感染登革病毒后抗体产生规律及应用于暴发疫情的血清学诊断

目的了解感染登革病毒后特异性抗体产生规律,指导基层实验室应用血清抗体检测方法对暴发疫情的早期病例作出正确诊断,为控制暴发提供实验室依据。方法采集福建省1次暴发登革热疫情中的发热病人和密切接触者血清标本441份,以及恢复期血清22份,用捕获法ELISA检测登革IgG和IgM抗体,并结合病例的流行病学资料进行分析。结果根据本研究规定的病例判定标准,441例中登革热感染者为228例。其中,IgM抗体检出226例,IgG抗体检出119例。226例IgM抗体阳性标本中,IgG抗体同时阳性的为118份;119例IgG阳性标本中,IgM抗体阴性1例;两者均阴性的标本中用RT-PCR方法检测出1例。22份恢复期血清两类抗体检测均为阳性。绝大部分病例集中在10～70岁,病例的职业分布较广,男女比例为1∶1.53。结论登革病毒感染后特异性IgM抗体在发病早期即可检出,并可维持至少一个半月,但个别病例发病早期IgM可能为阴性;IgG抗体随病程的延长,其检出率逐步增高,至发病后50 d,其检出率可达95%左右。本研究结果抗体产生规律同以往研究结果一致,可为基层实验室开展登革热血清学检测和病例诊断提供参考。     

抗体捕获ELISA检测IgM抗体在新疆出血热病人早期诊断中的应用

采用抗人μ链抗体包被,捕获病人血清标本中的IgM抗体,再加已知的特异性病毒抗原与IgM抗体结合,用抗新疆出血热病毒单克隆抗体酶结合物与病毒抗原结合病人血清中IgM抗体的方法,测定急性期患者特异性IgM抗体,探讨其早期诊断的价值。对8例发病后不同时期的XHF患者进行检测的结果,发病第5天即可检出IgM抗体且滴度已达较高水平,于第14天达高峰后开始下降,但阳性可持续70天以上。而IgG抗体对照检测显示虽然在1/3急性期病人发病第6天即可检出,但滴度很低,第14日后迅速升高,至第70天仍然保持很高滴度。实验结果表明用本法检测IgM抗体进行早期诊断的意义可与病毒分离及特异性病毒抗原的检测结果相比。为XHF的早期诊断提供了一种特异性和敏感性高,并且稳定可靠的诊断工具。     

流行性出血热患者唾液中特异性IgM抗体检测

本文报道应用IgM—抗体捕捉ELISA法检测流行性出血热患者唾液中特异性IgM抗体的结果。该法特异、敏感。检测出EHF患者发病第一天的唾液IgM抗体,阳性率92.86％(26/28)。其中21例在第15～20病日同时采集血清和唾液标本,检测结果唾液IgM阳性率80.95％(17/21)、将血清唾液IgM抗体均阳性的标本5例经2—ME试验,加热试验证明了其特异性。唾液标本较血清取材更方便、简单、成本低。     

一起鼠型斑疹伤寒爆发疫情中患者血清恙虫病抗体检测

目的 筛查一起鼠型斑疹伤寒爆发疫情患者血清中恙虫病抗体。方法 用间接免疫荧光法对20 份爆发疫情病人血清进行鼠型斑疹伤寒和恙虫病IgG 抗体检测。结果 20 例患者中,鼠型斑疹伤寒抗体阳性13 例,阳性率65%;恙虫病抗体阳性2 例（同时鼠型斑疹伤寒抗体阳性）,阳性率10%。结论 该起鼠型斑疹伤寒爆发疫情患者中存在恙虫病感染,临床上应加强对鼠型斑疹伤寒与恙虫病的诊断与鉴别诊断。     

