靶向性重组腺病毒对裸鼠肝癌种植瘤的治疗作用

目的观察靶向性重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3对原发性肝癌HepG2细胞及裸鼠皮下种植瘤的治疗作用。方法采用先前构建的靶向性重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3感染肝癌HepG2细胞、乳腺癌MDA-MB-231细胞以及正常肝L-02细胞,观察细胞形态学改变,并通过流式细胞术检测细胞凋亡指数;采用裸鼠皮下种植瘤模型、重组腺病毒瘤内给药治疗,观察肿瘤生长情况及病理学改变。结果 流式细胞学可见HepG2细胞凋亡和明显的凋亡峰,MDA-MB-231和L-02细胞凋亡指数分别为0和7.3%,明显低于HepG2细胞(48.2%),P<0.01。种植肿瘤细胞2周后HepG2细胞组、MDA-MB-231细胞组和对照组肿瘤体积大小分别为(0.26±0.31)cm3、(0.25±0.15)cm3和(0.26±0.28)cm3,各组间差异无统计学意义(P>0.05);种植肿瘤细胞4周后HepG2细胞组、MDA-MB-231细胞组和对照组肿瘤体积大小分别为(0.53±0.12)cm3、(0.49±0.22)cm3和(0.54±0.13)cm3,各组间差异无统计学意义(P>0.05);HepG2细胞组肿瘤经重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3治疗后8周时肿瘤体积为(0.65±0.13)cm3,明显小于MDA-MB-231细胞组〔(1.27±0.32)cm3〕和对照组〔(1.43±1.09)cm3〕,P<0.01,而后两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05)。治疗后HepG2细胞组肿瘤细胞出现坏死区,伴淋巴浸润细胞和凋亡细胞;对照组肿瘤细胞区域内未见明显坏死区;而MDA-MB-231细胞组肿瘤细胞呈实性排列,呈小腺腔样结构,异型性明显,瘤巨细胞及多核瘤细胞可见,治疗前、后未见明显变化。结论 靶向性重组腺病毒Ad-EAFP-PALB/r-Caspase-3具有有效靶向性凋亡诱导作用,体内、外治疗原发性肝癌有效,可能为原发性肝癌的靶向性基因治疗提供新途径。     

Vitamin D3对乳腺癌荷瘤裸鼠的治疗研究

目的 探讨维生素D3(vitamin D3，VitD3)对乳腺癌裸鼠移植模型的治疗作用。方法 裸鼠皮下接种MCF-7乳腺癌细胞，建立乳腺癌裸鼠移植模型。用VitD3和三苯氧胺(tamoxifen，TAM)给荷瘤裸鼠用药。用药4周后，检测肿块大小、血清钙、磷水平，并用流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期。结果 VitD3治疗组血清钙水平高于对照组，血磷水平低于对照组，VitD3使肿瘤细胞凋亡增加，并使细胞停留在G0／G1期，与TAM有协同作用。结论 VitD3和TAM可明显诱导乳腺癌细胞凋亡，并阻滞细胞停留在G0／G1期。     

体液性排斥反应的靶向B淋巴细胞治疗

器官移植术后B淋巴细胞活化产生的抗体导致移植物损伤,在体液性排斥反应启动和发展过程中发挥主导作用.笔者曾撰文,结合国内外文献讨论B淋巴细胞活化与抗体介导的移植物排斥反应[1].     

