人胰岛细胞自身抗原69ku蛋白基因的分离及重组质粒鉴定

目的：应用聚合酶链技术获取作为基因探针和体外表达研究所必需的人胰岛细胞自身抗原６９ku蛋白（hＩＣＡ６９）编码基因,为探讨该基因在不同种系间和（或）组织来源间的差 异打下基础。方法：分别从正常白人胰腺细胞和国人胰岛细胞瘤Ｐoly（Ａ＾＋）－ＲＮＡ中逆转录合成编码人胰岛细胞自身抗原６９ku蛋白（hＩＣＡ６９）的全长cＤＮＡ,以双链cＤＮＡ（ds cＤＮＡ）为模板,经聚合酶链反应（ＰＣＲ）特异性扩增出hＩＣＡ６９基因     

聚合酶链反应检测血清HBV－DNA临床价值评价

聚合酶链反应检测血清ＨＢＶ－ＤＮＡ临床价值评价长治医学院（０４６０００）杨予石，连卫民，张娜聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）以直接检出乙肝病毒ＤＮＡ为ＨＢＶ感染的直接依据，是目前最灵敏、最特异的感染性指标。我们应用...     

尿沉淀物直接聚合酶链反应检测TB─DNA及其临床意义

尿沉淀物直接聚合酶链反应检测ＴＢ─ＤＮＡ及其临床意义长治医学院附属医院（０４６０００）王溪，赵中夫，张国英聚合酶链反应（ＰｏｙｍｅｒｏｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎＰＣＲ）近年已被应用于临床检测。特别在对结核杆菌（ＴＢ）的检测方面，它为诊断各部位结核...     

乙型肝炎病毒血清标志与聚合酶链反应判断病毒复制的对照研究

乙型肝炎病毒血清标志与聚合酶链反应判断病毒复制的对照研究卫立堂江广予常吐艳滕兰克焦群智（黄河三门峡医院内三科三门峡市４７２０００）在聚合酶链反应（ＰＣＲ）检测乙肝病毒（ＨＢＶ）ＤＮＡ应用于临床之前，常用乙肝病毒血清学标志（ＨＢＶＭ）来判断体内是否有病...     

细菌性传染病的快速诊断

１小时内诊断病原体（细菌）对临床治疗十分有用。本文介绍ＤＮＡ探针技术、聚合酶链反应（ＰＣＲ）等扩增技术以及荧光法等在临床实验快速诊断试验中的应用，并就如何提高其敏感性和排除假阳性进行探讨。     

1892例血清乙肝病毒聚合酶链检测

１８９２例血清乙肝病毒聚合酶链检测三明市医学生物技术研究所吴青平，徐朝斌，夏爱英三明市第一医院欧文湖，王淑清，曾祥铨，朱春华聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术以其敏感、特异、简便、快速的特点而被广泛应用于病原体的检测，目前国内用于乙肝病毒（ＨＢＶ－ＤＮＡ）检...     

甲,乙,丙,丁,戊型肝炎诊断进展

本文综述了甲、乙、丙、丁、戊型肝炎的诊断进展，分析了各种常规检测方法的优缺点，介绍了分子生物学技术在肝炎诊断中的应用。作者指出，聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术及其与液相杂交或ＤＮＡ印迹试验的结合使用，为丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）感染的诊断提供了非常有效的方法。     

聚合酶链反应在小儿乙肝病毒感染快速诊断中的应用

聚合酶链反应在小儿乙肝病毒感染快速诊断中的应用山西省儿童医院儿科研究所（０３００１３）王银全乙肝病毒（ＨＢＶ）感染是我国最常见的病毒性肝炎之一。本文采用聚合酶链反应（ＰＣＲ）对１５８例被疑为ＨＢＶ感染的血清进行ＨＢＶ—ＤＮＡ测定，并与ＥＬＩＳＡ法比较...     

