循环小分子RNA:消化道肿瘤的分子传感器

目的总结循环小分子RNA(mi RNAs)与消化道肿瘤的关系,以及其在消化道肿瘤诊断、治疗及预后判断中的应用前景。方法收集国内外关于mi RNAs与消化道肿瘤关系的文献并作综述。结果 mi RNAs可通过基因调控作用,参与调节细胞的增殖、分化和凋亡。消化道肿瘤患者的血循环中常伴有一些异常表达的mi RNAs,其与肿瘤的发生和发展密切相关,不仅有助于肿瘤的诊断,而且还有助于确定肿瘤原发灶部位,甚至有助于临床和病理分期,由此预测肿瘤的进展、复发和转移情况,评估治疗效果等。结论循环mi RNAs可作为消化道肿瘤的分子传感器,用于临床消化道肿瘤的无创早期诊断、治疗和预后评估。     

白藜芦醇通过Wnt/β-catenin信号通路调控髓核细胞细胞外基质表达

目的探讨白藜芦醇(resveratrol,RES)对退变髓核细胞(nucleus pulposus cells,NPC)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)表达的调控作用及其相关分子机制。方法选取临床上接受椎间盘摘除术的10例患者,其中5例为年轻脊柱爆裂骨折患者,作为对照组;余5例为老年腰椎间盘突出症患者,作为退变组。取两组患者髓核组织,免疫组织化学染色比较β-catenin的原位表达,Western blot检测β-catenin、Ⅱ型胶原和聚集蛋白聚糖(Aggrecan)蛋白表达。取退变组髓核组织分离、培养NPC,分别用IL-1β单独(B组)或联合RES(C组)刺激第3代NPC,并设未刺激细胞作为空白对照组(A组),Western blot检测Ⅱ型胶原和Aggrecan蛋白表达。进一步采用小干扰RNA(small interfering RNA,si RNA)靶向沉默SIRT1和β-catenin后,采用Western blot、实时荧光定量PCR检测β-catenin、SIRT1蛋白和基因表达。用完全培养基(1组)、IL-1β(2组)、RES+IL-1β(3组)、SIRT1-si RNA+RES+IL-1β(4组)刺激第3代NPC培养24 h后,细胞免疫荧光染色检测β-catenin核转位情况;用完全培养基(Ⅰ组)、IL-1β(Ⅱ组)、IL-1β+β-catenin-si RNA(Ⅲ组)、IL-1β+RES(Ⅳ组)、IL-1β+RES+SIRT1-si RNA(Ⅴ组)刺激第3代NPC培养24 h后,采用Western blot检测Ⅱ型胶原和Aggrecan蛋白表达。结果免疫组织化学染色及Western blot检测示,与对照组比较,退变组髓核组织中β-catenin阳性表达的细胞比例显著升高(t=4.616,P=0.010);β-catenin蛋白相对表达量显著升高,Ⅱ型胶原和Aggrecan蛋白相对表达量显著下降(P0.05)。细胞学实验发现,B组β-catenin蛋白相对表达量显著高于A、C组,Ⅱ型胶原和Aggrecan相对表达量显著低于A、C组(P0.05)。si RNA转染后,Western blot检测显示SIRT1、β-catenin蛋白表达显著降低(P0.05)。细胞免疫荧光染色结果进一步提示与3组相比,4组SIRT1被si RNA沉默后,RES减弱的β-catenin核转位现象加剧。Western blot检测示,Ⅱ组Ⅱ型胶原和Aggrecan蛋白表达较Ⅰ组明显降低(P0.05);Ⅲ组NPC转染β-catenin-si RNA后,IL-1β对ECM的降解作用被明显抑制,Ⅱ型胶原和Aggrecan蛋白表达较Ⅱ组明显升高(P0.05);Ⅴ组NPC转染SIRT1-si RNA后,抑制了RES对ECM降解的保护作用,Ⅱ型胶原和Aggrecan蛋白表达较Ⅳ组明显降低(P0.05)。结论 RES可以通过抑制Wnt/β-catenin信号通路维持NPC ECM的表达,为椎间盘退行性疾病的治疗提供了新思路。     

