慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中论著TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达

目的 观察慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞中TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达.方法 用密度梯度离心法分离COPD患者和健康人外周血单个核细胞后,提取总RNA并逆转录为cDNA,用实时定量PCR检测TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的拷贝数.结果 COPD患者外周血单个核细胞的TLR3和TLR9 mRNA表达较正常健康人明显增高(P＜0.05),而TLR7和TLR8 mRNA的表达在COPD患者和正常健康人之间却无显著差异(P＞0.05).在COPD患者中,急性期和稳定期患者的TLR3、TLR7、TLR8和TLR9无显著差异(P＞0.05). 结论TLR3和TLR9的升高可能是COPD患者对病毒敏感性增高的一个重要机制.     

白癜风患者外周血单个核细胞中TLR7、TLR9、NF-κB的表达及意义研究

目的探究白癜风患者外周血单个核细胞(PBMC)中Toll样受体7(TLR7)、Toll样受体9(TLR9)、核因子-κB(NF-κB)的表达情况及其意义。方法前瞻性选取2017年4月至2018年4月沈阳市第七人民医院收治的33例白癜风患者作为观察组,33例同期健康体检者为对照组。使用流式细胞仪检测两组PBMC中的TLR7、TLR9表达情况,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测两组PBMC中的NF-κB表达情况。结果流式细胞仪结果显示,观察组患者PBMC中的TLR7表达量为(94.65±3.931)%,高于对照组的(92.84±3.52)%,但差异无统计学意义(P0.05);而观察组患者PBMC中的TLR9表达量为(86.68±11.01)%,低于对照组的(90.75±5.74)%,但差异无统计学意义(P 0.05); PCR反应结果显示,观察组患者PBMC中的NF-κB mRNA表达量为(0.96±1.52),高于对照组的(0.24±0.35),差异具有统计学意义(P 0.05)。结论白癜风患者PBMC中TLR7表达过量,TLR9则低表达,但与正常健康者的表达情况未见较大差异,而该信号通路的信号分子NF-κB表达量远高于正常健康者,推测TLR7、TLR9、NF-κB的表达与白癜风可能存在一定的关系,但具体机制需进一步探寻。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中TLR2/4-NF-κB及IRAK1/4信号通路变化研究

目的探讨慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中TLR2/4-NF-κB及IRAK1/4信号通路的变化。方法选取2018年1月至2019年6月本院就诊的COPD患者90例为COPD组,进一步分为COPD稳定期组(n=48)和急性加重期组(AECOPD组,n=42),另选同期健康志愿者90名为对照组。分离PBMCs并检测其表面TLR-2、TLR-4、NF-κB、IRAK-1、IRAK-4表达,检测血清白介素(IL)-1β、-6、-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)。结果 COPD稳定期组和AECOPD组的PBMCs中TLR-2、TLR-4、NF-κB、IRAK-1及IRAK-4 mRNA及血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α表达均高于对照组,且AECOPD组高于稳定期组,差异均有统计学意义(P0.05)。Pearson相关性分析显示,TLR-2、TLR-4、NF-κB、IRAK-1、IRAK-4与血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α呈正相关性,与FEV1/FVC呈负相关性(P0.05)。结论 TLR2/4-NF-κB及IRAK1/4信号通路激活及下游炎症因子高表达参与了COPD的发生及发展,且在AECOPD患者中这些变化尤为明显。     

类风湿性关节炎患者早期外周血单个核细胞Toll样受体2、4表达及意义

目的探讨类风湿性关节炎(RA)早期患者外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体(TLR)2、TLR4对其配体双糖链蛋白多糖(BGN)、脂多糖(LPS)的刺激反应性,阐明PBMC TLR2、TLR4在RA疾病早期中的作用。方法采用流式细胞术、实时荧光定量逆转录(RT)-聚合酶链反应(PCR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)分别检测BGN和LPS刺激前后,RA组和健康对照组外周血CD14+单核细胞TLR4+细胞频率、PBMC TLR2 mRNA和TLR4mRNA及上清液白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNFα)的含量变化。结果 RA早期患者TLR2 mRNA明显升高、TLR4 mRNA下降(P<0.01);经LPS刺激后,RA患者TLR4 mRNA升高3.50倍,而健康对照组下降到0.11倍;LPS和BGN促进了各组PBMC产生IL-6、TNFα,但RA早期患者组上升的倍数明显高于健康对照组。结论 PBMC TLR2、TLR4参与早期RA的发生、发展。     