采用聚合酶链反应技术诊断疱疹性眼病

采用聚合酶链反应技术诊断疱疹性眼病山西省眼科医院（０３０００２）关姣莲山西省卫生防疫站郝利新，王左锋ＰＣＲ技术可以认为是体外模拟天然ＤＮＡ复制过程的一项新技术，其基本原理是：模板ＤＮＡ在热变性作用下解链，然后变性使引物特异地结合到互补模板上，再在ＤＮ...     

PCR法检测慢性乙肝患者HBV－DNA的结果分析

ＰＣＲ法检测慢性乙肝患者ＨＢＶ－ＤＮＡ的结果分析李卓名聚合酶链反应（ＰＣＲ，ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅＣｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ），于１９８５年首见报道。本文应用此技术检测我院住院的ＨＢＶ－Ｍ阳性的慢性肝病患者血清ＨＢＶ－ＤＮＡ，并与酶联免疫检测ＨＢｓＡｇ...     

PCR技术诊断泌尿系结核的初步探讨

ＰＣＲ技术诊断泌尿系结核的初步探讨刘平，杨晓华，邹永康，任平，董虹聚合酶链反应（ＰｏｌｙｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎＲｅａｃｔｉｏｎ，ＰＣＲ）技术检测结核杆菌ＤＮＡ的实验室研究已取得成功，其灵敏度高，特异性强［１］。我院自１９９４年５月至１９９５年６月采用...     

应用聚合酶链反应技术诊断尖锐湿疣

应用聚合酶链反应技术诊断尖锐湿疣太原市中心医院（０３０００９）杨晓华忻州地区妇幼保健院王书萍尖锐湿疣（ＣＡ）的诊断多限于临床观察和组织学检查，对一些临床表现不典型的可疑病例，确诊困难。我们采用了分子生物学体外基因扩增技术聚合酶链反应（ＰＣＲ）方法［１...     

肝炎和巨细胞病毒与再生障碍性贫血相关性研究

应用套叠式聚合酶链反应（ＮＥＳＴ－ＰＣＲ）检测了４６例首发再生障碍性贫血（ＡＡ）和１０５例随机正常人血清中的甲型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＡＶ、ＲＮＡ）、乙型肝炎病毒ＤＮＡ（ＨＢＶ、ＤＮＡ）。丙型肝炎病毒ＲＮＡ（ＨＣＶ、ＲＮＡ）和人类巨细胞病毒ＤＮＡ（ＣＭＶ、ＤＮＡ）。结果显示：ＡＡ组中ＨＡＶ、ＨＢＶ、ＨＣＶ和ＣＭＶ一率分别为８．７％、７８．８９％、４１．３％和６７．３９％;而正常人中ＨＡＶ、ＨＢＶ、睡Ｃ     

浅谈聚合酶链反应技术的正确使用

聚合酶链反应 (ＰＣＲ)是一种选择性体外扩增ＤＮＡ和ＲＮＡ片断的方法。经不断的改进 ,现已发展到多种ＰＣＲ技术。１ＰＣＲ原理及操作技术１ １ＰＣＲ的基本原理 :ＰＣＲ模拟于ＤＮＡ的自然复制过程 ,它利用人工合成引物介导的ＤＮＡ聚合酶促反应 ,引物按照碱基配对与ＤＮＡ模板互补结合以后 ,在ＤＮＡ聚合酶的作用下 ,按照碱基配对的原则 (Ａ＿Ｔ，Ｃ＿Ｇ)从引物开始合成与模板ＤＮＡ互补的ＤＮＡ链。经变性、退火、延伸等一次循环 ,ＤＮＡ链数量增加一倍 ,模板在以后进行的循环 ,新合成的ＤＮＡ都起模板作用。如此循环一次 ,ＤＮＡ拷贝…     

