木聚糖酶的亚慢性毒性研究

目的：研究木聚糖酶的亚慢性毒性作用。方法：根据GB15193-2003《食品安全性毒理学评价程序和方法》设104．2、208．4、416．7、833．3mg／kg 4个剂量组,进行大鼠亚慢性毒性试验研究。结果：木聚糖酶大鼠亚慢性毒性试验各剂量组各指标均未显示明显毒性作用。结论：在本次实验条件下,木聚糖酶在833．3mg／kg剂量下未显示有毒性作用。     

叶枯唑原药对大鼠的亚慢性经口毒性研究

[目的]研究叶枯唑原药对大鼠的主要亚慢性毒性作用,确定最大无作用剂量及毒作用靶器官.[方法]按照GB15670-1995<农药登记毒理学试验方法>中大鼠亚慢性经口毒性试验方法进行,设0,7.0,27.9,111.7,447.0mg/kg5个剂量组.[结果]与对照组相比,高剂量组(447.0mg/kg)体重增长明显减慢(P<0.01);脏器系数检查显示低、中、高剂量组甲状腺脏体比均较对照组高(P<0.01);组织病理学检查见低、中、高剂量组大鼠甲状腺不同程度的增生,且呈现良好的剂量-反应关系.[结论]大鼠经口染毒叶枯唑原药90d的最大无作用剂量雌雄鼠均为7.0mg/kg,甲状腺为叶枯唑毒作用的靶器官.     

α-氯代醇对大鼠的亚慢性经口毒性试验研究

[目的]研究α-氯代醇对大鼠的主要亚慢性毒性作用,确定毒作用靶器官及其毒作用剂量。[方法]参照GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》中大鼠亚慢性毒性经口毒性试验方法进行,设0,15,30,75mg/kg4个剂量组。[结果]与对照组比较,雄性高剂量组(75mg/kg)体重增长明显减慢(P﹤0.01),两性别高剂量组血常规中的血红蛋白含量和RBC计数均较对照组降低(P﹤0.05),两性别中、高剂量组肾脏脏器系数有明显改变(P﹤0.05或P﹤0.01),雄性中、高剂量组睾丸及两性别中、高剂量肾脏存在明显病理改变,雄性各剂量组精子计数、精子活动度明显降低(P﹤0.05或P﹤0.01)。[结论]在本试验条件下,连续摄入30mg/kg以上≥80%α-氯代醇90d对SD大鼠肾脏有显著损伤,连续摄入15mg/kg≥80%α-氯代醇90d对雄性SD大鼠精子活动度及精子计数就有显著影响,连续摄入30mg/kg以上≥80%α-氯代醇90d对雄性SD大鼠生殖系统有显著病理损伤。     

无花果叶亚慢性毒性研究

目的研究无花果叶的亚慢性毒性作用。方法根据GB15193-2003《食品安全性毒理学评价程序和方法》设0.0、1.0、2.0、4.0、8.0 g/kg 5个剂量组,进行大鼠亚慢性毒性试验研究。结果无花果叶大鼠亚慢性毒性试验8.0g/kg剂量组体重、体重增重、食物利用率等指标与对照组比较差异有统计学意义(P0.05或P0.01)。结论在本次实验条件下,初步确定无花果叶最大未观察到毒效应剂量(NOEL)为4.0 g/kg。     

杀扑磷的毒性研究

目的　研究杀扑磷原药的急性和亚慢性毒性及致突变性 ,求出最大无作用剂量。方法　按照GB 15 670 -1995《农药登记毒理学试验方法》和GB 15 193 -94进行试验。结果　雌性大鼠LD50 为 3 8 3mg/kg ,雄性大鼠为 3 1 6mg/kg。小鼠骨髓多染红细胞微核试验和小鼠精子畸变试验均为阴性。大鼠亚慢性经口毒性试验显示 ,11 67mg/kg和 3 5 0 0mg/kg饲料组全血胆碱酯酶活力抑制明显 ,3 5 0 0mg/kg饲料组 ,雌性大鼠总摄食量明显减少。结论　杀扑磷的最大无作用剂量为 :雌性大鼠(1 2 6± 0 0 8)mg/ (kg·d) ,雄性大鼠 (0 40± 0 0 4)mg/ (kg·d)。     

