肿瘤引起T细胞和NK细胞的ζ链水平下调或缺失

ξ（zeta）链是一种跨膜信号蛋白,以二聚体形式表达在T和NK细胞膜上,影响T和NK细胞的活化。在肿瘤患者的肿瘤浸润淋巴细胞（TIL）和外周血淋巴细胞（PBL）中,T和NK细胞ξ链的水平往往比正常人低甚至缺失,从而导致T和NK细胞丧失免疫活性。ξ链水平低下的患者,其存活率常低于ξ链正常的患者而且预后不好。在免疫细胞内,肿瘤诱导活化的caspase能引起ξ链在蛋白水平的降解,而患进行体内的巨噬细胞通过产生H2O2也能降低ξ链的水平,但可被过氧化氢酶抑制。深入研究肿瘤患者ξ链下调机制,对肿瘤的诊断和治疗具有重要意义。     

人T细胞受体ζ链基因在昆虫细胞中的表达

目的：克隆人T细胞受体 (TCR) ζ链基因，运用昆虫杆状病毒系统表达该蛋白。方法：用RTPCR从人外周血单个核细胞（PBMC）中克隆TCR ζ链cDNA，构建到昆虫杆状病毒系统专用的Transfer载体中，并与杆状病毒共转染昆虫sf 9细胞。用SDSPAGE电泳和用小鼠抗人ζ链蛋白的单抗在流式细胞仪中鉴定重组蛋白的表达。结果：克隆的人TCR ζ链cDNA插入昆虫杆状病毒载体，并在昆虫sf 9细胞中特异地表达了蛋白。表达量约为细胞裂解上清液总蛋白的11%。经SDSPAGE分析，其分子量大小与预期的重组ζ链蛋白一致。用胞内标记流式细胞仪检测证实，转染重组杆状病毒的昆虫细胞含有人的ζ链蛋白。结论： 从人PBMC中成功克隆了T细胞受体ζ链的基因，并在昆虫细胞中获得高效表达。用生物工程技术获得TCR ζ链蛋白有利于深入研究其生物学功能     

维甲酸对DENA诱发肝癌大鼠的T淋巴细胞亚群与NK细胞的影响

目的：本文探讨维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖对T淋巴细胞亚群和NK细胞的影响。方法：设三个实验组,分别收集30个大鼠外周血样本,然后进行免疫荧光抗体标记。应用流式细胞仪（EPICS-XL）检测T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分率。结果：对照组与健康组比较,CD4＋细胞数明显减少,CD8＋细胞数明显增多,CD4＋/CD8＋比值下降（P〈0.01）。维甲酸组与健康组比较,CD4＋、CD8＋和CD56＋细胞数均无显著性差异（P〉0.05）。结论：维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖时对机体免疫功能的改善有一定影响。     

CIK治疗后肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞变化研究

目的:探讨CIK(CellInductionKiller)治疗后肿瘤患者的免疫功能状态。方法:采用流式细胞术检测20例肿瘤患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞。结果:肿瘤患者CD3+、CD4+、CD3-/CD16+56+细胞和CD4/CD8比值明显低于对照组并呈显著性差异,而CD8+细胞高于对照组(P<0.01)。CIK生物治疗后CD3+、CD4+、CD3-/CD16+56+细胞和CD4/CD8比值都升高,其中CD4+、CD3-/CD16+56+细胞与治疗前比较呈显著性差异(P<0.05),而CD8+细胞与治疗前比较降低(P<0.05)。结论:肿瘤患者的免疫功能低下,CIK生物治疗能够提高机体的免疫功能。流式细胞术对患者免疫功能的监测,具有快速、灵敏、准确的特点,对于评价疗效、判断预后具有重要价值。     

