诱导小鼠树突细胞表达吲哚胺2,3双加氧酶的研究

目的观察吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)在小鼠树突细胞(DC)中的表达及对T细胞增殖的影响。方法培养小鼠脾和骨髓DC并检测表型;γ-干扰素(IFN-γ)诱导IDO表达,半定量逆转录-聚合酶链式反应、Western blot及毛细管电泳法分析IDO表达水平及活性,混合淋巴细胞反应(MLR)法测定其刺激T细胞增殖的能力。结果脾、骨髓DC的CD8α阳性表达率分别为(15．46±0．85)％、(1．68±0．16)％;两者在mRNA和蛋白水平的IDO表达量相似。脾DC上清液犬尿酸浓度(43．31±0．48)μmol／L高于骨髓DC(7．38±0．38)μmol／L,脾DC刺激指数(SI,2．41±0．18)低于骨髓DC(2．92±0．15),差异均有统计学意义(P<0．01);加1-甲基色氨酸后脾DC的SI增高而骨髓DC变化不明显,两者水平相当。结论小鼠脾DC可表达活性IDO,活性IDO的表达可减弱其刺激T细胞增殖的能力。     

吲哚胺2,3双加氧酶在诊断肝移植急性排斥中的作用

目的 探讨外周血吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)基因表达对大鼠肝移植急性排斥反应(AR)的诊断价值.方法 建立大鼠原位肝移植模型,分为4组:A组:同基因移植组(Wistar-Wistar,n=32);B组:异基因移植组(SD-Wistar,n=32);C组:异基因移植+长期环孢素A组(CsA,n=32);D组:异基因移植+短期CsA组(用药剂量同C组,第3天起停药,n=32).应用实时聚合酶链反应(Real-time PCR)方法 分别检测术后第0、1、2、3、4、5、7、9天外周血IDO mRNA值,同时检测各时间点血清谷草转氨酶(AST)、总胆红素(T-BIL)、碱性磷酸酶(ALP)水平,并取肝脏病理切片.结果 A组外周血IDO mRNA呈持续低水平,AST、T-BIL、ALP逐渐降至正常,病理无排斥反应.C组检测结果 与A组相似.B组IDO mRNA显著上升为术后第2天(P<0.05),AST、T-BIL、ALP值显著上升为术后4d(P<0.01),病理切片判断轻度排斥为术后5d(χ2=4.8,P<0.05).D组IDO mRNA显著上升为术后第4天(P<0.05),AST、T-BIL、ALP值显著上升为术后5d(P<0.01),病理切片判断轻度排斥为术后7d(χ2=4.8,P<0.05).结论 外周血IDO mRNA检测可较病理检查更早诊断大鼠肝移植AR的发生,且方法 简单、安全.

Abstract：

Objective To study the diagnostic value of indoleamine 2, 3-dioxygenase (IDO) gene expression in acute liver rejection in rat orthotopic liver transplantation model. Methods The rat orthotopic liver transplantation models were divided into four groups: group A, isograft transplantation group (Wistar to Wistar); group B, allograft transplantation (SD to Wistar); group C, allograft transplantation and cyclosporine; Group D, allograft transplantation and cyclosporine (the drug was withdrawn on the 3rd day after the operation). The samples (peripheral blood and liver tissue) were obtained on the operation day, 1st, 2nd, 3rd, 4th, 5th, 7th and 9th day post-operation. Luorescent quantitative polymerase chain reaction (PCR), pathological study and serum test were performed on each sample. Results In groups A and C, the IDO mRNA was expressed at a low level, aspartate aminotransferase (AST), total bilirubin (T-BIL) and alkaline phosphatase (ALP) were decreased to the normal level, and the pathological test found no acute rejection (AR). In group B, the IDO mRNA was dramatically increased on the day 2 (P<0.05), AST, T-BIL and ALP rose dramatically on the day 4 (P<0.05), and mild AR was detected on the day 5 (χ2=4.8,P<0.05). In group D, the IDO mRNA was dramatically increased on the day 4 (P<0.05), AST, T-BIL and ALP rose dramatically on the day 5 (P<0.01), and mild AR was detected on the day 7 (χ2=4.8,P<0.05). Conclusion Comparing with pathological study, detecting IDO mRNA of peripheral blood can diagnose AR of rat at earlier stage and the technique is safe and simple.     

