Rho激酶在急性心肌梗死大鼠中的表达及其对心肌细胞凋亡的影响

目的: 分析心肌梗死(MI)后大鼠心肌组织中Rho激酶表达的变化,探讨Rho激酶信号通路与心肌细胞凋亡的关系及其选择性抑制剂法舒地尔对MI后心肌的保护作用。 方法: 选取雄性Wistar大鼠,结扎其左前降支建立急性心肌梗死(AMI)模型。将术后24 h存活的24只大鼠随机分为治疗组（n=12）和AMI组（n=12）,另随机选取10只大鼠作为假手术组,只在其左前降支下穿线不结扎。治疗组腹腔注射法舒地尔5 mg/kg,每日两次;AMI组和假手术组给予等量的生理盐水。4周后,用Evens蓝及四唑氮蓝试验(NBT)双染确定缺血及梗死面积;用RT-PCR法测定Rho激酶mRNA的表达;DNA片段分析观察心肌细胞凋亡的情况;用免疫组化染色法测定凋亡相关蛋白bcl-2及bax表达的变化。结果: 与AMI组相比,治疗组的梗死面积显著减小(P<0.05)。AMI大鼠缺血心肌组织中DNA片段分析显示,有DNA梯状条带(ladder)形成,假手术组大鼠却没有。AMI组大鼠中Rho激酶mRNA及凋亡相关蛋白bax的表达明显增加(P<0.01,P<0.01);bcl-2的表达明显减少(P<0.01)。以法舒地尔治疗4周后,Rho激酶mRNA及bax的表达均显著减少,bcl-2的表达显著增加(均P<0.01)。结论: MI大鼠心肌组织中Rho激酶的表达升高,心肌细胞凋亡增加。法舒地尔能够减少Rho激酶的表达,减少心肌细胞凋亡,发挥对心肌的保护作用。     

microRNA-133a在心肌梗死后心力衰竭大鼠心肌细胞中的表达及抗凋亡作用

目的　观察microRNA-133a（miR-133a）在心肌梗死后心衰大鼠心肌细胞中的表达及对细胞凋亡的影响。方法　SD大鼠随机分为四组：①假手术组：仅开胸不结扎冠状动脉;②心肌梗死组：结扎冠状动脉前降支;③rAAV9组：先冠状动脉转染空白病毒rAAV9后再结扎冠状动脉前降支;④miR-133a组：先冠状动脉转染rAAV9-ZsGreen-pre-miR-133a后再结扎冠状动脉前降支。饲养8周后,real-time　PCR检测大鼠心肌miR-133a、Transgelin-2（TAGLN2）、Caspase-9、Bcl-2　mRNA水平,免疫组织化学和Western　blot检测TAGLN2、Caspase-9、Bcl-2蛋白水平。结果　心肌梗死后心衰大鼠心肌组织中miR-133a的表达较假手术组相比显著下降（2.963±0.461比12.518±2.21）,TAGLN2和Caspase-9的mRNA及蛋白表达升高,Bcl-2　mRNA和蛋白表达水平降低。冠状动脉注射rAAV9-ZsGreen-pre-miR-133a使大鼠心肌miR-133a表达明显上调,TAGLN2和Caspase-9的mRNA及蛋白表达减少,Bcl-2的mRNA和蛋白表达水平增加。结论　心肌梗死后心衰大鼠心肌miR-133a表达下调,可能使其对促凋亡基因TAGLN2和Caspase-9的降解和抑制作用减弱,从而促进心肌凋亡的发生;过表达miR-133a可能减少心肌梗死后的心肌凋亡。     

抑郁对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的探讨抑郁对急性心肌梗死后大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法 30只SD大鼠随机分为三组,假手术组,心肌梗死对照组,心肌梗死抑郁组,每组10只。制备相应模型并干预后,用TUNEL法检测心肌细胞凋亡,用免疫组织化学法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果心肌梗死抑郁组和心肌梗死对照组大鼠心肌细胞凋亡率以及心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达均高于假手术组,差异有统计学意义(P<0.01),心肌梗死抑郁组大鼠心肌细胞凋亡指数以及心肌细胞Bax蛋白表达高于心肌梗死对照组,而心肌细胞Bcl-2蛋白表达低于心肌梗死对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论抑郁可增加急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡,其机制可能与促进促凋亡基因Bax表达、抑制抗凋亡基因Bcl-2表达有关。     