肥胖患者外周血单个核细胞Toll样受体4表达及活性研究

目的研究肥胖患者外周血单个核细胞（PBMCs）Toll样受体4（11LR4）表达及活性。方法收集16例肥胖患者和16例正常对照者的PBMCs,蛋白印迹法检测PBMCsTLR4及IKBct蛋白表达,实时荧光定量PCR检测PBMCsTLR4及白细胞介素6（IL-6）mRNA表达,并测定空腹血糖、空腹胰岛素、血游离脂肪酸（FFA）、IL-6及肿瘤坏死因子仪（TNF-a）。结果与正常对照组比较,肥胖组血FFA、IL-6、TNF-a及稳态模型评估的胰岛素抵抗指数（HOMA-IR）明显增高[FFA：（879±64）、（458±48）umoL／L,t=24．613、P=0．000;IL-6：（2．20±0．35）、（1．264-0．25）ng／L,t=14．993、P=0．000;TNF—a（1．964-0．32）、（1．384-0．24）ng／L,t=9．128、P=0．000;HOMA．IR：1．84-0．2、0．44-0．1,t=32．254、P=0．000];肥胖组PBMCsTLR4mRNA及蛋白表达显著升高（TLR4mRNA：3．13±0．21与0．99±0．03,f=54．758,P〈0．05;TLR4蛋白：7．04±0．42与2．53±0．17,t：77．450,P〈0．05）;肥胖组PBMCsIKBet蛋白表达显著降低（2．52±0．16与4．00±0．30,t=23．284,P〈0．05）,IL-6mRNA表达显著升高（2．55±0．15与1．03±O．11,t=53．981,P〈0．05）。结论肥胖患者PBMCsTLR4表达及活性显著增加,可能在肥胖患者胰岛素抵抗的发生、发展中具有重要作用。     

ST段抬高型心肌梗死患者入院血糖与外周血单个核细胞TLR4表达和活性的关系

目的研究ST段抬高型心肌梗死(STEMI)患者入院血糖与外周血单个核细胞(PBMCs)Toll样受体4(TLR4)表达和活性的关系,探讨入院血糖影响STEMI患者住院临床预后的可能机制。方法 142例STEMI患者纳入本研究,检测入院血糖、PBMCs TLR4及白细胞介素-6(IL-6)m RNA表达、血IL-6及肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。根据入院血糖水平分为高血糖组(入院血糖≥7.8 mmol/L)和正常血糖组(入院血糖<7.8 mmol/L)。比较两组患者临床特征、主要心脏不良事件、PBMCs TLR4表达和活性的差异,分析入院血糖与PBMCs TLR4表达和活性的相关性。结果高血糖组年龄、糖尿病史、体质指数、心率、白细胞计数、入院血糖、肌钙蛋白I、肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、血IL-6和TNF-α显著高于正常血糖组(P<0.05),舒张压和左心室射血分数显著低于正常血糖组(P<0.05)。高血糖组住院期间恶性心律失常、心力衰竭和死亡等主要心脏不良事件的发生率显著高于正常血糖组(P<0.05)。高血糖组PBMCs TLR4 m RNA及IL-6 m RNA表达水平显著高于正常血糖组(3.34±0.68 vs.1.68±0.55,P<0.05;2.89±0.47 vs.1.62±0.57,P<0.05)。Logistic回归分析显示,在所有入选的STEMI患者中,入院血糖是恶性心律失常、心力衰竭和死亡等主要心脏不良事件的独立危险因素(OR=1.976,95%CI:1.445~2.703,P<0.05;OR=2.117,95%CI:1.483~3.023,P<0.05;OR=2.317,95%CI:1.421~3.778,P<0.05)。Pearson相关性分析显示,入院血糖与PBMCs TLR4 m RNA、IL-6 m RNA表达水平呈正相关(r=0.577,0.527,P均<0.05)。结论急性STEMI入院高血糖患者住院期间主要心脏不良事件的发生率显著增加,急性STEMI患者入院血糖与PBMCs TLR4表达和活性显著正相关,急性STEMI患者入院高血糖可能通过增加单核细胞TLR4表达和活性导致心脏不良事件的发生。     