T及NK细胞ζ链与恶性肿瘤的研究进展

ζ链是T和NK细胞膜上重要的信号转导分子，能影响T和NK细胞的活化。恶性肿瘤患者T及NK细胞中ζ链的表达水平往往比正常人低甚至缺失，从而导致T和NK细胞免疫功能的缺陷，且ζ链水平与患者肿瘤负荷和预后密切相关，现综述ζ链表达异常与恶性肿瘤发生、发展的相关性以及如何利用‘链对肿瘤患者进行治疗的研究现状。     

胃肠道恶性肿瘤患者NK细胞和T细胞亚群的改变

胃肠道恶性肿瘤患者ＮＫ细胞和Ｔ细胞亚群的改变曹健乔颖陈大伟我们用流式细胞仪观察了ＮＫ细胞和Ｔ细胞亚群变化与胃肠道恶性肿瘤的发病关系。材料和方法胃癌和大肠癌患者共６３例，年龄５６±１２．３２岁。另取非消化道恶性患者２４例作为对照，其中腹股沟斜疝７例，大...     

肾细胞癌免疫治疗的研究进展

肾细胞癌（renal cell carcinoma, RCC）是成年男性常见的恶性肿瘤, 其发病率和死亡率排名均较前。免疫治疗能够激活机体免疫系统产生对肿瘤的反应使疾病稳定,但高剂量不良反应限制了其在临床的广泛应用。而靶向药物的兴起让肾癌患者治疗方式向靶向治疗转变。随着对肾癌临床治疗方式的不断深入研究,发现单纯的免疫或靶向治疗难以得到令人满意的疗效。因此有学者提出肾细胞癌的治疗应该向免疫联合靶向治疗方向转变。本文旨在对当前肾细胞癌相关免疫治疗的临床研究作一综述,以期为临床肾细胞癌的免疫治疗提供一定的理论依据。     

维甲酸对DENA诱发肝癌大鼠的T淋巴细胞亚群与NK细胞的影响

目的:本文探讨维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖对T淋巴细胞亚群和NK细胞的影响。方法:设三个实验组,分别收集30个大鼠外周血样本,然后进行免疫荧光抗体标记。应用流式细胞仪(EPICS-XL)检测T淋巴细胞亚群和NK细胞的百分率。结果:对照组与健康组比较,CD4 细胞数明显减少,CD8 细胞数明显增多,CD4 /CD8 比值下降(P<0.01)。维甲酸组与健康组比较,CD4 、CD8 和CD56 细胞数均无显著性差异(P>0.05)。结论:维甲酸抑制大鼠肝癌细胞增殖时对机体免疫功能的改善有一定影响。     

T及NK细胞ζ链与恶性肿瘤的研究进展

ζ链是T和NK细胞膜上重要的信号转导分子,能影响T和NK细胞的活化.恶性肿瘤患者T及NK细胞中ζ链的表达水平往往比正常人低甚至缺失,从而导致T和NK细胞免疫功能的缺陷,且ζ链水平与患者肿瘤负荷和预后密切相关,现综述ζ链表达异常与恶性肿瘤发生、发展的相关性以及如何利用ζ链对肿瘤患者进行治疗的研究现状.     

乳腺癌患者外周血T淋巴细胞及NK细胞的检测及其临床意义

目的:探讨乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞活性的临床意义。方法:采用流式细胞仪测定乳腺癌患者外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞的活性,以正常人作对照。结果:乳腺癌患者外周血CD3 ,CD4 ,NK细胞数量及CD4 /CD8 比值较正常对照组均明显下降(P<0.05),而CD8 细胞水平显著升高。外周血T淋巴细胞亚群和NK细胞数量的改变与乳腺癌临床病理指标有关,分期越晚,CD3 细胞、CD4 细胞、CD4 /CD8 细胞比值及NK细胞数量越低,CD8 细胞水平越高;I、II期乳腺癌患者与III、IV期患者之间有显著差异(P<0.05)。结论:乳腺癌患者细胞免疫功能低下,且临床病理分期越晚,其免疫功能越低,检测T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于乳腺癌患者的免疫监测。     

