缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注（I／R）损伤的影响及其机制。方法18只雄性SD大鼠随机分为3组（n=6）：假手术组（S组）、缺血再灌注组（I／R组）和缺血后处理组（IPo组）。采用夹闭双侧肾蒂45min-再灌注6h制备肾脏缺血再灌注损伤模型。IPo组在夹闭双侧肾蒂45min后，再灌注10s，缺血10s，重复3次后，完全恢复肾血流。再灌注6h时开胸，取心脏血后处死大鼠，取肾组织。测定血清肌酐（Cr）、尿素氮（BUN）和尿酸（UA）浓度，肾组织中丙二醛（MDA）含量和超氧化物歧化酶（SOD）活性；光镜下观察肾组织病理学改变；采用原位末端脱氧核苷酸转移酶标记（TUNEL）法检测肾组织中凋亡细胞，光镜下计数凋亡细胞，并计算肾小管上皮细胞凋亡指数（AI）。结果与S组比较，I／R组和IPo组Cr和BUN浓度升高（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），肾组织SOD活性降低，MDA含量升高，肾小管上皮细胞凋亡指数增加（P〈0．05），病理损伤明显。与I／R组比较，IPo组Cr和BUN浓度降低（P〈0．05），UA浓度差异无统计学意义（P〉0．05），SOD活性升高，MDA含量降低，肾小管上皮细胞凋亡指数减少（P〈0．05），病理损伤减轻。结论缺血后处理能减轻大鼠肾缺血再灌注损伤，其机制与增强肾脏抗氧化能力和抑制肾组织细胞凋亡有关。     

丹参对大鼠缺血再灌注肾组织一氧化氮合成酶mRNA表达的影响

目的：探讨丹参对肾缺血再灌注损作保护效应的分子机制。方法：以大鼠缺血再灌汪肾损伤为模型，采用组织细胞原位杂交有图像分析技术技术，检测cNOS（eNOS和nNOS）及iNOSmRNA在缺血再灌注肾组织中的表达，并测定肾组织NOS总活性有血肌酐（Cr）。结果：①3种NOS在正常肾组织中均有表达，其中eNOS表达最丰富，cNOS／iNOS比值为2．29。②缺血时，肾组织NOS总活性显著下降，3种NOSmRNA在皮质、髓质有小球中的表达均下调，以eNOS最显著，cNOS／iNOS比值呈下降（2．01）趋势。③再灌注后，3种NOSmRNA的表达明显上调，以iNOSmRNA最明显，cNOS／iNOS的比值降至1．77。④肾缺血注射丹参后再灌注，iNOSmRAN表达明显下调，而nNOSmRAN则显著上调，cNOS／iNOS比值处于正常范围（2．14），Cr含量下降至正常水平。结论：①皮质肾小管上皮中iNOS活性升同与再灌汪后肾功能进一步受损密切相关。②缺血再灌注肾损伤中，丹参抑制iNOSmRNA和促进cNOSmRNA的表达是其介导肾保护效应的重要分子机制。③cNOS／iNOS比值的恒定对肾血流量和肾小球滤过率（GFR）的调节可能具有重要的意义。     

缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的探讨缺血后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响。方法SD大鼠32只,雌雄不拘,随机分为4组（n=8）,假手术组（Ⅰ组）;对照组（Ⅱ组）建立肾缺血再灌注（I/R）模型;不同时间缺血后处理组（Ⅲ组和Ⅳ组）,建立I/R模型,Ⅲ组于缺血后再灌注10s,停灌10s,反复3次;Ⅳ组缺血后再灌注2min,停灌2min,反复3次。测定再灌注24h时血清尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）浓度、超氧化物岐化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）浓度,光镜下进行肾组织病理形态学观察,采用免疫组化法测定肾组织血红素氧合酶-1（HO-1）表达。结果再灌注24h时,与Ⅰ组比较,其余3组血清Cr、BUN和MDA浓度升高,SOD活性和HO-1表达降低（P〈0.01）;与Ⅱ组比较,Ⅲ组和Ⅳ组血清Cr、BUN、MDA浓度和HO-1表达降低,SOD活性升高（P〈0.05或0.01）;Ⅲ组和Ⅳ组各指标差异无统计学意义（P〉0.05）。Ⅲ组和Ⅳ组病理改变明显轻于Ⅱ组。结论缺血后处理可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,其机制与上调HO-1的表达和清除氧自由基有关。     