系统性红斑狼疮患者外周血单个核细胞中Toll样受体9和Foxp3的表达及二者相关性

目的检测系统性红斑狼疮(SLE)患者外周血单个核细胞中转录因子Toll样受体9(TLR9)和Foxp3在的表达,并探讨其意义以及二者的相关性,明确TLR9和Foxp3在SLE中的作用和意义。方法选择泰安市中心医院和山东大学齐鲁医院2012年10月至2014年6月门诊或住院SLE活动性患者33例、SLE非活动性患者30例,查体中心健康查体者23例作为正常对照,运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测正常对照组和SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3和TLR9m RNA的表达水平。结果活动性SLE患者外周血单个核细胞中TLR9 m RNA的表达水平明显高于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),非活动性SLE患者TLR9 m RNA的表达水平高于正常对照(P<0.05)。TLR9 m RNA水平与SLE疾病活动指数(SLEDAI)呈正相关(r=0.702,P<0.05)。活动性SLE患者外周血单个核细胞中Foxp3 m RNA的表达水平明显低于SLE非活动性患者和正常对照(P<0.05),非活动性SLE患者Foxp3 m RNA的表达水平低于正常对照(P<0.05)。Foxp3 m RNA水平与SLEDAI呈负相关(r=-0.681,P<0.05)。在SLE患者外周血单个核细胞中TLR9和Foxp3的表达呈负相关。结论 SLE患者TLR9的表达与疾病活动性呈正相关,而Foxp3的表达与疾病活动性呈负相关。TLR9和Foxp3之间可能存在相互调节的作用,共同导致SLE的发生和发展。     

慢性阻塞性肺疾病患者血清TLR3 mRNA水平与急性加重期发生的关系

目的:分析慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease, COPD)患者血清Toll样受体3(toll-like receptor 3,TLR3)信使RNA(messenger RNA,mRNA)水平与急性加重期发生的关系。方法:选择2021年11月—2022年10月儋州市人民医院收治的COPD急性加重期患者50例作为COPD急性加重期组、COPD稳定期患者52例作为COPD稳定期组、体检健康者55例作为对照组。收集所有受试者临床资料、肺功能指标[第1秒用力呼气容积占预计值百分比(FEV1%)、第1秒用力呼气容积与用力肺活量的比值(FEV1/FVC)];酶联免疫吸附法检测受试者血清白细胞介素-4(IL-4)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)水平;荧光定量PCR法检测受试者血清TLR3 mRNA水平;Pearson法或Spearman法分析COPD急性加重期患者血清TLR3 mRNA水平与吸烟史、FEV1%、FEV1/FVC、IL-4、TNF-α、hs-CRP水平的相关性;多因素logistic回归分析影响CO...     

