耐阿德福韦酯乙型肝炎病毒多聚酶区基因突变模式与病毒B、C基因型相关性分析

目的分析耐阿德福韦酯（ADV）慢性乙型肝炎（CHB）患者中HBV多聚酶区基因突变模式及基因型的关系。方法选取2010年2月-2012年5月宁波市第二医院住院及门诊114例ADV耐药的CHB患者,采用实时荧光定量PCR方法对患者血清HBV多聚酶区进行扩增,对PCR产物进行直接测序比对。正态分布的计量资料以x±s表示,非正态分布数据用M（P25-P25）表示,经过数据转换方差齐的采用方差分析和LSD-t检验。结果114例CHB患者的基因突变模式为8种,以rtA181V／T／S（57．89％）、rtN236T（14．91％）和rtA181V／T／s＋N236T（9．65％）突变为主,其中单独突变102例（89．47％）,联合突变12例（10．53％）。114例患者B基因和C基因分别为21例（18．42％）和93例（81．58％）,B基因以rtN236T突变模式为主,占47．62％（10／21）;C基因以rtA181V／T／s突变模式为主,占65．59％（61／93）;HBVB基因和C基因rtA181V／T／S和rtN236T突变模式比较差异均有统计学意义（χ2=12．269和18．658,P〈0．01）。结论耐ADV的CHB患者血清HBV多聚酶区基因突变以rtA181V／T／S、rtN236T和rtA181V／T／S＋N236T为主,且不同基因突变模式与基因型有关。     

替诺福韦酯对照阿德福韦酯初治的中国慢性乙型肝炎患者48周的随机、双盲、对照研究

目的明确国产替诺福韦酯治疗中国慢性乙型肝炎患者的疗效与安全性。 方法本研究采取多中心、随机、双盲、阳性对照的研究设计,选择阿德福韦酯为对照。研究的主要疗效指标为治疗48周HBV DNA< 20 IU/ml患者比率;另外,评价患者治疗48周HBV DNA下降水平、ALT复常率、HBsAg阴转及血清学转换率以及HBeAg阳性患者HBeAg阴转及血清学转换率。并评价替诺福韦酯与阿德福韦酯治疗组患者的不良事件的发生等情况。 结果共入组患者267例,其中替诺福韦酯治疗组（TDF组）141例,阿德福韦酯治疗组（ADV组）139例。两组患者基线人口学指标与临床指标差异均无统计学意义（P均> 0.05）。HBeAg阳性患者中,TDF组患者HBV DNA < 20 IU/ml患者比率显著高于ADV组患者（55.3% vs. 20.0%;χ²= 20.750,P < 0.001）;同样在HBeAg阳性患者中,TDF组患者HBV DNA < 20 IU/ml患者比率显著高于ADV组患者（86.2%% vs. 62.7%%;χ²= 20.750,P = 0.003）。ALT复常率在HBeAg阳性（84.5% vs. 80.5%;χ²= 0.406,P = 0.524）与阴性CHB患者（84.2% vs. 80.7%;χ²= 0.243,P = 0.622）组中差异均无统计学意义。HBeAg阳性组患者TDF组与ADV组的HBeAg阴转率（5.6% vs. 12.8%;χ²= 2.335,P = 0.126）和HBsAg阴转率（1.4% vs. 3.8%;χ²= 0.182,P = 0.670）差异均无统计学意义。HBeAg阴性组患者无HBsAg阴转病例。TDF组与ADV组患者不良事件和不良反应发生率差异均无统计学意义（P均> 0.05）。 结论国产TDF制剂治疗中国HBeAg阳性和阴性的CHB患者抑制HBV效果优于ADV且安全耐受性良好,可作为我国CHB患者的抗病毒治疗首选方案之一。     

