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1.
目的 探讨康莱特注射液(KLT)诱导肝癌细胞HepG2凋亡的作用机制.方法 用不同浓度的KLT培养肝癌细胞HepG2,应用流式细胞仪检测HepG2凋亡细胞的发生,应用ELISA法检测相关凋亡蛋白Bcl-2的变化.结果 流式细胞术证实KLT可诱导肝癌细胞HepG2凋亡(P<0.01), 且具有时间、剂量依赖关系.KLT处理组HepG2细胞中Bcl-2蛋白的表达分别为(16.91±0.20)units/ml、(10.78±1.41)units/ml和(7.66±0.64)units/ml,对照组为(22.65±2.83)units/ml.结论 KLT可诱导肝癌细胞HepG2凋亡;且KLT诱导HepG2细胞凋亡过程中,Bcl-2蛋白表达的下调对调控细胞凋亡有重要作用. 相似文献
2.
目的 研究胰岛素样生长因子Ⅱ(insulin-like growth factor Ⅱ,IGF-Ⅱ)对阿霉素(adriamycin,ADM)诱导的人肝癌细胞HepG2凋亡的影响及其与凋亡抑制蛋白survivin表达的关系.方法 实验分组:A组:空白对照组;B组:200 ng/ml ADM组;C组:2 n/ml IGF-Ⅱ+200 ng/ml ADM组;D组:20 ng/ml IGF-Ⅱ+200 ng/ml ADM组;E组:200 ng/ml IGF-Ⅱ+200 ng/ml ADM组,分别处理HepG2细胞48 h后,应用MTF检测各组细胞活力,流式细胞仪检测细胞的凋亡率,Western blot检测细胞中survivin蛋白的表达.结果 A、B、C、D、E组的HepG2细胞活力分别为:0.568±0.025、0.201±0.020、0.232±0.027、0.268±0.013、0.304±0.019,凋亡率分别为:6.9%±1.3%、35.4%±2.1%、31.2%±2.2%、26.4%±1.7%、21.7%±1.9%,survivin与β-actin的比值分别为:0.527±0.039、0.147±0.081、0.311±0.069、0.421±0.033、0.469±0.031,结果显示IGF-Ⅱ+ADM组的HepG2细胞活力较ADM组明显好转(P<0.01),凋亡率显著降低(P<0.01),IGF-Ⅱ+ADM组的HepG2细胞中survivin蛋白的表达较ADM组明显增高(P<0.01),且IGF-Ⅱ的上述作用随IGF-Ⅱ浓度的增高而增强(P<0.05).结论 IGF-Ⅱ能够上调HepG2细胞中survivin蛋白的表达,拮抗ADM诱导的HepG2细胞凋亡. 相似文献
3.
蛋白激酶C-α反义核酸对人肝癌细胞HepG2体外增殖及凋亡的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
目的 探讨蛋白激酶 (PK )C α反义寡核苷酸 (asODN)对人肝癌细胞HepG2体外增殖及凋亡的影响。方法 用RPMI 164 0体外培养和传代HepG2细胞 ,以脂质体 (LP)介导不同浓度PKC αasODN转染人肝癌细胞HepG2 ,四甲基偶氮唑蓝 (MTT)比色法检测其生长指数 (GI) ,软琼脂克隆形成法检测其克隆形成率 ,流式细胞术 (FCM )检测其凋亡率。结果 0 .10~ 1.0 0 μmol/L的PKC αasODN能显著降低HepG2细胞GI(P <0 .0 5 ) ;0 .0 5~ 1.0 0 μmol/L的PKC αasODN能显著降低其软琼脂克隆形成率 (P <0 .0 1) ,两者均具有量效依赖关系。 0 .5 0~ 1.0 0 μmol/L的PKC αa sODN可使HepG2细胞发生显著凋亡 (P <0 .0 1)。结论 通过PKC αasODN阻断人肝癌细胞HepG2信号转导分子PKC α ,可有效抑制HepG2体外生长增殖 ,并可诱导其凋亡 相似文献
4.