复方新诺明联合泼尼松治疗对系统性红斑狼疮患者外周单个核细胞TLR7和TLR9表达的影响

目的探究系统性红斑狼疮应用复方新诺明联合泼尼松治疗对外周单个核细胞TLR7和TLR9表达的影响。方法回顾性选择同济大学附属杨浦医院2018年5月至2019年12月期间收治的系统性红斑狼疮患者50例,对患者进行分组,为试验1组(n=20)和试验2组(n=30),其中试验1组为初次诊断患者,试验2组为复方新诺明联合泼尼松治疗患者,同时选同期同院健康体检的30例健康人作为对照组,对三组补体C4、补体C3、C-反应蛋白、红细胞沉降率、抗Sm抗体、抗ds-DNA抗体、抗核抗体、性别、年龄进行分析。结果在试验1组、试验2组、对照组中,外周血单个核细胞均有TLR9、TLR7表达。TLR9、TLR7转录水平经定量PCR检测,试验1组显著高于对照组(P 0.05)。试验2组TLR9、TLR7显著高于对照组(P 0.05)。试验2组的TLR7表达低于试验1组(P 0.05);系统性红斑狼疮活动指数与TLR9、TLR7呈正相关(P 0.01)。试验1组系统性红斑狼疮活动指数与TLR7的相关系数为0.099,与TLR9的相关系数为0.490;系统性红斑狼疮活动指数、抗Sm抗体滴度与TLR7的转录水平呈正相关(P 0.05)。TLR9和抗ds-DNA抗体滴度、系统性红斑狼疮活动指数呈正相关。TLR9与联合用药治疗剂量存在相关性。TLR9表达与药物治疗剂量、C4水平以及系统性红斑狼疮活动指数相关。TLR7转录水平与系统性红斑狼疮活动指数相关。结论系统性红斑狼疮病情变化情况与TLR9、TLR7基因转录呈正相关,而泼尼松、复方新诺明使用剂量是影响TLR9表达的主要因素。     

AECOPD患者外周血单个核细胞中miR-128-3p和TLR4表达的相关性及临床意义

目的:研究慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者外周血单个核细胞(PBMCs)中微小RNA(miR)-128-3p、Toll样受体4(TLR4)表达的相关性及临床意义。方法:选择2020年1月-2022年2月期间在我科住院治疗的122例AECOPD患者作为AECOPD组,在我科门诊就诊的140例稳定期COPD患者作为稳定期COPD组,在我院体检的110例志愿者作为对照组。检测PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平及实验室指标白细胞计数(WBC)、超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血沉(ESR),评价AECOPD患者的短期预后、结局包括存活和死亡。结果:AECOPD组PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平及WBC、hs-CRP、ESR水平均高于稳定期COPD组和对照组(P<0.05);AECOPD组PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平呈正相关,miR-128-3p、TLR4的mRNA表达水平与WBC、hs-CRP、ESR水平呈正相关;AECOPD组中死亡患者PBMCs中miR-128-3p、TLR4的mRNA...     

Isokinetic testing of quadriceps function in COPD: feasibility,responsiveness, and minimal important differences in patients undergoing pulmonary rehabilitation

BackgroundIsokinetic testing of peripheral muscle function is valid and reliable in patients with chronic obstructive pulmonary disease (COPD).ObjectiveTo evaluate whether and to what extent isokinetic testing of quadriceps function meets pre-defined test criteria in patients with COPD; to determine the response to pulmonary rehabilitation (PR), and to calculate minimal important differences (MIDs) of isokinetic quadriceps function.MethodsRetrospective analysis of 2033 patients with COPD (age: 65±9 years, body mass index: 26±6 kg/m², FEV₁: 49±22% predicted) who followed a comprehensive PR program. Pre and post PR isokinetic quadriceps function was assessed with 30 maximal extension-flexion contractions at an angular speed of 90°/s on a computerized dynamometer. The chosen anchors were 6-min walk test and COPD assessment test.ResultsPre PR, 27% of the patients performed the isokinetic test incorrectly. In male and female patients with a correct pre and post PR isokinetic test, peak torque (Δ=10±13 Nm or 9% and Δ=7±9 Nm or 10%, respectively) and total work (Δ=263±270 J or 14% and Δ=198±190 J or 15%, respectively) improved significantly. There was no change in work fatigue index following PR. Using distribution-based calculations, MID estimates for peak torque and total work ranged between 6–7 Nm and 97–135 J in males and between 4–5 Nm and 62–99 J in females.ConclusionsBased on the current test criteria, three in four patients with COPD performed the isokinetic quadriceps test correctly during baseline PR assessment. Furthermore, peak torque and total work, but not work fatigue index, were responsive to PR and sex-specific MIDs were established.     