胶体金法检测新型冠状病毒IgM及IgG抗体的价值

目的探讨胶体金法检测IgM及IgG抗体在检测新型冠状病毒肺炎中的价值。方法将26例确诊病例作为检测组,100例发热患者或密切接触者为对照组,采用胶体金法进行新型冠状病毒血清IgM及IgG抗体检测,并对26例病例进行持续的标本采集及抗体检测。结果发现3例核酸检测多次阴性而抗体为阳性的特殊病例;胶体金法检测IgM抗体敏感性为53.85%(14/26),特异性为99.00%(99/100),阳性预测值为93.33%(14/15)、阴性预测值为98.19%(99/111);IgG抗体敏感性为84.62%(22/26),特异性为100.00%(100/100),阳性预测值100.00%(22/22)、阴性预测值96.15%(100/104);发病7～67 d均可能检出IgM及IgG抗体,7 d后IgM阳性检出率大致维持在40.00%左右,IgG阳性检出率随发病天数逐渐升高,7周之后能达到96.55%。结论抗体检测作为核酸检测的补充对提高总的阳性检出率有重要价值,胶体金法适合条件有限的基层实验室。     

2019新型冠状病毒IgM和IgG抗体筛查在孕妇保健中的应用

目的探讨新型冠状病毒IgM和IgG抗体筛查在孕妇保健中的应用价值。方法采用直接化学发光法对疫情期间来本院孕期保健的2 061例孕妇开展2019-nCoV IgM和IgG抗体筛查,阳性者采用胶体金免疫层析法进行复查。同时采集孕妇的咽拭子和粪便标本作新型冠状病毒核酸检测,取COVID-19治愈者生产时的胎盘组织做组织细胞病理学检查。结果直接化学发光法初筛检出血清新型冠状病毒IgM阳性4例,IgG阳性11例。用胶体金免疫层析法复核,仅1例COVID-19康复孕妇两种方法IgG均阳性。血清抗体阳性的15例孕妇咽拭子和粪便标本新型冠状病毒核酸检测均阴性,排除新型冠状病毒感染。检测COVID-19康复孕妇生产时的胎盘血及新生儿静脉血新型冠状病毒抗体IgG阳性,IgM阴性,胎盘组织、羊水、新生儿咽拭子及粪便标本新型冠状病毒核酸阴性。病理检查胎盘组织病理诊断绒毛膜板下炎及绒毛膜羊膜炎Ⅱ期Ⅲ级,脐带血管壁及间质内见中性粒细胞浸润(脐带炎)。结论筛查血清新型冠状病毒IgM和IgG抗体简便易行,可在孕妇保健中与核酸检测互补。COVID-19康复孕妇新生儿新型冠状病毒IgG阳性,胎盘炎症是否由新型冠状病毒感染引起尚缺乏证据。     

微量ELISA技术在检测森脑病人特异IgM抗体中的应用

本文报告用间接微量酶联免疫吸附试验检测森脑特异IgM抗体。在37份采自病后不同时期的森脑患者血清中,共检出25例阳性。试验发现森脑特异IgM在病后1周内即以较高滴度存在,2周左右达到高峰,然后迅速下降,至5月后基本消失。未发现血清中同时存在的特异IgG对IgM检测有明显影响。通过对类风湿因子阳性血清的检测、SPA吸收试验、阻断试验、酶抗体结合物试验等,证实了检测结果的可靠性。这一方法简单、敏感、特异,适用于森脑的早期诊断。     

全自动血型分析仪临床应用评价

目的:探讨Erytra全自动血型分析仪在临床ABO-CDE血型鉴定和抗体筛查中的应用。方法:用Erytra全自动血型分析仪对本院2014-07-2014-12住院及门诊患者的标本进行ABO-CDE血型鉴定和抗体筛查。对机器报告ABO血型正反不一致、抗体筛查阳性标本送血型参比实验室进行进一步确认。另外随机抽取血型报告正常、抗筛阴性标本各1 000例进行试管法验证。结果:全自动血型分析仪对ABO血型检出率为99.97%,能提示弱抗原、弱抗体或亚型标本;对于有多次输血史和妊娠史的患者会出现CDE抗原检测双群或弱阳性现象;抗体筛查不仅能检出IgG类抗体,亦可检出部分IgM类抗体或IgG/IgM混合抗体。一次判读成功的ABO-CDE血型鉴定,抗体筛查阴性结果均与试管法相符,正确率100%。结论:全自动血型分析仪能够快速、准确的检测标本,满足临床的需求。     