吲哚胺2,3双加氧酶在移植中的作用

吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)是一种免疫调节酶,可催化色氨酸分子中吲哚环发生氧化裂解,是其沿犬尿氨酸途径分解代谢的限速酶.IDO具有免疫调节作用,树突状细胞(DC)是一种功能强大的抗原递呈细胞(APC),是唯一能够激活初始型T细胞的APC.IFN-γ等可刺激其表面表达IDO,并通过降解色氨酸,使局部组织中的色氨酸耗竭,代谢产物犬尿氨酸含量增加,从而抑制T细胞的增殖.因此DC表面表达IDO可能在移植中诱导免疫耐受方面起着重要的作用.     

IDO与胆囊癌的免疫耐受

吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)是色氨酸沿犬尿酸途径分解代谢的限速酶,其高表达是导致肿瘤免疫耐受的原因之一,直接影响树突状细胞(DC)疫苗的肿瘤治疗效果.脂多糖和细胞凶子等物质可调节IDO的表达.IDO通过3种机制参与肿瘤局部免疫耐受.对IDO的这种免疫调节机制的深入研究将在胆囊癌等肿瘤治疗方面具有重大意义.     

联体共生诱导大鼠心脏移植免疫耐受的实验研究

目的　通过联体共生模型 ,建立供、受者嵌合体 ,探讨嵌合体与免疫耐受的关系。方法　纯系雄性DA(RT1a)大鼠为供者 ,Lewis(RT11)大鼠为受者 ,随机分成 3组 ,每组供、受者各 15只。Ⅰ组 (未处理组 ) :仅行DA到Lewis大鼠的腹部心脏移植 ,手术前后不作任何处理。Ⅱ组 (环磷酰胺组 ) :DA到Lewis大鼠的心脏移植前后分别经腹腔注射环磷酰胺 80mg/kg。Ⅲ组 (联体组 ) :0d :供、受者大鼠腹腔注射环磷酰胺 80mg/kg ;第6d :供、受者联体 ;第 16d :联体大鼠腹腔注射环磷酰胺80mg/kg ;第2 1d :分开联体 ,行DA到Lewis大鼠的心脏移植。观察各组移植心存活时间 ,供心病理学改变 ,供、受者间的混合淋巴细胞反应 (MLR)。结果　Ⅲ组形成了稳定的供、受者嵌合体 ,供心平均存活时间为 :(76 .33± 10 .71)d ,较Ⅰ组 (7.17± 1.17)d、Ⅱ组 (8.5 0± 1.87)d显著延长 ,差异有显著性 (P <0 .0 1) ;Ⅲ组的供心仅见少量炎性细胞浸润 ;供、受者间MLR较正常对照组显著降低 ,差异有显著性 (P <0 .0 1)。结论　联体共生可形成稳定的外周和中枢嵌合体 ,嵌合体在同种心脏移植的免疫耐受中起重要作用。     

1O-羟基喜树碱和环孢素A诱导异基因大鼠心脏移植受者免疫耐受的实验研究

目的以中药制剂10-羟基喜树碱(HCPT)和环孢素A(CsA)诱导异基因大鼠心脏移植受者免疫耐受,并探讨免疫耐受的特异性和形成机制.方法以纯系SD大鼠为供者,纯系Wis-tar大鼠为受者行异体颈部心脏移植.将移植后50只受者大鼠随机分成5组,分别接受不同剂量HCPT、CsA或二者联合应用.A组接受安慰剂.B组接受HCPT 1.0mg·kg-1·d-1,腹腔注射.C组接受HCPT 2.0 mg·kg-1·d-1,腹腔注射.E组接受CsA10.0 mg·kg·d-1,导管灌胃.F组联合应用HCPT和CsA,方法剂量同B组和E组.心脏移植物长期存活受者术后60 d停用免疫抑制剂,120 d同时行供者来源(SD)大鼠和无关供者(SHR)大鼠皮肤移植.结果3只C组大鼠和5只F组大鼠心脏移植术后停用免疫抑制剂长期存活超过730 d.8块SD大鼠皮肤移植物长期存活超过610 d,而8块SHR大鼠皮肤均被排斥,平均存活时间(4.50±1.25)d.结论大剂量HCPT或小剂量HCPT与CsA联合应用可诱导异基因大鼠心脏移植受者免疫耐受,且形成的免疫耐受具有明确的抗原特异性.     