水蛭抗凝多肽的生物合成研究（Ⅰ）：热启动聚合酶链反应快速扩增 …

本文应用启动聚合酶链反应技术,快速扩增出特异的水蛭肽基因,其ＤＮＡ为２２１ｂｐ为２２１ｂｐ,与理论预计相符。     

RDPCR技术检测p53基因DNA损伤的研究

目前可资利用的检测特定基因ＤＮＡ损伤的手段较少。连接介导聚合酶链反应 (ｌｉｇａｔｉｏｎ ｍｅｄｉａｔｅｄｐｏｌｙ ｍｅｒａｓｅｃｈａｉｎｒｅａｃｔｉｏｎ ,ＬＭＰＣＲ)技术由于其灵敏度高和特异性强等优点 ,在研究ＤＮＡ加合物和氧化损伤等方面有较多报道[1～ 3] ,我们也成功地将其应用于检测ＤＮＡ链断裂[4 ] 。但该技术需用酶或化学方法处理在碱基修饰位点把ＤＮＡ链人为切断 ,限制了其应用[5] 。Ｇｒｉｍａｌｄｉ等[6 ] 改进设计的单链连接ＰＣＲ (ｓｉｎｇｌｅ ｓｔｒａｎｄｌｉｇａｔｉｏｎＰＣＲ ,ＳＬＰＣＲ)技术 ,虽然克服…     

聚合酶链反应用于乙肝病毒DNA及性传播疾病病原体检测的诊断价值

我所在１９９５年建立了聚合酶链反应（ＰＣＲ）实验室,几年来通过对门诊患者用 ＰＣＲ技术检测乙肝病毒 ＤＮＡ（ＨＢＶ－ＤＮＡ）及性传播疾病（ＳＴＤ）病原体的检测,从而对ＰＣＲ技术用于上述两项检测方面有了进一步的认识。现报道如下。１材料与方法１．１检测对象①乙肝患者４１４例,男２６１例,女１５３例,年龄９～７２岁。②１９９６～１９９９年到我所门诊就诊疑有淋病奈瑟菌（ＮＧ）、沙眼衣原体（ＣＴ）、解脲支原体（ＵＵ）感染的患者,其中男２８６例,女２０９例,为无选择的随机样品（取其宫颈和尿道分泌物做为样品）。…     

分子微生物学在疫苗学中的应用

病原体的遗传学，细胞生物学和全基因组序列分析已经极大地改变了对微生物疾病的流行病学，发病机理，诊断和防治研究的前景。例如重组ＤＮＡ和聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术是用来分离致病基因的强力有手段，可在生物学相关毒力测定中研究这些基因的致病作用，进而针对一个或几个这类基因发展疫苗，病原体基因组序列提供了一份编码每个毒力因子和免疫的基因清单，候选疫苗通过各种方法（包括最近提出的核酸免疫接种）进行选择和开发，     

巢式聚合酶链反应在乙肝母婴传播中的应用

应用巢式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）对７４例ＨＢＶＭ阳性的孕妇外周静脉血及其新生儿脐血进行了ＨＢＶＤＮＡ检测。结果显示双抗原（ＨＢｓＡｇ和ＨｂｅＡｇ）阳性组ＨＢＶＤＮＡ检出率母血为１００％（８／８），脐血为８７．５％（７／８）。单抗原（ＨＢｓＡｇ）阳性组ＨＢＶＤＮＡ检出率母血为２６．９２％（１４／５２），脐血为１９．２３％（１０／５２）。抗体（抗－ＨＢｃ、抗－ＨＢｓ、抗－ＨＢｅ一项至三项）     

隐匿性慢性乙型肝炎

随着分子生物学技术在病毒检测技术中的应用，已发现部分血清HBsAg阴性的个体，应用聚合酶链反应（PCR）技术检测血清和（或）肝组织中HBV阳性，称之为隐匿性HBV感染（Occult hepatitis B Virus infection）。这种感染状态可发生于抗-HBs和（或）抗-HBc阳性的患者，也可见于HBV血清学均阴性的个体。