抗-cE合并抗-Mur致血型鉴定及交叉配血困难的特征分析

目的分析抗-cE合并抗-Mur致血型鉴定及交叉配血困难的特征。方法对2例受检者血标本进行血型鉴定。其血清与已知血型的试剂红细胞,在盐水、木瓜酶、凝聚胺、抗球蛋白介质中反应,鉴定抗体的特异性。采用盐水法、凝聚胺法、微柱凝胶法进行交叉配血试验。结果病例1血清中存在IgM与IgG混合型抗-cE、IgM型抗-Mur,导致血型鉴定及交叉配血困难。病例2血清中存在IgG型抗-cE、IgM型抗-Mur,导致血型鉴定及交叉配血困难。结论抗-cE合并抗-Mur可致血型鉴定及配血困难,对该类患者进行不规则抗体检测和交叉配血过程中必须采用多种介质,并确认供血者对应抗原为阴性,防止假阴性漏检导致溶血性输血反应的发生。     

化学发光法与胶体金法检测SARS-CoV-2抗体阳性率比较

目的　探讨化学发光法和胶体金法检测SARS-CoV-2抗体在2019冠状病毒病（coronavirus disease 2019, COVID-19）诊断中的应用价值。方法　收集51例COVID-19确诊患者和41例非COVID-19患者的血清,用化学发光法检测非COVID-19组血清中SARS-CoV-2抗体IgM、IgG及联合检测（IgM或IgG）的阳性率;用化学发光法和胶体金法检测COVID-19组血清中SARS-CoV-2抗体IgM、IgG及联合检测（IgM或IgG）的阳性率,比较2种方法的一致性。结果　COVID-19组平均发病时间为（16.9±5.4）d。其中22例IgM阳性,阳性率为43.1%;47例IgG阳性,阳性率为92.2%;49例联合检测（IgM或IgG）阳性,阳性率为96.1%。非COVID-19组中,1例IgM阳性,阳性率为2.4%;0例IgG阳性,阳性率为0;1例联合检测（IgM或IgG）阳性,阳性率为2.4%。在COVID-19组中,化学发光法与胶体金法检测SARS-CoV-2抗体联合检测（IgM或IgG）的阳性率分别为96.1%和68.6%,化学发光法优于胶体金法（P＜0.05）。结论　SARS-CoV-2抗体的检测对COVID-19诊断有重要的意义,且化学发光法检出率优于胶体金法。     

抗体捕捉酶联免疫吸附法在流行性乙型脑炎早期诊断上的应用

用MacELISA测定了138份临床疑似乙脑病人的血清标本,并与HI试验进行了比较。MacELLSA能特异、敏感地检出乙脑患者发病第2天的IgM抗体,阳性率为55.56％。第4、5病日,IgM抗体阳性率高达92.86％。10例正常人和10份流行性出血热病毒抗体阳性的血清标本无一份阳性。     

漳州地区献血人群不规则抗体筛查分析

目的:探讨对献血者进行不规则抗体筛查的临床意义及其对保证输血安全的价值。方法:用盐水介质法对153 009例漳州地区献血人群的血浆标本进行不规则抗体筛查,用抗人球蛋白法做进一步鉴定。结果:153 009例标本不规则抗体筛选阳性92例(0.06%)。通过性别分组以及抗人球蛋白法进一步鉴定发现,58 440例女性献血者中检出不规则抗体为61例(0.104%),94 569例男性献血者中检出不规则抗体为31例(0.033%),女性组不规则抗体检出率高于男性组的不规则抗体检出率(P0.01)。同时,检出的不规则抗体中IgM抗体65例(0.042%),IgG抗体27例(0.018%),IgM抗体检出率高于IgG抗体(P0.01)。结论:对献血者进行不规则抗体检测能减少不规则抗体进入受血者体内的可能性,从而有效提高输血的安全性。     

