儿童呼吸道感染微生物检验标本采集转运与检测建议(细菌篇)

正1标本的类型选择1.1上呼吸道感染上呼吸道感染包括咽炎、喉炎、会厌炎、扁桃体炎、鼻窦炎等。不同部位的感染在标本选择上有不同要求:咽炎、喉炎、扁桃体炎可采集咽拭子标本培养;会厌炎则不建议采集咽部标本,因为碰触感染的会厌有可能诱发气道完全阻塞,可选择血培养检测病原;中耳炎理想的标本是通过鼓膜穿刺术或鼓膜切开术获取的中耳分泌物,咽、鼻咽、前鼻孔拭子培养或鼻腔引流物培养对急性细菌性中耳炎的病原诊断均无价值;鼻窦炎则应对鼻腔进行消毒后,使用针吸采集鼻窦分泌物标本,不推荐使用其他标本。     

儿童呼吸道感染微生物检验标本采集转运与检测建议(病毒篇)北大核心CSCD

急性呼吸道感染是儿童常见和多发疾病,分为上呼吸道感染和下呼吸道感染。急性上呼吸道感染包括以急性鼻咽炎为主要表现的普通感冒、急性鼻窦炎、扁桃体炎、喉炎、咽炎、会厌炎等;急性下呼吸道感染包括急性气管支气管炎、细支气管炎、肺炎,其中肺炎是5岁以下儿童死亡的最主要原因。引起儿童急性呼吸道感染的常见病原包括病毒、细菌、肺炎支原体、肺炎衣原体等。由于临床特点、治疗方法和预后不同,病原微生物学检验非常重要。为确保病原微生物检验结果准确,保证检验全过程的规范非常关键。标本选择、采集和运输这些检验前阶段对于病原微生物检验是十分重要的,临床上选择和采集标本的人员大多是医生和护士,由于对具体的要求缺乏了解,这个环节常成为整个检验过程中最薄弱的环节。此外,随着呼吸道病原微生物检验手段的不断发展,临床医生也需要对常用的病原微生物检验方法和临床价值有进一步的了解,为此,中华医学会儿科学分会呼吸学组呼吸道感染协作组和《中国实用儿科杂志》编辑委员会组织儿科、临床检验等领域的专家撰写了《儿童呼吸道感染微生物检验标本采集转运与检测建议》,以期为儿科医护人员的临床工作提供参考。本期发表的分别是病毒篇和细菌篇。     

《儿童呼吸道感染微生物检验标本采集转运与检测建议(病毒篇)》解读

病毒是儿童呼吸道感染的主要病原,由于临床表现各异,病原学检测非常重要。由于种种原因,呼吸道感染微生物检验标本的采集、处理、转运等常成为整个检验过程中最薄弱的环节,临床医师对常用的呼吸道病毒检测方法和临床价值也缺乏足够的了解。该文围绕《儿童呼吸道感染微生物检验标本采集转运与检测建议(病毒篇)》,就标本采集的重要性和存在的问题、呼吸道病毒检测方法和结果判读中需要注意的问题等展开讨论。     

应用实时聚合酶链反应技术检测儿童呼吸道标本中的呼吸道合胞病毒

目的建立实时聚合酶链式反应（PCR）技术检测儿科呼吸道标本中呼吸道合胞病毒（RSV）的方法.方法（1）根据RSV N基因序列设计合成分别用于扩增RSV A亚型和B亚型的TaqMan探针和引物,建立实时PCR方法,进行灵敏度和特异性检测.（2）采用实时PCR检测61例RSV检测阳性的冻存标本和103例新收集的呼吸道标本,并与病毒分离、间接免疫荧光、巢式PCR结果相比较.结果（1）实时PCR对A亚型RSV检测的灵敏度为5.25 pfu,B亚型为3.75 pfu,与巢式PCR相同.（2）实时PCR检测其他呼吸道病毒阳性标本,结果均为阴性;A亚型和B亚型之间无交叉.（3）实时PCR检测其他方法检测过的RSV阳性的冻存标本61例,A亚型（30例）阳性为27例（90%）,B亚型（31）阳性为27例（87.1%）.（4）103例新鲜标本中,实时PCR检出RSV 35例（A亚型7,B亚型28）,阳性率34.0%,其中巢式PCR阳性31例,阳性率30.1%;间接免疫荧光阳性22例,阳性率21.4%;病毒分离阳性9例,阳性率8.7%.实时PCR阴性的68例,其他方法均为阴性.实时PCR与三种方法的一致性检验,一致率在74.76%～96.12%（P均＜0.01）;差异性检验结果说明,实时PCR阳性检出高于间接免疫荧光和病毒分离（P均＜0.01）,而与巢式PCR差异无统计学意义（P＞0.05）.结论实时PCR检测儿科鼻咽分泌物标本中RSV的方法,敏感性、特异性和可重复性好,可用于急性呼吸道感染患儿标本中的RSV检测.     