沉默信息调节因子2同源蛋白1在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义

目的研究沉默信息调节因子2同源蛋白1(SIRT1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法和组织芯片技术检测88例甲状腺乳头状癌组织中SIRT1的表达,分析SIRT1蛋白的表达情况及其与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系。结果SIRT1阳性染色主要集中在细胞核中,呈黄色或者棕色颗粒。根据免疫组织化学染色评分,88例甲状腺乳头状癌组织中SIRT1阳性率为48.9%。χ~2检验结果显示,SIRT1表达与颈部淋巴结转移、TNM分期显著相关(P0.05),SIRT1表达与年龄、性别、肿瘤大小、癌灶多少、甲状腺包膜浸润不相关(P0.05)。Logistic回归分析显示,SIRT1阳性是甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的独立危险因素(P0.05)。结论 SIRT1可能参与甲状腺乳头状癌的发生发展和颈部淋巴结转移,并可能成为甲状腺乳头状癌颈部淋巴结转移的治疗靶点。     

SIRT1在膀胱癌组织中的表达及临床意义分析

目的:探讨沉默调节蛋白1(SIRT1)在膀胱癌组织中的表达情况及在肿瘤进展、侵袭、转移中的作用。方法:选取82例不同病理分期的膀胱尿路上皮癌患者术后石蜡标本,采用免疫组织化学技术检测癌组织及癌旁正常组织中SIRT1的表达,分析其与临床病理特征的关系。另选取15例膀胱尿路上皮癌行膀胱根治术患者的癌组织和癌旁组织,应用Real-Time PCR技术检测SIRT1 mRNA表达水平。结果:SIRT1的表达水平与临床分期、病理分级及是否转移呈相关性(P0.05),与性别、年龄、是否复发无相关性(P0.05)。癌组织中SIRT1 mRNA的表达明显高于癌旁组织的表达,差异有统计学意义(P0.05)。结论:SIRT1在膀胱癌组织呈高表达,与临床分期及转移相关,有可能作为肿瘤进展的潜在标志物及治疗靶点。     

SiRNA在泌尿系统肿瘤中的应用进展

RNA干涉(RNA interference,RNA i)是生物体内通过双链RNA(doub le-stranded RNA,dsR-NA)抵抗病毒入侵和抑制转座子活动的一种自然机制。21~25nt大小的小干涉RNA(small interfering RNA,siRNA)作为RNA i过程中关键效应分子,在哺乳动物细胞能够高特异性、高效性地抑制基因的表达,因而在研究基因功能、表达调控、信号传导通路和基因药物开发方面显示其显著的优越性。这项技术也被应用于泌尿系统肿瘤的研究,主要针对泌尿系统肿瘤的发生、发展机制及治疗等方面进行探讨。本文就siRNA在泌尿系统肿瘤领域内的应用研究作一综述。     

白藜芦醇对梗阻性黄疸大鼠肾损害的保护机制

目的研究白藜芦醇在大鼠梗阻性黄疸肾损害中的保护作用机制。方法雄性Wistar大鼠45只,随机分为3组:假手术组、梗阻性黄疸组及梗阻性黄疸+白藜芦醇干预组。取各组血清检测总胆红素(TBIL)、直接胆红素(DBIL)、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Cr)水平,取肾组织匀浆检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽(GSH)水平,Western blot法检测肾组织中沉默信息调控因子1(SIRT1)、核因子-κB(NF-κB)蛋白表达,RT-PCR法检测肾组织中SIRT1 m RNA表达,TUNEL法检测肾细胞凋亡。结果 1与假手术组比较,梗阻性黄疸组血清中TBIL、DBIL及BUN、Cr明显升高(P0.05),肾组织中SOD活性、GSH水平及SIRT1m RNA和蛋白明显降低(P0.05),MDA含量、NF-κB蛋白和细胞凋亡率明显升高(P0.05)。2与梗阻性黄疸组比较,梗阻性黄疸+白藜芦醇干预组血清中TBIL、DBIL及BUN、Cr水平明显降低(P0.05),肾组织中SOD活性、GSH水平及SIRT1 m RNA和蛋白表达明显升高(P0.05),NF-κB蛋白和细胞凋亡率明显降低(P0.05)。结论白藜芦醇能减轻梗阻性黄疸肾损害,可能通过激活SIRT1抑制NF-κB表达、提高SOD活性而发挥抗炎、抗氧化、抗凋亡作用。     