树突状细胞诱导特异性细胞毒性淋巴细胞对胰腺癌细胞荷瘤鼠种植模型的治疗研究

目的探讨树突状细胞诱导特异性细胞毒性淋巴细胞 (CTL)对胰腺癌的治疗作用。方法以体外诱导的树突状细胞诱导特异性CTL细胞 ,然后与胰腺癌细胞Bxpc 3共培养 ,检测其对Bxpc 3的杀伤作用。同时将Bxpc 3种植于荷瘤鼠皮下 ,31天后每周在肿瘤边缘注射CTL细胞 ,观察肿瘤生长情况 ,并检测肿瘤组织端粒酶活性。结果树突状细胞诱导特异性CTL对胰腺癌细胞Bxpc 3的杀伤率是 71 6 %。荷瘤鼠接种胰腺癌细胞后第 31天 ,CTL治疗组与对照组相比种植瘤大小及端粒酶活性之间差异无显著意义 ,第 5 5天CTL治疗组肿瘤大小为 (38± 6 )mm2 ,端粒酶活性为1 33± 0 0 3,对照组肿瘤大小为 (74± 33)mm2 ,端粒酶活性为 4 16± 0 32 ,治疗组与对照组相比肿瘤大小及端粒酶活性之间差异均有显著意义。结论树突状细胞诱导特异性CTL在体内可以大量杀伤胰腺癌细胞 ,在体外可以抑制胰腺癌细胞种植瘤的生长并降低瘤细胞端粒酶活性。     

细胞因子对肾癌荷瘤裸鼠生长抑素的影响

为研究细胞因子对肾癌宿主体内生长抑素（ＳＳ）的影响及相互关系，探索肾癌治疗的更好方法，作者以４．４×１０６ｍｌＲＣＣ９４６１６人肾癌细胞注入裸鼠背部皮下，将荷瘤裸鼠随机分为ＴＮＦ、ＩＬ－２、ｒＩＦＮ、ＴＮＦ加ＩＬ－２、ＴＮＦ加ｒＩＦＮ及对照组。分别给药，实验结束时取血０．５～０．８ｍｌ，及瘤体、瘤旁和正常组织各１ｇ，放免法测定ＳＳ浓度。结果显示各细胞因子均可改变各组织中的ＳＳ浓度，以ＴＮＦ加ＩＬ－２组最明显（Ｐ＜０．０１）。作者认为，ＳＳ的分布受细胞因子的影响，这一影响可能是通过调节机体的免疫机制和对肿瘤的杀伤作用而产生的。研究提示将ＴＮＦ、ＩＬ－２、ＳＳ联合应用可能会对肾癌的生物治疗更有效     

磁性阿霉素隐形脂质体对裸鼠移植性人胃癌的靶向治疗

目的　探讨磁性阿霉素隐形脂质体靶向治疗裸鼠移植性人胃癌的疗效。方法　荷人胃癌的裸鼠为动物模型,尾静脉给药,肿瘤部位放置恒定磁场进行磁导向化疗。结果　磁性阿霉素隐形脂质体靶向MDL( )组对人胃癌的移植瘤有显著抑制作用,体积和瘤重抑瘤率分别为71%和70 % ,显著高于磁性阿霉素隐形脂质体非靶向MDL(- )组(5 7%、5 0 % )和游离阿霉素DOX组(33%、31% )(P <0 .0 5 ) ,空白组细胞凋亡率均低于各实验组,MDL( )组达4 2 % ,高于其他各组(P <0 . 0 5 )。实验期间DOX组体重一直未见增加,而MDL( )组体重平稳增加,且饮食、活动未见明显变化。结论　磁性阿霉素隐形脂质体作为一种新型抗肿瘤药物显示了良好的应用前景。     

光动力治疗人胆管癌细胞荷瘤裸鼠的实验研究

目的研究光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对人胆管癌荷瘤裸鼠的治疗效果,探讨其抗肿瘤性、安全性及腹腔注射和瘤内注射光敏剂两种不同给药途径疗效的差异。方法人胆管癌细胞QBC939接种于Balb/c裸小鼠皮下,建立荷瘤动物模型。以血卟啉衍生物(HpD)作光敏剂,采用腹腔内和瘤内注射2种不同给药方式,后以波长630 nm的激光照射肿瘤组织,观察PDT后肿瘤体积变化和病理改变。结果接受光动力治疗的两组肿瘤生长速度明显减慢,瘤内局部注射给药组疗效与腹腔给药组差异无统计学意义(P>0.05);组织学检查见肿瘤组织有广泛坏死,各组裸鼠心、肝、肺、肾组织切片未见病理性结构改变。结论HpD,PDT对人胆管癌荷瘤裸鼠的肿瘤组织有杀伤作用,使肿瘤生长减慢;HpD-PDT杀伤胆管癌移植瘤的深度可达0.8cm;在本实验光照条件下的PDT治疗是安全的。     