阿德福韦酯初治耐药与阿德福韦酯挽救治疗再耐药患者的临床特征比较

目的：研究阿德福韦酯（ADV）初治耐药和ADV挽救治疗拉米夫定（LAM）耐药者再耐药的临床和病毒学特点。方法对ADV治疗过程中出现病毒突破的患者进行耐药位点的检测。明确耐药位点患者中单用ADV者37例,LAM耐药后换用ADV的患者40例,患者发生病毒学突破时留取血清标本,行血生化检测并收集其临床资料。结果 ADV初治耐药（ADVr）组和ADV挽救LAM耐药再耐药（LAMr/ADVr）组患者临床特征中的平均年龄、性别分布、HBsAg定量、HBV DNA载量、基因型分布、肝功能指标（TBil、ALT和AST水平）等差异均无统计学意义（P均＞0.05）,但两组患者的HBeAg阳性率差异具有统计学意义（57.5%vs 83.8%;χ^2=6.339,P=0.012）。在病毒学特征方面,N236T变异、A181T＋N236T变异更多发生于ADVr组患者中,而LAMr/ADVr组患者的耐药模式更加复杂。结论 LAM耐药后换用ADV治疗同样会导致病毒耐药的发生,临床特征和ADV初治耐药相近,但引起HBV变异模式的复杂化。     

阿德福韦酯治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎近期疗效分析

目的评价阿德福韦酯治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎（CHB）患者的疗效。方法58例核苷（酸）类似物初治的HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者,随机分为阿德福韦酯组（10mg／d）36例和安慰剂组22例,分别接受12周治疗后,所有患者均进入为期36周的开放用药（阿德福韦酯10ms／d）阶段。观察患者血清HBVDNA水平、HBeAg和肝脏生物化学功能的变化。结果经过12周的治疗,阿德福韦酯组患者的血清HBVDNA平均下降3．17 log10拷贝／ml,降幅显著高于服用安慰剂组的0．79 log10拷贝／ml（P〈0．05）。第12周和48周时,两组患者的ALT复常率、HBeAg阴转率和HBeAb血清转换率均无明显差异。在治疗结束时,有5例患者出现了HBVDNA反弹,其中1例患者发生了与阿德福韦酯耐药相关的变异。结论（1）阿德福韦酯（10mg／d）治疗HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者具有良好的抗病毒和临床疗效;（2）在48周疗程中,5例（8．8％）患者出现HBVDNA反弹,其中1例为耐药突变,其余4例未检测到相关耐药突变;（3）阿德福韦酯治疗48周,相关耐药突变的发生率为1．7％。     

阿德福韦酯治疗应答不佳的慢性乙型肝炎患者的耐药分析

目的明确临床实际工作中ADV治疗≥48周未获病毒学应答患者基因型耐药情况并对耐药相关因素进行分析。方法收集ADV治疗≥48周未获病毒学应答患者的血清样本及临床资料,应用PCR产物直接测序法联合焦磷酸测序法进行基因型耐药检测;分析基因型耐药与患者抗病毒治疗经过、HBV DNA载量等因素的相关性。结果共收集104例ADV治疗≥48周未获病毒学应答患者,共检出基因型耐药22例,耐药位点25个;耐药变异以rt A181T变异为主(60%)。既往LAM经治换用ADV患者ADV耐药检出率显著高于ADV初治患者(χ2=5.448,P=0.020);本组患者中能否检出ADV耐药变异与患者ADV治疗时间(t=1 212.5,P=0.647)、送检耐药时HBV DNA载量(t=1.648,P=0.102)以及应用ADV治疗病毒下降速度(t=1 135.5,P=0.877)无显著相关性。结论 ADV治疗≥48周未获病毒学应答患者ADV基因型耐药检出率为21.15%,其中以rt A181T位点变异为主;提示对于ADV长期治疗应答不理想的患者,即使未出现病毒学突破,也应酌情考虑进行耐药检测。     

乙型肝炎病毒阿德福韦酯预存耐药变异的检测及意义

hbv耐药变异的产生是很难避免的,加强对hbv变异特征的研究,更好地了解变异在耐药发生及疾病预后中的作用,从而采取有针对性的防治措施具有重要意义.本研究对未经阿德福韦酯(adv)治疗的患者进行了adv主要耐药相关变异位点的检测,并对其临床特点进行分析.     