环状RNA在胰腺癌中的研究进展

胰腺癌是预后最差的消化道恶性肿瘤, 其发生发展机制仍待研究。环状RNA(circRNA)是一类具有连续、共价闭合的环状结构的单链RNA, 其生物学功能包括作为微小RNA的海绵、调节基因转录、影响同源信使RNA(mRNA)剪接、与蛋白质交互作用、翻译蛋白质等。研究显示circRNA在胰腺癌中表达失调, 通过多种途径影响肿瘤进展, 并调节胰腺癌的肿瘤微环境。本文综述circRNA的生物学功能及其对胰腺癌恶性表型的调控作用, 为其临床应用及基础研究提供新的思路。     

血液miRNA在肺癌诊断中作用的研究进展

微小核糖核酸(miRNA)是一类新近发现的非编码小RNA分子,参与人体一系列的生理和病理过程,miRNA的表达异常可起到癌基因或抑癌基因的作用,对肿瘤的发生、发展有着重要的作用。肺癌发病率高、预后较差,是危害人类健康的重要恶性肿瘤。近年的研究表明,血液miRNA参与肺癌的发生、发展及治疗等诸多过程。     

DDX家族与肿瘤的相关性研究进展

DEAD-box家族是一类以D(Asp)-E(Glu)-A(Ala)-D(Asp)为保守序列的RNA解旋酶家族,参与需要RNA调节的所有细胞过程.研究表明,DDX家族很多成员在肿瘤组织中表达失调,并且参与肿瘤的发生、发展,在肿瘤细胞的增殖、凋亡、细胞周期、侵袭、转移以及代谢等方面发挥关键作用,可以作为肿瘤的诊断、恶性程度的评价、临床预后的预测等新的分子标志物,也为肿瘤的治疗提供了新的潜在分子靶标.本文就DDX家族的结构、功能、以及与肿瘤的关系作一综述.     

沉默信息调节因子7在胃癌组织的表达及其与胃癌临床病理的关系

目的观察沉默信息调节因子7(SIRT7)在胃癌组织中的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系。方法收集195例胃癌病人的癌组织和癌旁正常组织,Western blot检测SIRT7在胃癌及癌旁组织中的表达水平,免疫组织化学方法检测不同病理特征的胃癌组织和癌旁组织中SIRT7的表达。结果胃癌组织中SIRT7阳性率(65. 64%)明显高于癌旁正常组织的阳性率(19. 49%),差异有统计学意义(P 0. 05)。SIRT7在胃癌组织中的表达与病人年龄、性别及肿瘤大小无明显相关(P 0. 05),而与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期明显相关(P 0. 05)。结论SIRT7在胃癌组织中的表达高于癌旁正常组织,且与胃癌淋巴结转移、浸润深度、TNM分期密切相关,表明SIRT7在胃癌的侵袭过程中发挥重要作用。     