制蚜菌素对大鼠的亚慢性经口毒性

目的研究制蚜菌素对SD大鼠的亚慢性经口毒性。方法按照GB 15670-1995《农药登记毒理学实验方法》,设为0.0、2.4、9.6、38.3 mg/kg饲料4个剂量组,每组20只大鼠,雌雄各半;分别采用无明显损害作用剂量(NOAEL)和基准剂量(BMD)计算亚慢性经口毒性阈值。结果大鼠亚慢性经口毒性试验显示,高、中剂量组肝重、肝脏器系数及摄食量低于对照组,差异有统计学意义,且均存在剂量-效应关系,呈负相关。结论制蚜菌素原药亚慢性经口毒性NOAEL雌雄性大鼠分别为(0.22±0.02)、(0.18±0.01)mg/(kg.d),BMD的95%可信限下限(BMDL)雌雄性大鼠分别为0.790、0.319 mg/(kg.d)。     

S-生物烯丙菊酯亚慢性经口毒性和致突变性研究

目的研究农药S生物烯丙菊酯的致突变性和亚慢性经口毒性。方法按GB156701995的方法进行Ames试验、小鼠骨髓微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验和大鼠亚慢性经口毒性试验。结果Ames试验各条件下均为阴性(0.5、5、50、500、5000μg/皿)。S生物烯丙菊酯2～40mg/kg剂量组骨髓微核细胞率和10～40mg/kg剂量组睾丸精母细胞染色体畸变率与阴性对照组比较差异均无显著性。亚慢性经口毒性试验中,各剂量组(2.9～38.5mg·kg-1·d-1)在一般状态、体重、脏器系数等指标均基本正常;高剂量组动物和中剂量组动物部分脏器(脑、心、肝、肾、肺、脾、睾丸)有不同程度的病理表现;经综合分析,S生物烯丙菊酯在本试验对SD大鼠亚慢性经口的最大无作用剂量为2.9mg·kg-1·d-1。结论本受试物在本试验剂量下无致突变作用,亚慢性经口的最大无作用剂量可为本农药安全性评价和进一步试验提供依据。     

戊唑醇原药诱变性与亚慢性经口毒性的实验研究

目的探讨戊唑醇原药的诱变性及亚慢性毒性作用。方法按照我国GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》要求进行。结果 62.5~250μg/皿的Ames实验结果为阴性;染毒14.7~294 mg/kg的剂量组微核试验结果为阴性;染毒36.8~147 mg/kg的剂量组的小鼠睾丸精母细胞染色体畸变率未见增加;亚慢性经口毒性试验高剂量组(71.7mg/kg.bw/d)的雄鼠在染毒中后期出现精神不振、少动、被毛蓬松、会阴部污秽等中毒症状。结论戊唑醇原药无明显致突变作用。戊唑醇原药有一定的蓄积毒性作用,可引起潜在的慢性中毒,主要的毒作用部位是肝脏与血液系统。戊唑醇原药SD雌、雄大鼠亚慢性(90 d)经口试验未观察到有害效应的剂量水平分别为16.3、8.0 mg/kg.bw/d。     

精喹禾灵的亚慢性毒性研究

[目的]探讨精喹禾灵对大鼠的亚慢性毒性,求出最大无作用剂量。[方法]按照GB15 670 1995《农药登记毒理学试验方法》。[结果]精喹禾灵13 0 0mg/kg饲料总摄食量、增重及食物利用率低于对照组,脑/体比、心/体比、肺/体比、肝/体比、肾/体比均高于对照组,睾丸重量及睾丸/体比低于对照组。43 3mg/kg饲料组及13 0 0mg/kg饲料组睾丸组织病理学检查可见组织形态学改变。[结论]精喹禾灵可引起SD大鼠睾丸生殖细胞病变,最大无作用剂量为(10 .42±0 65 )mg/(kg·d)。     

精吡氟禾草灵的亚慢性毒性研究

[目的]探讨精吡氟禾草灵(Fluazifop-p-butyl)对大鼠的亚慢性毒性,求出最大无作用剂量。[方法]按照GB15670-1995《农药登记毒理学试验方法》中亚慢性90d毒性方法,雌雄性大鼠设低(163、290 mg/kg饲料)、中(653、1160 mg/kg饲料)、高(2610、4640 mg/kg饲料)3个剂量组和1个对照组,测试指标包括血液学、尿液、血液生化检查,病理学检查,每周一次测定体重、进食量,到期解剖测定脏器重量,对结果进行统计学处理。[结果]精吡氟禾草灵高剂量组雌雄性大鼠总摄食量低干对照组,肝/体值、肾/体值高于对照组,雄性大鼠脑/体值高于对照组,脾/体值、睾丸/体值低于对照组;中剂量组雄性大鼠脑/体值、肝/体值、肾/体值高于对照组,脾/体值低于对照组。高剂量组睾丸组织病理学检查可见组织形态学改变。[结论]精吡氟禾草灵可引起SD大鼠睾丸生殖细胞病变;最大无作用剂量雌性为(55.72±4.13)mg/(kg·d),雄性为(22.05±1.56)mg/(kg·d)。     