鼻病毒致儿童下呼吸道感染

从1956年Pelon用组织培养方法分离出第一株人鼻病毒(Iauman rhinovirus,HRV)后,先后有多种HRV细胞株被分离,鉴定出的HRV血清型已超过120种.HRV是人类血清型最多的病毒之一,也是人类普通感冒的最主要病毒.既往认为,HRV不能引起下呼吸道感染,原因在于下呼吸道温度达37℃,在此温度下HRV不能生长及复制.后来.通过体内外实验发现,HRV能在37℃环境下于支气管上皮细胞中复制,通过原位杂交及逆转录PCR(RT-PCR)检测支气管肺泡灌洗液后发现,HRV能感染人类下呼吸道,引起肺炎、儿童喘息、哮喘加重以及成人慢性阻塞性肺疾病(COPD)等.且有越来越多的证据表明,HRV是引起婴儿及儿童下呼吸道感染的重要病原之一[1-4].     

呼吸道感染儿童人细小病毒B19检测及临床意义

目的：了解呼吸道感染患儿是否存在人细小病毒B19(HPVB19)感染。方法：采用巢式PCR方法,对2 0 0 0年9月至2 0 0 1年8月2 5 6例临床诊断为呼吸道感染的儿童进行血清及咽分泌物HPVB19 DNA检测,并选择同期且检查前2～4月无呼吸道感染的 10 4例正常儿童为对照组。结果：①血清标本显示,观察组HPVB19 DNA阳性率18.8% (4 8/2 5 6 ),对照组HPVB19 DNA阳性率5 .8% (6 /10 4 ) ,二组相比差异有显著性 (P<0 .0 1) ;观察组4 8例阳性血清样本中,第1季度阳性者为15例,第2季度18例,第3季度7例,第4季度8例,第1,2季度阳性率高于第3,4季度阳性率(P <0 .0 1)。②咽分泌物标本显示,观察组阳性率2 0 .1% (5 4 /2 5 6 ) ,对照组阳性率 3.8% (4 /10 4 ) ,二组相比较差异具有显著性 (P <0 .0 1) ,观察组第1,2 ,3,4季度咽分泌物阳性例数分别为17,2 0 ,8,9例,第1,2季度阳性率高于第3,4季度 (P <0 .0 1)。结论：人类细小病毒B19可导致儿童呼吸道感染,说明HPVB19为儿童呼吸道感染的致病因素之一,对呼吸道感染儿童有必要进行HPVB19的检测;HPVB19所致的儿童呼吸道感染在第1,2季度高于第3,4季度。     

鼻病毒与儿童呼吸道感染的关系研究进展

近年来儿童呼吸道感染的发生率和病死率在全世界范围内均有升高,其中鼻病毒与儿童呼吸道感染的关系尤为密切.除上呼吸道感染外,在感染期间下呼吸道也存在鼻病毒RNA.呼吸道上皮细胞是鼻病毒感染的靶细胞.近年有关鼻病毒感染与呼吸道感染关系的研究,为临床的治疗提供依据.鼻病毒引发呼吸道感染的病理机制还有待深入探讨.     

呼吸道合胞病毒免疫球蛋白治疗儿童骨髓移植后下呼吸道感染

呼吸道合胞病毒（ＲＳＶ）感染是骨髓移植（ＢＭＴ）后常见的并发症之一．据报道ＢＭＴ患者并发ＲＳＶ下呼吸道感染,若未经抗病毒治疗病死率接近１００％,而应用利巴韦林（ｒｉｂａｒｉｒｉｎ）治疗者病死率高达５０％－７０％．报道静注呼吸道合胞病毒免疫球蛋白（ＲＳＶ－ＩＧＹＶ）治疗儿童ＢＭＴ合并ＲＳＶ感染的疗效． 病例和方法ＲＳＶ－ＩＧＩＶ是一种含有高浓度ＲＳＶ中和抗体（抗体滴度＞１９２００ＭＵ／ｍｌ）的ＩｇＧ免疫球蛋白．１９９１年６月至１９９６年２月,１１例ＢＭＴ合并ＲＳＶ感染患儿接受了ＲＳＶ－ＩＧＩＶ治疗…     