曲尼司特对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

曲尼司特是一种过敏介质阻滞剂，最初主要应用于变态反应疾病和皮肤病的治疗。近来研究表明，它在心力衰竭的治疗中起一定作用，能够降低急性心肌梗死（AMI）大鼠心肌肥大细胞数和肥大细胞蛋白酶-1（rat mast cell protease-1，RMCP-1）mRNA的表达，改善AMI大鼠心脏的收缩和舒张功能。研究表明，曲尼司特可能是通过抑制肥大细胞脱颗粒和RMCP-1的合成，进而阻止心力衰竭的发生发展的。体外实验证实，肥大细胞颗粒能引起心肌细胞凋亡，且这种作用主要由RMCP-1介导。因此，抑制心肌细胞凋亡可能是曲尼司特改善心功能，阻止心力衰竭发生发展的机制之一。     

急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白表达的研究

目的　探讨急性心肌梗死 (AMI)大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白P5 3、Fas、Bax和Bcl 2的表达。方法　雄性SD大鼠 10 9只 ,其中 10 1只结扎冠状动脉左前降支 ,80只术后存活分入 10个时点 ,每时点 8只 ,另 8只大鼠开胸暴露左冠状动脉但不结扎作假手术组。于AMI后 1、3、6、12及 2 4h和 2、3、5、7及 14d分别以原位末端标记(TUNEL)法和免疫组织化学方法检测心肌细胞凋亡和心肌组织P5 3、Fas、Bax和Bcl 2蛋白的表达。结果　 8只假手术大鼠心肌组织仅有少量的凋亡细胞 ,P5 3、Fas和Bcl 2的免疫反应阳性 ,而Bax的免疫反应为阴性。AMI后 1h梗死区周围心肌的凋亡细胞阳性指数开始升高 ,3d达高峰 ,14d仍高于假手术组 ;P5 3、Fas、Bax和Bcl 2分别于 6h、12h、12h和 3h开始升高 ,于 2d、3d、2 4h和 2d达高峰 ,然后逐渐下降 ,14d与假手术组比较差异无显著性意义。结论　AMI大鼠心肌细胞凋亡增加 ,心肌组织的凋亡相关蛋白P5 3、Fas、Bax和Bcl 2的表达也增加     

血管内皮生长因子对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响

目的　探讨静脉应用血管内皮生长因子 (VEGF)对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关蛋白P5 3、Fas、Bax和Bcl 2表达的影响。　方法　 3 3只雄性SD大鼠结扎左冠状动脉后 2 4h随机接受VEGF16 5 肝素 (治疗组 )或肝素 生理盐水 (对照组 )治疗。VEGF16 5(2 μg/1ml)加肝素 (5 0U)或肝素 生理盐水 (5 0U/1ml)每天经尾静脉注射 ,共用 7d(治疗组 8只 ,对照组 10只 )和 14d(治疗组 7只 ,对照组 8只 )。于结扎后第 9天和第 16天测定心肌细胞凋亡指数、心肌组织P5 3、Fas、Bax和Bcl 2蛋白的表达。　结果　治疗组的心肌细胞凋亡数量明显少于对照组〔第 9天 :(10± 2 ) %比 (2 8±2 ) % ,P <0 0 1;第 16天 :(6± 2 ) %比 (12± 2 ) % ,P <0 0 5〕 ,VEGF抑制P5 3、Fas和Bax的表达 ,促进Bcl 2的表达。　结论　每天静脉应用VEGF 14d可减少心肌细胞凋亡 ,抑制P5 3、Fas和Bax的表达 ,促进Bcl 2的表达     

miRNA-223在急性心肌梗死患者血清中的表达及其对心肌细胞凋亡的影响

目的研究miRNA-223在急性心肌梗死(AMI)患者血清中的表达,并探讨miR-223表达对心肌细胞凋亡的影响。方法随机选取2015年1月至2017年1月于新乡市中心医院心血管内科收治的AMI患者67例和同期体检健康人50例,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测miR-223表达水平,以人心肌细胞(HCM)作为模型研究miR-223表达对HCM凋亡的影响。结果 miR-223在67例AMI患者血清中的相对表达水平为(5.58±0.99),高于其在50例健康人血清(0.66±0.15)的相对表达水平(P0.05),并且经Logistic回归分析显示血清miR-223是AMI发生的独立危险因素;荧光素酶报告基因系统验证miR-223靶向抑制HCM细胞中CCTN2基因的表达;经H2O2诱导后,转入miR-223-mimc的HCM细胞凋亡率比转入miR-223-NC的HCM细胞凋亡率增加了95.9%。结论 miR-223在AMI患者血清中高表达,并且高表达的miR-223可能通过靶向抑制心肌细胞CCTN2的表达而促进其凋亡。     

