荧光染色体原位杂交技术在产前诊断中的应用

目的 建立并优化荧光染色体原位杂交技术并评价其在胎儿21、18、13、X和Y染色体数目异常产前诊断中的临床应用价值.方法 常规穿刺取羊水或脐带血样本196例,经低渗、固定、制片、老化等,直接利用两组特异性探针(GLP 13/GLP 21和CSP18/CSP X/CSP Y)进行原位杂交,快速检测羊水或脐带血细胞中21、18、13、X和Y染色体的数目,并同时对样本进行经典的细胞培养和染色体核型分析.结果 以≥90％的细胞显示的荧光信号点数目作为染色体数目的判断标准,正常情况下GLP 13/GLP 21探针组显示2个绿色荧光点/2个红色荧光点,CSP18/CSP X/CSPY探针组显示2个蓝绿色荧光点/2个黄色荧光点(女性)或者2个蓝色荧光点/1个黄色荧光点/1个红色荧光点(男性).196例羊水或脐血均在72～96h内给出报告,检出21三体综合征7例、l8三体综合征2例、性染色体异常(47,XYY)1例,与1个月后报告的染色体核型分析结果一致.结论 荧光染色体原位杂交方法可用于快速产前诊断胎儿21、18、13、X、Y染色体数目异常,与常规的染色体核型分析技术结合,可快速准确地检测胎儿染色体的非整倍体异常.     

荧光标记染色体原位杂交技术及其应用

介绍了荧光标记染色体原位杂交技术的基本过程，各种探针的特点、用途及制备方法，并叙述了此技术在基因定位、生物剂量估计和临床诊断等领域里的广泛应用。     

染色体核型联合染色体微阵列分析在胚胎停育诊断中的应用价值

目的 探讨染色体核型分析联合染色体微阵列分析(CMA)在孕早期胚胎停育遗传学诊断中的临床应用价值。方法 收集2019年6月-2020年6月因早期胚胎停育于石家庄市第四医院产前诊断中心就诊的194例患者的临床信息及胚胎停育组织。对入组胚胎停育组织依次采用传统染色体核型分析及CMA进行染色体分析,结合胚胎染色体检测结果进行亲缘性溯源检测并汇总、分析染色体核型分析/CMA结果。结果 (1)所有患者入组平均34.1(22～45)岁,其中120例(61.9%,120/194)>35岁;孕周平均9.75(7～14)周,其中144例(74.2%,144/194)<10周。存在不良孕产史的101例(52.1%,101/194)孕妇中,79例(78.2%,79/101)有胚胎停育史,22例有自然流产史(21.8%,22/101)。(2)124例(63.9%,124/194)核型异常者中,三体89例(71.8%,89/124),单体15例(12.1%,15/124),三倍体11例(8.9%,11/124),嵌合体8例(6.4%,8/124),结构异常1例(0.8%,1/124)。(3)33例仅...     

荧光原位杂交技术在辐射剂量学中应用进展

荧光原位杂交技术在辐射剂量学中应用进展姜涛作者单位：１０００８８北京，卫生部工业卫生实验所早在六十年代，当染色体分析技术开始用于辐射剂量估算时，一些染色体工程学者就打趣说：“如果生物学家能将每一条染色体涂染成不同颜色，一切就将变得简单得多”。三十年后...     

荧光原位杂交技术检测细胞内在放射敏感性的研究

长期以来 ,细胞的内在放射敏感性在放射生物学和肿瘤学领域中是研究的焦点之一 ,在放疗前预测个体肿瘤和正常组织对辐射的反应 ,可使临床医生选择合适的治疗方案 ,提高治愈率 ,减少并发症[1 ] 。研究发现 ,辐射诱发的染色体畸变与细胞放射敏感性有很好的相关性 ,有望成为细胞内在放射敏感性的预测指标[2 ] 。但在应用于临床之前 ,尚需进行大量的基础性工作。笔者应用ＦＩＳＨ技术及噻唑蓝比色法(ＭＴＴ法 )研究了辐射诱发的染色体畸变细胞率与细胞内在放射敏感性之间的关系。一、材料和方法1 细胞系和培养 :人成纤维细胞系ＧＭ6 37,ＡＴ5…     