Beclin－1和SIRT－1在大肠癌组织中的表达及意义

目的研究自噬相关基因Beclin－1和沉默信息调节因子－1(SIRT－1)在大肠癌中的表达情况，探讨其在大肠癌发生、发展及预后中的意义。 方法应用免疫组织化学方法检测Beclin－1和SIRT－1在58例大肠癌、30例大肠腺瘤及30例正常大肠黏膜组织中的表达，并结合临床病理特征进行分析。统计学分析采用SPSS19.0统计软件进行，计数资料采用χ²检验，相关性分析采用Spearman相关分析，P<0.05为差异具有统计学意义。 结果Beclin－1及SIRT－1在大肠癌组织中的表达率(79.3%，75.9%)显著高于大肠腺瘤(53.3%，50.0%)及正常大肠黏膜组织(20.0%，23.3%)，差异均有统计学意义(P<0.05) 。Beclin－1的表达与大肠癌的临床病理因素均无相关性(P>0.05)。SIRT－1的表达与大肠癌的浸润深度、淋巴结转移、TNM分期呈正相关(P<0.05)。Beclin－1与SIRT－1的表达成正相关(P<0.05) 。Beclin－1和SIRT－1表达阳性的大肠癌患者术后5年生存率明显低于表达阴性者(P<0.05) 。 结论自噬相关基因Beclin－1和SIRT－1的异常表达在大肠癌的发生中起协同作用，可能作为大肠癌发生、发展、预后的重要判定指标。     

A-to-I RNA编辑酶1参与调控肿瘤的发生和发展

肿瘤的发生和发展是一个内因与外因共同作用的复杂过程.既往的研究证实,DNA突变进而引起下游分子通路的活化参与了肿瘤的发生.近年来对于转录后修饰的研究表明,RNA编辑是重要的转录后调控机制之一,进一步丰富了RNA及蛋白质的多样性,同样参与了包括肿瘤发生在内的多种疾病的过程.近年来由于RNA编辑酶之一ADAR1功能的复杂性和重要性使其备受关注,已有多项研究表明,ADAR1在肿瘤发生、发展过程中起着重要的作用.本文主要针对ADAR1参与肿瘤的发生、发展进行综述.     

长链非编码RNA 在胰腺癌中的研究进展

长链非编码RNA(lncRNAs)是一类转录本长度超过200nt、不具备蛋白编码功能的RNA分子。LncRNAs能够在表观遗传、基因转录水平以及转录后水平等不同层面发挥作用。此外,新近发现的微小RNA、环状RNA等可与lnc RNAs交互作用,参与恶性肿瘤的发生与发展过程。近年来,研究发现大量的lncRNAs异常表达于胰腺癌组织和细胞中,在胰腺癌的发生发展中也起着重要作用。因此,笔者就多种异常表达的lncRNAs在胰腺癌中的作用及机制进行综述。     

三阴性乳腺癌发生发展相关环状RNA研究进展

乳腺癌是女性肿瘤中发病率和致死率均为第一的肿瘤,其分子亚型中的三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer, TNBC)因缺乏明确的分子靶点成为其治疗中的难点。寻找可靠的生物标志物来识别TNBC成为靶向治疗TNBC首先要解决的问题。TNBC相关非编码RNA标志物研究成为该领域的热点。环状RNA(circular RNA,circRNA)是一类重要的非编码RNA,参与细胞结构与功能、基因表达与调控及信号通路等生命过程,且在癌症的发生和发展中发挥重要作用。近年来,很多文献报道了与TNBC发生发展相关的circRNA,并阐述了其分子机制,其中部分还可作为TNBC生物标志物。本文将就相关研究进行综述。     

葛根素保护高糖环境下足细胞损伤的氧化应激机制

目的:观察葛根素保护足细胞的氧化应激相关机制。方法:小鼠永生型足细胞分别在正常糖(5 mmol/L葡萄糖+25 mmol/L甘露醇)、高糖(30 mmol/L葡萄糖)、加或不加葛根素(10μmol/L葛根素)条件下培养。用DCFDA法检测ROS水平;用Realtime PCR和Western blotting方法评价NOX4的RNA和蛋白水平;进一步分析葛根素干预后对线粒体和细胞质膜NOX4作用的差异;分别给予葛根素1μmol/L、10μmol/L刺激,观察葛根素不同浓度对SIRT1的作用;转染SIRT1质粒,过表达SIRT1后观察对NOX4的影响。结果:(1)葛根素能减少高糖在小鼠永生型足细胞中产生的过多ROS。(2)葛根素通过抑制细胞质膜的NOX4的表达来抗氧化。(3)葛根素通过保护SIRT1来抑制NOX4的表达。结论:葛根素通过保护SIRT1来抑制细胞质膜NOX4的表达来发挥其抗氧化作用。     