儿童急性下呼吸道感染病毒病原学分析

目的了解儿童急性下呼吸道感染病毒病原学特点。方法采用直接免疫荧光法(DIF),对2007年9月—2009年9月住院的5480例0～12岁下呼吸道感染患儿鼻咽分泌物进行8种病毒检测。结果5480例患儿中,2710例检出至少1种病毒,总检出率49.5%。呼吸道合胞病毒(RSV)检出最多,为1386例,占51.1%,其余,依次是偏肺病毒(hMPV)513例(18.9%),副流感病毒Ⅲ(PIVⅢ)338例(12.5%),腺病毒(ADV)192例(7.1%);流感病毒A(IFA)128例(4.7%),流感病毒B(IFB)79例(2.9%),副流感病毒Ⅰ(PIVⅠ)41例(1.5%),副流感病毒Ⅱ(PIVⅡ)33例(1.2%)。6个月以下年龄组阳性率最高,为43.5%。RSV、hMPV季节性较明显,主要集中在冬春季节(11月至次年4月)。肺炎、毛细支气管炎、支气管炎(伴喘息)、支气管炎(不伴喘息)和哮喘患儿病毒阳性率分别为47.4%、63.6%、50.5%、30.1%和43.5%。结论病毒是儿童急性下呼吸道感染的主要病原。发病年龄主要在婴幼儿,其中RSV和hMPV最常见。     

新近发现的呼吸道病毒在儿童呼吸道感染中的研究进展

呼吸道感染是儿童时期最主要的疾病之一,其中病毒在儿童呼吸道感染中起重要作用.随着分子生物学检测技术的发展,人偏肺病毒、人冠状病毒、人博卡病毒、多瘤病毒、新型肠道病毒和C组鼻病毒等病毒逐渐被发现,且被证实可导致儿童呼吸道感染,多种病毒协同感染在呼吸道感染中的作用也逐渐受到重视.该文就近年国内外对这些新发现的病毒在儿童呼吸道感染中的研究现状及其与常见病毒协同感染情况进行综述.     

锌与儿童呼吸道感染

锌是人体重要的微量元素,锌缺乏将导致一系列代谢紊乱和病理变化.我国儿童普遍存在锌缺乏的问题.近年来,补锌对儿童呼吸道感染的防治作用得到广泛关注.该文就补锌对儿童上呼吸道感染和下呼吸道感染的发病率、病死率及病程长短的影响,以及锌在呼吸道疾病的可能作用机制等方面进行综述.     

急性呼吸道感染的病毒原学检测

我科于1992年2月～1997年2月采用桥联酶标法,对3689例急性呼吸道感染(ARI)进行了呼吸道病毒的快速检测。其中上呼吸道感染917例,支气管炎1344例,肺炎1428例;男2221例,女1468例;年龄≤3岁2945例,>3岁774例。共检出病毒阳性者2023例,总阳性率54.84％,包括混合感染298     

急性呼吸道感染儿童中新型鼻病毒C型的检测与临床特点

急性呼吸道感染儿童中新型鼻病毒C型的检测与临床特点(Prevalence and Clinical Characterization of a Newly Identified Human Rhinovims C Species in Children with Acute Respiratory Tract Infections)一文发表在<临床微生物杂志>(Journal of Clinical Microbiology).     

儿童急性下呼吸道合胞病毒单一感染与混合感染对照研究

目的 了解呼吸道病毒混合感染所致急性下呼吸道感染（ALRTI）患儿的临床特征。方法 2007年10月至2011年9月,在首都医科大学附属北京儿童医院住院治疗的临床诊断为ALRTI的患儿1722例,在就诊当日或次日采集鼻咽吸取物1份,采用逆转录（RT）-PCR方法进行常见呼吸道病毒核酸检测,包括呼吸道合胞病毒（RSV）、鼻病毒（RV）、副流感病毒（PIV）1～4型、甲型及乙型流感病毒、腺病毒、肠道病毒、冠状病毒、偏肺病毒及博卡病毒。将单一RSV感染与RSV混合多种病毒感染患儿临床资料进行比较。结果 1722例患儿标本中,370例检出RSV病毒,总检出率21.5%。单一RSV感染206例,RSV与一种病毒混合感染124例,RSV与2种以上病毒混合感染40例。RSV与一种病毒混合感染的124例标本中,RSV/RV感染68例（54.8%）,其次为RSV/PIV感染24例（19.3%）。双重病毒混合感染组与RSV单一病毒感染组比较,双重病毒混合感染组患儿住院时间更长（P＜0.001）。多重病毒感染组与RSV单一病毒感染组相比,患儿发热比例更高（P＝0.017）、发热持续时间更长（P＝0.015）、住院天数延长（P＜0.001）、并且在住院期间接受了更多的静脉激素治疗（P＝0.005）。而在喘息症状、出现合并症（心力衰竭、呼吸衰竭、肝功损害、心肌损害、腹泻）方面差异无统计学意义。在氧疗、呼吸支持治疗及使用支气管扩张剂方面差异亦无统计学意义。结论 与单一RSV感染组相比,RSV合并多重病毒感染患儿发热比例更高、发热持续时间及住院天数更长,且住院期间接受了更多的静脉激素治疗。提示多病毒混合感染可能影响患儿临床进程, RSV感染时应重视混合感染。     