食管癌患者外周血中自然杀伤性T细胞含量的检测及其临床意义

 　目的　研究食管癌患者外周血中自然杀伤性（NK）T细胞在手术前后的表达情况。方法　采用流式细胞术（FCM）分析59例食管癌患者手术前后外周血中CD3、CD56、CD4、CD8抗体的表达,研究NKT细胞及其亚群的表达情况及所占比例。结果　随着CD+3 CD+56 CD+8／CD+3 CD+56 CD+4的比值逐渐升高,Ⅲ～Ⅳ期食管癌患者的比例逐渐降低,ANOVA示组间差异有统计学意义（P＜0.05）;CD+3 CD+56 CD+8／CD+3 CD+56 CD+4的比值与CD+3 CD+56 CD+4 NKT细胞非线性相关;CD+3 CD+56 CD+8 NKT细胞与NK细胞正相关,与CD+3 T细胞负相关。结论　CD+3 CD+56 CD+8／CD+3 CD+56 CD+4 的比值可能与肿瘤负荷有关,并且有助于判断食管癌患者的疾病程度及预后。     

膀胱癌微卫星改变及其临床意义

目的探讨膀胱癌微卫星不稳定性的表现及意义。方法采用PCR方法检测40例膀胱癌患者5个微卫星位点的改变,同时用同样的方法检测癌组织中BAX基因和TGF-βⅡ型受体基因移码突变的情况。结果至少发生一个微卫星位点改变的阳性率为82.5%(33/40),D9S162、D16S476、D9S54、FGA和IFN-A1位点改变各自的阳性率分别为57.5%(23/40)、42.5%(17/40)、37.5%(15/40)、47.5%(19/40)和55.0%(22/40),阳性检出率与良性病变相比,差异有显著性,检出率与肿瘤的分期分级无显著相关性。发生微卫星改变的33例中,42.4%(14/33)和33.3%(11/33)分别可见BAX基因和TGF-βⅡ型受体基因的移码突变。结论检测微卫星的改变是膀胱癌早期诊断、监测复发的有效手段,微卫星改变可能是膀胱癌发生过程中多基因突变的一种表现形式。     

晚期肺癌患者外周血Treg细胞与NK细胞及其活化受体检测临床意义的探讨

目的:观察CD4+CD25highCD127low调节性T细胞(Treg细胞)、NK细胞及其活化受体(NKG2D)在初诊晚期肺癌患者外周血中的变化,探讨它们在肺癌发病中的作用及临床意义。方法:流式细胞术检测90例初诊晚期肺癌患者及45位健康人外周静脉血CD4+CD25highCD127lowTreg细胞、NK细胞及NKG2D的水平,并就其中27例患者化疗前后数据对比。结果:与对照组比较,肺癌组CD4+CD25highCD127lowTreg细胞比例明显升高,t=3.500,P=0.001;NK细胞比例及NKG2D的表达明显降低,t值分别为-3.534和-5.228,P值均为0.001。Ⅳ期患者CD4+CD25highCD127lowTreg细胞比例较ⅢA期患者明显升高,F=3.657,P=0.030。化疗后患者NK细胞及NKG2D较化疗前明显降低,t值分别为3.176和2.771,P值分别为0.004和0.01。化疗前后患者CD4+CD25highCD127lowTreg细胞水平差异无统计学意义,t=1.419,P=0.168。肺癌患者外周血CD4+CD25highCD127lowTreg细胞比例与NK细胞比...     

