction of the peak of CFU-E and BFU-E and then, the numbers returned to the control level with increased doses. The cytosine arabinoside (Ara-C) suicide test showed significant increases in the percentage of CFU-E and BFU-E in S-phase after CS-Cr treatment. Pretreatment of mice with CS-Cr could protect CFU-E and BFU-E against the cytotoxic agent--harringtonine. Addition of CS-Cr to culture system also promoted the generation of CFU-E and BFU-E at concentrations of 150-200 micrograms/ml in vitro. With a liquid culture technique, a stimulatory action of CS-Cr on fibroblast colony-forming units (CFU-F) proliferation was seen in vivo and in vitro.

     

组胺受体激动剂及其拮抗剂对红系祖细胞产率的影响

研究组胺及其拮抗剂对早期和晚期红系祖细胞(BFU-E 和CFU-E)产率的影响。结果表明,一定浓度的组胺和2—噻唑乙胺对CFU-E和BFU-E的产率均产生抑制效应,而4—甲基组胺则无此作用;事先用甲苯苄二胺阻断H_1-受体,能减弱组胺对CFU-E和BFU-E的抑制效应;相同条件下用甲氰咪胍阴断H_2-受体无此效应。提示组胺对红系祖细胞的抑制效应系通过组胺H_1—受体所介导。     

川芎嗪对辐射致血虚证小鼠骨髓细胞蛋白质表达的影响

目的:观察川芎嗪对辐射致血虚证小鼠骨髓细胞蛋白质表达的影响,探讨川芎嗪补血作用的分子机制。方法:采用3.5 Gy60Coγ射线全身1次性照射,制备小鼠血虚证模型;骨髓集落细胞培养,观察并计数粒系-巨噬细胞集落生成单位(CFU-GM)、爆增型红细胞集落生成单位(BFU-E)、红细胞集落生成单位(CFU-E)、混合集落生成单位(CFU-mix)集落数;利用蛋白质组学寻找差异表达蛋白质。结果:辐射后小鼠骨髓CFU-GM、BFU-E、CFU-E、CFU-mix集落数明显减少,川芎嗪能使其显著回升并部分逆转辐射后蛋白质表达的变化,使小鼠骨髓细胞5种蛋白质表达回升,5种回落。结论:川芎嗪可促进辐射致血虚证小鼠骨髓造血祖细胞增殖,调节多种骨髓细胞蛋白质的表达,后者可能是川芎嗪促进造血细胞生长和增殖的重要机制之一。     

组胺受体激动剂及其拮抗剂对红系祖细胞产率的影响

研究组胺及其拮抗剂对早期和晚期红系祖细胞（BFU-E和CFU-E）产率的影响。结果表明，一定浓度的组胺和2-噻唑乙胺对CFU-E和BFU-E的产率均产生抑制效应，而4-甲基组胺则无此作用；事先用甲苯苄二胺阻断H1-受体，能减弱组胺对CFU-E和BFU-E的抑制效应；相同条件下用甲氰咪胍阻断H2-受体无此效应，提示组胺对红系祖细胞的抑制效应系通过组胺H1-受体所介导。     

国产红细胞生成素对人体胎肝细胞形成红系集落的刺激作用

国产红细胞生成素(EPO)刺激妊娠4～5个月的胎肝红系祖细胞(BFU-E、CFU-E)形成集落,CFU-E集落的峰值出现于培养后48小时,BFU-E在7～10天借助于血红蛋白的特征可直接观察。CFU-E的产率与种入的细胞数呈线性关系,并与EPO浓度密切相关,100mu/ml培养物时集落计数最高。     

补肾泻肝方药对再生障碍性贫血患者骨髓造血祖细胞的影响

为研究补肾泻肝方药治疗再生障碍性贫血的机理,将25例再障患（其中肾阴虚14例,肾阳虚11例）的骨髓进行体外培养,观察不同中药复方[滋肾阴（Ⅰ）、泻肝炎（Ⅱ）、温肾阳（Ⅲ）、补肾泻肝（Ⅳ）]和细胞因子（IL-2、IRN-γ）对其红系、粒-巨噬系造血祖细胞（CFU-E、BFE-U、CFU-GM）集落形成的影响。结果：Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ方对CFU-E、BFU-E、CFU-GM均有促进作用,Ⅳ方的作用尤其明显,而Ⅱ方无此作用;IL-2、IFN-γ对上述指标有抑制作用;加入Ⅱ、Ⅳ方后能减除这种抑制,但Ⅰ、Ⅲ方无此作用。提示：补肾泻肝方药是治疗再障的有效处方,减除IL-2、IRN-γ对造血祖细胞的抑制、促进CFU-E、BFU-E、CFU-GM的形成是其治疗再障的重要机理。     

川芎嗪对血虚证小鼠骨髓细胞IL-4R和IL-7R基因表达的作用

目的：考察川芎嗪对辐射致血虚证小鼠骨髓细胞IL-4R和IL-7R基困表达的影响，为阐明川芎嗪的补血机制提供依据。方法：采用3.5Gy^60Coγ射线全身1次性照射制各小鼠血虚证模型；骨髓集落培养计数CFU-GM、CFU-E、BFU—E、CFU-mix；RT-PCR检测骨髓IL-4R和IL-7R基因表达。结果：川芎嗪显著升高放射线致血虚证小鼠骨髓CFU-GM、CFU-E、BFU-E、CFU-mix数量，上调骨髓细胞IL-4R和IL-7R基因表达。结论：川芎嗪促进骨髓细脆IL-4R和IL-7R基因表达明能是其升血和调节免疫功能的机制之一。     

红系祖细胞体外培养获得成功

红系祖细胞(BFU-E、CFU-E)体外培养过去在国内尚未开展。1983年11月在泰安召开的全国造血、止血、血栓学术会上,成立了全国造血细胞培养技术协作组,哈医大是核心成员之一。为了填补国内此项空白,会议决定委托哈医大负责建立红系祖细胞体外培养技术,约定1984年再次开会进行交流推广。经过努力,红系祖细胞BFU-E 及CFU-E体外培养获得成功,细胞集落生长良好,提前完成了任务,并应用于临床测定正常人13例、白血病及其他血液病患者45例,操作过程由哈医大电教室编制了录像片。1984年10月在南昌召开了全国造血细胞培     

四川省1996年医学科研进展(下)

(一)造血干细胞体外培养临床应用研究建立了CFU-GM、BFU-E/CFU-E的体外培养技术,在国内首先引进了PICke的L-CFU的培养方法,经过十多年的临床应用和研究取得如下结果: 1.证实了ANLL的CFU-GM和L-CFU的生长方式,和诱导化疗后CR率的生存期有关。提出可作为该病患者预后的二项指标;2.查明了再障和MDS患者CFU-G生长特点,以及此二病的发病机理都与造血干细胞缺陷、免疫抑制或造血微环境受损有关;3.证明了尿毒症患者贫血的发生与其血浆中存在对BFU-E和CFU-E的抑制物质有关;4.证明纯红再障和1例纯白再