618例儿童呼吸道感染的病毒病原学分析

目的 了解儿童常见呼吸道病毒感染的发生率,比较不同年龄段儿童呼吸道感染的病毒检出情况,并分析儿童喘息症状与病毒感染的关系.方法 以618例呼吸道感染住院患儿为研究对象,取其鼻咽分泌物进行七项呼吸道病毒抗原检测并分析其结果,包括呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、甲型流感病毒(IFA)、乙型流感病毒(IFB)、副流感病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ(PIVⅠ、Ⅱ、Ⅲ).结果 (1)618例送检标本中,166例阳性,总阳性率为26.86％,其中RSV最高,阳性率为17.96％,其余依次为PIVⅢ(5.99％),IFA(1.62％),ADV(0.81％),PIVⅠ (0.49％);混合感染1例,阳性率为0.16％,为RSV与PIVⅠ混合感染.(2)14d～ ＜1岁、1岁～＜3岁、3岁～＜6岁及≥6岁不同年龄组病毒检出阳性率依次为35.04％、18.25％、17.11％、9.26％.(3)不同呼吸道感染性疾病病毒检出率不同,以毛细支气管炎检出率最高,为47.37％.(4)所检测呼吸道感染患儿中婴幼儿更易出现喘鸣体征,喘息患儿中以RSV检出阳性率最高,为42.17％.结论 RSV和PIVⅢ是儿童呼吸道感染的最常见病毒;呼吸道感染的儿童年龄越小,越容易发生病毒感染;喘息患儿中RSV感染率最高.     

小儿急性呼吸道感染与病毒

自从应用组织培养方法于病毒方面的研究以来,打开了发展病毒学的道路。近年在呼吸道病毒的研究方面,又有了新的进展。病毒感染对于小儿急性呼吸道疾病(以下简称ARD)的重要性,逐渐有了明确的认识。根据多数的报导来看,病毒感染约占小儿ARD的20～50％,其中现已发现的病毒约占60～70％,尚有一些病毒有待今后继续研究和鉴定。     

儿童呼吸道感染病原体核酸检测专家共识

急性呼吸道感染是儿童最常见的感染性疾病,严重威胁儿童生命健康。快速准确的病原学诊断对于该类疾病的临床诊疗及防控具有重要意义。核酸检测方法因具有较高的灵敏度和特异性,得以快速地在临床推广应用,成为呼吸道感染病原体诊断的主要方法。为规范儿童呼吸道感染病原体核酸检测的临床应用,提升病原体的诊断水平,特组织相关领域专家,撰写《...     

儿童呼吸道过敏性疾病与感染

近年来,随着人类生活环境的变化,呼吸道过敏性疾病,如过敏性鼻炎、婴幼儿喘息、过敏性哮喘等的发病率不断上升,影响儿童的生活质量,为家庭、社会带来沉重的负担。微生物感染,如病毒、细菌、支原体/衣原体、真菌、寄生虫等感染,均能通过免疫机制来调节呼吸道过敏性疾病的发生、发展。为加强理解呼吸道过敏与微生物感染之间的关系及其相关机...     

肥胖儿童与反复呼吸道感染

反复呼吸道感染（简称复感），是儿科临床常见疾病，作者近年来发现肥胖是儿童易患复感的重要因素，并且肥胖几年龄越小越易复感，现报告如下。一、临床资料选择7岁以下儿童82名，均为儿童保健在册儿童。随机分为肥胖儿（诊断标准参照儿科学1990年版）观察组与正常儿对照组。观