流式细胞术在细胞活率检测中的应用

目的探讨流式细胞术在细胞活率检测中的应用。方法测试管中用CD45-PerCP单抗标记动员后采集物中的单个核细胞,用碘化丙锭(PI)染色其中死亡的细胞。对照管中不加PI,其余与测试管相同。结果(1)随着温育时间的延长,PI拒染率逐渐降低,温育时间以15 min为宜。(2)PI拒染率与台盼蓝拒染率呈显著正相关(r=0．998);其精密度优于台盼蓝拒染试验。结论流式细胞术适用于细胞活率的检测。     

细胞DNA—Fuelgen染色方法的改良

自从 192 4年 Feulgen等人建立了 DNA- Feulgen染色方法以来 ,至今这种方法仍是 DNA定量测定的主要染色方法之一。我们在从事工作中 ,做了大量的 Feulgen染色以及 DNA含量测定工作 ,在传统的 DNA- Feulgen染色基础上 ,对经典的 Feul-gen染色方法 [1 ]进行了改良 ,获得了理想的特异性 DNA染色效果。经过多次与原 Feulgen染色方法及 DNA测定结果对比 ,改良的 Feulgen染色方法具有结果恒定、染色清晰、组织标本保留时间长、具有重复性和测定标本的稳定性。而且染液的放置时间明显延长 ,节省了染液的配置时间及染料用量 ,并在整个染色…     

马尔尼菲青霉菌细胞化学染色研究

马尔尼菲青霉菌是机会致病菌,在人体免疫功能低下时,易引起以单核巨噬细胞系统受累为主的全身多部位化脓性、慢性肉芽肿性或坏死性感染.在东南亚引起的临床感染仅次于结核分支杆菌和新型隐球菌,居第三位,是引起艾滋病患者感染的主要致病菌.近年内,马尔尼菲青霉菌形态学、真菌培养及与荚膜组织胞浆菌、黑热病小体鉴别的资料日渐增多,但马尔尼菲青霉菌细胞化学特点报道尚少.笔者对河北医科大学第二医院确诊的马尔尼菲青霉菌败血症骨髓和血涂片中马尔尼菲青霉菌进行了12种细胞化学染色,证明马尔尼菲青霉菌含有多种酶类、糖原、黏多糖、脂质、脱氧核糖核酸、核糖核酸及铁颗粒,现报道如下.     

细胞DNA-Feulgen染色方法的改良

自从1924年Feulgen等人建立了DNA-Feulgen染色方法以来,至今这种方法仍是DNA定量测定的主要染色方法之一.     

免疫组化染色防脱片三种方法的比较

目的：对明胶硫酸铬钾、多聚赖氨酸、APES三种防脱片剂进行比较,探讨哪种脱片剂防脱片效果最好。方法：选取大鼠经灌流的脑组织,固定,经冰冻切片机切片,利用明胶硫酸铬钾、多聚赖氨酸、APES处理的玻片进行贴片,做免疫组化染色,对防脱片效果进行比较。结果：经明胶硫酸铬钾处理的切片脱片率为2．5％,多聚赖氨酸的脱片率为10%,APES的脱片率为15％。结论：明胶硫酸铬钾的防脱片效果最好。此法价格低廉,方法简单,任何实验都可使用,特别适用于大批量的使用,可在临床和科研的实验室中积极推广使用。     

用猪AMI模型研究荧光染料CFSE和Brdu作为移植细胞标记物的实用性

目的研究荧光染料CFSE和Brdu作为体内细胞移植标记物的实用性.方法构建猪急性心肌梗死(AMI)模型.用CFSE和Brdu对骨髓单个核细胞进行双标记,经冠状动脉回输至MI区.4周后,利用激光共聚焦显微镜和免疫组织化学法分别观察CFSE和Brdu的定位和标记情况.结果细胞移植4周后,发现Brdu阳性细胞多位于心肌疤痕形成区且MI区的新生血管内壁也出现阳性染色.在MI区可见CFSE标记的带绿色荧光的细胞,但背景色较高.结论在动物实验中,CFSE和Br-du均可作为移植细胞标记物,Brdu的标记效果优于CFSE,适于同时进行形态学和组织学研究.     

免疫组化染色的影响因素与质量控制

近年来,免疫组化在肿瘤诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可。其中良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提,由于免疫组化染色过程中存在许多步骤或环节,且每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,把握好免疫组化的染色过程意义重大。从染色结果看,常见的有以下三种情况。     

尿液有形成分染色技术的研究及应用进展

尿液有形成分染色技术对泌尿系统疾病的诊断与鉴别诊断具有重要临床意义.本文介绍了各种改良染色法、细胞化学染色法、荧光染色法及纺织染料染色法的发展概况,并对尿液有形成分染色技术的发展前景进行了阐述.     

尿液有形成分染色技术的研究及应用进展

尿液有形成分染色技术对泌尿系统疾病的诊断与鉴别诊断具有重要临床意义.本文介绍了各种改良染色法、细胞化学染色法、荧光染色法及纺织染料染色法的发展概况,并对尿液有形成分染色技术的发展前景进行了阐述.     