传染性非典型肺炎病例SARS冠状病毒特异性抗体检测及分析

目的　对福建省传染性非典型肺炎病例血清标本中SARS冠状病毒 (SARS -CoV)特异性抗体进行检测。方法　采用间接酶联免疫吸附试验 (ELISA)测定SARS临床诊断、疑似、医学观察病例以及其他非SARS患者和健康人群血清SARS -CoV特异性IgM、IgG抗体。 结果　 (1) 3例SARS临床诊断病例血清SARS -CoV特异性IgG抗体均为阳性 ,其中 2例IgM抗体阳性 ,2例恢复期血清比急性期血清IgG抗体呈≥ 4倍增长 ;(2 ) 1例疑似病例IgM和IgG抗体均为阳性 ,且恢复期血清比急性期血清IgG抗体呈 >4倍增长 ;(3) 11例医学观察病例IgM和IgG抗体均为阴性 ;(4 ) 5 0例非SARS患者和健康人群IgG抗体全部阴性。 结论　间接ELISA是传染性非典型肺炎实验室特异性检测方法 ,可对SARS临床诊断进行进一步的核实。     

COPD 急性加重期肺炎衣原体感染

肺炎衣原体是急性呼吸系统疾病的常见致病菌。用高分辨单克隆间接荧光抗体染色对COPD 患者咽拭子标本进行肺炎衣原体检测,用微量免疫荧光法检测IgM 和IgG 含量,同时进行肺炎衣原体、革兰氏阴性嗜肺军团菌、巨细胞病毒的血清学试验,以评价COPD 急性加重期肺炎衣原体感染的发病率和流行性。COPD 急性加重期门诊患者142例,年龄30～88     

微柱凝胶抗人球蛋白法检测IgG抗体的实验研究与应用

目的:探讨微柱凝胶抗人球蛋白法(MGT-AGT)替代Coombs试验检测IgG抗体的敏感性和对临床患者血液标本直接抗人球蛋白试验(DAT)阳性检出率.方法:采用MGT-AGT法对不同浓度的DAT阳性标本或IgG抗D致敏红细胞及IgG游离抗D抗体进行实验比较,并用MGT-AGT法、凝聚胺试验(MPT)和Coombs试验,对81例临床患者的血液标本DAT阳性检出率进行了比较.结果:对于DAT阳性标本或IgG抗D致敏的红细胞的检测,MGT-AGT法在1∶128稀释时可以检出,MPT法在1∶32稀释时可以检出,Coombs试验在1∶32稀释时可以检出.对于IgG游离抗D抗体的检测,MGT-AGT法在1∶32稀释时可以检出,MPT法在1∶16稀释时可以检出,Coombs试验在1∶16稀释时可以检出.对于81例临床患者血液标本DAT阳性的检出率,MGT-AGT法为:免疫性溶血性贫血患者87.8%,新生儿溶血病患者68.2%,系统性红斑狼疮患者55.5%;MPT法分别为75.6%、54.5%和33.3%;Coombs试验分别为78.1%、54.5%和11.1%,MGT-AGT法的敏感性高于MPT法和Coombs试验(P＜0.01).结论:MGT-AGT法检测DAT阳性标本、IgG抗D致敏的红细胞、IgG游离抗D抗体的敏感性和对临床患者血液标本DAT阳性的检出率均高于MPT法和传统的Coombs试验.     

酶联免疫吸附试验检测人血清弓形体IgG,IgM抗体的研究

对ELISA检测人血清弓形体IgG、IgM抗体进行了研究。450份孕妇血清中,ELISA阳性率显著高于IHA;抗体滴度分折,ELISA一般高于IHA2～10倍。25份ELISA IgG抗体阳性血清,IFA检出19份;3份IgM抗体阳性和2份IgG、IgM抗体均阳性血清,IFA分别检出2份。2份阴性和4份含不同抗体滴度的阳性血清于第一次测定后,第7天和第21天测定的阴、阳性结果一致,OD值变异系数为2.43～16.52％。39份阳性血清抗体滴度与OD值呈直线比例关系(r=0.991,P<0.0005)。结果表明,ELISA用于弓形体感染的血清学诊断具有较好的实用性。     

严重急性呼吸综合征患者外周血病毒载量和抗体水平动态监测

目的 动态监测严重急性呼吸综合征(SARS)患者外周血SARS病毒载量和抗体含量变化。方法 选择3例因同一传染源感染的SARS患者为研究对象，应用实时荧光定量逆转录，聚合酶链反应(RT—PCR)检测患者外周血PBMCs中病毒载量，用酶联免疫检测技术检测血清SARS病毒IgG、IgM含量。结果 3例患者分别在出现症状后第3～11日、第1～13日、第1～9日检测到SARS冠状病毒核酸，第5～7日病毒载量达到高峰。IgM抗体在患者起病后第7～9日即可被检测到，IgG抗体在患者起病后第7～14日即可被检测到，高峰在第10～20日。结论 SARS病毒载量存在自限性消长过程。SARS抗体IgG、IgM均较早出现，IgG维持时间比IgM长。     