150例不同基因型慢性乙型肝炎患者逆转录聚合酶区耐药变异位点特征及耐药影响因素

目的观察150例不同基因型慢性乙型肝炎（CHB）患者乙型肝炎病毒（HBV）DNA逆转录聚合酶（RT）区域耐药变异位点特征,并分析耐药影响因素。 方法回顾性分析唐山市传染病医院2018年1月至2020年12月收治的行RT区检测的150例CHB患者的临床资料,比较不同基因型CHB患者RT区耐药变异位点特征,根据HBV DNA RT区测序结果将患者分为耐药变异位点突变组（突变组）与未发生耐药变异位点突变组（未突变组）,采用Logistic回归分析耐药变异位点突变的影响因素。 结果150例CHB患者中74例发生耐药变异位点突变,76例未发生耐药变异位点突变;耐药变异位点突变发生在B和C基因型中,其中B基因型3例,C基因型71例;以rtM204I/V/S、rtL180M + rtS202G/I + rtM204I/V/S、rtL180M + rtM204I/V/S、rtA181T/V占比最高;B基因型CHB患者仅有rtM204I/V/S、rtL180M + rtS202G/I + rtM204I/V/S、rtL180M + rtM204I/V/S突变,C基因型患者RT区耐药变异位点较多;耐药变异位点突变组患者抗病毒治疗状况为持续治疗（χ² = 57.075、P < 0.001）、不适当停药（χ² = 5.543、P = 0.019）、基因分型C基因型（χ² = 3.062、P = 0.003）占比高于未发生耐药变异位点突变组,HBV DNA（t = 14.579、P < 0.001）、HBsAg（t = 21.863、P < 0.001）高于未突变组,差异均有统计学意义。两组患者年龄、性别、HBeAg、饮酒史、家族CHB史、高血压史、糖尿病史、高血脂史、是否同期接受其他治疗、肝纤维化、病程、总胆红素（TBil）、白蛋白（ALB）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、谷氨酰转肽酶（GGT）和碱性磷酸酶（ALP）差异均无统计学意义（P均> 0.05）。单因素Logistic回归分析显示,抗病毒治疗（OR = 5.765、P < 0.001）、不适当停药（OR = 2.757、P = 0.021）、HBV DNA（OR = 1.617、P = 0.004）、HBsAg（OR = 2 296.820、P < 0.001）以及基因分型（OR = 12.307、P < 0.001）均为CHB患者耐药发生的危险因素;经多因素Logistic回归分析显示,抗病毒治疗（OR = 11.141、P = 0.006）、不适当停药（OR = 5.962、P = 0.019）、HBV DNA（OR = 1.849、P = 0.040）、HBsAg（OR = 5 490.477、P < 0.001）以及基因分型（OR = 12.456、P < 0.001）为CHB患者耐药发生的危险因素,差异均有统计学意义。 结论入组不同基因型CHB患者HBV DNA RT区耐药变异位点存在差异,C基因型患者占比较高,耐药变异位点多;患者耐药受不适当停药、HBV DNA及HBsAg水平影响,临床可针对各项危险因素制定干预措施,并在治疗期间为患者更换抗病毒药物,以减少病毒突变株的产生。     

一例YMDD变异治疗后乙型肝炎病毒准种的变化

目的 研究拉米夫定耐药后续治疗过程中乙型肝炎病毒准种的变化情况.方法 选取1例拉米夫定耐药变异后加用阿德福韦酯治疗无应答、换用替比夫定仍无应答的病例,对其中的两个时间点(拉米夫定耐药后和替比夫定无应答)的血清进行巢式PCR扩增、克隆分析.结果 发现了治疗过程中的几种变异模式:L80I+M204I;L80I+L180M+M204I;L80I+A181T+M204I;L80V+M204I.结论 随着不同抗病毒药物的应用,乙型肝炎病毒的准种不断演变,拉米夫定耐药相关突变会影响到以后其他核苷类似物的后续治疗.     