白细胞介素-2基因转染联合特异性细胞毒性T淋巴细胞对裸鼠肝癌的影响

目的 观察白细胞介素-2(IL-2)基因转染联合特异性细胞毒性T淋巴细胞(sCTL)治疗裸鼠肝癌的疗效.方法 荷肝癌裸鼠6只,随机分为pORF-hIL-2质粒转染实验组和对照组,检测血浆白细胞介素(IL)-2的浓度.荷肝癌裸鼠24只,随机分成对照组、IL-2基因治疗组、sCTL治疗组和IL-2基因联合sCTL治疗组,观察肿瘤体积变化及生存时间.结果 实验组血清IL-2浓度在转染后第3天到达顶峰135.3 ng/L,持续15 d,对照组检测不到IL-2;各组肿瘤体积(治疗15 d后)变化为(262.27±78.30)、(151.65±63.93)、(27.16±27.69)、(-63.32±16.92)mm3;中位生存时间20、27.5、60、90 d;差异均有统计学意义(P＜0.01).结论 联合应用IL-2基因转染和sCTL细胞治疗裸鼠的HepG2移植瘤,可以明显地提高抗瘤效应,表现协同增效作用.     

荷瘤裸鼠肌肉内基因电转染对移植瘤的作用

目的　以人甲状腺未分化癌细胞系TA K建立的人甲状腺未分化癌裸鼠皮下移植模型为对象 ,研究裸鼠肌肉内电转染对移植瘤的作用。方法　将皮下移植肿瘤的裸鼠分为 5组 :空白对照组、pcDNA 3质粒肌肉电转染组、TIMP 3质粒肌肉注射组、TIMP 3质粒肌肉电转染组及TIMP 3质粒肿瘤电转染组。肌肉电转染采用的参数是电场强度为 2 0 0V/cm ,脉冲时值为 2 0ms ,8次 ,1Hz;肿瘤内电转染采用的参数是电场强度为 6 0 0V/cm ,脉冲时值为 2 0ms,1次 ,1Hz。结果　TIMP 3质粒肌肉内电转染组和TIMP 3质粒肿瘤内电转染组肿瘤生长受到抑制 ,与另外 3组相比肿瘤生长速度明显减缓 (P<0 .0 5 ) ,且两组肿瘤组织中TIMP 3蛋白量过度表达。结论　抑癌基因可通过肌肉内DNA电转染起到抗肿瘤效果。     

靶向survivin的RNA干扰对裸鼠前列腺癌的影响

目的探讨利用RNA干扰技术在裸鼠体内抑制survivin基因表达并诱导前列腺癌细胞凋亡的作用。方法设计、构建靶向survivin的重组质粒载体并导入裸鼠皮下移植瘤,称量瘤重,计算抑瘤率,应用RT-PCR法检测survivin基因的干涉效率,TUNEL染色法技术检测细胞凋亡效果。结果PBSsi-survivin A和PBSsisurvivin B两种阳性表达载体转染组均具有显著低瘤重和高抑瘤率特点,两组均显著抑制了Survivin mRNA表达,并诱导前列腺癌细胞凋亡。结论RNAi可有效抑制前列腺癌PC-3细胞survivin基因mRNA表达,减缓肿瘤生长,并诱导细胞凋亡。     