目的探讨蛋白酶体抑制剂Vekade诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡的作用和机制。方法以不同浓度Velcade处理HepG2细胞24h和48h。四甲基偶氮唑蓝比色法评价细胞生长情况;流式细胞术检测细胞凋亡;Westernblot测定caspase3改变;RT—PCR检测Bcl-2家族、CyclinA和CyclinDmRNA的表达。结果不同Velcade浓度(32、64、128、256、512nmol/L)处理HepG2细胞48h后,细胞活性较对照组明显减少(分别是91.4%±2.1%、75.0%±3.7%、57.3%±1.6%、52.7%±1.6%和31.4%±2.6%),与对照组(100.0%±1.7%)比较具有显著性差异(P〈0.05)。128nmol/L的Velcade处理HepG2细胞,48h流式细胞仪检测结果显示SubGl细胞百分数明显升高,SubGl细胞百分数(27.3%±5.3%),与对照组(4.3%±0.5%)差别显著(P〈0.05),同时,Pro—caspase3明显下降;但Velcade对Bcl-2家族表达无明显影响;Velcade诱导HepG2细胞G2/M阻滞,抑制CyclinA和CyclinD表达。结论Velcade诱导肝癌细胞凋亡不通过改变Bcl-2家族表达,可能存在其它途径;Velcade诱导肝癌细胞G2/M周期阻滞与调节通过下调CyclinA和CyclinD表达相关。 相似文献
5.
目的探讨不同温度热疗对人肝癌细胞Hep G2的凋亡作用。方法人肝癌Hep G2细胞常规方法培养,采用水浴加热法对实验组(41℃,42℃,43℃)和对照组(37℃)细胞进行加温(0.5 h)处理,处理后继续培养24 h。采用流式细胞术检测细胞的凋亡情况,免疫组织化学技术检测细胞凋亡相关蛋白P53的水平,实时荧光定量PCR法检测热疗作用后生存素(Survivin),caspase-9基因mRNA的表达变化。应用SPSS16.0软件进行统计学分析。凋亡率、P53蛋白值、caspase-9 mRNA表达水平等计量资料采用均数±标准差表示,组间比较采用t检验或方差分析。P0.05差异有统计学意义。结果在37℃,41℃,42℃,43℃,细胞凋亡率分别为(9.58±1.22)%、(16.47±3.41)%、(20.07±1.85)%和(23.42±1.93)%;P53蛋白表达OD值分别为(0.083±0.015)、(0.145±0.024)、(0.267±0.031)、(0.389±0.019)。与对照组比较,survivin基因mRNA的表达量下降(P0.05),caspase-9基因mRNA的表达显著增加(P0.05)。不同温度热疗后,随着加热温度的增高,细胞凋亡率增加,促进了基因p53及caspase-9的表达,凋亡抑制基因survivin的表达量下降。结论通过热疗可以增加p53及caspase-9基因的表达,抑制survivin基因的表达,从而诱导肝癌Hep G2细胞凋亡。 相似文献
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10-HCPT对人肝癌细胞HepG2体外生长及凋亡的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
我们观察了 10 羟基喜树碱(10 HCPT)对人肝癌细胞株HepG2体外生长及其凋亡率的影响,为10 HCPT在肝癌辅助治疗中的应用提供了实验依据。材料与方法一、材料人肝癌HepG2 细胞株(HepG2)由重庆医科大学肝脏病研究所提供。10 HCPT由中国医学科学院药植所新药中心提供。二、方法1 相似文献
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目的:探讨在茉莉酸甲酯(MeJA)诱导HepG2细胞凋亡过程中的端粒酶活性变化.方法:RT-PCR检测HepG2细胞中hTERTmRNA表达,免疫细胞化学检测 HepG2细胞端粒酶蛋白表达.结果:MeJA作用HepG2细胞48h后,hTE RTmRNA表达水平明显下降(P<0.05);端粒酶蛋白表达水平明显降低(P<0.01).结论:MeJA通过下调hTERT mRNA及其蛋白的表达,引起HepG2细胞凋亡,从而发挥抗肝癌作用. 相似文献
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9.
目的 观察槲皮素对HepG2细胞增殖和凋亡的影响并探讨其机制.方法 选用槲皮素12.5、25.0、50.0、100.0、200.0 μmol/L为实验浓度梯度,采用噻唑蓝(MTT)比色法及流式细胞检测技术检测人肝癌HepG2细胞对槲皮素的敏感性;应用免疫细胞化学及逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测细胞中已糖激酶蛋白及mRNA的表达.结果 槲皮素对肝癌HepG2细胞的增殖呈浓度依赖性的抑制作用,以上各浓度抑制率分别为10.1%、20.4%、35.6%、59.8%、70.2%;诱导细胞凋亡率分别为9.7%、15.2%、22.6%、31.7%、42.3%:100 μmol/L槲皮素作用HepG2细胞48 h前后已糖激酶蛋白表达的灰度值分别为128.33±13.27、193.18±12.36;与β-肌动蛋白(β-actin)mRNA表达的吸光度(A)值分别为0.3747±0.1356、0.2058±0.1172.结论 槲皮素对肝癌HepG2细胞具有生长抑制作用,并通过抑制己精激酶的表达来促进细胞凋亡. 相似文献
10.