闽南地区核苷（酸）类药物经治的乙型肝炎患者乙型肝炎病毒基因型与逆转录酶区耐药突变特点

目的分析闽南地区核苷酸（类）药物（NAs）经治的乙型肝炎患者乙型肝炎病毒（HBV）基因型与逆转录酶区（RT）耐药突变特点。 方法采用PCR产物直接测序法分析2012年1月至2017年12月中国人民解放军联勤保障部队第910医院肝病中心收治的524例HBV感染者HBV RT区K169～M250核苷酸序列。随访患者抗病毒治疗史,同时检测其血清中HBV e抗原（HBeAg）、HBV DNA、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和天门冬氨酸氨基转移酶（AST）等水平。 结果入组524例患者中,293例（55.92%）为HBV B型,231例（44.08%）为HBV C型。HBV B型和C型患者性别、HBeAg状态、病程、NAs药物选择、不同药物治疗方式下NAs相关耐药突变率、NAs用药时间及血清HBV DNA载量、ALT、AST水平差异均无统计学意义（P均> 0.05）。但HBV C型患者年龄（t = 6.486、P < 0.001）和NAs相关耐药突变率（64.94% vs. 51.88%,χ² = 8.493、P = 0.003）显著高于HBV B型患者。524例患者中NAs相关耐药突变检出率为57.63%（302/524）,204位点突变频率最高,其次为180、181和229。10个位点突变均伴随M204变异出现,包括169、173、180、200、202、207、214、237、245和250。HBV C型患者在9个位点上（180、181、184、191、200、221、224、229和238）的突变率显著高于B型患者,差异有统计学意义（P均< 0.05）。HBV B型患者在236和250位点的突变率显著高于C型患者（χ² = 5.867、P = 0.015,χ² = 4.226、P = 0.040）。M204相关的伴随突变在基因型B和C中亦表现出不同的倾向性：M204I突变更易出现在B型患者中,而L180 + M204I、T184 + L180 + M204V更易出现在C型患者中。 结论在NAs药物选择压力下,HBV B型感染者和C型感染者表现出不同耐药突变特点。     

阿德福韦酯治疗乙型肝炎病毒相关肾炎的持续疗效

目的:探讨乙型肝炎病毒相关肾炎(HBV-GN)的抗病毒治疗方法.方法:45例乙型肝炎病毒相关肾炎患者随机分为治疗组和对照组,治疗组(n=26)应用核苷类阿德福韦酯(Adefovir dipivoxil,ADV)治疗;对照组(n=19)采用拉米夫定治疗.观察每组的近期(1年)疗效和长期(3年及以上)的持续疗效.结果:近期疗效:治疗组有效率88.5%(23/26)和对照组的89.5%(17/19)相似(P＞0.05).长期的持续疗效:对照组的持续有效率仅为58.8%(10/17),显著低于治疗组的91.3%(21/23)(P＜0.05).结论:ADV治疗HBV-GN,可以获得比拉米夫定更高的持续有效率.     

HBsAg定量在慢性乙型肝炎患者干扰素抗病毒治疗中的变化及临床意义

目的研究HBsAg定量在慢性乙型肝炎患者干扰素抗病毒治疗期间的变化及临床意义。 方法收集43例接受IFN-α治疗的HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者为研究对象。分别在治疗前和治疗后1、3和6个月时定量检测患者血清HBsAg水平;并同时监测其HBV DNA、HBeAg、HBcAb及ALT的水平。 结果43例患者治疗前和治疗后1、3、6个月时血清HBsAg水平呈下降趋势,差异具有统计学意义（P = 0.029）;治疗1个月时较治疗前有所下降,但差异无统计学意义（t =-1.12、P = 0.304）;治疗3个月和6个月时均较治疗前显著下降,差异具有统计学意义（t =-2.71、P = 0.015,t =-2.71、P = 0.010）;其他不同时间点间比较差异均无统计学意义。IFN-α治疗6个月时患者血清HBsAg下降> 0.5 log₁₀IU/ml组患者ALT复常率高于下降< 0.5 log₁₀IU/ml组,差异具有统计学意义（χ² =5.536、P = 0.019）;下降> 0.5 log₁₀IU/ml组HBeAg阴转率高于下降< 0.5 log₁₀IU/ml组,差异具有统计学意义（χ² = 4.226、P = 0.040）;下降> 0.5 log₁₀IU/ml组HBeAg血清学转换率高于下降< 0.5 log₁₀IU/ml组,差异具有统计学意义（χ² = 4.226、P = 0.040）。 结论HBsAg定量在慢性乙型肝炎患者IFN-α治疗早期呈下降趋势。HBsAg定量在慢性乙型肝炎IFN-α治疗早期下降迅速的患者ALT复常率、HBeAg阴转率及HBeAg血清学转换率均高于下降缓慢者。     