微核着丝粒的荧光原位杂交技术在辐射研究中的应用

微核分析因其在遗传毒理学和辐射生物剂量学中的广泛应用而受到人们关注。近年来，随着分子遗传学及荧光原位杂交（FISH）技术的发展，人们对微核有了进一步的认识。FISH技术能用于解释微核的形成机理、功能及微核的超微结构，并可用于辐射损伤的遗传学评价。     

荧光原位杂交技术在石油化工业探伤人员剂量重建中的应用研究

目的对早年从事放射工作的人员进行剂量重建。方法用1^#、4^#全染色体探针进行荧光原位杂交(FISH)分析了22名探伤人员及10名对照者的染色体畸变。结果探伤人员染色体易位率、总畸变率显著高于对照组，二者差异有统计学意义；染色体易位率随探伤工龄增加而增加；探伤人员生物剂量与物理剂量比较基本一致。结论用FISH方法检测染色体畸变对早期受照射人员进行剂量重建是可行的。     

微核着丝粒的荧光原位杂交技术在辐射研究中的应用

微核分析因其在遗传毒理学和辐射生物剂量学中的广泛应用而受到人们关注。近年来,随着分子遗传学及荧光原位杂交(FISH)技术的发展,人们对微核有了进一步的认识。FISH技术能用于解释微核的形成机理、功能及微核的超微结构,并可用于辐射损伤的遗传学评价。     

荧光原位杂交技术分析大剂量照射后Calyculin A诱导的早熟凝集染色体

目的 探索用荧光原位杂交(FISH)技术分析大剂量照射后Calyculin A(CA)诱导的早熟凝集染色体的可行性.方法 采用X射线照射离体外周血,吸收剂量为0、1、5、10、15和20 Gy.RPMI 1640培养基培养,CA诱导染色体早熟凝集,1、4号全染色体探针荧光原位杂交,荧光显微镜下观察,计数畸变阳性细胞数及两条染色体断片数,拟合剂量效应曲线.结果 以阳性细胞作为观察对象,剂量范围在0~15 Gy时,阳性细胞数和照射剂量呈现良好的剂量-效应关系,Y=0.008+0.065D+1.858×10^-5D²(R²=0.994).以断片数作为观察对象,剂量范围在0~20 Gy 时,同样呈现良好的剂量-效应关系:Y=-0.032+0.216D-0.01D²(R²=1.0).结论 用FISH分析CA诱导的早熟凝集染色体,可用于估算大剂量照射后的生物剂量.     

多色荧光原位杂交技术的建立及其在早先受照射者剂量重建中的应用

目的 建立多色荧光原位杂交方法，并探讨用该方法进行早先辐射受照射者的剂量重建的可行性。方法 筛选8对染色体端粒和着丝粒特异性人工细菌染色体(BAC)克隆，建立多色荧光原位杂交方法，用该方法分析^60Coγ射线离体照射的新生儿脐带血淋巴细胞染色体畸变，并建立相应的标准剂量—效应曲线，参照标准剂量—效应曲线来估算两例早先受照射者的累积吸收剂量。结果 本研究中建立的多色荧光原位杂交方法用生物素和(或)地高辛将端粒和着丝粒BACDNA标记成绿、红、黄(绿 红)3种荧光染色，使得1，2，3，7，8，9，14和15号染色体很容易辨认。用该方法分析受^60Coγ射线照射的新生儿脐带血淋巴细胞染色体畸变，除断片外，其他染色体畸变的剂量—效应曲线均为线性二次剂量反应模式。用所有细胞或稳定性细胞中的完全相互易位率作指标，估算了两例早先受射照者的吸收剂量。结论 本研究所建立的多色荧光原位杂交方法可以用来进行早先受照射者的剂量重建。     