大鼠肾缺血再灌注损伤中ICAM-1表达的变化

目的:观察细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)在大鼠肾缺血再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)不同时间点表达的变化并与肾功能恶化程度做相关性分析,从而探讨ICAM-1在肾I/R损伤中所起的作用.方法:应用苦味酸法和二乙酰一肟反应法测定大鼠肾I/R不同时间点血肌酐和尿素氮值, HE染色光镜下观察石蜡包埋切片肾组织损伤的形态学改变,免疫组化法分析ICAM-1在肾I/R不同时间点表达的变化.结果:肾功能检测发现, 再灌注1 h后血肌酐和尿素氮值开始增高和正常对照组比较有统计学差异(P＜0.05),12 h达峰值.HE染色光镜下观察肾组织细胞以近端肾小管变性、坏死为主,I/R各时间点肾组织病理损伤变化与肾功能变化规律相一致.再灌注后早期ICAM-1表达以内皮细胞为主,后期肾脏各部均可表达,小管上皮尤甚.肾脏表达的ICAM-1与肾功能恶化程度存在明显的正相关(P＜0.01).结论:I/R早期肾脏即有ICAM-1表达,其表达量与肾功能恶化程度呈正相关,提示ICAM-1在肾I/R损伤发病机制中起促进作用.     

缺血预处理对大鼠急性缺血-再灌注肾细胞凋亡的影响

目的:探讨缺血预处理对急性肾缺血-再灌注细胞凋亡的影响。方法:采用8 min缺血加5 min再灌注预处理在体肾缺血-再灌注模型(I45 min I-R 6h),将实验动物随机分为正常(A组)、假手术(S组)、单纯缺血(B组)、缺血再灌注(C组)、预处理(D组)五组,采用透射电镜、流式细胞仪检测肾细胞凋亡和细胞增殖周期,利用光学显微镜进行组织学观察,同时测定血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)及MDA含量。结果:与A、S组相比,C组细胞凋亡率显著增高(P<0.01);与C组相比,D组细胞凋亡率和细胞增殖指数均降低(P<0.01),G0/G1时段增加(P<0.01),肾组织损伤病理评分显著降低(P<0.05),同时肾超微结构破坏较轻。结论:缺血预处理对急性肾缺血-再灌注有保护作用,可以减轻急性肾缺血-再灌注引起的细胞凋亡,其作用机制可能与调节细胞增殖周期有关。     

肾缺血/再灌注损伤时P38丝裂原活化蛋白激酶及细胞凋亡的实验研究

P38MAPK是丝裂原活化蛋白激酶(MAPKS，mitogen—activated kinase)的一个亚类，有关P38MAPK信号通路在肾缺血／再灌注损伤中与细胞凋亡关系的研究国内外很少。本研究通过检测肾缺血／再灌注不同时间点细胞凋亡及P38MAPK的变化，来揭示肾缺血／再灌注损伤的病理机制。     