目的探讨甲基强的松龙(MP)对人肝癌HepG2细胞系增殖的影响。方法采用细胞培养、AnnexⅤ免疫荧光染色和流式细胞术定量分析,检测了细胞周期分布及细胞凋亡情况。结果与对照组比较,MP作用于人肝癌HepG2细胞系后其G0/G1期细胞比率增加,S期细胞比率减少(P<0.01),且与作用时间呈正相关(r=0.85,P<0.01);细胞凋亡率及坏死率随MP浓度增加而增高;早期凋亡细胞呈细胞膜绿色荧光。结论MP诱使人肝癌HepG2细胞发生G0/G1期阻滞,具有抑制细胞增殖的作用。 相似文献
11.
目的 探讨顺铂增加TRAIL诱导肝癌细胞HepG2凋亡的分子机制,提供TRAIL应用肝癌临床治疗的一种新的用药模式。方法 以肝癌细胞HepG2为研究对象,应用流式细胞仪分析顺铂联合应用TRAIL对细胞周期的影响,Western blot检测顺铂作用前后HepG2细胞在TRAIL诱导凋亡过程中Caspase-8、Caspase-3、DR4、DR、DcR,c—FLIP及RIP的表达变化。结果 顺铂能够增强TRAIL诱导HepG2细胞凋亡的能力,两者联合应用具有明显的协同作用,顺铂预先处理能够下调c-FLIP及RIP的表达及增加DR的表达。结论 TRAIL联合顺铂可以诱导肝癌细胞HepG2凋亡,其机制是通过下调c-FLIP及RIP的表达,解除Caspase-8受抑,恢复凋亡信号的传导来实现的。死亡受体D&的表达上调也可能参与了这一变化过程。 相似文献
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目的 探讨三磷酸肌醇(IP3)和PTEN基因表达变化在quercetin诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 以肝癌HepG2细胞为空白对照,以不同浓度quercetin作用于HepG2细胞不同时间后,应用同位素试剂盒检测细胞IP3含量,RT-PCR分析PTEN mRNA表达,Westernblotting分析细胞PTEN蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 各浓度的quercetin作用于肝癌HepG2细胞,IP3含量显著低于对照组(17.9±1.5、15.5±1.1、5.7±0.9、5.5±0.8 VS 29.4±0.5),PTEN mRNA表达与对照组无显著差异,mN蛋白表达显著高于对照组(0.55±0.02、0.67±0.02、0.94±0.04、0.95±0.03 VS 0.02±0.002),细胞凋亡率显著高于对照组.60 μmol/L quercetin作用于肝癌HepG2细胞6 h、12 h、24 h、48 h、72 h,各时相IP3含量显著低于对照组(23.3±1.4、12.0±1.4、7.5±0.8、5.6±0.5、4.3±0.6 v8 29.2±0.6,P<0.01).PTEN mRNA表达与对照组无显著差异,12 h后各时项PTEN蛋白表达显著高于对照组,24 h后各时相细胞凋亡率为显著高于对照组(P<0.01).结论 Quercetin能减少IP3生成,上调PTEN蛋白,诱导肝癌细胞凋亡. 相似文献
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目的 探讨脂质体介导LIGHT基因和IFN-γ转染诱导肝癌HepG2细胞的促凋亡作用.方法 以脂质体介导LIGHT基因和IFN-γ转染肝癌HepG2细胞,设立转染组(单转、联合转染组)和对照组(未转染组).分别于转染后12、24、48 h检测肝癌HepG2细胞的凋亡率、Bcl-2及Caspase-8的表达量,并采用方差分析.