DHA复合物诱导人胃癌细胞SGC-7901凋亡的实验研究

[目的]研究DHA复合物抗肿瘤作用机理。[方法]以人胃癌细胞SGC-7901为模型,利用吖啶橙染色,荧光显微镜观察人胃癌细胞SGC-7901经DHA复合物治疗前后的形态,研究DHA复合物诱导人胃癌细胞SGC-7901的凋亡作用。[结果]实验发现:经DHA复合物治疗后,人胃癌细胞SGC-7901细胞核出现明显的凋亡核形态。[结论]DHA复合物具有明显诱导人胃癌细胞SGC-7901发生凋亡的作用。     

c-myc在植酸诱导人胃癌细胞凋亡中的作用研究

目的研究植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法采用MTT实验法观察植酸对SGC-7901细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜下观察植酸对细胞形态的改变;免疫组化法和Westernblot法检测凋亡调控基因c-myc的表达。结果MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量与时间的效应关系;倒置显微镜下的形态学观察表明加药组细胞的生长受到抑制;植酸组细胞中c-myc蛋白比对照组表达降低,且呈现剂量-反应关系。结论植酸对人胃癌SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,c-myc参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制。     

NF-kBP_(65)及Bcl-2蛋白在植酸诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法:采用AO/EB荧光染色法、彗星实验观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用,Western blot法检测凋亡调控基因Bcl-2及NF-kBP65的表达。结果:荧光染色可见植酸组细胞核染色质成固缩状、串珠状或出现凋亡小体等典型的凋亡细胞形态;植酸组细胞出现了具有凋亡特征的彗星样改变,彗星细胞拖尾率随着植酸浓度的增加呈递增趋势。植酸组细胞中Bcl-2、NF-kB蛋白比对照组表达下降,且呈现剂量-反应关系。结论:植酸对SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,对NF-kB途径的抑制作用可能是其抗癌的机制之一。     

植酸对胃癌细胞恶性增殖的抑制作用研究

目的研究植酸对bax、bcl-2表达影响与抑制胃癌细胞增殖作用及其机制。方法采用MTT实验法观察植酸对胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制作用;倒置显微镜下观察植酸对细胞基本生长状态的改变及形态的变化;单细胞凝胶电泳实验观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用;Western blotting检测凋亡相关基因bax及bcl-2的蛋白表达。结果MTT实验结果显示,植酸对SGC-7901细胞具有生长抑制作用,并呈现剂量与时间的效应关系;倒置显微镜下的形态学观察表明加药组细胞的生长状态不佳;植酸作用组细胞出现了典型凋亡的彗星施尾,且存在剂量-效应关系;植酸能够下调bcl-2蛋白的表达,植酸处理组细胞中bax蛋白比对照组表达增加,且均呈现剂量-反应关系。结论植酸对SGC-7901细胞具有抑制增殖作用,bax及bcl-2参与了植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用机制。     

曲古菌素A对胃癌细胞SGC-7901增殖抑制的研究

目的:研究组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古菌素A(TSA)对胃癌细胞SGC-7901增殖活性的抑制作用。方法:采用不同浓度的TSA处理胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测药物作用前后的细胞增殖情况。流式细胞仪检测TSA处理前后细胞周期的变化。结果:75 ng/ml TSA在48 h时就出现明显抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖。抑制由12 h至72 h显著增加,细胞周期检测发现75 ng/ml TSA即可导致细胞G2期阻滞,抑制细胞增殖。结论:TSA可抑制体外胃癌细胞SGC-7901的生长,诱导SGC-7901细胞出现G2期阻滞。     

