眼针对腹泻型肠易激综合征模型大鼠结肠组织5-HT表达的影响

目的:观察眼针对D-IBS模型大鼠结肠5-HT表达的影响。方法:雄性Wistar大鼠分为正常组、D-IBS模型组和眼针组3组。采用慢性应激结合束缚方法建立D-IBS模型并进行眼针治疗。采用ELISA测定血清和结肠5-HT含量;采用免疫组化法测定结肠5-HT表达。结果:与正常组比较,模型组血清和结肠组织中5-HT含量显著升高(P0.01),结肠组织中5-HT的表达水平显著升高(P0.01);与D-IBS模型组比较,眼针组血清和结肠5-HT含量显著降低(P0.01),结肠5-HT表达显著降低(P0.01)。结论:眼针能够调控D-IBS模型大鼠结肠5-HT的表达。     

疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠 结肠黏膜5-HT,CGRP表达的影响

目的:研究疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠血及结肠黏膜中5-羟色胺(5-HT)、降钙素基因相关肽(CGRP)的影响,探讨其疗效机制。方法:60只Wistar大鼠随机分为正常组,模型组,疏肝健脾方高、中、低剂量组和匹维溴胺组;用寒冷-束缚刺激法复制D-IBS大鼠模型;采用紫外分光光度法测各组大鼠血清5-HT含量,放免法检测血浆CGRP水平,免疫组织化学SABC法检测结肠黏膜组织5-HT,CGRP的表达情况。结果:模型组大鼠血中5-HT含量及结肠黏膜中5-HT阳性纤维的平均吸光度(A)升高,CGRP降低,与正常组比较,差异有统计学意义(P<0.05);各用药组血中5-HT及其在肠黏膜的表达降低,CGRP升高,与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),且以疏肝健脾高、中剂量组差异明显(P<0.01)。结论:疏肝健脾方通过调节D-IBS大鼠5-HT,CGRP的变化,是其发挥疗效的作用机制之一。     

肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠行为及海马单胺递质的影响

目的:观察蒙药肉蔻-5味丸对慢性抑郁模型大鼠行为及海马单胺递质的影响,探讨其抗抑郁作用机制。方法:60只雄性SD大鼠,随机分为正常组、模型组、盐酸氟西汀组(3.6 mg·kg-1)及肉蔻-5味丸低、中、高剂量组(0.2,0.4,0.8g·kg-1),每组10只。采用慢性不可预见性应激与孤养结合的造模方法复制抑郁模型,造模同时ig给药,每天1次,连续给药21 d。以体重变化,矿场试验(open-field test),糖水消耗试验来进行行为学评价,酶联免疫法(ELISA)检测大鼠海马5-羟色胺(5-HT),去甲肾上腺素(NE),多巴胺(DA)单胺递质的含量。结果:给予21 d应激后,模型组大鼠体重增长缓慢,糖水消耗量、Open-field试验水平活动得分和垂直活动得分及海马5-HT,DA,NE的含量较正常组显著降低(P0.05,P0.01),与模型组相比氟西汀和肉蔻-5味丸可不同程度改善其抑郁状态,氟西汀组、肉蔻-5味丸高、中剂量组大鼠海马5-HT,DA,NE的含量显著增加(P0.05,P0.01)。结论:肉蔻-5味丸的抗抑郁作用可能与提高脑内5-HT,NE,DA单胺递质的含量相关。     