结果 (1)细胞凋亡率:单转组转染后12、24、48 h为18.8%±3.5%、25.7%±2.8%、36.4%±3.6%;联合转染组为23.8%±2.4%、31.1%±2.1%、42.5%±4.5%;对照组为8.7%±2.1%、9.3%±1.6%、10.9%±1.2%.3组比较差异有统计学意义(F=15.69,53.33,48.28,P<0.01).(2)Bcl-2表达量:单转组在转染后12、24、48 h为16.4%±5.0%、13.4%±3.5%、8.6%±2.3%;联合转染组为14.7%±3.8%、9.1%±2.0%、4.6%±2.0%;对照组为25.3%±6.3%、19.8%±4.4%、10.1%±3.8%.3组比较差异有统计学意义(F=6.19.12.29,5.81,P<0.05).(3)Caspase-8表达量:单转组在转染后12、24、48 h为19.3%±2.4%、27.2%±1.9%、33.7%±3.0%;联合转染组为22.7%±2.2%、30.9%±3.1%、38.2%±3.2%;对照组为1.2%±0.8%、1.8%±0.6%、3.2%±1.5%.3组比较差异有统计学意义(F=71.54,112.78,101.61,P<0.01).结论 LIGHT基因转染肝癌HepG2细胞后通过调节Bcl-2及Caspase-8的表达来发挥促凋亡作用,IFN-γ能增强LIGHT基因诱导肝癌HepG2细胞的凋亡. 相似文献
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金雀异黄素调节肝癌HepG2细胞bax基因表达诱导细胞凋亡的实验研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 探讨三磷酸肌醇(IP3)和bax基因表达变化在金雀异黄素(genistein,Gen)诱导肝癌细胞凋亡中的作用.方法 以0/μmol/L Gen作用肝癌HepG2细胞72 h为对照组,以不同浓度(20、40、60及80μmol/L)Gen为浓度依赖性实验;以60μmol/L Gen作用于肝癌HepG2细胞0 h为对照组,60μmol/L Gen作用于HepG2细胞不同时相(6、12、24、48及72 h)为时间依赖性实验;应用同位素试剂盒检测细胞IP,含量;RT-PCR分析bax mRNA表达;流式细胞仪检测细胞凋亡率.结果 不同浓度(20、40、60及80 μmol/L)的Gen作用于肝癌HepG2细胞72 h后,IP3含量显著低于对照组[(17.7±1.3)、(11.2±0.9)、(4.9±0.5)、(4.8±0.3)pmol/106 cells vs (29.4±0.5)pmol/106 cells],P<0.01;bax mRNA表达(RI,灰度与面积之积的相对强度)显著高于对照组(0.26±0.02、0.33±0.05、0.35±0.06、0.38±0.05 vs 0.09±0.01),P<0.01;细胞凋亡率也显著高于对照组((10.1±0.9)%、(18.7±1.6)%、(28.7±2.5)%、(27.9±2.0)% vs(2.6±0.1)%],P<0.01.60μmol/L Gan作用于肝癌HepG2细胞不同时相(6、12、24、48及72 h)后,各时相IP3含量显著低于对照组[(22.6±0.9)、(12.0±1.4)、(7.5±0.8)、(5.6±0.5)、(4.3±0.6)pmol/106 cells vs(29.2±0.6)pmol/106 cells],P<0.01;12 h后baxmRNA表达显著高于对照组(0.25±0.06、0.29±0.02、0.30±0.02、0.35±0.04 vs 0.09±0.01),P<0.01;24 h后各时相细胞凋亡率明显高于对照组((7.4±0.5)%、(20.5±2.0)%、(30.7±1.6)% vs(2.6±0.1)%],P<0.01.结论 Gen能减少 IP3生成,上调bax基因表达,诱导肝癌细胞凋亡. 相似文献
15.
