补阳还五汤联合间充质干细胞移植对脑缺血再灌注损伤大鼠bFGF mRNA表达的影响

目的探讨补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞(MSCs)移植对脑缺血损伤的神经保护机制。方法将48只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、MSCs移植组(MSCs组)、补阳还五汤联合MSCs移植组(联合组),每组12只。建立局灶性脑缺血再灌注模型,MSCs组、联合组从尾静脉注入MSCs,联合组并给予补阳还五汤,给药10天后检测碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因表达情况。结果 MSCs组与联合组均能上调大鼠脑组织bFGFmRNA表达水平,与模型组和假手术组相比,差异均有统计学意义(P<0.05),联合组表达明显高于MSCs组(P<0.05)。结论补阳还五汤联合MSCs移植能通过上调脑组织bFGFmRNA表达水平,促进内源性神经营养因子bFGF基因表达而起对脑缺血再灌注损伤起保护作用。     

补阳还五汤联合鞘内注射间充质干细胞治疗脊髓损伤的研究

目的:探讨补阳还五汤联合鞘内注射大鼠间充质干细胞(rMSCs)对大鼠脊髓损伤(SCI)的修复作用。方法:将66只Wistar大鼠,随机分成模型组、假手术组、PBS对照组(简称对照组)、补阳还五汤组(简称中药组)、鞘内注射rMSCs组(简称移植组)和补阳还五汤联合鞘内注射rMSCs组(简称联合组)。造模后3天,对照组鞘内注射PBS液,中药组予以补阳还五汤灌胃30天,移植组鞘内注射rMSCs,联合组鞘内注射rMSCs同时给予补阳还五汤灌胃30天。治疗后第7、14、21、28天分别行BBB分级法检测神经功能恢复情况,HE染色法观察脊髓损伤病理改变和修复情况,应用免疫组化技术检测BrdU标记的rMSCs胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和神经元特异烯醇化酶(NSE)表达情况。结果:成功制作了大鼠脊髓半横断损伤模型,移植组和联合组BBB分级法检测平均得分较模型组、对照组和中药组有显著提高(P0.05),联合组在不同时间点的BBB平均得分都高于移植组。脊髓组织病理切片显示联合组较移植组组织水肿和炎性细胞浸润减轻更明显,胶质细胞增生更加活跃。双标免疫组化显示移植的rMSCs可迁移到宿主脊髓损伤处并存活,从第7天开始即有NSE和GFAP表达。联合组中GFAP、NSE阳性细胞数目均较移植组多(P0.05)。结论:鞘内注射移植rMSCs对大鼠脊髓损伤具有修复作用,联合应用补阳还五汤有协同增效的效果,有利于大鼠脊髓功能的恢复。     

补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏肌成纤维细胞异常转化的机制研究

目的:通过观察补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏TGF-β_1/Smads通路信号分子的表达作用,阐释补阳还五汤调节高血压前期大鼠肾脏肌成纤维细胞异常转化,延缓肾脏病理损伤的作用。方法:将20只雄性盐抵抗大鼠(dahl salt resistant rat,SS)随机分为正常对照组,中药对照组,20只雄性dahl盐敏感大鼠(dahl salt sensitive rat,DS)随机分为模型组和中药治疗组,每组10只。高盐饲料喂养12 d后,中药对照组和中药治疗组予以补阳还五汤灌胃治疗,每日1次,共治疗5周。治疗结束后取大鼠左肾组织检测TGF-β_1Smad2 Smad7及α-SMA的mRNA表达和P-Smad2蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组TGF-β_1Smad2和α-SMA的mRNA表达升高(P0.05),Smad7mRNA表达降低(P0.05),P-Smad2蛋白表达升高(P0.05);补阳还五汤治疗后,与模型组比较中药治疗组TGF-β_1Smad2和α-SMA的mRNA表达降低(P0.05);Smad7mRNA表达升高(P0.05),P-Smad2蛋白表达降低(P0.05)。结论:补阳还五汤可能是通过调节肾脏TGF-β_1/Smads通路相关信号分子的表达抑制肌成纤维细胞异常转化,延缓肾脏病理损伤。     