阿托伐他汀对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的影响

将60只雄性Wistar大鼠随机分为假手术组10只和急性心肌梗死（AMI）组50只。AMI组通过结扎左冠状动脉前降支制作AMI模型,成功后24h剩余36只,再随机分为AMI对照组和干预组各18只。干预组每日予阿托伐他汀（40mg／kg）灌胃,假手术组和AMI对照组每日予等量生理盐水灌胃。4周后分别采用TUNEL法和RT-PCR法检测非梗死区心肌细胞凋亡指数（MAI）和TNF-α mRNA的表达水平。结果干预组和AMI对照组非梗死区心肌中MAI和TNF-α mRNA的表达均明显高于假手术组（P〈均〈0．05）,干预组与AMI对照组相比上述指标均明显降低（P均〈0．05）。提示阿托伐他汀可降低大鼠AMI后非梗死区MAI,抑制非梗死区心肌中TNF-α mRNA的表达可能是其机制之一。     

复方丹参滴丸对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响

目的　探讨了复方丹参滴丸对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡和凋亡相关蛋白的影响。方法　45只SD大鼠随机分为假手术组、心肌梗死组和复方丹参滴丸组,每组15只。假手术组仅作开胸手术,并于术后行生理盐水灌胃;心肌梗死组和复方丹参滴丸组结扎大鼠左冠状动脉前降支建立急性心肌梗死模型,并在术后分别给予生理盐水和复方丹参滴丸治疗。治疗3天后处死大鼠,取心肌组织,采用实时荧光定量PCR对大鼠心肌组织中Fas、Fas-L和p53　mRNA进行分析,采用Western　blot对Bcl-2和Bax蛋白水平进行分析,并采用TUNEL染色法和Western　blot分析心肌细胞凋亡情况。结果　与假手术组比较,急性心肌梗死组和复方丹参滴丸组大鼠心肌组织中Fas、Fas-L和p53　mRNA水平明显增加（P<0.05）。而复方丹参滴丸组织中Fas、Fas-L和p53　mRNA水平较急性心肌梗死组显著下降（P<0.05）。急性心肌梗死组大鼠心肌组织Bcl-2/Bax比值较假手术组明显下降（P<0.05）,而复方丹参滴丸组较假手术组差异无显著性。心肌梗死组和复方丹参滴丸组大鼠心肌细胞凋亡指数较假手术组明显增加（P<0.05）。而复方丹参滴丸组大鼠心肌细胞凋亡指数较心肌梗死组明显下降（P<0.05）。结论　复方丹参滴丸可明显降低急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡相关蛋白的表达水平,对抑制急性心肌梗死细胞凋亡有着重要意义。     

心痛宁合剂对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响

目的观察心痛宁合剂对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法结扎大鼠冠状动脉复制急性心肌梗死模型,分为高、低剂量心痛宁合剂组、开搏通对照组、模型对照组,另设假手术对照组。用药1周后,取心肌切片,进行HE染色、免疫组织化学染色,观察心肌细胞凋亡。结果心痛宁合剂能有效的抑制心肌细胞凋亡,上调Bcl-2基因表达,下调Fas基因表达,与开搏通治疗比较,差异有统计学意义（P均〈0.05）。结论心痛宁合剂能够抑制大鼠心肌梗死的细胞凋亡,对治疗急性心肌梗死有良好疗效。     

心肌营养素-1对心肌梗死大鼠心功能和心肌细胞凋亡的影响

心肌梗死时心肌细胞不仅发生坏死，也可发生凋亡。心肌营养素-1(CT-1)是白介素-6家族的新成员，可促进心肌细胞的存活、增殖和诱导肥大。此外，在体外还能减轻心肌的缺血-再灌注损伤和缺氧诱发的心肌细胞凋亡。本研究观察了CT-1对急性心肌梗死大鼠心功能和心肌细胞凋亡的影响。     

阿托伐他汀对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及左心室重塑的影响

目的观察阿托伐他汀（AVT）对大鼠急性心肌梗死（AMI）后心肌细胞凋亡及左心室重塑的影响。方法将Wistar大鼠随机分为三组：假手术组、急性心肌梗死（AMI）组、AVT组。AMI模型制作成功后,AVT组给予20mg/（kg.d）的AVT灌胃4周,然后测定左室重塑的指标,包括左心室相对重量、左室长轴长度（L）、左室截面直径（D）、左心室舒张末期容积（LVEDV）、面积（CSA）和室间隔厚度（WT）;采用黄嘌呤氧化酶法测定两组大鼠血清超氧化物歧化酶总活力（T-SOD）,采用硫代巴比妥酸法测定血清丙二醛（MDA）水平,采用流式细胞仪测定细胞凋亡率,采用全自动生化分析仪检测血脂水平。结果与AMI组相比,AVT组左心室重塑指标明显改善,T-SOD活性显著增强,MDA水平、凋亡率显著下降（P均〈0.05）,各组血脂含量相比P均〉0.05。结论 AVT能抑制非梗死区心肌细胞凋亡,防止左心室重塑。此作用与血脂无关。     