吉西他滨时辰给药治疗荷瘤裸鼠的实验研究

【摘要】〓目的〓建立肺癌A549细胞裸鼠皮下注射成瘤模型,按照昼夜的不同时辰给予吉西他滨,观察其疗效和副作用,初步筛选出最佳给药时间。方法〓32只裸鼠饲养在SPF级实验动物房,统一光照条件,光照时间(7:30~19:30),黑暗时间(19:30~7:30),温度控制在25℃左右,湿度控制在50%左右;收集对数生长期培养的A549细胞,浓缩成2×107/mL的细胞悬液,在无菌条件下抽取约0.2 mL细胞悬液注射至裸鼠皮下。待肿瘤长到约1 cm×1 cm×1 cm大小,随机分为4组,每组8只。前三组按照时辰2 am、8 am、14 pm给予吉西他滨(50 mg/Kg),隔两天给药一次,持续三周,第四组给予等量无菌生理盐水作为对照组。每周测量肿瘤体积和裸鼠体重,绘制肿瘤的生长曲线和体重变化曲线。第30天处死裸鼠,抽血测肝肾功能,留取标本做HE染色观察镜下改变。结果〓吉西他滨对A549肺癌裸鼠移植瘤有治疗效果,其中2 am组抑瘤效果最明显,肿瘤生长最慢,裸鼠体重增长最快;8 am组抑瘤效果最差,肿瘤生长最快,裸鼠体重增长最慢。光镜下可见吉西他滨治疗组肺肝肾损伤较对照组减轻,肝肾功能改善(P<0.05,8 am、14 pm组vs.对照组;P<0.01,2 am组vs.对照组);药物治疗组当中,2 am组治疗效果最好,8 am组治疗效果最差(P<0.05,2 am vs. 8 am组)。结论〓吉西他滨对A549肺癌移植瘤裸鼠有明显的抑瘤作用,而且疗效和副作用呈时辰节律变化,2 am组疗效最佳,8 am组疗效最差。     

去甲斑蝥素对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的抗癌作用机制

目的 探讨去甲斑蝥素（NCTD）对荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤的抗癌作用机制。方法 在建立裸鼠胆囊癌移植瘤动物模型的基础上进行肿瘤增殖、侵袭、转移体内干预实验,实验分空白对照、氟尿嘧啶、NCTD、NCTD＋氟尿嘧啶4组。6周末应用链霉素亲和生物素复合物（SABC）法检测移植瘤增殖细胞核抗原（PCNA）、Ki-67、细胞周期素D1（cyclin D1）、p27、Bcl-2蛋白,逆转录PCR（RT-PCR）检测PCNA、cyclin D1、p27、Bcl-2、Bax、存活素（Survivin）基因mRNA。HE染色观察瘤周癌细胞浸润、侵袭,解剖显微镜下观察肺组织转移瘤结节,并采用SABC和RT-PCR检测nm23、金属蛋白酶2（MMP2）及其组织抑制剂（TIMP2）蛋白和mRNA。结果 NCTD组增殖相关PCNA、Ki-67、cyclin D1蛋白表达下降,p27蛋白表达上升;PCNA mRNA、cyclin D1 mRNA表达下降,p27 mRNA表达增高。NCTD组凋亡相关Bcl-2蛋白表达下降;Bcl-2 mRNA、Survivin mRNA表达下降,Bax mRNA表达增高。NCTD显著减少荷瘤鼠移植瘤的瘤周癌细胞浸润和肺转移结节（P〈0．01）;NCTD组转移相关MMP2蛋白表达下降,nm23、TIMP2蛋白表达上升;nm23-H,mRNA、TIMP2 mRNA表达增高。结论 NCTD抑制荷瘤裸鼠胆囊癌移植瘤增殖、侵袭和转移的机制可能与NCTD干扰胆囊癌移植瘤细胞周期,抑制细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻止细胞迁移运动,以及影响细胞增殖、细胞周期调控、细胞凋亡、细胞基质溶解和转移相关基因蛋白表达有关。     

维生素E琥珀酸酯对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用

目的 检测维生素E琥珀酸酯（VES）对裸鼠荷乳腺癌MCF-7细胞的抑制作用。方法 裸鼠皮下接种MCF-7乳腺癌细胞建立荷瘤裸鼠模型。以150mg／kg（体重）剂量的VES治疗模型鼠共5周。处死动物后测量肿瘤大小。以流式细胞仪检测细胞周期变化和细胞表面Fas和FasL的表达；以免疫组化法检测肿瘤组织Fas和FasL的表达，并以TUNEL法检测细胞凋亡指数。结果 VES对荷乳腺癌裸鼠具有显著的增殖抑制作用。细胞周期分析显示，VES冶疗后肿瘤细胞表现为G0／G1期阻滞，肿瘤组织和细胞表面的Fas和FasL均出现上调，同时细胞的凋亡指数升高。结论 VES对于MCF-7乳腺癌荷瘤裸鼠具有强效的抑制作用，其机制与上调肿瘤细胞Fas／FasL表达，促进细胞凋亡有关。     