补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植对脑缺血再灌注大鼠行为学及脑梗死体积的影响

目的:研究补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植对局灶性脑缺血再灌注大鼠行为学及脑梗死体积的影响。方法:用右侧大脑中动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,检测脑梗死体积,并比较其神经功能行为积分。结果:移植组与联合组均能够使大鼠神经功能损害评分降低,以联合组第7d恢复最为明显(P0.05)。脑组织切片经TTC染色,可见右侧大脑中动脉供血区出现大小不等的梗死灶,MSCs组及补阳还五汤联合MSCs组与缺血再灌注组比较有显著意义(P0.01),前两者之间比较无显著性意义(P0.05)。结论:补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞移植可减少局灶性脑缺血再灌注大鼠脑梗死体积,改善脑缺血后神经行为症状。     

补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞对脑缺血大鼠血脑屏障通透性的影响

目的:为了研究补阳还五汤联合骨髓间充质干细胞(MSCs)对脑缺血再灌注大鼠血脑屏障(blood brain barrier, BBB)通透性及其影响因素AQP4的表达。方法:将大鼠80只随机分为假手术组、模型组、补阳还五汤组、MSCs组、补阳还五汤联合MSCs组(联合组),每组各16只。利用改良线栓法制备大脑中动脉栓塞(middle cerebral artery obstruction,MCAO)缺血再灌注大鼠模型,在3、5 d运用干湿重法测定缺血脑组织含水量,采用伊文思蓝(Evans blue, EB)法检测血脑屏障的通透性,用透射电镜观察血脑屏障超微结构的变化,采用Western Blot法检测缺血脑组织中AQP4的表达。结果:与假手术组相比,在造模后3、5 d时间点,MCAO模型组大鼠脑组织含水量、EB含量显著升高,AQP4的蛋白表达水平上升,具有极显著性统计学意义(P0.01);与模型组相比,补阳还五汤组、MSCs组、联合组中缺血脑组织含水量、EB含量及AQP4的蛋白表达水平显著下降,各组间有显著统计学意义(P0.05)。联合组的作用在第5天更为明显,与MSCs组及补阳还五汤组相比,具有显著性差异(P0.05)。结论:补阳还五汤联合MSCs可以降低脑组织的含水量及血脑屏障的通透性,维持BBB结构的完整性,其作用机制与水通道蛋白AQP4的调控密切相关。     

补阳还五汤新用

补阳还五汤新用李贯彻，李英姿，孟祥福补阳还五汤出自《医林改错》，由黄芪、当归尾、赤芍、地龙、川芎、桃仁、红花组成。具有补气、活血、通络的功效，是治疗中风后遗症半身不遂的常用方，笔者以气虚血瘀为临床辨证要点，用本方治疗妇科杂病，每获良效。１盆腔瘀血综合...     

神经干细胞迁移研究平台的建立及补阳还五汤的干预影响

目的:建立体外神经干细胞(neural stem cells,NSCs)迁移研究的平台,并通过经典名方补阳还五汤对此平台进行适用性验证。方法:分离、培养大鼠脑胚胎NSCs,利用NSCs放射性迁移、划痕修复动态检测以及Transwell趋化性迁移检测的方法,建立体外NSCs迁移研究平台。利用此平台评价经典名方补阳还五汤(300,600 mg·L~(-1)),有效单体川芎嗪(10,50 mg·L~(-1))以及阳性对照基质细胞衍生因子-1(stromal-derived factor 1,SDF-1)等对NSCs迁移的影响。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测放射性迁移系统及Transwell培养上清液中SDF-1及血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的含量。结果:经过不同时间点的观察,放射性迁移、划痕修复动态检测以及Transwell趋化性迁移均可见不同程度的NSCs的迁移;与空白组比较,补阳还五汤及川芎嗪能够明显促进放射性迁移体系中NSCs的迁移,还能够显著增加向Transwell下室迁移的细胞数,且具有剂量依赖性(P0.05,P0.01),此外还可显著提高NSCs培养上清中SDF-1,VEGF的含量(P0.01),其中对SDF-1含量上调作用高于VEGF;给予AMD3100预处理后,600 mg·L~(-1)补阳还五汤及10,50 mg·L~(-1)川芎嗪促进Transwell向下室迁移的细胞数显著降低。结论:该研究建立的NSCs迁移研究平台动态、多维,能模拟不同临床病理生理过程,且经济实用、简便易行,可供中药复方和单体成分活性筛选之用。     

