DNMT3A R882突变在急性髓系白血病中的临床意义

目的研究初发急性髓系白血病（AML）病人中DNA甲基化转移酶3A（DNMT3A）R882位点突变情况,并分析其相关临床资料特征。方法运用DNA基因测序法检测116例AML病人与30例缺铁性贫血病人骨髓样本中DNMT3A R882突变情况。结果116例初发AML病人中,DNMT3A R882突变共16例,包括R882H突变9例,R882C突变7例,且均为杂合突变,而良性对照组中无突变;DNMT3A R882突变型AML（Mut-DNMT3A）组病人核型正常的AML（NK-AML）人数及M4、M5人数多于DNMT3A野生型AML组（Wild-DNMT3A组）（P < 0.05）。Mut-DNMT3A组病人年龄、外周血白细胞数及血小板数高于Wild-DNMT3A组（P < 0.05）。Mut-DNMT3A组病人总生存率、无病生存率均低于Wild-DNMT3A组（P < 0.05）。结论DNMT3A R882突变易发生于AML病人,特别是NK-AML及M4、M5病人,且常合并高龄、高白细胞危险因素;DNMT3A R882突变是AML病人预后不良的生物学标志。     

DNMT3A R882突变在成人急性髓系白血病中的研究进展

DNA甲基化转移酶3A(DNMT3A)是重要的DNA甲基化转移酶之一,与血液系统恶性肿瘤的发生发展密切相关.近几年研究发现DNMT3A R882在成人急性髓系白血病(AML)中高频突变,并且成为研究热点.DNMT3A R882突变通过改变DNMT3A结构,使DNMT3A酶活性下降、全基因组DNA低甲基化,促进成人AML发生发展.DNMT3A R882突变在成人AML患者完全缓解(CR)时的长期存在,是预后不良的主要生物分子学标志,同时也意味着常规的微小残留病灶监测(MRD)不能作为R882突变的分子标志.现就近几年对成人AML患者中DNMT3A R882突变的研究进展做一综述.     

急性髓系白血病FLT3基因突变的研究进展

近年来对急性髓细胞性白血病（AML）中FLT3突变及FLT3抑制剂的研究十分广泛和深入。研究表明,野生型FLT3基因在AML中普遍高表达70％～100％,FLT3突变存在于部分AML中（成人约20％～30％）,FLT3基因突变已经被公认是AML中发生率最高的一种基因改变。目前认为FLT3突变在白血病的发生、预后判断、微小残留病变检测等方面具有重要意义。近来FLT3抑制剂治疗AML的研究很多,     

DNA甲基转移酶DNMT1与EZH2在急性髓系白血病中的表达及相关性研究

目的探讨DNA甲基转移酶DNMT1与EZH2在急性髓系白血病(AML)中的表达及其相关性。方法采用荧光定量PCR技术检测50例AML患者骨髓细胞中DNMT1与EZH2 mRNA的表达水平,分析DNMT1表达水平与临床特征和预后的关系以及与EZH2的相关性。结果 50例AML患者骨髓细胞中DNMT1 mRNA的表达显著高于30例正常供者的(2.72±0.73vs 0.89±0.27,P<0.01);EZH2的表达水平也显著高于正常供者的(4.39±1.06,1.87±0.33,P<0.01);EZH2与DNMT1的表达水平呈显著正相关(r=0.51,P=0.002);DNMT1表达水平与外周血幼稚细胞比例≥60%(P<0.05)、WBC≥50×109/L(P<0.05)显著相关;DNMT1高表达组患者中位生存时间15个月(95%CI:9~19个月),显著低于DNMT1低表达组患者的32个月(95%CI:27~40个月)(P=0.006)。结论 DNMT1和EZH2在AML患者中均高表达,两者表达水平呈正相关,DNMT1与AML患者预后不良相关。     

动态监测 FLT3-ITD 基因突变在急性髓系白血病中的意义

目的:分析急性髓系白血病(AML)化疗前后FLT3-ITD基因突变与临床缓解的相关性,探讨FLT3-ITD基因动态改变对评估AML患者临床疗效的意义.方法:分析2016年6月—2019年6月中山市人民医院收治的初诊AML患者178例(除M3型),通过PCR扩增联合一代测序的方法检测骨髓单个核细胞FLT3-ITD突变情况,比较FLT3-ITD阳性患者与阴性患者临床特征和缓解率的差异.结果:AML初诊患者中FLT3-ITD阳性患者(33例)的中位白细胞计数、骨髓原始细胞比例及血乳酸脱氢酶水平明显高于FLT3-ITD阴性患者(145例)(P<0.05);AML初诊FLT3-ITD阳性患者与阴性患者相比,具有更低的完全缓解率(42.4％vs58.6％,P<0.05);而在FLT3-ITD初诊阳性患者(33例)中,化疗后持续阳性患者(5例)的完全缓解率显著低于化疗后阴性的患者(28例)(0.0％vs 50.0％,P<0.05).结论:AML初诊FLT3-ITD阳性患者化疗效果欠佳,化疗后FLT3-ITD持续阳性与AML难以缓解相关,提示连续监测FLT3-ITD突变有助于判断治疗效果、评估疾病预后.     