PAR 家族在消化道肿瘤中的作用

PARs属G蛋白偶联受体,研究发现PARs的4种亚型PAR1,PAR2,PAR3和PAR4与消化道肿瘤的发生和发展密切相关。笔者阐述了PARs在消化道和消化道肿瘤中的病理生理作用,重点在PAR2和PAR4在消化道肿瘤中的表达及其作用机制,并对PARs在消化道肿瘤发生发展中的作用进行综述。     

SIRT1基因敲除对骨关节炎小鼠VEGF/AKT信号通路的影响

目的通过研究沉默信息调节因子1(SIRT1)基因敲除对骨关节炎小鼠VEGF/AKT通路的作用,探讨骨关节炎关节软骨退变的可能机制。方法将小鼠分为两组:SIRT1~(+/+)小鼠骨关节炎模型组(A组,n=6);SIRT1~(-/-)小鼠骨关节炎模型组(B组,n=6)。荧光定量聚合酶链反应检测SIRT1基因表达情况;HE染色、番红O-固绿双染色观察膝关节软骨形态结构改变,Mankin评分评价膝关节关节软骨退变,免疫组化染色检测膝关节软骨细胞中SIRT1、VEGF和AKT蛋白水平。结果 B组SIRT1 m RNA表达量为2.24417±1.316569,明显低于A组(P0.01)。HE染色和番红O-固绿双染色结果显示,B组膝关节关节软骨退变明显,Mankin评分分值为9.8333±1.94079分,明显高于A组(P0.05),B组SIRT1、VEGF和AKT免疫组化染色积分分别为3.3333±1.96638、10.0000±2.44949和1.3333±1.21106,B组SIRT1蛋白表达与A组相比差异不显著(P0.05);B组VEGF蛋白表达明显高于A组(P0.05);B组AKT蛋白表达明显低于A组(P0.01)。结论 SIRT1基因敲除可能通过激活VEGF/AKT通路加重骨关节炎关节软骨的退变,因此SIRT1基因可能对骨关节炎起到保护作用。     

miRNA在胃癌发生发展中的作用

目的总结近几年来micro RNA(mi RNA)在胃癌发生发展过程中所起的重要作用。方法查阅近年来国内外与胃癌发生发展过程有关的mi RNA文献并作综述。结果 mi RNA通过结合与胃癌相关的调控基因或m RNA,使目的 m RNA表达沉默,从而影响胃癌的发生发展。结论 mi RNAs的异常表达与胃癌的发生发展密切相关,起着抑癌或者致癌的作用。     

长链非编码RNA UCA1在膀胱癌中的研究进展

近年来,随着对长链非编码RNA(lncRNA)研究的不断深入,lncRNA在肿瘤发生发展中的作用受到越来越广泛的关注。其中,lncRNA尿路上皮癌相关抗原1(UCA1)在膀胱癌、胃癌、肝癌、卵巢癌等多种肿瘤组织中呈高表达,并参与了肿瘤的发生与发展。本文就UCA1与膀胱癌的关系作一综述。     

Argonaute蛋白在肾透明细胞癌中的表达及其与预后的相关性

肾细胞癌是泌尿系统肿瘤中病死率最高的肿瘤,其中约有80％是来源于肾小管的肾透明细胞癌.不同临床分期患者术后5年生存率差异明显,因此临床上迫切需要1个有效可靠的分子标志物,能对肾癌患者的进行个体化预后风险进行评估.Argonaute蛋白(AGO蛋白)是RNA诱导沉默复合物(RISC)中重要的组成部分之一,共同参与基因沉默即RNA干扰(RNAi)的过程,近年来AGO蛋白家族在各种肿瘤中作为潜在的肿瘤相关因素,逐渐成为一个新的研究热点.我们通过免疫组织化学方法检测AGO蛋白在肾癌组织中的表达,并结合临床病理资料探寻其在肾癌发生、发展中的潜在作用,探讨其与肾癌患者预后的相关性.