补阳还五汤新用

补阳还五汤新用黄镇鹏１阳萎吴××，男，２４岁，建筑工人，１９９０年８月１０日初诊。主诉：阳事不举２月余。缘患者于２月前工作时不慎被铁条击中下腹及外阴部，此后阳事不举。先后就诊３位中医，皆认为肾虚，均予温肾壮阳之剂治疗，效果不显而来诊。症见阳事不举，精...     

补阳还五汤新用

补阳还五汤出自《医林改错》，由黄芪、当归、赤芍、地龙、川芎、红花、桃仁组成，具有补气活血通络之功效，原方用于治疗气虚血瘀之半身不遂。笔者以本方加减治疗闭经、偏头痛等病症，取得满意疗效，现介绍如下。     

补阳还五汤新用

<正> 清代名医王清任以“元气既虚,必不能达于血管,血管无气,必停留而淤”为理论依据,创制了由黄芪、当归,川芎、赤芍、桃仁、红花、地龙组成的补气活血通络之补阳还五汤,是治疗中风后遗症半身不遂及周围性面神经麻痹的有效方剂。笔者根据“气虚血淤”这个病理改变,本着“异病同治”的原则,除用本方治疗以上两种病症外,还试治了心绞痛、痛经、功能性子宫出血、多发性神经炎等疾患,均取得较好的疗效,现举几则治验于下。冠心病心绞痛本病常在中年以后发病,症见胸闷心悸,短气乏力,自汗,心前区刺痛反复发作,脉细涩或结     

补阳还五汤抑制同型胱氨酸介导的血管平滑肌细胞增殖

目的:探讨补阳还五汤抑制同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)介导的血管平滑肌细胞增殖及其作用机制。方法:雄性SD大鼠补阳还五汤给药剂量为14.9 g.kg-1.d-1,给药7 d制备含药血清,取适量含药血清配制含药血清为5%,10%,20%3种培养基,取对数期细胞,按照分组将5%,10%,20%含药血清培养基预处理细胞1 h后加入Hcy 2 mmol.L-1作用24 h,流式细胞技术测定细胞周期,Western-blotting(WB)测定增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的蛋白表达量,用荧光探针DCFH-DA试剂盒对细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的聚积量进行测定。结果:补阳还五汤能抑制血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)细胞周期的进程,其中5%含药血清组细胞处在S+G2期为47.34%(P<0.05),10%含药血清组为38.81%(P<0.01),20%含药血清组为27.95%(P<0.01),下调细胞内PCNA的表达(P<0.01),测得补阳还五汤给药组细胞内ROS的荧光强度较Hcy组弱。结论:补阳还五汤能显著抑制Hcy介导的VSMC增殖,其作用机制可能是通过降低细胞内ROS的聚积量。     