吲哚胺2,3-双加氧酶在间充质干细胞诱导肾移植免疫耐受中的作用

目的研究探讨骨髓间充质干细胞(MSC)是否能够诱导肾脏移植物免疫耐受的产生以及吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)在MSC介导免疫调节反应中的作用。方法在BALB/c小鼠接受C57BL/6小鼠移植肾脏后24小时,C57BL/6小鼠来源的正常(wt)或IDO基因敲除(IDO-/-)的MSC(1×106)经静脉注入到移植受体中,分别作为wt-MSC治疗组和IDO-/--MSC治疗组,每组6只。以6只未注射的BALB/c移植小鼠受体为未治疗组。以移植物排斥反应所致小鼠死亡或术后100天设定为研究终点。长期存活的BALB/c肾移植受体在移植术后100天,接受来自C57BL/6供体或第三方移植物供体C3H(H-2k)小鼠的皮肤移植,监测移植皮肤情况。对3组小鼠进行移植物组织病理学观察,免疫组化评估肾脏组织Foxp3+细胞水平。用流式细胞技术进行抗原特异性抗体和细胞表型检测,用混合淋巴细胞反应(MLR)评估树突细胞(DC)和T细胞功能。结果本研究发现wt-MSC治疗可诱导受体产生同种异体移植物免疫耐受,表现为移植物病理检查结果正常、未发现抗原特异性抗体水平升高、免疫耐受受体中耐受性树突细胞(Tol-DC)数量显著增多等。同时,在免疫耐受的受体脾脏和肾移植物中均可发现大量CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞(Treg)。这些结果均提示Treg在MSC诱导免疫耐受中的重要作用。值得关注的是,经IDO-/--MSC处理的移植受体中,MSC丧失了其诱导同种异体移植物的免疫耐受的能力,肾移植物很快被排斥,同时机体移植物的排斥反应变化与未治疗组相同。结论由MSC分泌的IDO通过促进Treg的生成,在诱导肾脏移植免疫耐受中起着关键性的作用。本研究将为MSC在器官移植中的临床应用提供理论及临床转化依据。     

紫杉醇对大鼠心脏移植物急性排斥反应的免疫抑制作用

目的探讨紫杉醇对大鼠心脏移植后急性排斥反应的免疫抑制作用。方法以W istar大鼠为供者,SD大鼠为受者,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型。70只SD大鼠随机分为5组,每组14只。对照组:术后不使用免疫抑制药;组Ⅰ:术后腹部注射紫杉醇(0.75 m g/kg.d);组Ⅱ:术后腹部注射紫杉醇(1.5 m g/kg.d);组Ⅲ:术后给环孢菌素A(C sA,5m g/kg.d)灌胃;组Ⅳ:术后腹部注射紫杉醇(0.75 m g/kg.d)+C sA(5m g/kg.d)灌胃。观察5组大鼠一般情况、移植心脏存活时间及术后7d病理学改变。结果组Ⅰ、组Ⅱ、组Ⅲ和组Ⅳ大鼠移植心脏存活时间均较对照组显著延长(P<0.05),组Ⅳ存活时间长于组Ⅰ和组Ⅲ(P<0.05)。术后第7d,对照组移植心脏明显肿胀,病理急性排斥反应分级为3级以上。组Ⅰ和组Ⅱ移植心脏搏动有力,颜色鲜红、质软,病理急性排斥反应分级为2~3级,与对照组比较,能明显减轻移植后心肌病理损害(P<0.05)。组Ⅲ移植心脏搏动良好,急性排斥反应分级大部分为2级。组Ⅳ移植心脏大小基本正常,无水肿,颜色鲜红、质软,搏动好,病理急性排斥反应分级<2级;对移植心心肌保护作用优于组Ⅰ和组Ⅱ(P<0.05)。结论紫杉醇能减轻大鼠心脏移植术后急性排斥反应,并能延长移植心脏的存活时间,具有免疫抑制作用。小剂量紫杉醇与C sA联用,在抗心脏移植物排斥反应中具有协同作用。     