亚硒酸钠对胃癌SGC-7901细胞增殖、凋亡及hTERT表达的影响

目的探讨亚硒酸钠对人胃癌SGC-7901细胞株生长、凋亡和hTERT表达的作用及相关机制。方法用含不同浓度亚硒酸钠(0、0.5、2.5、5.0、8.0μmol/L)的培养液培养SGC-7901细胞24、48、72、96h,用相差显微镜观察亚硒酸钠对SGC-7901细胞形态的影响;MTT法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞增殖的影响;AnnexinV-FITC/PI双染法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞细胞的凋亡的影响;链霉亲和素-生物素-酶复合物(SABC)免疫细胞化学法检测亚硒酸钠对SGC-7901细胞hTERT蛋白表达的影响。结果 (1)MTT法结果显示:用亚硒酸钠培养SGC-7901细胞株24,48,72,96h后,随浓度增加,吸光度值逐渐降低,24h后当亚硒酸钠浓度大于2.5μmol/L时,与对照组比较其吸光度值均明显降低(P<0.01),48、96h后各浓度亚硒酸钠组与正常对照组比其吸光度值均明显降低(P<0.01)。随浓度的增加,亚硒酸钠对SGC-7901细胞生长抑制率逐渐增加。(2)流式细胞仪检测结果显示:亚硒酸钠可促进SGC-7901细胞发生细胞凋亡。5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组比正常对照组凋亡率明显升高(P<0.01)。(3)免疫细胞化学法检测结果显示:亚硒酸钠可降低SGC-7901细胞中hTERT蛋白免疫细胞化学染色的平均光密度(MOD),24h时5、8μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),48h时0.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),72h时2.5、5.0、8.0μmol/L亚硒酸钠组与对照组比MOD明显降低(P<0.01),96h时实验组与对照组比较MOD均明显降低(P<0.01)。结论亚硒酸钠能抑制SGC-7901细胞生长,诱导其凋亡,其作用机制可能与下调hTERT表达有关。     

诱导胃癌细胞凋亡中天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶的表达

目的　研究天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶 (caspase 8)在维生素E琥珀酸酯 (VES)诱导胃癌细胞凋亡过程中的作用。方法　以人胃癌SGC 790 1细胞作为靶细胞 ,采用WesternBlot法、荧光分光光度法、DAPI染色法探讨caspase 8在VES诱导SGC 790 1细胞凋亡过程中的表达和活性。结果　经 5、10、2 0mg/LVES处理后 ,细胞中caspase 8蛋白表达增加 ,caspase 8活性分别为 ( 17 83±1 82 )U和 ( 33 74± 2 6 5 )U、( 5 2 34± 3 10 )U ,均呈剂量 效应关系 ;用caspase 8抑制剂z 异亮氨酸 谷氨酸 苏氨酸 天冬氨酸 (IETD fmk)处理SGC 790 1细胞后 ,降低了VES诱导的细胞凋亡率及caspase 8的活性。结论　caspase 8是VES诱导SGC 790 1细胞凋亡的重要参与者。     

β-紫罗兰酮诱导SGC-7901细胞凋亡作用

目的探讨β-紫罗兰酮对胃腺癌SGC-7901细胞的凋亡作用及其可能机制。方法采用细胞生长曲线、核分裂、Hoechst33258荧光染色、透射电镜和WesternBlot方法,观察了β-紫罗兰酮对SGC-7901细胞的生长抑制作用和细胞凋亡诱导情况。结果β-紫罗兰酮对SGC-7901细胞生长和有丝分裂有明显地抑制作用,EC50值为(174.93±12.79)μmol/L;并且可诱导SGC-7901细胞产生凋亡,激活Caspase-3片断和降低ERK1/2蛋白的表达,呈剂量-反应关系。结论β-紫罗兰酮可诱导SGC-7901细胞产生凋亡,不仅作用凋亡途经,而且还影响MAPK途经。     

植酸对人胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的研究

目的了解植酸对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法MTT法检测植酸在体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用;AO/EB荧光染色和DNA Ladder实验检测细胞凋亡;免疫组化法检测凋亡调控基因P53蛋白的表达。结果植酸在体外可以明显抑制人胃癌细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡。免疫组化实验结果表明,植酸可以抑制SGC-7901细胞中凋亡相关P53蛋白的表达。结论植酸在体外可以抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,且对于P53蛋白表达的下调作用可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。     

芹菜素对人胃癌细胞的生长抑制和凋亡诱导作用的研究

目的:了解芹菜素对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法检测芹菜素在体外对人胃癌SGC-7901细胞的生长抑制作用;流式细胞仪检测细胞的周期分布;DAPI荧光染色和DNA Ladder实验检测细胞凋亡;Western blotting方法检测了凋亡相关信号分子caspase-3和Bcl-2的蛋白表达情况。结果:芹菜素在体外可以明显抑制人胃癌细胞的生长,并诱导细胞发生凋亡。Western blotting实验结果表明,芹菜素可以诱导SGC-7901细胞中凋亡相关信号分子caspase-3活化片段的产生并抑制Bcl-2蛋白的表达。结论:芹菜素在体外可以抑制人胃癌SGC-7901细胞的生长并诱导细胞发生凋亡,且对于caspase-3的活化及Bcl-2蛋白表达的下调作用可能是其诱导细胞凋亡的机制之一。