臭氧氧化预处理在肾缺血再灌注损伤中对内皮型一氧化氮合酶表达的影响

目的 观察臭氧氧化预处理对大鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其对内皮型一氧化氮合酶（eNOS）表达的影响.方法 38只8周龄雄性Wistar大鼠按随机数字表法随机分为4组.（1）假手术组（n＝8）：仅切除右肾;（2）缺血再灌注组（n＝10）：切除右肾、游离左肾后夹闭左肾动、静脉45 min再开通;（3）臭氧氧化预处理组（n＝10）：与缺血再灌注组建模方法一致,但在建模前15 d起每天1次经直肠灌注法吹入氧气和臭氧的混合气体5~5.5 mL;（4）氧气预处理组（n＝10）：与臭氧氧化预处理组建模方法一致,但经直肠仅吹入氧气（13 mg/kg）.建模后24 h检测各组大鼠血清肌酐、血尿素氮和血清一氧化氮浓度;48 h后采用免疫组织化学法和逆转录PCR法检测各组大鼠肾组织eNOS表达;蛋白质印迹法检测肾组织胞浆eNOS含量.结果 建模后24 h,缺血再灌注组大鼠血清肌酐为（117±20）μmol/L,血尿素氮为（32.8±7.6）mmol/L,血清一氧化氮为（58±12）μmol/L,均高于假手术组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.臭氧氧化预处理组血清肌酐为（63±16）μmol/L,血尿素氮为（17.4±5.2）mmol/L,低于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义（均P〈0.05）;血清一氧化氮为（84±14）μmol/L,均高于缺血再灌注组和氧气预处理组,差异有统计学意义（均P〈0.05）.臭氧氧化预处理组肾组织学Paller评分（41±6）低于缺血再灌注组（62±9）,eNOS灰度值（163±15）高于缺血再灌注组（126±18）,差异有统计学意义（均P〈0.05）.假手术组大鼠肾组织内有微量eNOS mRNA表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS mRNA表达增强,均高于假手术组（均P〈0.05）,臭氧氧化预处理组eNOS mRNA表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组（均P〈0.05）.假手术组无明显eNOS蛋白表达,缺血再灌注组、臭氧氧化预处理组和氧气预处理组eNOS蛋白表达增强,均高于假手术组（均P〈0.05）,臭氧氧化预处理组eNOS蛋白表达高于缺血再灌注组和氧气预处理组（均P〈0.05）.结论 臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤有保护作用,作用机制可能与其诱导eNOS合成增多、一氧化氮产生增多有关.     

大鼠肾冷缺血再灌注损伤模型的建立

目的 建立大鼠肾冷缺血再灌注损伤(IRI)的模型.方法 封闭群SD大鼠24只,随机分为2组(n=12):A组(对照组),B组(实验组).A组切除右肾并游离左肾蒂,60 min后关闭腹腔切口.B组采用冷缺血再灌注模型,主要步骤:(1)冷灌注:右肾动脉插管对左肾原位灌注.通过右肾静脉插管将灌注液引流出体外,完成冷灌注后切除右肾,阻断左肾蒂.(2)冷缺血保存:将已充分游离的左肾牵至腹腔外,在自制保存袋中冷保存.(3)再灌注:60min后,去除保存袋,开放血流,再灌注左肾,左肾复位,缝合切口;2组大鼠均在术后24 h再次手术切除左.肾.肾组织进行光镜、电镜形态学检查,检测肾组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活力、丙二醛(MDA)含量,术前与术后24 h取血标本进行测定血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)评估肾功能.结果 (1)形态学检查(光镜与电镜超微结构):A组肾脏组织形态结构正常,B组损伤表现明显;(2)A组手术前后比较血浆BUN、Cr测定值差异均无统计学意义(P＞0.05).IR后的B组均高于术前,差异有统计学意义(P＜0.05);(3)IRI后A组肾组织匀浆SOD活力高于B组(P＜0.05),A组肾组织匀浆MDA含量测定值低于B组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 建立的模型要求条件简单、易行,可用于肾移植冷缺血再灌注损伤相关的研究;

Abstract：

Objective In this study,for studying IRI in kidney transplantation. ,we established the models of cold ischemia and reperfusion injury in rats. Methods Twenty four SD rats were randomly assigned to two groups:control (A) ,and experimental (B) group. Group A was only removed the right kidney. Cold ischemia reperfusion was performed as the follow-listed model in Group B. The main process of the model: ( 1) Perfusing left kidney: after resected the right kidney of the rat, one pipe was put in the remainder right renal artery to perfuse the left kidney. The perfusion flowed out through another pipe in the right renal vein. The blood vessels of left kidney were clipped after cold perfusion. (2) Cold ischemic conservancy : the operation table was leant to left side, and the left kidney was taken out of abdominal cavity then stored in a cold bag which was full of ice and water,but the vessels of that were intact. (3) Reperfusing left kidney: after 60 minutes, the clip was removed. Left kidneys of all rats in two groups were removed to be detected. Structure of the kidney was evaluated by light microscopy and electronic microscopy. Superoxide dismutase ( SOD) activity and malondialdehyde ( MDA) content in the renal tissues was examined,and the renal function was also assessed by determining the levels of blood urea nitrogen ( BUN) and serum creatinine (CR) before and 24 hours after operation. Results (1) Morphologic change (hematoxylin-eosin staining) :A normal morphology was observed by light microscopy and electon microscopy in group A.Significant injury was detected in group B. (2 ) In group A, there was not significant difference about BUN and CR between before and after operation (P ＞0. 05) ,but in Group B,those increased significantly at 24 hour after operation (P ＜0. 05). (3) Activity of SOD in renal tissues in group A was higher than those in group B (P ＜ 0. 05 ) , meanwhile, Content of MDA in group A was lower than those in group B ( P ＜0. 05 ).Conclusion The rat renal cold ischemia reperfusion model we established is feasible regardless of experimental conditions, and can be studied as the events following IRI in kidney transplantation.     

缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 评价缺血预处理联合后处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠30只,体重250～280 g,随机分为5组(n=6):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、缺血预处理组(IP组)、缺血后处理组(IPo组)和缺血预处理联合后处理组(IP+IPo组).S组仅开腹,游离双侧肾脏,分离双侧肾蒂但不夹闭.采用夹闭双侧肾蒂45 min、再灌注6 h的方法 制备肾缺血再灌注模型.IP组夹闭双侧肾蒂5 min,再灌注5 min,反复3次,余操作同I/R组;IPo组夹闭双侧肾蒂45 min后,再灌注10 8,缺血10 s,反复3次,再灌注6 h.于再灌注6 h时,经心脏抽血后迅速处死大鼠取肾,测定血清肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)的浓度;采用硫代巴比妥酸法测定肾组织丙二醛(MDA)含量,采用黄嘌呤氧化酶法测定肾组织超氧化物歧化酶(SOD)活性;光镜下观察肾组织病理学结果 ;TUNEL法检测肾组织凋亡细胞,计算凋亡指数(AJ).结果 与S组比较,其余各组血清Cr和BUN的浓度升高,肾组织SOD活性降低,MDA含量和AI升高(P<0.05);与I/R组比较,IP组、IPo组和IP+IPo组血清Cr和BUN的浓度降低,肾组织SOD活性升高,MDA含量和AJ降低(P<0.05),肾损伤减轻;与IP组和IPo组比较,IP+IPo组肾组织SOD活性升高,AI降低(P<0.05),肾损伤减轻.结论 缺血预处理联合后处理可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,较单独应用时效果好.     

移植肾缺血再灌注损伤的临床分析

目的 :评价综合防治移植肾缺血再灌注损伤的临床价值。方法 :对本中心开展的 6 0例无特殊情况的同种异体肾移植术应用综合方法防治移植肾缺血再灌注损伤进行分析。结果 :52例恢复良好 ,7例并发急性排斥反应延期恢复 ,1例并发加速排斥反应切除移植肾。结论 :移植肾缺血再灌注损伤经过合理的防治 ,大多预后良好。     

在肝缺血-再灌注损伤中不同NO合酶的表达

在肝缺血-再灌注损伤中，再灌注损伤的发生可分为两期：在早期，内皮细胞肿胀、血管收缩、白细胞压迫性损害和可能的血管内血浓缩形成微循环停滞，这一过程延长缺氧期；在第二期，则发生炎性细胞因子和氧自由基生成的结果。自认识NO为内皮源松弛因子以来。已阐明其很多生理作用，NO合酶(NOS)在氧和辅     

卡托普利对缺血-再灌注鼠心肌一氧化氮及其合酶活性的影响

目的　研究一氧化氮 (NO)和一氧化氮合酶 (NOS)在心肌再灌注损伤中的作用 ,探讨卡托普利(captopril)对缺血 -再灌注鼠心肌保护的机制。　方法　采用 L angendorff离体鼠心灌流模型 ,将 18只 SD大白鼠随机分为 3组 (每组 6只 ) ,对照组、缺血 -再灌注组、卡托普利组。观察心肌 NOS同工酶活性、过氧化物歧化酶活性、丙二醛含量、肌酸激酶含量和冠脉流出液 NO的变化。　结果　缺血 -再灌注组与对照组比较心肌诱导型 NOS(i NOS)活性增高 (P<0 .0 0 1) ,而心肌原生型 NOS(c NOS)活性及总 NOS活性显著降低 (P<0 .0 0 1,0 .0 5 ) ,冠脉流出液 NO含量下降(P<0 .0 1)。卡托普利组再灌注 30分钟 ,心肌 i NOS活性低于缺血 -再灌注组 (P<0 .0 1) ,c NOS活性和总 NOS活性高于缺血 -再灌注组 (P<0 .0 1,0 .0 5 ) ,再灌注期间冠脉流出液 NO水平高于缺血 -再灌注组 (P<0 .0 1) ,心肌损伤较缺血 -再灌注组减轻。　结论　心肌 NOS同工酶活性及 NO产生的失常是心肌再灌注损伤的重要机制之一 ,卡托普利可通过调节心肌 NOS同工酶活性 ,维持正常的 NO水平 ,起到心肌保护作用。     