基于Treg细胞探讨补阳还五汤对动脉粥样硬化斑块的影响及机制

目的:从调节性T细胞(Treg)细胞和炎症角度探讨补阳还五汤(BYHWT)对动脉粥样硬化斑块影响及具体作用机制。方法:8周龄50只Apo E基因敲除(Apo E~(-/-))小鼠随机分为模型组,BYHWT组低、中、高剂量,雷帕霉素组,以C57/BL小鼠作为正常组。模型组,BYHWT组给予高脂饮食造模12周,正常组给予正常饮食。造模成功后,BYHWT低、中、高剂量组分别给予5,10,20 g·kg~(-1)BYHWT灌胃,雷帕霉素组给予促进Treg细胞增殖剂-雷帕霉素(4 mg·kg~(-1)),正常组和模型组给予等剂量生理盐水灌胃,所有组灌胃4周;4周后取心脏主动脉窦,制备成石蜡组织切片,采用苏木素-伊红(HE)染色法评价斑块面积,采用免疫组化评估斑块内Treg细胞表达数量。眼内眦取血,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测外周血炎症因子表达,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测外周血叉状头转录因子p3(Foxp3)mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组动脉粥样硬化斑块面积显著增加(P0.01),外周血中肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-6(IL-6)含量均显著升高(P0.05),转化生长因子-β(TGF-β),白细胞介素-10(IL-10)明显降低(P0.05),外周血Foxp3 mRNA表达明显降低(P0.05);与模型组相比,BYHWT中、高剂量组斑块面积明显减小(P0.05),外周血TNF-α,IL-6含量降低(P0.01),BYHWT高剂量组TGF-β,IL-10表达增加(P0.05,P0.01),高剂量组斑块内Treg细胞表达增加(P0.01),各剂量组外周血Fxop3 mRNA表达增加(P0.01)。结论:BYHWT具有抗动脉粥样硬化作用,该作用可能与增加Treg细胞数量,进而抑制体内炎症反应有关。     

补阳还五汤加减治疗中风45例

[目的]观察补阳还五汤加减治疗中风临床疗效。[方法]本组86例,分为两组。对照组给予内科常规治疗,治疗组在常规组的基础上加用补阳还五汤治疗。[结果]治疗组有效率100%,对照组有效率87.8%。[结论]应用补阳还五汤的治疗组疗效优于对照组,是治疗中风的一种有效途径。     

补阳还五汤对兔骨折骨痂成份和生物力学性能的影响

目的：探讨补阳还五汤促进骨折愈合的机制。方法：以兔作人工骨折模型,并于造模后第7、14、21、35、49天后进行骨痂成份及生物力学性能测定。结果：用药组骨痂羟脯氨酸含量与钙的含量在造模后第7、14、21天高于对照组;用药组造模后第35、49天腓骨抗折荷重力量显著高于对照组（P＜0.05）。结论：补阳还五汤可提高骨折兔骨痂钙及羟脯氨酸含量,提高生物力学性能,促进骨折愈合。     

补阳还五汤对大鼠局灶性脑缺血后神经干细胞迁移的影响

目的:观察补阳还五汤对大鼠大脑中动脉阻塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)后神经干细胞(neural stem cells,NSCs)迁移的影响.方法:采用MCAO模型,缺血90 min后再灌.将造模成功的大鼠分层并随机分组分为模型和补阳还五汤组,24 h后ig补阳还五汤12g.kg-1,1次/d,连续3周.另16只不阻塞动脉大鼠设为手术组.分别在给药后1,2,3周进行行为学评分;并在第4天和18天ip 5-溴-2-脱氧尿苷(5-bromo-2-deoxyuridine,BrdU)50 mg· kg -1,各连续3d.2,3,5-三苯基四氮唑(TTC)染色测量梗死面积;免疫组化检测BrdU阳性细胞;酶联免疫法(ELISA)检测基质细胞衍生因子1(stromal cell derived factor-1,SDF-1)蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组1周和3周神经行为学评分显著升高(P ＜0.05或P＜ 0.01),脑梗死面积、缺血侧室管膜下区(subventricular zone,SVZ)及纹状体区BrdU阳性细胞数均显著增加(P＜ 0.05或P＜ 0.01).与模型组相比,补阳还五汤能显著改善大鼠MCAO神经功能缺失症状,药后1,2,3周神经功能评分为(1.33±0.60),(o.89±0.58),(0.50±0.31)分,明显低于模型组的(1.72±0.46),(1.56±0.51),(1.89±0.50)分(P＜0.01);降低脑梗死面积,药后1,3周分别为(16.1±5.2)％,(10.3±0.40)％,明显低于模型组的(35.2±6.3)％,(29.8±6.9)％,(P＜0.01),提高SVZ和纹状体区BrdU阳性细胞数,药后1周分别为(71.17±5.19),(83.8±3.83)个,明显高于模型组的(52.17±6.52),(60.20±6.72)个,药后3周分别为(43.33±6.06),(54.60±5.77)个,明显高于模型组的(35.83±4.88),(22.00±3.87)个(P＜0.01);给药3周时显著提高SDF-1表达,3周时为(36.3±2.71) pg·mg-1,明显高于模型组的(28.65±3.47)pg·mg-1(P＜ 0.05).结论:补阳还五汤能促进MCAO大鼠缺血侧NSCs迁移,其可能机制是通过上调SDF-1蛋白的表达水平实现的.     