目的研究二十碳五烯酸(EPA)对人肝癌HepG2细胞生长影响。方法经EPA处理的HepG2细胞(实验组),采用MTF法检测细胞增殖,荧光染色、透射电镜观察细胞凋亡形态改变,流式细胞胞仪检测细胞凋亡。结果与对照组比较,EPA在45ug/ml和60ug/ml两个浓度对HepG2细胞的抑制率在24h、48h、72h分别为36.7%和52.1%、68.1%和94.8%、94.2%和99.7%;形态学上可见实验组细胞的凋亡显著,凋亡小体明显著多。流式细胞仪可以见到明显的细胞凋亡。结论EPA呈剂量和时间依赖性方式抑制肝癌HepG2细胞的生长增殖。细胞凋亡是其途径之一。 相似文献
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目的观察缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对HepG2细胞增殖相关CyclinD1、CyclinA基因与凋亡相关Survivin、Bcl-2基因的影响。方法对Tet—on基因表达系统调控的缺氧诱导因子1α转染入HepG2细胞,用不同质量浓度的强力霉素对受强力霉素调控、稳定表达HIF—1α的HepG2^Tet-on进行凋亡诱导,检测肝癌细胞的凋亡和HIF-1α、CyclinD1、CyclinA、Survivin、Bcl-2的基因表达。结果终浓度分别为0、0.1、1、5mg/L的对HIFHepG2^Tet-on进行细胞凋亡诱导,细胞凋亡率分别为56.4%±7.8%、42.7%±4.9%、31.5%±6.1%、19.7%±4.5%;随着强力霉素浓度的增加,HIF-1α、CyclinD1、CyclinA、Survivin、Bcl-2基因表达水平增加,差异有统计学意义(P〈0.01)。结论HIF-1α基因在体外可以促进HepG2细胞的增殖,抑制其凋亡,而且随着HIF—1α基因表达水平的增加作用不断增强,这可能与HIF-1α诱导CyclinD1、CyclinA、Survivin、Bcl-2基因表达有关。 相似文献
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目的:探讨CyclinD1、Ki-67蛋白在茉莉酸甲酯(MeJA)抑制人肝癌细胞HepG2细胞增殖过程中的表达变化。方法:免疫细胞化学检测HepG2细胞CyclinD1、Ki-67蛋白的表达。结果:MeJA作用HepG2细胞48 h后,CyclinD1、Ki-67蛋白表达水平明显下降(P<0.01)。结论:MeJA通过下调Cy-clinD1、Ki-67蛋白表达,使细胞周期相关蛋白的表达发生改变,减少处于增殖期的细胞数目,从而发挥抗肝癌作用。 相似文献
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[目的]探讨人骨髓核分化抗原(MNDA)对人骨肉瘤Saos-2细胞增殖及凋亡的影响.[方法]逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法定量测定Saos-2细胞中MNDA的mRNA表达差异.将MNDA基因转染Saos-2细胞,应用MTT法测定转染后的肿瘤细胞增殖,流式细胞仪定量检测细胞凋亡程度,没有转染质粒的和转染空质粒的做为对照组.[结果] MNDA的mRNA在骨肉瘤Saos-2细胞中表达明显降低.转染MNDA后人骨肉瘤Saos-2细胞的凋亡程度高于对照组,增殖率低于对照组.[结论]转染MNDA可诱导人骨肉瘤Saos-2细胞发生凋亡,抑制骨肉瘤细胞的增殖率. 相似文献
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近年来研究表明组蛋白乙酰化和去乙酰化与肿瘤的发生密切相关,组蛋白的乙酰化状态对基因的调控起着重要作用,去乙酰化酶抑制剂可明显抑制肿瘤细胞的生长[1].本研究旨在观察组蛋白去乙酰化酶抑制剂-曲古菌素(TSA)在体外、体内对HepG2肝癌细胞系增殖的影响. 相似文献
20.
目的:探讨三磷酸肌醇( IP3) 和bax基因表达变化在五羟黄酮(Quercetin)诱导肝癌细胞凋亡中的作用。方法:以肝癌HepG2 细胞培养72 h为对照,以20,40,60,80μmol/L Quercetin作用于 HepG2 细胞72 h 时和60μmol/L Quercetin 作用于 HepG2 细胞 6,12,24,48,72 h,应用同位素试剂盒检测细胞IP3含量,RT-PCR分析bax mRNA表达,Western blotting 分析细胞bax蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果:各浓度的Quercetin作用于肝癌HepG2 细胞72 h,IP3含量显著低于对照组(P<0.01),bax mRNA和bax蛋白表达显著高于对照组,细胞凋亡率显著高于对照组(P<0.01); 60 μmol/L Quercetin 作用于肝癌HepG2 细胞6,12,24,48,72 h,各时相IP3含量显著低于对照组(P<0.01);12 h后bax mRNA和bax蛋白表达显著高于对照组,24 h后各时相细胞凋亡率为显著高于对照组(P<0.01)。结论:Quercetin能减少IP3生成,上调bax基因表达,诱导肝癌细胞凋亡。 相似文献