抑肽酶预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的影响

目的:观察抑肽酶预处理对兔脊髓缺血再灌注损伤的影响,为临床应用抑肽酶治疗脊髓缺血再灌注损伤提供实验依据.方法:6月龄国产大耳白兔39只,随机分为A组(15只)、B组(15只)和C组(9只).A、B组动物于左肾动脉下用主动脉环扎器环扎腹主动脉,缺血60min后开放,再灌注24h.A组于缺血前10min静脉注射抑肽酶3×107IU/kg,继而用Graseby 3500微量泵持续注入抑肽酶1×107IU/(kg·h)至处死动物时;B组用生理盐水代替A组的抑肽酶,其余同A组;C组只暴露不夹闭腹主动脉,不给药.A、B组缺血前,缺血5、10、20、60min及再灌注后8h、24h,C组相应时间点,测定各组皮层体感诱发电位(CSEP).A、B组缺血前,缺血再灌注后8h、24h,C组相应时间点,处死动物,取L2～L4脊髓行一氧化氮(NO)及一氧化氮合酶(NOS)测定,取L3～L4脊髓灰质切片进行组织学检查,观察神经无形态变化.结果:A、B两组缺血5min时CSEP的P1波和N1波潜伏期较缺血前延长、波幅降低(P<0.05),缺血20min时两波潜伏期及波幅消失,缺血冉灌注后8h两波潜伏期及波幅有所恢复,但较缺血前及缺血后5min、10min时明显延长和降低(P<0.01),缺血再灌注后24h两波潜伏期及波幅较前面各时间点延长和降低(P<0.01);缺血再灌注后8h、24h,A组较B组P1波和N1波潜伏期短、波峰高(P<0.05),而C组较A、B组潜伏期短、波峰高(P<0.01).A、B两组NO、总NOS及诱导型NOS(iNOS)在缺血再灌注后8h明显升高,24h时更高(P<0.05),在缺血再灌注后8h、24h时A组的NO、总NOS及iNOS较B组低(P<0.01).各时间点C组P1波和N1波潜伏期及波幅不变,NO、总NOS及iNOS量均不变(P>0.05).A、B组脊髓缺血再灌注后神经元均有损伤,但在再灌注后8h、24h时A组神经元损伤程度均较B组为轻:C组神经元正常.结论:抑肽酶预处理可以改善脊髓缺血再灌注早期的CSEP,减少NO含量,从而减少缺血再灌注损伤.     

臭氧氧化预处理对大鼠肾缺血再灌注损伤的热休克蛋白表达的影响

目的 探讨臭氧氧化预处理通过诱导热休克蛋白70(HSP70)的合成,保护大鼠肾脏缺血再灌注损伤的作用与机制.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,I/R前15 d经直肠吹入氧气和臭氧的混合气体5.0～5.5 ml(臭氧浓度50 mg/L,1 mg/kg体蕈,每日 1次).全自动生化分析仪检测尿素氮(BUN)、肌酐(Cr),比色法测定血清的脂质过氧化产物丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD).Western blot检测HSP70蛋白的含量;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测HSP70的表达.结果 肾缺血再灌注24 h后,血清中BUN、Cr、MDA明显增高,肾组织内HSPT0表达明显增强(P<0.05),经臭氧氧化预处理后,血清中的BUN、Cr、MDA均降低,SOD升高;HSP70表达升高更加明显(P<0.05).结论 臭氧氧化预处理可以诱导大鼠肾缺血再灌注组织中HSP70表达,减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤.     

caspase-1及下游炎性因子与急性肾缺血-再灌注损伤

在缺血-再灌注过程中细胞因子的表达异常活跃,正常情况下抑炎因子和促炎因子之间的动态平衡状态被打破.目前这种过度的细胞因子表达被认为是引起包括炎症、细胞凋亡等一系列再灌注损伤的基础.近年的研究表明caspase-1及其下游因子IL-18、IL-1β、IFN-γ这组功能密切相关的前炎性因子,在急性肾缺血-再灌注损伤中发挥重要作用.现将它们在急性肾缺血-再灌注损伤的作用及其作用机制作一综述.     