补阳还五汤治疗糖尿病肾病35例疗效观察

目的：观察补阳还五汤治疗糖尿病肾病（DN）的临床疗效。方法：将65例患者随机分为治疗组35例和对照组30例。2组均予控制血糖、血压、血脂等常规治疗，治疗组在常规治疗基础上加用补阳还五汤（处方：黄芪、川芎、地龙、红花、当归、赤芍、桃仁）治疗。主要观察临床疗效及治疗前后实验室各项指标改善情况。结果：总有效率治疗组为88．6％，对照组为73．3％，2组比较，差异有显著性意义（P〈0．05）。治疗组治疗后尿白蛋白排泄率（UAER）、24小时尿蛋白定量、空腹血糖（FBG）、糖化血红蛋白（HbAtC）、血浆白蛋白（Alb）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）均显著下降，与治疗前比较，差异有显著性或非常显著性意义（P〈0．05，P〈0．01）；治疗后治疗组与对照组比较，差异均有显著性意义（P〈0．05）。结论：常规治疗基础上加用补阳还五汤治疗糖尿病肾病疗效优干单纯西药治疗。     

补阳还五汤抗动脉粥样硬化作用与紧密连接蛋白的关系

目的: 探讨补阳还五汤对同型半胱氨酸(homocysteine,Hcy)致动脉粥样硬化(AS) 的保护作用与紧密连接蛋白表达的关系. 方法: 将40只雄性载脂蛋白E基因敲除(ApoE^-/-)小鼠随机分为模型组、补阳还五汤低、中、高剂量组,Rho激酶抑制剂Y-27632组.以正常雄性C57BL/6J小鼠设正常组,每组8只动物.模型组和治疗组均采用0.1 g·kg^-1·d^-1的Hcy造模,造模同时,治疗组分别补阳还五汤(5,10,20 g·kg^-1·d^-1)组,Y-27632 50 mg·kg^-1组,ig.8周后采用Western-blot检测主动脉组织claudin蛋白的表达变化和反转录PCR(RT-PCR)检测连接蛋白包括咬合蛋白(occludin)、闭合蛋白(claudin)、带状闭合蛋白(zonula occludens, ZO)、连接黏附分子(junction adhesion molecule, JAM)的mRNA的表达变化. 结果: 与正常组对比,Western-blot检测模型组AS病变明显,模型组与正常组比claudin蛋白表达明显减少,RT-PCR检测模型组与空白组相比,claudin,JAM,Zo,Occludin的mRNA的表达明显降低,不同剂量的补阳还五汤改善AS病变的同时上调血管组织中Claudin,JAM,Zo,Occludin的表达水平. 结论: 补阳还五汤能显著的增加血管组织中Claudin,occludin,JAM,Zo表达量,说明补阳还五汤抗hcy所致的AS与增强血管组织中紧密连接蛋白有关.     