Survivin反义寡核苷酸对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用研究

目的探讨survivin反义寡核苷酸（ASODN）对乳腺癌荷瘤裸鼠的抑瘤作用。方法30只裸鼠建立人乳腺癌MCF-7细胞移植瘤动物模型。成瘤后动物随机分3组，每组10只。分别于瘤周及瘤体注射阳离子脂质体（1ipofectin，Lip），ASODN／Lip及NODN／Lip，每5天1次，共3次。观察肿瘤抑制率、肿瘤体积和裸鼠体重的变化。用TUNEL法，透射电镜观察体内瘤体的细胞调亡情况；用Western—blot检测各组肿瘤的survivin蛋白表达情况。结果成功建立了裸鼠皮下移植瘤模型。ASODN／Lip治疗组的肿瘤体积在治疗期内减少，抑瘤率达70．10％；而NODN／Lip治疗组和Lip对照组肿瘤体积增加。各组裸鼠体重无明显变化。ASODN／Lip组细胞凋亡率为38．6％明显高于其他两组，差异有显著性（P〈0．05）。ASODN／Lip组肿瘤的survivin蛋白表达明显降低。结论survivin反义寡核苷酸可有效地抑制人乳腺癌裸鼠皮下肿瘤的生长速度，并促进诱导肿瘤细胞的凋亡。     

人胆管细胞癌荷瘤裸鼠模型的建立

目前,外科手术、化疗和放疗对胆管癌的疗效均欠佳〔1〕。经确诊后胆管癌病人的总体生存期仅为6个月至5年不等〔2〕。基于为胆管癌研究提供一个肿瘤的体内实验系统目的,我们建立了荷人胆管癌裸鼠模型。方法:人胆管癌细胞系ＱＢＣ939(第三军医大学西南医院肝胆外科中心建株)在含10%ＦＢＳ的ＲＰＭＩ1640培养液中培养(37℃,5%ＣＯ2)。待细胞长至对数生长期,消化、收集培养中的细胞5×107,总体积为1.0ｍｌ,取0.1ｍｌ注入裸小鼠皮下〔3〕(10只)。每周测量并记录肿瘤的长径(ａ)和高度(ｂ)及裸小鼠的生存期。肿瘤生长曲线测绘方法:接种完成后,逐日…     

维生素E琥珀酸酯对人大肠癌荷瘤裸鼠的体内抑制作用

维生素E琥珀酸酯（vitamin E succinate,VES）是一种新的抗肿瘤药物,对肿瘤细胞有选择性的抑制作用[1].本研究通过人大肠癌荷瘤裸鼠模型的建立,探讨VES在体内抑制肿瘤的作用.     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的观察胶原酶对肥厚性瘢痕（ＨＴＳ）胶原降解的影响，探讨它对ＨＴＳ的治疗作用。方法建立ＨＴＳ裸鼠移植模型，局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果ＨＴＳ组织胶原纤维被降解，真皮层变薄，瘢痕缩小，质地变软，与对照组差异十分明显。结论胶原酶的局部注射可能是治疗ＨＴＳ的较好方法。     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的观察胶原酶对肥厚性瘢痕(HTS)胶原降解的影响,探讨它对 HTS 的治疗作用。方法建立 HTS 裸鼠移植模型,局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果 HTS 组织胶原纤维被降解,真皮层变薄,瘢痕缩小,质地变软,与对照组差异十分明显。结论胶原酶的局部注射可能是治疗 HTS 的较好方法。     

胶原酶对裸鼠移植肥厚性瘢痕的治疗作用

目的 观察胶原地肥厚性瘢痕（ＨＴＳ）胶原降解的影响,探讨它对ＨＴＳ的治疗作用。方法 建立ＨＴＳ裸鼠移植模型,局部注射胶原酶于瘢痕组织。治疗后取材行光、电镜观察和分析。结果 ＨＴＳ组织胶原纤维被降解,真皮层变薄,瘢痕缩小,质地变软,与对照组差异十分明显。结论 胶原酶的局部注射可能是治疗ＨＴＳ的较好方法。