蒙医脑-白脉调控针刺对卒中后抑郁模型大鼠行为及前额叶皮质NE、DA、5-HT含量影响

目的观察蒙医脑-白脉调控针刺对卒中后抑郁(PSD)模型大鼠行为及前额叶皮质单胺递质的含量影响。方法 32只SD雄性大鼠,随机分为假手术组、模型组、蒙医针刺组、盐酸氟西汀组,每组8只。用栓线法建立局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,叠加慢性不可预见性刺激与孤养结合造成PSD动物模型。通过糖水偏爱实验和敞箱实验对大鼠行为学评价,采用酶联免疫法检测大鼠前额叶皮质去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)等单胺递质的含量。结果与假手术组比较,模型组大鼠糖水消耗量、敞箱实验中的水平活动次数和垂直运动次数明显下降(P﹤0.05),前额叶皮质NE、DA、5-HT含量明显降低(P﹤0.05)。与模型组比较,蒙医针刺组和盐酸氟西汀组大鼠糖水消耗量、敞箱实验中的水平活动次数和垂直运动次数明显增加(P﹤0.05),前额叶皮质NE、DA、5-HT含量明显增加(P﹤0.05)。蒙医针刺组和盐酸氟西汀组之间比较,无显著差异(P0.05)。结论蒙医脑-白脉调控针刺改善卒中后抑郁大鼠行为异常,明显提高前额叶皮质NE、DA、5-HT单胺递质的含量,具有抗抑郁作用。     

健脾补肾中药对衰老脑组织中胆碱乙酰转移酶/乙酰胆碱酯酶、单胺氧化酶B影响的研究

目的:观察健脾补肾中药对衰老大鼠脑组织单胺氧化酶B(MAO-B)、胆碱乙酰转移酶/乙酰胆碱酯酶(ChAT/AchE)活性表达的影响。方法:受试动物随机分组并建立亚急性衰老大鼠模型,经健脾补肾中药干预后测定各组大鼠脑组织MAO-B、ChAT/AchE活性变化。结果:与空白组比较,模型组大鼠MAO-B、AchE表达显著升高(P<0.05),ChAT表达显著降低(P<0.01),应用健脾补肾中药治疗后,治疗组大鼠MAO-B、AchE表达显著降低(P<0.05),ChAT表达显著升高(P<0.05)。结论:健脾补肾中药具有调节脑组织单胺类神经递质和胆碱类神经递质代谢而发挥脑功能保护作用。     

疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆及结肠组织5-HT、SP、VIP的影响

[目的]观察疏肝健脾方对腹泻型肠易激综合征大鼠血浆及结肠组织5-羟色胺(5-HT)、P物质(SP)和血管活性肠肽(VIP)的影响。[方法]将60只SD大鼠按随机数字表法随机分为正常组、模型组、得舒特组、疏肝健脾方低、中、高剂量组,使用乙酸灌肠加束缚的方法建立腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠模型,应用免疫组化法检测5-HT、SP及VIP。[结果]疏肝健脾方可以明显降低大鼠的粪便含水量(P<0.05);疏肝健脾方中、高剂量组腹部撤退反射(AWR)评分在不同扩张容量下均较模型组明显降低(P<0.05);疏肝健脾方可以降低大鼠血浆中5-HT和结肠组织中SP的含量,而血浆中SP、VIP及结肠组织中VIP含量无显著变化。[结论]疏肝健脾方可以改善大鼠的腹泻及内脏的高敏感性,并对5-HT及SP有调节作用,提示疏肝健脾方可以有效治疗D-IBS,并与调节胃肠激素有关。     

当归芍药散对慢性应激抑郁模型大鼠行为及中枢单胺类神经递质的影响

目的:研究当归芍药散对慢性应激抑郁模型大鼠行为及中枢单胺类递质的影响.方法:应用分养和长期不可预见性温和应激造成大鼠抑郁模型,并观察当归芍药散对该模型大鼠的治疗作用.定期测定各组大鼠糖水嗜好程度;敞箱实验方法测定大鼠水平及垂直活动;RP-HPLC-荧光法测定动物大脑额叶皮质中神经递质的含量.结果:与正常对照组比较,模型组大鼠糖水消耗、垂直活动、水平运动显著减少,大脑额叶皮质中NE,DA,5-HT,5-HIAA的含量均明显降低;当归芍药散高剂量可明显升高DA,5-HT,5-HIAA的含量(P＜0.01),低剂量仅对5-HIAA含量有明显增高(P＜0.01),对NE含量无明显改变.结论:初步表明当归芍药散具有抗抑郁作用,机制可能与调节脑内单胺类神经递质DA,5-HT,5-HIAA的含量有关.     