两种结核菌脂抗体的OD值在不同范围时的临床意义

目的　探讨IgG和IgM结核菌脂抗体在初治继发性肺结核中的相关性。 方法　将酶联免疫法的OD值分为三个范围 (≥ 1、0 .99～ 0 .85、<0 .84) ,同时检测和比较 172例初治继发性肺结核 (菌阳 5 0例、菌阴 12 2例 )和 32例非肺结核的IgG和IgM的OD值。 结果　OD值在 0 .99～0 .85范围时 ,结核组与非结核组比较两种抗体敏感性和特异性比较 ,IgM差异有显著性 (P <0 .0 5 ) ,而IgG差异无显著性 (P >0 .0 5 )。肺结核的菌阳与菌阴组中两抗体敏感性和特异性比较差异均无显著性 (P >0 .0 5 )。IgG、IgM两抗体的OD值 :有 2 0 .9%均≥ 1,有 2 4.4%均 <1,有 5 4.6 %则IgM或IgG≥ 1。 结论　初治继发性肺结核IgM结核抗体的敏感性和特异性均高于IgG ,二者同时检测可提高检出阳性率。     

人唾液、尿液中弓形虫抗原抗体的检测

目的探讨用唾液、尿液替代血清进行弓形虫感染免疫学诊断的可行性。方法用ELISA法对血清进行弓形虫循环抗原(CAg)、IgM、IgG抗体的检测,取上述各项免疫学指标阳性的血清样本80例,并随机抽取3项指标均为阴性的血清样本102例,分别与其唾液和尿液标本在同一反应板上同步进行测定,比较其阳性和阴性符合率。结果(1)554份血清样本中,CAg、IgM和IgG3项的阳性率分别为4.51%(25/554)、3.61%(20/554)、6.32%(35/554)。(2)唾液中检出IgM抗体阳性16例,与血清的阳性符合率为80%(16/20),检测CAg、IgG抗体均为阴性。(3)检测尿液中的抗原抗体均无一例阳性。结论采用唾液标本检测弓形虫IgM抗体,在弓形虫感染的诊断及流行病学调查中均具有一定的应用前景。     

严重急性呼吸综合征相关性冠状病毒抗体检测及分析

目的 了解发病期严重急性呼吸综合征(SARS)患者体内Urbani SARS相关性冠状病毒抗体产生的规律，探讨这些患者中肺炎衣原体、肺炎支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒感染情况。方法 采用免疫荧光技术检测43例SARS患者双份血清和10例非SARS患者血清中Urbani SARS冠状病毒抗体IgM／IgG，并采用酶联免疫法检测上述血清中肺炎衣原体、肺炎支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒IgM／IgG。结果 43例患者中新近感染Urbani SARS冠状病毒40例(93％)，3例未检出其感染；10例非SARS患者血清中Urbani SARS冠状病毒抗体IgM／IgG均为阴性。肺炎衣原体、肺炎支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒新近感染率分别为25．6％、163％、7％和4．7％，其既往感染率分别为39．5％、34．9％、27．9％和0。SARS病毒IgM抗体在起病开始便能检测到，其阳性率在起病8～14d和15～33d时分别为69．6％和63％，二者比较无统计学差异，但均显著高于起病1～7d时的阳性率(16．7％)；SARS病毒IgG抗体在起病6d时便能检测到，其阳性率在起病1～7d、8～14d和15～33d时分别为19．4％、65．2％和92．6％，三者之间比较均差异有显著性。结论 SARS患者发病初期即可出现Urbani SARS冠状病毒IgM和IgG抗体，发病2周至1个月时检测阳性率明显增加。部分SARS患者中存在肺炎衣原体、肺炎支原体、腺病毒、呼吸道合胞病毒新近感染和／或既往感染。免疫荧光技术榆测Urbani SARS冠状病毒抗体可用于SARS的早期诊断。