干扰素联合抗病毒治疗对提高核苷（酸）类药物经治慢性乙型肝炎患者表面抗原阴转率的影响

目的观察核苷（酸）类（NAs）药物经治慢性乙型肝炎（CHB）患者联合干扰素治疗的疗效。 方法选取2014年1月至2018年1月首都医科大学附属北京地坛医院门诊及住院的NAs经治CHB患者共75例为研究对象，入组患者需符合HBV DNA < 100 IU/ml且HBsAg < 1 000 IU/ml，根据患者是否愿意接受干扰素治疗分为原方案治疗组（沿用原NAs方案，37例）与联合治疗组（NAs联合IFN治疗，38例），两组患者均治疗48周。观察两组患者血清HBsAg 24周下降水平、48周阴转率及HBsAg阴转的相关预测因素。 结果联合治疗组（27例，联合治疗组38例患者中1例予以剔除，10例尚未到随访期）在48周HBsAg阴转率为48.15%（13/27），血清学转换率为44.44%（12/27），而原方案治疗组患者HBsAg阴转率5.41%（2/37），血清学转换率为5.41%（2/37），组间差异均有统计学意义（HBsAg阴转率：χ² = 13.599、P < 0.001；血清学转换率：χ² = 11.730、P = 0.001）；联合治疗组患者HBsAg水平随着治疗时间延长逐渐下降，治疗24周时HBsAg平均水平为15.49（0.06，358.39）IU/ml，较基线下降52.77（6.29，203.60）IU/ml，而原方案治疗组患者治疗24周时HBsAg平均水平为578.82（53.29，778.76）IU/ml，较基线下降31.54（－14.43，59.29）IU/ml，两组患者HBsAg水平（Z =－3.850、P < 0.001）及较基线下降程度（Z =－3.000、P = 0.003）差异均有统计学意义。治疗24周时，联合治疗组患者HBsAg水平较基线下降> 0.5 log₁₀ IU/ml患者21例（占56.76%），而原方案治疗组仅有3例（8.11%），差异具有统计学意义（χ² = 17.822、P < 0.001）；多因素Logistic回归分析显示NAs经治患者HBV DNA有效控制且HBsAg低水平的CHB患者基线HBsAg、24周HBsAg下降> 0.5 log₁₀ IU/ml与治疗48周时HBsAg阴转相关。 结论NAs经治后HBV DNA有效控制且HBsAg低水平CHB患者联合IFN治疗能促进HBsAg水平下降，并提高HBsAg阴转率。     

干扰素α治疗HBeAg阳性慢性乙型肝炎应答不佳的优化疗效研究

目的 观察干扰素α（IFNα）联合阿德福韦酯（ADV）和替比夫定（LdT）序贯治疗对IFNα治疗应答不佳的HBeAg阳性慢性乙型肝炎（CHB）的临床疗效.方法 选择2010年2月至2013年4月浙江省绍兴市第六人民医院收治的接受IFNα治疗24周后应答不佳的HBeAg阳性CHB患者86例.根据患者意愿分为继续单用IFNα治疗组21例,IFNα联合ADV治疗组30例,改用LdT序贯治疗组35例.采用x2检验比较三组患者治疗48周时的ALT复常率、HBV DNA低于检测值下限（500拷贝/mL）的比例、HBeAg及HBsAg血清学转换率.结果 治疗48周时,继续单用IFNα治疗组的ALT复常率为52.6％ （10/19）,低于IFNα联合ADV治疗组（86.7％,26/30）和LdT序贯治疗组（84.8％,28/33）,差异有统计学意义（x2=6.913和6.361,P＜0.05）;继续单用IFNα治疗组的HBV DNA低于检测值下限（500拷贝/mL）的比例为26.3％（5/19）,低于IFNα联合ADV治疗组（60.0％,18/30）和LdT序贯治疗组（54.5％,18/33）,差异有统计学意义（x2=11.33和3.895,P＜0.05）;继续单用IFNα治疗组没有HBeAg转阴或血清学转换,而IFNα联合ADV组和LdT序贯治疗组分别有6例（20.0％,6/30）和7例（21.2％,7/33）发生HBeAg转阴或血清学转换（x2=4.330和4.657,P ＜0.05）.三组患者均未发生HBsAg转阴或血清学转换.IFNα联合ADV治疗组与LdT序贯治疗组之间的ALT复常率、HBV DNA低于检测值下限率和HBeAg转阴或血清学转换率比较差异无统计学意义（x2=0.042,0.019和0.064,P ＞0.05）.结论 对于IFNα治疗应答不佳的HBeAg阳性CHB患者,IFNα联合ADV治疗或LdT序贯治疗可明显改善患者的肝功能和病毒学应答,两种治疗方案疗效相近.     