染色体微阵列分析技术在侧脑室增宽胎儿产前诊断中的应用价值

目的 应用染色体微阵列分析技术(CMA)在全基因组水平分析侧脑室增宽胎儿的遗传学病因,探讨胎儿侧脑室增宽与染色体拷贝数变异(CNVs)的相关性及CMA检测在侧脑室增宽胎儿产前诊断中的应用价值.方法 选取2015年1月-2016年11月在第四军医大学西京医院就诊并接受介入性产前诊断的70例孕中/晚期超声提示胎儿侧脑室宽大于1.0cm且标准G显带染色体核型分析正常或G显带染色体核型分析不能确定的染色体异常胎儿样本,应用Affymetrix CytoScanTM750k芯片进行CMA检测,根据相关生物信息学数据库对CMA检测结果进行全面分析,并定期复查胎儿的发育情况,随访妊娠结局及胎儿出生后的生长发育状况.结果 在70例侧脑室增宽胎儿中,CMA检测发现9例胎儿存在致病性CNVs,3例胎儿存在意义不明确、可能致病的CNVs,1例胎儿存在意义不明确、可能致病的杂合性缺失(LOH).在70例侧脑室增宽胎儿中,重度非孤立性侧脑室增宽6例,其中致病性CNVs 2例(33.3％,2/6);重度孤立性侧脑室增宽3例,未检出致病性CNVs,意义不明确、可能致病CNVs 1例(33.3％,1/3);轻度非孤立性侧脑室增宽31例,其中致病性CNVs 6例(19.4％,6/31),意义不明确、可能致病CNVs 2例(6.5％,2/31);轻度孤立性侧脑室增宽30例,其中致病性CNVs 1例(3.3％,1/30),意义不明确、可能致病CNVs 1例(3.3％,1/30).结论 CMA可更有效地检测出传统核型分析无法识别的微缺失、微重复等染色体异常,对侧脑室增宽的胎儿进行CMA检测能够提高异常检出率,对临床产前诊断及遗传咨询具有重要价值.     

荧光原位杂交技术在膀胱癌早期诊断中的作用

目的通过荧光原位杂交(FISH)技术检测尿液内脱落细胞染色体异常情况,以提高膀胱癌早期诊断率,减少患者膀胱镜检查次数。方法应用FISH技术分析110例血尿患者尿脱落细胞染色体异常情况,其中包括膀胱癌86例、泌尿系感染12例、滤泡增生(腺性膀胱炎)4例、良性肿瘤(乳头状瘤)4例、不明原因血尿4例。上述患者均经膀胱镜组织活检确诊。比较FISH检测与病理切片检查在确诊膀胱肿瘤上的区别。结果 86例膀胱癌患者中有68例FISH检测结果为阳性,剩余18例FISH检测为阴性的膀胱癌患者中有10例为小于5mm的Ta期浅表膀胱癌。与病理学检查结果比较,FISH检测的特异性为100%,敏感性为87%。FISH检测结果发现T1及T2期膀胱癌细胞染色体异常数目明显高于Ta期膀胱肿瘤(P<0.05),但在T1及T2期膀胱肿瘤间差异无统计学意义(P>0.05)。结论 FISH检测具有敏感性高、特异性强、无创伤等优点,在初步诊断及监测膀胱癌复发方面具有较好的临床应用前景,有可能成为简便、有效的膀胱癌初筛指标之一。     

染色体分析在辐射生物剂量学中应用的新进展

已经证明，双着丝粒畸变分析可应用于辐射生物剂量学的许多场合，如细胞遗传学与物理学方法结合可用来估算最近发生的严重过量照射。对于内科医生来说，剂量信息是很重要的，因剂量可能和随机或确定的健康风险有关。讨论了一种新近发展的用来观察稳定性易位的荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）法及其作为回顾性剂量计应用的有关课题，如一次全身均匀照射后１１ 年获得可信的剂量估算。值得注意的是，离体实验表明，非均一或局部照射可能导致易位率随时间降低。最后对ＦＩＳＨ法所要求的工作量和其对低剂量的分辨能力的局限性进行了评论，这是在发生广泛的核素环境污染后用该方法进行人群的回顾性剂量评估所必须考虑的。     

多色荧光原位杂交显带技术在高、低传能线密度辐射损伤中的应用

淋巴细胞染色体畸变率与电离辐射密切相关,并且已经广泛应用于辐射损伤的生物剂量评估.多色荧光原位杂交显带技术(mBAND)是染色体畸变检测的重要新兴技术,并且逐步应用于不同传能线密度(LET)射线所引起的染色体畸变检测.该文对mBAND技术在X、γ射线所属的低LET射线和太空射线及高能重离子流所属的高LET射线中的应用,二者引起不同染色体畸变类型以及产生的不同辐射生物剂量效能作综合阐述.     