FK506对大鼠心脏移植细胞凋亡的作用

目的　观察大鼠心脏移植急性排斥反应中的细胞凋亡现象及FK5 0 6对它的影响。方法　进行 48次SD→Wistar的大鼠颈部心脏移植 ,用苏木素 伊红 (HE)染色和原位末端标记(TUNEL)技术检测移植心切片 ,进行排斥反应的病理分级并计算凋亡指数 (AI)。结果　移植心的细胞凋亡主要发生于心肌细胞 ;FK5 0 6能明显减少心肌细胞的凋亡 ,减轻移植心的组织损伤。移植后第 3、5、7天AI对照组分别为 3.73± 2 .32、8.30± 2 .97、10 .2 2± 5 .5 2 ;FK5 0 6治疗组为 1.2 7± 1.2 0、2 .89± 2 .18、3.11± 1.6 8;两组比较差异有非常显著性 (P <0 .0 1)。结论　细胞凋亡是心脏移植急性排斥中组织损伤的重要机制 ;FK5 0 6能明显抑制心肌细胞凋亡 ,这可能是FK5 0 6发挥免疫抑制作用的重要方面。     

10-羟基喜树碱对异基因大鼠心脏移植物急性排斥反应的抑制作用

目的　探讨 10 羟基喜树碱 (HCPT)对移植物急性排斥反应的免疫抑制作用。方法　以SD大鼠为供者 ,Wistar大鼠为受者 ,行大鼠同种异体异位心脏移植。用中药制剂 10 羟基喜树碱(HCPT)预防和治疗移植物急性排斥反应。结果　HCPT 1.0mg·kg-1·d-1组与对照组比较 ,移植物存活时间明显延长 (6.0 5d/ 11.45d ,P <0 .0 0 1) ;HCPT 2 .0mg·kg-1·d-1组作用更为显著 (>2 41.6d) ,其中 3只大鼠于术后 60d停用HCPT ,移植心脏长期存活 ,超过 73 0d ,并经证实已形成免疫耐受。大鼠心脏移植物发生急性排斥反应时 ,HCPT 10 .0mg·kg-1·d-1能使排斥反应完全逆转 ,移植心脏功能完全恢复正常。较大剂量HCPT可导致轻微的胃肠道反应 ,但未观察到明显的肝、肾、心、脾、睾丸和造血系统损害。结论　HCPT对大鼠移植心脏急性排斥反应具有显著的抑制作用 ,且具有剂量相关性     

阻断B7诱导大鼠心脏移植免疫耐受的实验研究

目的　研究阻断B7方法诱导大鼠心脏异位移植的免疫耐受。　方法　采用Ono法建立大鼠异位心脏移植模型 ,实验组腹腔注射B7阻断剂CTLA 4Ig,观察大鼠移植的心脏存活天数 ,病理改变和术后IL 2 ,IgG以及IgM含量的变化。　结果　实验组移植的心脏存活时间为 :(31 6 0± 1 82 )d ,对照组 (7 2 5± 0 71)d ,差异有显著性意义 (P <0 0 1)。组织学改变 :实验组见局灶性血管周围或间质内淋巴细胞浸润和局灶性心肌损伤 ,病理分级Ⅰ～Ⅱ级。对照组可见大量淋巴细胞浸润 ,心肌细胞损伤和坏死 ,间质内出血水肿 ,病理分级Ⅳ级。术后IL 2含量实验组比对照组明显下降 ,有显著性差异 ,P <0 0 1。IgG和IgM含量差异无显著性意义 (P >0 0 5 )。　结论　阻断B7能诱导大鼠心脏移植免疫耐受 ,为移植排斥反应提供了新的治疗方法     