百合知母汤总皂苷调节5-HT功能治疗抑郁症的作用机制

目的:分析百合知母汤总皂苷(SBZ)调节5-羟色胺(5-HT)功能治疗抑郁症状的作用机制,同时探讨百合知母的药对优势。方法:SD大鼠采用孤养配合慢性不可预见性温和刺激诱发抑郁模型,分为抑郁症模型组,百合总皂苷组(100 mg·kg~(-1)),知母总皂苷组(220 mg·kg~(-1)),SBZ组(240 mg·kg~(-1)),百忧解组(FLU,10 mg·kg~(-1)),另设正常组,每组11只;正常组和抑郁症模型组给予等量0.5%阿拉伯树胶溶液,其他组别给予相应剂量的药物。测量各组大鼠强迫游泳不动时间,酶联免疫吸附测定(ELISA)检测血液、大脑5-HT含量;免疫荧光检测大脑皮层及海马5-HT1a阳性表达。实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测海马5-HT合成基因色氨酸羟化酶1(TPH1),突触囊泡单胺转运体(SLC18A1),突触相关蛋白-25(SNAP25)mRNA水平以及5-HT1a受体信号传导下游调节基因RGS19在血液以及下丘脑的mRNA表达。蛋白免疫印迹法(Western blot)检测5-HT转运体蛋白(SERT)在海马和下丘脑表达水平。结果:与模型组比较,SBZ明显降低抑郁大鼠强迫游泳不动时间(P0.05),上调血液以及大脑5-HT含量(P0.05),上调大脑皮层以及海马5-HT1a阳性表达(P0.05,P0.01)。SBZ上调海马TPH1,SLC18A1和SNAP25 mRNA表达,同时上调血液、下丘脑组织RGS19 mRNA表达(P0.05,P0.01)。SBZ下调海马和下丘脑SERT蛋白表达(P0.01)。结论:SBZ激活5-HT合成基因TPH1表达,同时下调SERT表达抑制5-HT重摄取,增加中枢5-HT含量;上调5-HT1a受体及其下游RGS19基因表达调节受体功能及其信号传递;同时SBZ通过上调SLC18A1和SNAP25表达改善神经突触递质传递能力,最终达到抗抑郁的效果。SBZ抗抑郁药效与百合总皂苷、知母总皂苷对比具有显著优势。     

补肾活血饮对帕金森病伴发抑郁模型大鼠行为学及脑内5-HT、NE及NPY的影响

目的 探讨补肾活血饮对帕金森病伴发抑郁模型大鼠行为学及脑内单胺类神经递质5-羟色胺（5-HT）、去甲肾上腺素（NE）及神经肽Y（NPY）的影响。方法 采用直接向脑内注入6-羟基多巴胺损毁脑黑质致密部的方法建立帕金森病模型,并采用慢性不可预见性温和应激及孤养方法建立抑郁模型。将造模成功的75只PD大鼠用随机数字表法分为模型组、补肾活血饮组、盐酸氟西汀组、多巴丝肼组、盐酸氟西汀+多巴丝肼组,每组15只;另取20只正常大鼠为正常组。通过糖水偏爱测试、强迫游泳实验、悬尾实验等方法检测大鼠行为;采用高效液相-电化学检测（HPLC-ECD）测定各组大鼠脑内5-HT、NE含量;用放射免疫法测定各组大鼠脑组织及血清中NPY含量。结果 与正常组比较,给药前、治疗后模型组大鼠体重明显下降（P<0.01）;治疗后,模型组大鼠悬尾静止时间、强迫游泳不动时间均明显延长,糖水偏爱率明显减少,大鼠脑组织中5-HT及NE含量减少,血清及脑组织中NPY含量降低（均 P<0.01）。与模型组比较,治疗后补肾活血饮组、盐酸氟西汀组、盐酸氟西汀+多巴丝肼组大鼠体重升高（P<0.01）,悬尾静止时间、强迫游泳不动时间均减少（P<0.01）,糖水测试糖水偏爱率明显增高（P<0.01）,血清及脑组织中NPY含量升高（P<0.01）;补肾活血饮组、盐酸氟西汀组及盐酸氟西汀+多巴丝肼组、多巴丝肼组大鼠脑组织中5-HT及NE含量均升高（P<0.01, P<0.05）。与多巴丝肼组比较,补肾活血饮组、盐酸氟西汀组、盐酸氟西汀+多巴丝肼组大鼠体重升高（P<0.01）,悬尾静止时间、强迫游泳不动时间均减少（P<0.05）,糖水偏爱率增高（P<0.05）,血清及脑组织中NPY含量明显升高（P<0.01）。结论 补肾活血饮能促进PD伴发抑郁模型大鼠脑组织NPY释放,增加5-HT、NE含量,改善帕金森大鼠抑郁样行为。     