尿液有形成分染色技术的研究及应用进展

尿液有形成分染色技术对泌尿系统疾病的诊断与鉴别诊断具有重要临床意义.本文介绍了各种改良染色法、细胞化学染色法、荧光染色法及纺织染料染色法的发展概况,并对尿液有形成分染色技术的发展前景进行了阐述.     

羧基荧光素琥珀酰亚胺酯标记肿瘤细胞及其在细胞毒检测中的价值

目的探讨化学染料羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯（CFDA-SE）标记肿瘤细胞的最佳条件及其在细胞毒检测中的价值。方法用不同浓度的CFDA-SE标记K562（人红白血病细胞）、YAC-1（小鼠淋巴瘤细胞）、A375（人乳腺癌细胞）、MCF-7（人黑色素瘤细胞）不同肿瘤细胞系，并检测其0—24h的荧光强度，观察荧光强度变化的时间动力学，选择CFDA-SE标记细胞的最佳浓度；CFDA-SE标记细胞后孵育时间为1—6h，再用DNA染料碘化丙啶（PI）标记，流式细胞仪分析CFDA-SE和PI双标记细胞，并计算细胞死亡率，研究CFDA-SE对细胞的毒性。CFDA-SE标记时间分别为5、6、7、8、10、15min，测定标记不同时间的荧光强度和细胞的死亡率，选择最佳标记时间；用CFSE在最佳条件下标记靶细胞进行细胞毒检测实验。结果对于不同肿瘤细胞系，CFDA-SE标记的最佳浓度不同；CFDA-SE对细胞没有毒性，死亡率低于5％；最佳标记时间为8min。人外周血单个核细胞和BALB／c鼠脾淋巴细胞对肿瘤细胞K562、YAC-1均表现出杀伤活性，杀伤百分率随效靶比和共孵育时间的增加而增加。最佳效靶比为50：1—25：1，共孵育时间为2—4h。结论CFDA-SE具有标记细胞稳定，能用于细胞培养时间较长的研究，不影响细胞功能，适用于流式细胞仪检测细胞毒实验的优点，是一种很好的标记细胞的荧光素染料。     

骨髓基质细胞固紫B盐染色法的建立及其临床意义

目的 建立骨髓基质细胞(BMSC)固紫B盐细胞化学染色法,并评估其临床应用价值.方法 将传代培养的BMSC、骨髓、胸腔积液及腹腔积液标本制成涂片,行固紫B盐染色,观察细胞的着色情况及阳性BMSC形态特征,计数和比较再生障碍性贫血组(AA)、增生性贫血组与健康对照组骨髓标本的BMSC数;并以健康对照组BMSC数的下限值作为AA的诊断界点,随机双盲法评估该方法的诊断价值,计算敏感度、特异度、阳性似然比及阴性似然比.结果 BMSC胞质染成紫红色,胞核不着色,其他细胞(粒、红、巨三系,单核、巨噬细胞,淋巴细胞,浆细胞,间皮细胞等)均不染色;AA组BMSC计数为(1.07±0.29)个,增生性贫血组为(2.26±0.37)个,健康对照组为(1.58±0.33)个,AA组BMSC计数明显低于增生性贫血组和健康对照组(q值分别为24.29、8.83,P均<0.01),健康对照组低于增生性贫血组(q=16.41,P<0.01);本法诊断AA的敏感度、特异度、阳性似然比、阴性似然比分别为90%、93%、12.86、0.11.结论 固紫B盐染色方法操作简便,特异性强,对骨髓的增生程度评价及贫血的鉴别诊断具有较高的诊断价值.     

两种循环酶法检测血清同型半胱氨酸结果的可比性及偏倚评估

目的对两种不同厂家同型半胱氨酸(Hcy)诊断试剂测定结果的可比性及偏倚评估进行研究,为血清Hcy诊断试剂的试验室认可提供试验数据。方法依据美国临床试验室标准化协会(CLSI)中的EP9-A2文件,用上海华臣和深圳奥萨试剂在Hitachi7600-020全自动生化分析仪上对40份患者血清分别进行Hcy测定,其中以华臣试剂为参比方法,以奥萨试剂为试验方法。用线性回归分析对医学决定水平处的预期偏倚和可信区间进行计算,根据生物学变异导出的可允许偏倚为标准,判断试剂的临床可接受性。结果两种试剂对患者血清Hcy测定结果显示,方法内重复性良好,无离群点。在医学决定水平处的系统偏倚临床可以接受。结论同一试验室一个检测项目存在2个或2个以上的试剂时,应进行试剂间的方法比对及偏倚评估,判断其临床可接受性,以保证检验结果的可比性。     

便潜血免疫乳胶凝集试剂的研制及初步应用

目的 为了早期发现、诊断直、结肠癌,建立了一种检测便潜血的新方法。方法 利用免疫学原理,乳胶颗粒作为指示剂,检测粪便中的血红蛋白。结果 该方法灵敏度为40μgHb／g（粪便）,与动物血、组织、人血清无交叉反应;测定范围;40～8000μg Hb／g粪便;对直、结肠癌诊断的灵敏度为100%。结论 与日本同类产品相比,特异性无明显差异（P〉0．05）,灵敏度差异有统计学意义（P〈0．01）。临床应用结果表明,该法简便、快速,优于联苯胺法。由于此法具有较高的临床应用价值,建议使用此法进行粪便潜血检测,以取代传统的化学检测方法。