食管癌放疗患者T淋巴细胞和自然杀伤细胞水平的临床研究

 【摘要】　目的　探讨行放疗的食管癌患者外周血T淋巴细胞、自然杀伤（NK）细胞的变化及其与放疗疗效的相关性。方法　对56例经病理组织学确诊的食管癌患者采用单纯放疗,应用流式细胞术测定其治疗前后外周血T淋巴细胞亚群及NK细胞比例,评价其与近、远期治疗效果的相关性。以30名健康体检者外周血为健康对照。结果　食管癌患者外周血T细胞比例、Th细胞比例、Th／Ts分别为（58.3±5.2）%、（28.7±5.0）%、1.0±0.3,低于健康对照组的（65.8±7.2）%、（38.1±7.7）%、1.6±0.7（均P＜0.05）;而Ts细胞比例为（28.8±5.3）%,高于健康对照组的（25.4±5.7）%（P＜0.05）。外周血T淋巴细胞亚群及Th／Ts的变化与患者性别、肿瘤分期、病理分化程度、病变部位等临床病理参数之间的差异均无统计学意义（均P＞0.05）。放疗后,患者外周血总T细胞比例、Th细胞比例、Th／Ts及NK细胞比例分别为（66.9±4.5）%、（40.6±5.6）%、（1.6±0.5）%和（16.2±3.9）%,均高于治疗前的（59.4±4.9）%、（29.1±4.2）%、（1.0±0.4）%和（14.6±3.2）%（均P＜0.05）,而Ts细胞比例治疗后为（25.4±3.6）%,较治疗前的（28.4±5.7）%降低（P＜0.05）。总T细胞、Th细胞增高程度与病变进展密切相关,差异有统计学意义（均P＜0.05）。结论　T淋巴细胞亚群、NK细胞可用于行放疗的食管癌患者的免疫监测。检测患者外周血相关指标的表达对评估患者的免疫功能、治疗及预后具有一定的临床意义。     

膀胱癌患者外周血髓系来源的抑制细胞的比例及其临床意义

目的分析髓系来源的抑制细胞（myeloid-derived suppressor cells,MDSC）在膀胱癌患者外周血中的分布,初步探讨其临床意义。方法采用流式细胞术检测62例膀胱癌患者及20例健康人外周血中MDSC的比例,分析MDSC比例与临床病理特征和CD4＋CD25high调节性T细胞（Treg）的关系。结果与正常对照（0.122±0.043）%相比,膀胱癌患者外周血中MDSC比例明显增加（0.679±0.438）%,二者差异有显著性（P〈0.01）;手术后,患者外周血中MDSC的比例明显下降,与术前比较有统计学意义（P〈0.05）;MDSC水平与膀胱癌肿瘤分期明显相关,而与肿瘤的分化程度和患者外周血Treg水平无显著相关（P〉0.05）。结论膀胱癌患者外周血MDSC细胞水平明显升高,可能与肿瘤免疫功能低下及肿瘤发生发展密切相关。     

非小细胞肺癌EGFR基因突变异质性研究进展

 表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶抑制剂（TKIs）在EGFR基因活化突变阳性晚期非小细胞肺癌（NSCLC）患者中疗效显著,然而,同样是EGFR活化突变阳性的NSCLC患者接受EGFR-TKIs治疗后,疗效仍有明显差异;同一个患者的不同瘤灶也会对EGFR-TKIs出现不同的反应,这些现象可能与EGFR基因突变异质性有关,同一瘤灶的不同部分、同一患者的不同瘤灶、以及同一瘤灶治疗前后EGFR突变状态都有可能不一致。本文将从这三个方面对EGFR突变异质性研究进展作一综述。     

乳腺癌患者外周血CD4+CD25+调节性T细胞的检测及意义

目的探讨乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞的变化及意义.方法采用流式细胞技术检测64例乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞,采用ELISA法检测外周血中转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达水平.结果乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+调节性T细胞占T淋巴细胞的百分比为(5.1±2.9)%,高于乳腺良性肿物患者和健康志愿者(P均<0.05).乳腺癌患者外周血中CD4+CD25+T细胞水平与肿物大小、TGF-β1呈正相关(r分别为0.511和0.253),与CD8+CD28+T细胞和NK细胞呈负相关(r分别为-0.243和-0.301).结论乳腺癌患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4+CD25+调节性T细胞水平较高,对乳腺癌患者具有免疫抑制作用.     