羟喜树碱和环孢素A对异基因大鼠心脏移植物急性排斥反应的协同抑制作用

目的 探讨羟喜树碱（OPT）和环孢素A（CsA）对异基因心脏移植物急性排斥反应的协同抑制作用。方法 以纯系SD大鼠为供者,纯系Wistar大鼠为受者,行异体颈部异位心脏移植。40只受者大鼠心脏移植后随机分成4组。A组接受安慰剂。B组接受 OPT1.0mg·kg-1·d-1,腹腔注射。E组接受CsA　10mg·kg-1·d-1,导管灌胃。F组联合应用OPT和CsA,方法剂量同B、E组。结果A组平均存活期为（6.05±0.76）d,B组为（11.45±1.99）d,E组为（14.45±4.85）d,F组有5只大鼠平均存活期为（45.00±19.43）d,另5只大鼠在移植60d后停用OPT和 CsA,存活期超过730 d,并经试验证明形成特异性免疫耐受。结论OPT和CsA的联合应用显著降低异基因大鼠心脏移植物急性排斥反应,明显延长心脏移植存活期。     

吲哚胺-2,3-双加氧酶介导的色氨酸代谢在器官移植中的作用

色氨酸是细胞生长代谢的必需氨基酸,吲哚胺-2,3-双加氧酶是催化色氨酸沿犬尿酸途径分解代谢的限速酶.吲哚胺-2,3-双加氧酶主要通过降解局部微环境中色氨酸,造成色氨酸缺乏,抑制T细胞增生与活化.吲哚胺-2,3-双加氧酶介导的色氨酸代谢中问产物犬尿素、3-羟基犬尿氨酸、3-羟基邻氨基苯甲酸能抑制同种异体T细胞增生.吲哚胺-2,3-双加氧酶树突状细胞与Treg细胞协同作用可能促进免疫耐受的形成.虽然吲哚胺-2,3-双加氧酶介导的色氨酸代谢在移植免疫调节过程中的作用还不甚清楚,但大量的研究表明其诱导移植免疫耐受的应用前景广阔.     

联合药物预处理对非协调性异种心脏移植物的影响

目的　观察联合应用环孢素A(CsA)和来氟米特 (Lef)预处理对豚鼠 大鼠非协调性异种心脏移植物的影响并探讨其作用机制。方法　移植大鼠分为 4组 :A组 (CVF ,n =10 ) ;B组(CVF CsA ,n =8) ;C组 (CVF Lef,n =5 ) ;D组 (CVF CsA Lef ,n =11) ;记录移植物存活时间 ,检测移植物病理组织学 ,用免疫组织化学检测移植物CD68、CD5 7表达情况 ,TUNEL法检测移植物细胞凋亡。结果　移植物的平均存活时间 :A组为 41h、B组为 68h、C组为 5 5h、D组为 82h。各组移植物病理表现均为急性血管性排斥反应 (AVR)改变。B、C、D组移植物炎症细胞浸润数减少 ,CD68和CD5 7表达下调 ,凋亡指数较低 ,半定量测定与A组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ;D组凋亡指数最低而CD68和CD5 7表达最弱 ,与其他各组比较差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　联合应用CsA和Lef预处理可明显延长非协调性异种移植物存活时间 ,减少炎症细胞浸润 ,抑制心肌细胞凋亡 ,减轻异种AVR损害。     

CTLA4-Ig抗大鼠肝移植排斥反应及诱导免疫耐受的实验研究

目的 建立大鼠原位肝移植（ROLT）急性排斥反应模型．探讨细胞毒淋巴细胞抗原4免疫球蛋白（CTLA4-Ig）抗排斥反应和诱导免疫耐受的作用。方法采用“二袖套管”法建立Wistar→SD大鼠配对组合的肝移植后排斥反应模型．并于术后第2天腹腔内一次性注射CTLA4-Ig（75pg／只大鼠）．与未给药的相同组合的排斥反应模型鼠对照研究．观察移植术后7d2组动物的一般情况、肝功能变化、移植肝病理改变及血清TNF-α水平的变化，同时观察CTLA4-Ig组动物术后4个月时的上述情况．以了解CTLA4-Ig抗排斥及诱导免疫耐受的作用。结果①对照组动物于肝移植术后6～14d内相继死亡；移植肝出现明显的排斥反应的病理改变征象。②CTLA4-Ig组动物于术后7d及4个月均未见明显的排斥反应表现．移植肝无明显的排斥反应的病理改变征象．血清TNF-α、ALT、AST、TBIL及DBIL水平均明显低于对照组（P〈0．05）．TP及A1b水平则明显高于对照组（P〈0．05）。结论CTLA4-Ig有抗排斥反应及诱导免疫耐受功能的作用；血清TNF-α水平作为观察ROLT后排斥反应的指标，可能有一定的参考价值。     