缺血后处理对犬肾缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响

目的：探讨缺血后处理对犬急性肾缺血再灌注损伤氧化应激反应的影响.方法：将15只成年雄性杂种狗分为3组,每组5只,即假手术组（S组）、缺血再灌注组（I/R组）、缺血后处理组（IPO组）.在肾缺血60min后立即给予再灌注30 s,再缺血30 s,循环3次,然后完全恢复灌注.术前及术后每天检测血清肌酐（Cr）浓度,检测肾组织超氧化物歧化酶（SOD）活性、丙二醛（MDA）含量、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（TAC）.术后犬存活3天,杀死后取左肾标本,光镜下观察肾组织病理学改变.结果：IPO组与I/R组术后3天连续比较,血清Cr浓度有显着降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;IPO组与I/R组比较,SOD、CAT、TAC活性升高,MDA浓度降低,病理损伤明显减轻,差异有统计学意义（P〈0.05）.结论：缺血后处理能减轻肾缺血再灌注损伤氧化应激反应,其机制与氧自由基清除有关.     

缺血后处理对肾缺血再灌注损伤的抑制作用及对细胞凋亡的影响

目的 观察缺血后处理对大鼠急性.肾缺血再灌注损伤的抑制作用及其对细胞凋亡的影响.方法 建立原位大鼠单侧肾缺血再灌注动物模型,摘除右肾后对左肾行缺血后处理,即10 s再灌注,10 s缺血,6次循环后再灌注24 h.全自动生化分析仪检测血尿素氮(BUN)和肌酐(Cr)含量,比色法测定血浆中脂质过氧化产物丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)含量,免疫组织化学法观察肾组织中细胞色素C的表达,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹法(Western blot)检测胞浆中细胞色素C的含量.结果 肾缺血再灌注24 h后,血中BUN、Cr和MDA明显增高,肾细胞凋亡率明显增加.移植肾经缺血后处理,血中BUN、Cr和MDA含量均降低,SOD含量升高,细胞色素C释放减少,肾细胞凋亡率明显降低.结论 缺血后处理可以减轻移植肾脂质过氧化反应,减少肾细胞凋亡率,减轻肾缺血再灌注损伤.     

川芎嗪对小鼠急性肾缺血再灌注损伤的影响

目的 :探讨川芎嗪对小鼠急性肾缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法 :采用无损动脉夹夹闭右肾肾蒂阻断血流 30min ,然后放开动脉夹再灌注 15min、6 0min、2 4h制造小鼠急性肾缺血再灌注模型 ,观察血肌酐、血清尿素氮、血清丙二醛、血浆一氧化氮和肾含水量的变化。结果 :与生理盐水组相比 ,川芎嗪组在缺血再灌注 2 4h血肌酐、血清尿毒氮、血清丙二醛水平显著降低 (P <0 .0 1) ;再灌注 15min的血浆一氧化氮升高 (P <0 .0 5 ) ;肾含水量无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论 :川芎嗪对小鼠急性肾缺血再灌注有一定的保护作用     

硝苯地平对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨硝苯地平对大鼠肾缺血再灌注损伤的影响.方法 健康雄性SD大鼠42只,体重220～250 g,随机分为3组(n=14):假手术组(S组)、缺血再灌注组(IR组)和硝苯地平组(N组).IR组和N组采用夹闭双侧肾动、静脉45 min后恢复灌注的方法制备大鼠肾缺血再灌注模型,S组不夹闭双侧肾动、静脉.N组于夹闭前15 min和再灌注前15 min分别尾静脉注射硝苯地平0.1 mg/kg,IR组分别尾静脉注射等量溶剂.于再灌注6和24 h时留尿,测定尿N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性;抽取腹主动脉血,测定血清肌酐(Cr)、MDA和一氧化氮(NO)浓度,然后处死大鼠取肾,采用流式细胞仪检测肾皮质细胞凋亡情况、热休克蛋白70(HSP70)的表达,免疫组化法测定内皮素-1(ET-1)的表达.结果 与S组比较,IR组血清Cr和MDA浓度、尿NAG活性、HSP70和ET-1表达水平及肾皮质细胞凋亡率均升高(P＜0.05),血清NO浓度差异无统计学意义(P＞0.05);与IR组比较,N组血清Cr和MDA浓度、尿NAG活性、ET-1表达水平及肾皮质细胞凋亡率降低,血清NO浓度升高(P＜0.05),HSP70表达水平差异无统计学意义(P＞0.05).结论 硝苯地平可减轻大鼠肾缺血再灌注损伤,可能与其抑制ET-1表达有关.     