HBV基本核心启动子和前C区变异的深度测序分析

目的利用Ion Torrent PGM深度测序技术,探讨乙型肝炎病毒e抗原（HBeAg）阳性慢性乙型肝炎（CHB）患者乙型肝炎病毒（HBV）基本核心启动子和前C区突变特征。 方法收集HBeAg阳性CHB患者血清样本25例,提取HBV DNA,采用巢式PCR方法扩增HBV基本核心启动子和前C区片段,构建深度测序文库,基于Ion Torrent PGM平台深度测序,生物信息学分析突变位点及其突变率;构建HBV基本核心启动子和前C区突变型和野生型参考质粒,作为深度测序质控品。 结果在25例HBeAg阳性CHB患者HBV基本核心启动子和前C区检出流行率达20%的突变位点10个：G1746A、A1752G/T、T1753C/G、A1762T、G1764A、C1817G/A、T1825C/A、A1846T、G1896A、G1899A;G1746A和T1825C/A的流行率分别达92%和100%。突变位点在HBV B基因型和C基因型感染者的分布情况显示,A1752G/T和G1896A主要流行于B基因型感染者（63.6% vs 0.0%,χ² = 12.374、P = 0.0007;72.7% vs 28.6%,χ² = 4.812、P = 0.0472）,A1762T和G1764A主要流行于C基因型感染者（27.3% vs 78.6%,χ² = 6.579,P = 0.0172）;C基因型感染者A1762T/G1764A突变率显著高于B基因型感染者,但差异无统计学意义（25.7% ± 28.4% vs 68.4% ± 42.7%,t = 1.614、P = 0.1326）。25例HBeAg阳性CHB患者中,32.0%患者仅有A1762T/G1764A突变,24.0%患者仅有G1896A突变,24.0%患者同时携带A1762T/G1764A和G1896A突变。 结论深度测序分析可用于定量检测HBV基本核心启动子和前C区突变,为HBV突变研究的临床应用提供了技术平台。     

成都某院乙型肝炎患者的免疫特点分析

目的分析成都某院乙型肝炎患者的免疫特点。 方法将329例乙型肝炎患者分为急性乙型肝炎组、慢性乙型肝炎组、乙型肝炎肝硬化组及乙型慢加急性肝功能衰竭组,比较各组患者的免疫球蛋白、补体和T淋巴细胞亚群等免疫指标的差异。 结果急性乙型肝炎组与慢性乙型肝炎组相比,各项免疫指标差异均无统计学意义（P均> 0.05）。乙型肝炎肝硬化组患者的IgG、IgA和IgM水平分别为（18.12 ± 5.70）g/L、（3.63 ± 0.94）g/L和（4.39 ± 0.82）g/L,显著高于其余3组;而该组患者CD3⁺ T、CD4⁺ T和CD8⁺ T细胞计数分别为（583.10 ± 276.35）个/μl、（339.13 ± 131.55）个/μl和（205.23 ± 41.22）个/μl,显著低于其余3组（P均< 0.05）。乙型慢加急性肝功能衰竭组患者的补体C3和C4水平分别是（0.39 ± 0.27）g/L和（0.08 ± 0.07）g/L,显著低于其余3组（P均< 0.05）。随着肝功能损害程度的加重,慢性乙型肝炎患者的ALT、AST、TBil和IgG水平均逐渐升高,而补体C3、C4、CD3⁺ T和CD4⁺ T细胞计数则逐渐下降（P均< 0.05）。 结论乙型肝炎患者的免疫状态与疾病进展及病情严重程度有一定相关性,肝硬化及肝功能衰竭患者体内存在免疫球蛋白升高、补体下降及T细胞损耗等免疫紊乱的情况。