荧光原位杂交法检测c-erbB-2基因在大肠癌中的表达与意义

2007年1月～2007年6月我们应用荧光原位杂交技术（Fluorscence in situ hybridization,nsH）检测大肠癌组织中c-erbB-2基因扩增情况,并分析其与大肠癌的发生、发展、分类、分级、分期、5年存活率和淋巴结转移的关系。     

无创DNA产前检测在高龄孕妇胎儿染色体异常诊断中应用价值

目的探讨无创DNA产前检测(NIPT)在高龄孕妇胎儿非整倍体染色体疾病产前筛查中的临床应用价值。方法回顾性分析自2015年12月至2018年3月于解放军967医院优生优育中心就诊的587例进行NIPT的高龄孕妇临床资料。按年龄将孕妇分为35～39岁组(n=425)与年龄≥40岁组(n=162)。采用NIPT高通量测序检测孕妇外周血中胎儿游离DNA。检测结果提示,21-三体、18-三体、13-三体及性染色体高风险者行羊膜腔穿刺抽取羊水进行羊水胎儿染色体核型分析。对检测结果提示低风险者通过电话随访进行验证。结果 587例受检者NIPT检测结果提示,胎儿非整倍体染色体异常高风险者11例,其中,21-三体6例,18-三体3例,13-三体2例;性染色体异常(45,XO;47,XXX)2例。NIPT检测阳性率为2.21%(13/587)。13例高风险孕妇行羊水染色体核型结果显示,21-三体6例,18-三体2例,13-三体1例,性染色体异常2例。应用NIPT后介入性产前诊断率为1.87%;其中21-三体阳性预测值为100.00%(6/6),18-三体阳性预测值为66.67%(2/3),13-三体阳性预测值为50.00%(1/2),性染色体阳性预测值为100.00%(2/2)。35～39岁年龄组染色体异常高风险发生率为1.18%(5/425),年龄≥40岁组染色体异常高风险发生率为4.94%(8/162),两组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 NIPT检测对高龄孕妇胎儿21-三体、18-三体及性染色体符合率较高,可明显减少高龄孕妇介入性产前诊断,提高产前筛查的准确性。     

用荧光原位杂交技术建立~(60)Coγ射线诱发人外周血淋巴细胞染色体易位率剂量效应曲线及易位的持续性研究

目的　研究不同剂量6 0 Coγ射线诱发人外周血淋巴细胞染色体易位率和辐射剂量间的剂量效应关系以及观察易位率在同一剂量、不同时相点的变化。方法　采用荧光原位杂交技术和连续Giemsa法 ,用 4号和 7号全染色体探针分析 0、0 2 5、0 5、0 75、1和 2Gy6 0 Coγ射线离体照射诱发人外周血淋巴细胞染色体易位率 ,同时对两个剂量点进行 5 2和 72h培养 ,比较其易位率。结果　易位率和辐射剂量间的量效关系可以用一个二次多项式方程Y =0 0 0 30 0 0 134D 0 0 16 5D2 来描述 ;易位率在 5 2和 72h培养时差异无显著性。结论　易位率和辐射剂量间存在良好的量效关系 ,可作为进行早先照射剂量重建的理论依据     

临床微生物检测中荧光定量PCR技术的应用研究

目的 探讨在临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术的临床价值.方法 选择2018年5月-2019年6月收治100例患者作为研究对象,观察采集标本在临床微生物检测中应用荧光定量PCR技术的检测结果.结果 60例粪便标本中,检出沙门菌20株,检出率为33.33％,副溶血性弧菌12株,检出率为20.00％,肠出血性大肠杆菌O...     

MRI联合超声与染色体微阵列分析技术在中枢神经系统异常胎儿产前的应用

目的 探讨核磁共振(MRI)联合超声(US)与染色体微阵列分析技术(chromosomal microarry analysis,CMA)在中枢神经系统异常胎儿产前诊断中的应用.方法 选取我院接受治疗的226例怀疑中枢神经系统异常胎儿的孕妇为此次观察的对象,所有孕妇胎儿均接受MRI联合US与CMA进行相关的检查.比较在...