SOCS-3在脓毒症患者外周血单个核细胞中表达的研究

目的探讨细胞因子信号转导抑制因子-3（SOCS-3）在脓毒症发病机制中的作用。方法选择36例脓毒症患者,30例健康志愿者为对照组,应用RT-PCR方法测定SOCS-3在外周血单个核细胞中的表达,并和患者APACHEⅡ评分进行相关分析。结果SOCS-3在脓毒症组和对照组的外周血单个核细胞中均有表达,脓毒症组较对照组表达显著增加（P〈0．001）,SOCS-3 mRNA的表达和脓毒症A—PACHEⅡ评分呈负相关,相关系数（r）为-0．746（P〈0．01）。结论SOCS-3参与了脓毒症的发病过程,SOCS-3的表达在脓毒症患者中可能起着保护作用。     

外周血单个核细胞的抗体依赖性细胞介导的细胞毒活性检测

为摸索简便易行检测人外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）之具有抗体依赖性细胞介导的细胞毒作用（ＡＤＣＣ）方法，建立了一种用少量外周血检测人ＰＢＭＣ的ＡＤＣＣ活性的微量比色方法。确定实验条件为：效应细胞浓度１．０×１０￣７／ｍｌ，效靶比１∶１０；抗绵羊红细胞抗体１∶５００稀释，３７℃孵育４小时，细胞毒指数适中（约３５％左右）。上述实验条件可敏感地检测ＰＢＭＣ的ＡＤＣＣ活性，具有操作简便、易于一般实验室开展的优点。     

谷氨酰胺对COPD外周血单个核细胞HSP70、TNF-α表达的影响

目的探讨谷氨酰胺（Gin）对慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞（PBMC）中热休克蛋白70（HSP70）和肿瘤坏死因-α（TNF-α）表达的影响。方法选择30例COPD急性加重期（AECOPD）患者为研究对象,设为AECOPD组．将治疗10～20d后处于稳定期的上述患者设为SCOPD组,分别以Gin干预,并以健康人为正常对照组。采用Real—timePCR法检测上述5组PBMC中HSP70mRNA和TNF-α mRNA的表达水平。结果AECOPD和SCOPD空白对照组HSP70mRNA、TNF-α mRNA的表达高于正常对照组,差异有统计学意义（t分别=-3．74、-3．57、-3．63、-3．31,P均〈0．05）;AECOPD组和SCOPD组中,用Gin干预的较未用Gln的PBMC中HSP70表达均升高,差异有统计学意义（t分别=4．87、2．81,P均〈0．05）,而TNF-α表达均下降（t分别=-3．42、-2．97,P均〈0．05）。结论Gin可抑制COPD患者炎症因子TNF-α的活性,升高HSP70的表达。     

慢性阻塞性肺疾病患者呼吸道曲霉菌分离阳性的临床意义

目的 了解呼吸道曲霉菌分离阳性的慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者发生侵袭性肺曲霉病(IPA)的危险因素及预后.方法 选择2000年1月至2005年12月期间52例呼吸道曲霉菌分离阳性的COPD患者,根据我国IPA的诊断标准进行回顾性分析.结果 确诊IPA者7例,临床诊断18例,曲霉菌定植27例.单因素方差分析发现,长期使用糖皮质激素和广谱抗生素、机械通气、过去1年中多次住院等因素与COPD患者发生IPA有关;但多因素Logistic回归分析显示,长期使用糖皮质激素及过去一年中多次住院者是发生IPA的独立危险因素.IPA组住院病死率为84%,明显高于定植组22.2%,差异具有统计学意义(P<0.01).对预后危险因素分析表明,延迟诊断和治疗与预后相关.结论 接受长期糖皮质激素治疗及过去1年中多次住院的COPD患者,呼吸道分泌物曲霉菌分离阳性应视为IPA的高危因素.     

慢性乙肝患者外周血单个核细胞mIL—2R的检测

用生物素－链霉亲和素免疫细胞化学法检测慢性乙型肝炎（ＣＨ－Ｂ）患者外周血单个细胞（ＰＢＭＣ）静息状态及ＰＨＡ诱导后膜白介素－２受体表达水平，结果显示ＣＨ－Ｂ患者Ｔ淋巴细胞处于部分激活状态，其对ＰＨＡ的应答能力未见明显低下。ＣＨ－Ｂ患者ＰＨ诱导后ｍＩＬ－２Ｒ的表达水平可作为评价病情和考核疗效的指标之一。