脑出血后抑郁大鼠脑内单胺神经递质的变化及中药的干预作用

目的:探讨脑出血后抑郁动物模型脑内单胺神经递质5-羟色胺、去甲肾上腺素、酪氨酸羟化酶的变化,研究中药颐脑解郁方对脑出血后抑郁的干预机理。方法:用免疫组织化学方法观察脑出血后抑郁模型大鼠脑内5-羟色胺、去甲肾上腺素、酪氨酸羟化酶的表达变化及以西药百忧解为对照和中药的干预作用。结果:模型组脑内海马CA1区、扣带皮质、梨状皮质内5-HT阳性细胞表达减少,下丘脑TH阳性细胞表达减少,扣带皮质和下丘脑内NE表达减少;西药增加海马CA1、扣带皮质5-HT的表达,增加下丘脑TH的表达面积,增加扣带皮质、下丘脑内NE的表达面积增多。中药颐脑解郁增加海马CA3、梨状皮质5-HT的表达,增加下丘脑TH的表达面积,增加扣带皮质、下丘脑内NE的表达面积和光密度。结论:脑出血后抑郁模型大鼠脑内5-羟色胺、去甲肾上腺素、酪氨酸羟化酶表达下降,中西药可以通过增强TH、NE、5-HT的功能,增加其浓度,起到改善抑郁的作用。     

健脾理气化湿方配方颗粒治疗脾虚湿热型非酒精性脂肪性肝炎患者疗效及对FFA，HOMA-IR，APRI的影响

目的:观察健脾理气化湿配方颗粒治疗脾虚湿热型非酒精性脂肪性肝炎(NASH)患者的疗效,及对患者游离脂肪酸(FFA),胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)和天门冬氨酸氨基转移酶/血小板指数(APRI)的影响。方法:根据标准募集96例符合纳入标准的脾虚湿热型NASH患者,采用随机数字表将患者按1∶1比例分配至对照组和治疗组,每组48例。在运动和饮食调整基础上,对照组予安慰剂颗粒剂,治疗组予健脾理气化湿方颗粒剂口服,疗程共24周。分别于治疗前后进行相关检查,评估疗效并观察FFA,HOMA-IR和APRI的变化。结果:治疗组临床总有效率为82.5%,对照组为52.5%,治疗组高于对照组(P0.01)。两组患者治疗后FFA水平均较治疗前明显下降(P0.05,P0.01),治疗组下降更为显著(P0.01);两组治疗后HOMA-IR均较治疗前显著下降(P0.01),治疗组下降更为显著(P0.01)。与治疗前比较,对照组治疗后APRI略有下降,差异无统计学意义;治疗组APRI显著下降(P0.01),且显著低于对照组(P0.01)。结论:健脾理气化湿方对脾虚湿热型NASH患者具有较好疗效,能够显著降低FFA水平,改善胰岛素抵抗和肝纤维化。     