CD13表达及其与FLT3-ITD、NPM1突变在急性髓系白血病中的研究

目的:探讨72例急性髓系白血病(acute myelogenous leukemia,AML)患者CD13表达及其与FLT3-ITD、NPM1突变同步检测的临床意义,并分析FLT3-ITD、NPM1突变的关系及其与CD13表达水平的相关性。方法:收集72例AML患者病例资料,采用流式细胞仪检测72例AML患者CD13表达,PCR及Sanger测序法检测FLT3-ITD、NPM1突变。结果:72例AML患者中68例CD13表达阳性(68/72,94.44%),经诱导化疗,44例获得完全缓解(44/68,64.71%)。CD13~+与CD13-患者相比,χ~2=2.118,P=0.148,完全缓解率差异无统计学意义(P>0.05)。68例CD13~+的AML患者中,FLT3-ITD~+/NPM1~+双突变患者白细胞计数明显高于其余3组,差异均有统计学意义(P=0.000、P=0.010、P=0.000),而完全缓解率明显低于FLT3-ITD~-/NPM1~+与FLT3-ITD~-/NPM1~-组,差异有统计学意义(χ~2=8.400,P=0.000;χ~2=8.880,P=0.000)。FLT3-ITD~+/NPM1~-患者中位生存期仅为24个月,较FLT3-ITD~-/NPM1~+与FLT3-ITD~-/NPM1~-患者,生存期更短。FLT3-ITD~-/NPM1~+患者的平均年龄、白细胞计数及血红蛋白均高于FLT3-ITD~+/NPM1~-患者(P=0.030;P=0.000;P=0.040),白细胞计数及血红蛋白均高于FLT3-ITD~-/NPM1~-患者(P=0.020;P=0.00),完全缓解为85.71%,明显高于FLT3-ITD~+/NPM1~+和FLT3-ITD~+/NPM1~-患者(χ2=8.40,P=0.000;χ2=13.45,P=0.000),中位生存期为41个月(95%CI=34.4~47.6个月),较FLT3-ITD~+/NPM1~+和FLT3-ITD~+/NPM1~-患者生存期长,提示NPM1突变患者预后良好。结论:68例CD13~+患者中,FLT3-ITD~+/NPM1~+双突变患者具有高白细胞数和低CR率;FLT3-ITD~+/NPM1~-患者生存期短;FLT3-ITD~-/NPM1~+患者诱导缓解率高,FLT3-ITD~+/NPM1~-较低。对于AML患者,提示可以同时分析CD13表达及FLT3-ITD和NPM1突变的情况,为AML的相关治疗提供一个更好的思路。     

儿童急性髓系白血病基因突变特征分析

目的 探讨儿童急性髓系白血病(AML)的基因突变特征.方法 回顾性分析95例初治原发儿童AML的临床资料,通过二代基因测序(NGS)检测34种AML常见基因突变.结果 95例患者中,男52例,女43例,男女比例1.21:1,初诊年龄1～14岁.常见基因突变检出率由高到低依次为C-KIT(22.1％)、CEBPA(13....     

NPM1和FLT3基因突变的正常核型急性髓系白血病病人临床特征及预后分析

目的 了解正常核型急性髓系白血病(AML)病人核仁磷酸蛋白1(NPM1)、FMS样酪氨酸激酶3(FLT3)基因突变的发生频率,并探讨基因突变伴随的临床特征及对近期预后的影响。方法 收集94例初治的正常核型AML病人(M3除外),行NPM1、FLT3基因突变检测。结果 94例正常核型AML病人,NPM1基因突变阳性率为40.43%;FLT3内部串联重复突变(FLT3-ITD)阳性率为28.72%;NPM1并FLT3-ITD基因突变阳性率为14.89%;FLT3点突变(FLT3-TKD)阳性率为7.45%。与无突变组相比,NPM1+/FLT3-组发病年龄、外周血白细胞和血小板计数、骨髓原始细胞比例均较高,差异有显著性(t=2.048~2.072,P<0.05)。NPM1-/FLT3-ITD+组外周血白细胞计数和骨髓原始细胞比例均较无突变组高(t=2.549、2.784,P<0.05)。NPM1+/FLT3-组1疗程化疗诱导完全缓解率为87.50%,高于无突变组的63.89%(χ2=4.205,P<0.05);NPM1-/FLT3-ITD+组完全缓解率为53.85%,与无突变组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 NPM1、FLT3基因突变是正常核型AML病人中常见的分子学异常,此两种基因突变检测对AML病人的个体化治疗及预后评估有重要意义。     