补阳还五汤对LPS诱导巨噬细胞活化与自噬的影响

目的:探讨磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(PI3K/Akt/m TOR)信号通路在补阳还五汤抗脂多糖(LPS)诱导巨噬细胞活化与自噬中的作用。方法:细胞增殖毒性检测(CCK-8)法筛选诱导RAW264.7巨噬细胞活力值的最适LPS浓度。在最适LPS浓度下,利用PI3K阻断剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)(5 mmol·L~(-1)),Akt阻断剂MK2206(5μmol·L~(-1)),m TOR阻断剂Rapamycin(10μmol·L~(-1)),Beclin-1阻断剂Spautin-1(5μmol·L~(-1))及不同剂量的补阳还五汤含药血清(5%,10%,20%)处理RAW264.7巨噬细胞24 h后,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测RAW264.7巨噬细胞炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β),白细胞介素-6(IL-6),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定磷酸化(p-)PI3K,p-Akt,p-mTOR通路蛋白的表达及微管轻链蛋白3(LC3),泛素结合蛋白1(p62),Beclin-1的水平。自噬双标腺病毒转染检测RAW264.7细胞自噬流的变化。结果:CCK-8结果显示10 mg·L~(-1)LPS作用时,细胞活性显著增强。模型组IL-1β,IL-6,TNF-α浓度显著高于空白组(P0.01),与模型组比较,Rapamycin显著升高IL-6浓度,其他给药组均可降低IL-1β,IL-6,TNF-α的水平(P0.05,P0.01)。模型组p-Akt,p-PI3K,p-mTOR蛋白表达量明显低于空白组(P0.05),LC3,p62蛋白表达量显著高于空白组(P0.01),与模型组比较,Rapamycin显著降低p-Akt蛋白表达量,不影响p-mTOR表达,补阳还五汤各剂量组与其他各阻断剂组均可明显升高p-Akt,p-PI3K,p-mTOR蛋白表达量(P0.05,P0.01),降低LC3,p62蛋白表达量(P0.05,P0.01),各组Beclin-1蛋白表达量均无显著性差异。与空白组比较,模型组中有明显的自噬体斑点形成,自噬流顺畅;与模型组比较,补阳还五汤含药血清组,3-MA,Spautin-1组自噬斑点的形成明显减少或消失,MK2202,Rapamycin组自噬体斑点大小明显减小,但自噬活力仍较强。结论:补阳还五汤抗LPS诱导巨噬细胞活化与自噬与抑制巨噬细胞炎症反应,调控PI3K/Akt/m TOR信号通路,抑制自噬的过度发生有关。     

小陷胸汤合补阳还五汤治疗早期糖尿病肾病临床观察

目的:观察小陷胸汤合补阳还五汤治疗早期糖尿病肾病的临床疗效,并探讨其作用机制。方法:将86例患者随机分为治疗组和对照组,各43例,治疗组口服小陷胸汤合补阳还五汤,对照组口服替米沙坦40 mg/次,1次/d,两组疗程均为6个月。观察两组临床疗效、中医证候积分,并检测治疗前后尿白蛋白排泄率(UAER),血清肌酐(SCr),血尿素氮(BUN),空腹血糖(FBG),总胆固醇(TC),甘油三酯(TG),低密度脂蛋白(LDL)及高密度脂蛋白(HDL)。结果:治疗组总有效率(87.8%)优于对照组(62.7%)(P0.05);两组症状疗效改善率差异显著(P0.05,P0.01);治疗组治疗后UAER,SCr,BUN,FBG,TC,TG,LDL均明显低于治疗前(P0.05,P0.01),HDL较治疗前明显升高(P0.05);治疗组治疗后与对照组比较,UAER,SCr,BUN,FBG有降低趋势;TC,TG,LDL降低,HDL升高(P0.05)。结论:小陷胸汤合补阳还五汤结合西医基础治疗早期糖尿病肾病有较好的疗效。