芪参益气滴丸对急性心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡及心功能的影响

目的 研究芪参益气滴丸(QS)对急性心肌梗死(AMI)大鼠心肌细胞凋亡及心功能的影响.方法 结扎左冠状动脉前降支建立大鼠AMI模型,将30只SD大鼠随机分为假手术组、AMI组、QS治疗组,QS治疗组给予0.135g.kg-1.d-1)的QS混浊液灌胃4w,治疗结束后检查3组大鼠血流动力学,处死大鼠,采用原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡指数,采用免疫组化法测定Bcl-2及Bax蛋白表达.结果 与假手术组、AMI组相比,QS治疗组血流动力学指标明显改善(P ＜0.05);Bax蛋白表达升高,Bcl-2蛋白表达降低,心肌细胞凋亡指数显著降低(P＜0.05).结论 QS可通过多种途径有效减少其心肌细胞凋亡,从而改善AMI大鼠的心功能.     

运动预适应对急性心肌缺血大鼠心肌细胞凋亡及凋亡蛋白表达的影响

目的探讨运动预适应(EP)对非动脉硬化大鼠及动脉硬化大鼠急性心肌缺血心肌细胞B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达及半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-3蛋白的影响。方法选取7周龄SD大鼠90只,随机分为5组:对照组(A组)、急性心肌缺血组(B组)、动脉硬化+急性心肌缺血组(C组)、EP+急性心肌缺血组(D组)、动脉硬化+EP+急性心肌缺血组(E组),其中A组10只,其余各组20只。C、E组予维生素D3连续灌胃4 d,喂高脂饲料(猪油、胆固醇、胆酸、丙基硫氧嘧啶)6 w制备动脉硬化模型。B、C、D、E组腹腔注射3 mg/kg异丙肾上腺素(ISO),复制大鼠急性心肌缺血损伤模型。D、E组建立EP大鼠模型进行间歇性游泳运动,以尾部负重体重的3%重物。建模后24 h内采用脊髓脱臼法处死大鼠,取左心室心肌组织,采用免疫组化检测Bcl-2及Bax蛋白的表达,Western印迹检测Caspase-3蛋白。结果与A组比较,B、C、D、E组心肌细胞Bcl-2的表达均显著降低(P<0.05),而Bax表达均显著升高(P<0.05);B组与C组心肌细胞Bcl-2的表达差异无统计学意义(P>0.05),但C组Bax的表达显著升高(P<0.05);D组、E组心肌细胞Bcl-2的表达较B组、C组显著升高(P<0.05),而Bax的表达显著降低(P<0.05);与D组比较,E组Bcl-2的表达显著降低,而Bax的表达显著升高(P<0.05)。与A组相比,B、C、D、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著升高(P<0.01);与B组、C组相比,D组、E组心脏Caspase-3蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与D组比较,E组心脏Caspase-3蛋白表达水平无明显差异(P>0.05);与A组比较,B、C、D、E组细胞凋亡指数(AI)显著增高(P<0.05),其中C组AI最高;与B组、C组比较,D组、E组AI显著降低(P<0.05),而D组比E组AI稍低(P<0.05)。结论EP可能改善急性心肌缺血或是在合并动脉硬化基础上急性心肌缺血大鼠的心肌细胞凋亡,可能基于凋亡相关基因Bcl-2表达升高、Bax表达降低调控及下调Caspase-3蛋白所致。     