他克莫司和来氟米特合用预防大鼠心脏移植急性排斥反应

来氟米特 (Ｌｅｆｌｕｎｏｍｉｄｅ ,Ｌｅｆ)是一种高效的新型免疫抑制剂 ,属异 口恶唑类衍生物 ,用于自身免疫性疾病的治疗 ,而他克莫司 (ＦＫ5 0 6)是临床上最为有效的免疫抑制剂之一。为探讨两药联合应用的免疫抑制效果 ,我们用二者的最低有效剂量 ,进行联合用药的实验研究。现报道如下。材料和方法　受体雄性ＳＤ大鼠 ,体重 2 0 0～ 2 5 0ｇ和供体雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠 ,体重 80～ 12 0ｇ ,均由北京维通利华实验动物技术有限公司提供。Ｌｅｆ由美国欣凯公司提供 ,ＦＫ5 0 6由德国Ｆｕｊｉｓｕｗａ公司提供。按参考文献 1描述的套管法建…     

胰腺癌荷瘤鼠吲哚胺2,3-双加氧酶表达和CD4~+CD25~+Treg细胞数的变化

目的 观察吲哚胺2,3-双加氧酶(IDO)的表达以及调节性T细胞(Treg)数量在胰腺癌荷瘤鼠中的变化,并探讨胰腺肿瘤细胞免疫逃逸的机制.方法 建立小鼠胰腺癌模型,荧光定量聚合酶链反应(PCR)、Western blot分析肿瘤组织周嗣引流淋巴结(TDLNs)IDO表达水平;并利用流式细胞术检测荷瘤鼠TDLNs及脾脏中CD4~+CD25~+T细胞占CD4~+T比例;荧光定虽PCR测量Foxp3在TDLNs及脾脏mRNA水平.结果 胰腺癌荷瘤鼠TDLNs中IDO在mRNA(1.670±0.099比1.123±0.243),蛋白表达水平(1.401±0.079比0.872±0.193),高于正常对照组.差异均有统计学意义(P<0.05);荷瘤鼠和脾细胞中CD4~+CD25~+T细胞占CD4~+T细胞的比例明显高于对照鼠[TDLNs分别为(25.00±2.16)%和(11.02±1.31)%,P<0.05;脾脏分别为(22.14±2.33)%和(12.11±0.93)%,P<0.05];荷瘤鼠Foxp3 mRNA表达水平显著高于对照鼠,荷瘤鼠分别为:TDLNs 3.427±0.164、脾细胞2.098±0.112,而对照鼠分为:0.933±0.253、1.137±0.343(P<0.05).结论 胰腺癌荷瘤鼠癌组织周围引流淋巴结IDO表达明显增高,且TDLNs及脾脏CD4~+CD25~+Treg细胞的数量增加.     

ClC-3在大鼠异位心脏移植急性排斥期的表达及意义

目的观察电压门控氯通道-3(C lC-3)在大鼠异位心脏移植急性排斥期中的表达及意义。方法以SD大鼠为供者,W istar大鼠为受者,建立大鼠腹部心脏异位移植模型,分为两组,每组32对。对照组:用生理盐水灌胃;环孢菌素A(C sA)组:用C sA灌胃干预。每组8只观察移植心存活时间,术后1、3、5和7d各切取6只标本,常规组织切片监测排斥反应,以原位末端标记(TUNEL)法检测心肌细胞凋亡,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测移植心肌组织C lC-3的表达。结果C sA组移植心存活时间明显长于对照组(15.4±5.1d vs.7.6±1.5d,P<0.05);C sA组各采样时段的免疫排斥反应分级及心肌凋亡指数明显低于对照组(P<0.05),而C lC-3表达强度均强于对照组(P<0.05)。C sA干预能明显降低免疫排斥反应分级及心肌凋亡指数,改善C lC-3表达强度的降低。结论移植心脏中C lC-3表达水平的高低与心脏急性免疫排斥反应的轻重及心肌细胞凋亡指数的高低密切相关,提示C lC-3在移植心脏免疫排斥反应心肌细胞凋亡坏死中有着重要的作用。     