槲皮素对缺血再灌注大鼠离体心脏的作用

目的 观察槲皮素(Quercetin)对缺血再灌注损伤(IRI)离体大鼠心脏的作用.方法 将32只SD大鼠随机分为4组:空白对照组(Control);给药对照组(Control+Que);缺血再灌注组(I/R);缺血再灌注给药组(I/R+Que),行Langendorff心脏灌注,给药组预防性给予槲皮素(5 μmol/L).监测各组心功能(±dp/dtmax),比较再灌注1 h心肌尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶(NOX2)、一氧化氮合酶(iNOS、eNOS)表达和超微结构的变化.结果 I/R组与Control组比较心功能显著降低(分别为18.91±3.38、-22.43±8.84和60.65±11.65、-56.62±8.49,P＜0.01),NOX2、iNOS、eNOS mRNA(分别为0.1590±0.0539、0.0897±0.0236、0.0154±0.0061和0.0247±0.0070、0.0377±0.0135、0.0091±0.0033,P＜0.05)和蛋白的表达均显著增加,心肌超微结构严重损伤;与I/R比较I/R+Que组(45.77±8.05,-42.10±8.71)显著增强心功能(P＜0.01),显著降低NOX2、iNOS、eNOS mRNA(分别为0.0864±0.0358、0.0445±0.0104、0.0085±0.0032,P＜0.05)和蛋白的表达,明显减轻心肌超微结构的损伤.结论 在离体水平预防性给予槲皮素能够显著减轻缺血再灌注对大鼠心肌造成的损伤,保护心脏.

Abstract：

Objective To observe the effect of quercetin (Que) on isolated rat hearts after ischemia-reperfusion injury (IRI). Methods Thirty-two SD rats were divided randomly into 4 groups with 8 in each group: ( 1 ) Control group, isolated hearts contiuosly peffused without ischemia; (2) Control + Que group: isolated hearts contiuosly perfused without ischemia but the adminstration of Que (5 μmol/L) 5 min after perfusion; (3) I/R group: isolated hearts perfused with 30 min global ischemia followed by reperfusion; (4) I/R + Que group: isolated hearts perfused with 30 min global ischemia followed by reperfusion and the adminstration of Que (5 μmol/L) 10 min before ischemia. Hemodynamic parameters ( ± dp/dtmax),myocardial ultrastructure, nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NADPH) oxidases 2 ( NOX2),inducible nitric oxide synthase (iNOS) and endothelial nitric oxide synthase (eNOS) mRNA and protein expression after reperfusion were compared among the four groups. Results As compared with control group, hemodynamic parameters were greatly decreased after reperfusion ( 18.91 ± 3. 38, - 22. 43 ± 8. 84vs 60. 65 ± 11.65, - 56. 62 ± 8. 49 ,P ＜ 0. 01 ), myocardial ultrastructures were significantly destroyed and the expression levels of NOX2, iNOS, eNOS mRNA and protein were significantly increased after 60-min reperfusion (0. 1590 ±0.0539, 0.0897 ±0.0236, 0.0154 ±0.0061 vs 0.0247 ±0.0070, 0.0377 ±0. 0135, 0. 0091 ± 0. 0033, P ＜ 0. 05 ) in I/R group. As compared with I/R group, hemodynamic parameters were significantly recovered (45.77 ± 8.05, - 42. 10 ± 8. 71, P ＜ 0. 01 ), myocardial ultrastructures were well protected and the expression levels of NOX2, iNOS, eNOS were significantly decreased (0. 0864± 0. 0358, 0. 0445 ± 0. 0104, 0. 0085 ± 0. 0032, P ＜ 0. 05 ) in I/R + Que group, but there was no significant difference between control group and control + Que group ( P ＞ 0. 05 ). Conclusion Que can protect isolated perfused rat hearts from IRI by its antioxidative effect.