大鼠急性心肌梗死心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、FAS的表达

大鼠急性心肌梗死心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、FAS的表达     

骨髓单核细胞移植对大鼠急性心肌梗死后非梗死区域心肌细胞凋亡的影响

目的探讨大鼠急性心肌梗死(AMI)后骨髓单核细胞(BMMNCs)移植对心功能和非梗死区域心肌细胞凋亡的影响以及二者之间的可能关系。方法利用密度梯度离心法获取BMMNCs,并用4′,6-二脒-2-苯基吲哚(4′,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)标记,结扎大鼠前降支,建立AMI动物模型,分别于AMI后1 h(n=10)及1 w(n=10)梗死中央及周边局部注射BMMNCs(2×107个,0.2 ml),对照组(n=10)AMI后1 h局部注射等量生理盐水,AMI后8 w心脏超声检测三组大鼠心脏功能,然后取材,进行非梗死区域心肌细胞凋亡TUNEL分析。结果AMI 1 w移植组左室收缩功能明显高于其他两组,其非梗死区域心肌细胞凋亡则明显低于其他两组。结论大鼠AMI 1 w后BMMNCs移植可以增加改善心梗后心功能,减少非梗死区域心肌细胞凋亡。     

重组人脑利钠肽对急性心肌梗死大鼠心功能和心肌细胞凋亡的影响

目的观察重组人脑利钠肽对急性心肌梗死(AMI)大鼠心功能和心肌细胞凋亡的影响。方法通过结扎100只SD大鼠左冠状动脉前降支建立AMI模型,随机分为观察组和对照组各50只。观察组予重组人脑利钠肽15 ug/kg、连续4周,对照组予等体积生理盐水。两组分别于治疗48 h、1周、2周、3周和4周时采用超声检测左室射血分数(LVEF),处死大鼠并取血测定血浆BNP浓度,原位末端标记法(TUNEL法)测定心肌细胞凋亡指数(MAI),免疫组化法检测Fas、FasL蛋白阳性染色指数。结果与对照组比较,观察组LVEF在第48 h即有明显升高(P<0.05);观察组MAI治疗后3、4周与48 h比较下降明显(P均<0.05),观察组治疗4周时与对照组比较亦有明显下降(P<0.05)。观察组于2、3、4周时Fas/Fasl蛋白阳性率明显低于48 h时(P均<0.05),且与对照组比较下降明显(P均<0.05)。结论连续予重组人脑利钠肽能够通过减少大鼠AMI后心肌细胞凋亡,达到改善心功能的目的。     

急性心肌梗死时心肌细胞凋亡的研究进展

越来越多的研究表明急性心肌梗死（ＡＭＩ）时,有两种心肌死亡形式,凋亡和坏死。并且在急性心肌缺血６小时内凋亡是心肌细胞死亡的主要形式,而心肌细胞坏死到１天－２天时才达高峰。进一步提示临床上争取早期恢复心肌再灌流,抑制心肌细胞凋亡,可减小梗死面积。细胞凋亡的调控机制是非常复杂的,涉及多种基因、第二信使因子、细胞内酶活必尊文作者着重介绍ＡＭＩ时心肌细胞凋亡的研究现状及其调控机制的研究进展。     

急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的研究进展

研究表明,急性心肌梗死(AMI)后,凋亡可致心肌细胞数量减少,影响心肌梗死面积.心室重构中,凋亡也可能是决定AMI向心力衰竭转归快慢的因素之一.     

山药多糖对大鼠急性心肌梗死后心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制

目的探讨山药多糖(CYPS)对心肌梗死大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及其机制。方法大鼠心肌细胞随机分为空白对照(NC)组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+75 mg/L CYPS组、H/R+150 mg/L CYPS组、H/R+300 mg/L CYPS组,噻唑蓝(MTT)法检测心肌细胞存活率;流式细胞术检测心肌细胞凋亡率;Western印迹法检测心肌细胞细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK)4、活化半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Cleaved caspase)-3、成纤维细胞生长因子(FGF)9蛋白表达。比较FGF9过表达及沉默FGF9表达对H/R损伤心肌细胞存活率及凋亡率的影响。观察CYPS不同剂量组及FGF9表达对心肌细胞中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响。结果与NC组相比,H/R组心肌细胞存活率显著降低(P<0.05),CDK4蛋白水平及GSH-Px、SOD含量显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率与Cleaved caspase-3蛋白水平显著升高(P<0.05);与H/R组相比,CYPS不同剂量组心肌细胞存活率显著升高(P<0.05),CDK4蛋白水平及GSH-Px、SOD含量显著升高(P<0.05),而细胞凋亡率与Cleaved caspase-3蛋白水平显著降低(P<0.05);CYPS可促进H/R损伤心肌细胞中FGF9表达水平升高(P<0.05);FGF9过表达对H/R损伤心肌细胞具有保护作用;沉默FGF9逆转CYPS对H/R损伤心肌细胞的保护作用。结论CYPS可通过上调FGF9表达对H/R损伤的心肌细胞发挥保护作用,其作用机制可能与抑制心肌细胞凋亡及增强抗氧化能力有关。