抑制胆囊癌细胞内Janus激酶/信号转导与转录激活子1信号通路以下调吲哚胺2,3双加氧酶表达的意义

目的 探讨调控胆囊癌细胞内Janus激酶(JAK)/信号转导与转录激活子1(STAT1)信号通路抑制吲哚胺2,3双加氧酶(IDO)表达的作用机制,为解除胆囊癌生物治疗中肿瘤产生的免疫耐受提供理论依据.方法 应用γ-干扰素和组蛋白去乙酰化酶抑制剂SAHA处理胆囊癌SGC996细胞.Western blot方法检测IDO、STAT1以及干扰素调节转录因子1(IRF-1)的表达.用细胞免疫组化和激光共聚焦显微镜观察STAT1的入核情况,转染和荧光素酶报告基因分析γ激活序列(GAS)和干扰素刺激反应元件(ISRE)的活性.结果 胆囊癌细胞中IFN-γ刺激IDO的表达呈剂量和时间依赖性.SAHA抑制IDO的表达呈剂量依赖性.SAHA抑制STAT1的磷酸化和入核,抑制IFN-γ促进的GAS、ISRE和IRF-1的活性.结论 抑制人胆囊癌细胞中JAK/STAT1信号通路可导致IDO表达下降,表明调控JAK/STAT1信号通路可能会解除胆囊癌生物治疗中肿瘤产生的免疫耐受.     

茯苓酸抗大鼠心脏移植急性排斥反应的实验研究

目的 探讨化合物茯苓酸对心脏移植急性排斥反应的抑制作用,为从中药中筛选出具有明确免疫抑制作用和低毒副作用的免疫抑制剂打下了良好的基础. 方法 以32只Wistar大鼠为供体,32只SD大鼠为受体,建立大鼠腹腔异位心脏移植模型,移植后的大鼠随机分为4组,每组8对.茯苓酸小剂量组:茯苓酸1 mg/(kg·d)橄榄油溶液灌胃;茯苓酸大剂量组:茯苓酸10 mg/(kg·d)橄榄油溶液灌胃;环孢菌素A(CsA)组: CsA 5 mg/(kg·d)橄榄油溶液灌胃;对照组:橄榄油溶液0.5 ml/(kg·d)灌胃.灌胃至观察终点.术后观察移植心存活时间,心脏跳动情况和心肌组织学改变,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清白细胞介素2(IL-2)和γ干扰素(IFN-γ) 的含量.结果 茯苓酸大剂量组、茯苓酸小剂量组和CsA组移植心存活时间分别为24.90±0.99 d、15.50±1.60 d和26.80±0.88 d,均较对照组(6.10±1.10 d)显著延长(q=22.363, P=0.000; q=44.793, P=0.000; q=49.272, P=0.000).茯苓酸大剂量组、茯苓酸小剂量组和CsA组血清IL-2水平均低于对照组(q=14.483, P=0.000; q=3.705, P=0.000; q=21.418, P=0.000); 茯苓酸大剂量组低于茯苓酸小剂量组(q=10.778, P=0.000).茯苓酸大剂量组、茯苓酸小剂量组和CsA组血清IFN-γ水平均低于对照组(q=16.508, P=0.000; q=4.281, P=0.000; q=19.621, P=0.000);茯苓酸大剂量组低于小剂量组(q=14.975, P=0.000).术后第7 d移植心病理检查结果显示:茯苓酸小剂量组、茯苓酸大剂量组和CsA组心肌病理损害较对照组明显减轻. 结论 茯苓酸对心脏移植急性排斥反应具有明显的抑制作用.