补肾止颤方对6-OHDA诱导的帕金森病模型大鼠神经保护作用的研究＊

目的 探讨补肾止颤方对帕金森病（Parkinson??s disease， PD）模型大鼠多巴胺能神经元的保护作用。方法 将100只Sprague-Dawley大鼠随机分为5组：正常组、模型组、补肾止颤方低剂量组、中剂量组、高剂量组，补肾止颤方按照不同剂量溶于生理盐水中，每天中午灌胃1次，正常组和模型组予以相同体积的生理盐水灌胃。分别在处理10天和20天后检测各组大鼠的行为学，免疫组织化学法检测脑内多巴胺能神经元标志物酶酪氨酸羟化酶（Tyrosine hydroxylase，TH）和多巴胺递质转运子（Dopamine transmitter transporter， DAT），酶联免疫吸附测定（Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）检测脑内多巴胺及其代谢产物的变化。结果 和模型组比不同剂量的补肾止颤方均能够改善PD大鼠的行为学，提高TH、DAT、3，4二羟基苯乙酸（3，4 dihydroxyphenylacetic acid， DOPAC）、5羟色胺（Serotonin，5-HT）、高香草酸（High vanilla acid，HVA）的表达（P < 0.05或P < 0.01），同时下调单胺氧化酶B（Monoamine oxidase B，MAO-B）的表达（P < 0.01）。结论 补肾止颤方能够改善6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine， 6-OHDA）损伤早期大鼠的行为学改变，增加帕金森病大鼠多巴胺能神经元的数量，并能维持多巴胺能神经元功能，降低神经损伤，有较好的神经保护作用。     

健脾消糖颗粒对糖尿病前期胰岛功能的影响

目的： 观察中药制剂健脾消糖颗粒治疗糖尿病前期的疗效及对患者胰岛功能的影响。方法： 将117例糖尿病前期患者随机分为治疗组与对照组,治疗组59人,对照组58人,两组均进行健康教育与生活干预治疗。治疗组服用健脾消糖颗粒与阿卡波糖片治疗,对照组单纯服用阿卡波糖片。疗程为6个月,比较两组治疗前后空腹血糖（FPG）、餐后2 h血糖（2 hPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）,空腹胰岛素（INS）,胰岛素抵抗指数（IR）,胰岛素敏感指数（ISI）,Homaβ细胞功能指数的前后变化。结果： 两组治疗后FPG,2 hPG,HbA1c下降（P<0.05）,与对照组比较,治疗组下降更明显（P<0.01）,治疗组与对照组FINS,HOMA-IR下降（P<0.05）与对照组比较,治疗组下降更明显（P<0.01）,ISI,胰岛素分泌指数（HOMA-B）上升（P<0.05）,与对照组比较,治疗组上升更明显（P<0.01）。结论： 阿卡波糖片和健脾消糖颗粒均能改善糖尿病前期患者的FPG,2 hPG,HbA1c的水平和胰岛功能,加用健脾消糖颗粒的效果更加显著。     

健脾消癌方通过PI3K/Akt信号通路抑制结肠癌血管生成的研究＊

目的 观察结肠癌HCT116细胞健脾消癌方的条件培养液对HUVEC细胞管腔形成的影响，从PI3K/Akt生物轴调控角度探讨其作用机制。方法 培养HCT116细胞，细胞设3组：对照组，健脾消癌方组（加入15%健脾消癌方含药血清）及人参皂苷Rg3组；制备HCT116细胞健脾消癌方条件培养液（分组及制备方法见实验方法），用条件培养液干预HUVEC（脐静脉内皮细胞，Human Umbilical Vein Endothelial Cells），Matrigel基质胶法检测HCT116细胞健脾消癌方条件培养液对HUVEC小管形成的影响。随后采用蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组HCT116细胞磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、p-Akt、VEGF（血管内皮生长因子，Vascular endothelial growth factor）蛋白表达。最后在结肠癌HCT116荷瘤小鼠中验证健脾消癌方对肿瘤生长速度的影响，并经瘤组织VEGF蛋白表达、CD31免疫组化染色检测肿瘤内血管生成情况。结果 模型组HUVEC细胞管腔形成较空白血清组显著增加（P<0.05）；健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组较模型组HUVEC细胞管腔形成显著减少（P<0.01）。p-Akt和VEGF蛋白表达水平模型组高于空白血清组（P<0.05），健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组显著低于模型组（P<0.01）；PI3K、Akt蛋白表达量组间差异无统计学意义。与对照组比较，模型组荷瘤小鼠肿瘤体积显著性增大，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积显著性增加，差异有统计学意义（P<0.05）；与模型组比较，健脾消癌方组及人参皂苷Rg3组荷瘤小鼠肿瘤体积显著减小，瘤组织内VEGF表达、CD31阳性面积降低，差异有统计学意义（P<0.05）。结论 健脾消癌方可抑制肿瘤的血管生成和生长，其作用机制可能与PI3K/Akt生物轴调控VEGF表达有关。     