肺癌患者调节性T细胞与NK细胞活化受体NKG2D的相关性及其临床意义

目的 分析肺癌患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞及自然杀伤细胞(NK细胞)活化受体NKG2D的表达水平之间的关系,探讨其在肿瘤免疫逃逸机制中的作用及临床意义.方法 选择70例肺癌患者,均经病理确诊.采用流式细胞术(FCM)检测患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞、NK细胞及NKG2D表达水平,并以50名健康人为对照.结果 肺癌患者外周血中CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞比例较健康对照组明显升高[(8.4±4.1)％与(6.7±1.7)％],差异有统计学意义(t=3.09,P＜0.05);肺癌组NK细胞比例与健康对照组比较[(15.6±8.3)％与(17.2±4.2)％],差异无统计学意义(t=-1.33,P＞0.05);肺癌组NKG2D较健康对照组明显降低[(83.3±4.9)％与(87.4±2.9)％],差异有统计学意义(t=3.16,P＜ 0.05).CD+4 CDHi25 CDLo127调节性T细胞与NKG2D呈负相关性(r=-0.302,P＜0.05).结论 在肺癌患者外周血中调节性T细胞可能通过下调NKG2D,参与肿瘤免疫逃逸机制,二者可作为评估肺癌患者免疫功能状态及预后的参考指标.     

Tim-3 在食管癌患者T细胞表面的表达及其临床意义

[摘要] 目的：探讨Tim-3 在食管癌患者T细胞表面的表达及其临床意义。方法：收集2016 年9 月至2018 年4 月郑州大学第一附属医院胸外科25 例食管癌患者的新鲜肿瘤组织和癌旁组织及配对的外周静脉血,同时取10 例健康人外周静脉血。流式细胞术检测25 例食管癌患者癌组织及外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell, PBMC）中T细胞Tim-3、早期凋亡分子和内因子的表达水平,并分析了Tim-3+T细胞的比例与临床病理参数的关系。qPCR检测肿瘤组织及癌旁组织中Tim-3 的表达水平。运用TCGA数据库进一步验证Tim-3 在肿瘤组织和癌旁组织中的表达水平及其与预后的关系。结果：结果发现Tim-3 在食管癌患者肿瘤组织T细胞表达水平较高（P<0.01）。Tim-3+T细胞功能呈耗竭状态（P<0.05 或P<0.01）,且食管癌微环境中T细胞表面Tim-3 的表达与淋巴结转移和临床分期密切相关（均P<0.01）。结论：Tim-3 在食管癌患者T细胞表面的表达导致T细胞功能耗竭,提示Tim-3 可能成为一个潜在的食管癌治疗靶点。     

T2和T3期膀胱癌术后放射治疗及膀胱内灌注化疗疗效分析

目的　分析T2、T3期膀胱移行细胞癌行部分膀胱切除术后放射治疗及膀胱内灌注治疗疗效。方法　回顾性分析本院 93例膀胱癌行部分膀胱切除术后放射 +化疗疗效 ,其中 5 8例接受放射治疗及灌注化疗 (放 +灌组 ) ,35例仅接受膀胱内灌注化疗 (灌注组 )。放射治疗采用 8或 18MVX射线 ,照射剂量为 5 0～ 6 0Gy。膀胱内灌注采用噻替哌或卡介苗 ,前者 5 0～ 6 0mg/次 ,2次 /周 ,共 6次 ;后者 0 .5mg/次 ,1次 /周 ,共 3次。结果　放 +灌组和灌注组 3年局部控制率分别为 6 8.6 %、48.2 %(χ2 =4.0 8,P =0 .0 44 ) ;1、3、5年生存率分别为 94.7%、70 .7%、49.5 %和 87.2 %、5 9.9%、35 .7% (χ2 =1.77,P =0 .184) ;放 +灌组生存 5年者有 78.6 %保存膀胱。放 +灌组放射反应大 ,但患者都能耐受。结论　T2、T3期膀胱移行细胞癌行部分膀胱切除术后放射治疗 +膀胱内灌注化疗可以降低局部复发。