痛泻要方加减引经药防风对肠易激综合征大鼠内脏敏感性及脑肠轴不同靶点脑肠肽的影响

目的:研究痛泻要方加减防风对腹泻型肠易激综合征(D-IBS)大鼠内脏敏感性及脑肠轴不同靶点脑肠肽的影响。方法:将新生SD大鼠随机分为正常组、模型组、痛泻要方缺防风组、痛泻要方全方组,和痛泻要方倍用防风组,每组10只,除正常组外,其余各组采用母子分离结合乙酸灌肠法,复制腹泻型肠易激综合征大鼠模型,造模后各组灌胃给予相应药物,连续2周,检测粪便含水量和腹壁撤退反射(AWR),采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测5-羟色胺(5-HT)和P物质(SP)的含量,通过免疫组化法检测促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的表达。结果:与模型组比较,各实验组均能显著降低粪便含水量、最小容量阈值和血浆、下丘脑、结肠中的5-HT,SP含量,减少CRH的表达(P0.05,P0.01)。痛泻要方全方组和痛泻要方倍用防风组大鼠粪便含水量,5-HT和SP含量及CRH的表达量较痛泻要方缺防风组明显减低,AWR评分明显升高,差异具有统计学意义(P0.05,P0.01)。结论:防风具有增强痛泻要方抑制腹泻型肠易激综合征的内脏高敏感性和调节脑肠轴不同靶点中的脑肠肽的效应。     

温阳健脾汤治疗脾肾阳虚型泻药性便秘

目的: 探讨温阳健脾汤治疗脾肾阳虚型泻药性便秘的临床疗效及配体干细胞因子(SCF)/c-kit信号通路。 方法: 2013年1月至2014年9月期间,本院诊治的80例脾肾阳虚型泻药性便秘患者,根据随机数字法,将其分为对照组(枸橼酸莫沙必利)和观察组(温阳健脾汤),每组各40例,治疗4周,观察和比较两组治疗的临床疗效、治疗前后中医症状积分变化、Western blot检测结肠c-kit及SCF蛋白表达水平。 结果: 与对照组相比,观察组治疗的总有效率明显升高(90.0% VS 70.0%,P<0.05),差异有统计学意义;与酪氨酸激酶受体对照组相比,观察组治疗后中医症状积分明显降低(4.8±2.3 VS 8.2±3.4,P<0.05),差异有统计学意义;与治疗前相比,治疗后两组结肠酪氨酸激酶受体c-kit,干细胞因子SCF蛋白表达均明显增多,P<0.05,差异有统计学意义,而与对照组相比,治疗后观察组结肠c-kit蛋白表达明显升高(0.39±0.17 VS 0.28±0.15,P<0.05),差异有统计学意义,而SCF蛋白表达没有明显变化(0.72±0.23 VS 0.71±0.20),差异无统计学意义。 结论: 温阳健脾汤能够提高结肠c-kit,SCF蛋白的表达,通过SCF/c-kit信号通路,改善脾肾阳虚型泻药性便秘患者的临床症状。