成人急性髓性白血病中p16第二外显子的表位改变

目的 :探讨成人急性髓性白血病 (acutemyloidleucmia ,AML)中p16基因第二外显子的单核苷酸多态性及其在基因诊断中的作用。方法 :用酶切 PCR技术研究 3 1例成人急性髓性白血病及在 8例正常对照中p16第二外显子HapⅡ、SacⅡ和NruⅠ位点表位改变。结果 :在 3 1例成人AML样本及在 8例正常对照中 ,p16的E2 中HapⅡ、NruⅠ、SacⅡ位点都呈现出改变与不改变两种状态。结论 :p16的E2 中HapⅡ、NruⅠ、SacⅡ位点在正常个体与成人AML患者中均存在个体差异性 ,将成为成人AML再分型诊断的依据     

白三烯B4受体在急性髓系白血病中的预后价值和功能富集分析

目的 运用生物信息学分析白三烯B4受体（LTB4R）在急性髓系白血病（AML）患者中的表达模式、预后价值和潜在生物学功能。方法 从癌症基因组图谱（TCGA）数据库和美国国立生物技术信息中心（NCBI）公共基因芯片数据平台（GEO）下载mRNA基因芯片数据集和临床基线资料数据集,利用R studio进行表达分析、生存分析、Cox风险回归分析、相关性分析研究LTB4R的表达模式和预后价值。利用UALCAN 平台研究 LTB4R表达水平与临床特征的关联。利用linkedomics平台筛选出LTB4R共表达基因进行GO和KEGG信号通路富集分析。应用STRING平台构建蛋白质相互作用网络。基于LTB4R表达水平将LAML数据集分组并筛选差异表达基因,继而进行GSEA分析。收集临床30例AML患者及21例健康对照者外周静脉抗凝血2 mL,分离单个核细胞,采用qRT-PCR对LTB4R和免疫检查点基因表达水平、相关性进行验证;分离外周血500 μL血清,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测LTB4R蛋白表达水平。结果 LTB4R表达水平在AML患者骨髓样本中显著增强（4.898±1.220 vs 2.252±0.215,P<0.001）,与不良预后相关[P=0.004,风险指数（HR）=1.74],并可做为AML预后的独立风险因素（P=0.019,HR=1.66）。同时LTB4R与FAB分型、细胞遗传学风险、染色体异常、NPM1突变相关。 LTB4R 的共表达基因富集到多个肿瘤发生相关的信号途径,例如粒细胞炎症、淋巴细胞激活、免疫反应信号传导、能量代谢等。GSEA分析显示差异基因富集于免疫细胞分化、活化、细胞因子信号途径等。临床实验证实AML患者样本中LTB4RmRNA（P=0.044）及蛋白表达水平增高（P=0.008）,并且mRNA表达水平与HAVCR2呈正相关（r=0.466,P=0.040）。结论 LTB4R 可做为AML的新型标志物和独立预后指标,潜在功能富集于肿瘤免疫、代谢相关信号通路,可为AML 疾病进程相关信号通路和分子网络研究提供线索。     

伴3q异常的急性髓系白血病24例临床分析

目的:研究伴3q异常的急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)的临床及实验室特征. 方法:采用R带常规显带技术进行染色体检查,对657例AML患者的核型进行分析.结果:在657例AML患者中检出3q异常患者24例,检出率3.7%;在24例患者中,涉及3q21或3q26异常18例(75.0%),其中3q21q26异常11例(45.8%),包括9例 t(3;3)及2例inv(3);其余伴3q异常的6例患者,2例为t(1;3),t(2;3)、t(3;7)、t(3;11)及t(3;14)各1例.11例3q21q26异常的AML患者,其中3例从骨髓增生异常综合征转化而来,10例患者血小板正常或增高,骨髓形态学为巨核细胞异常增殖.而在其余7例伴3q21或3q26异常的患者中均未见有血小板增高及骨髓巨核细胞的增殖.24例涉及3q异常的AML患者化疗疗效差,仅4例患者获得短期缓解,中位生存仅6.7个月.结论:AML的3q异常以3q21q26最为常见,且涉及3q异常的AML患者,无论是3q21q26还是其他异常的患者治疗效果差,预后不良.     

急性髓细胞白血病细胞IL—2受体基因的研究

为研究髓细胞白血病（ＡＭＬ）细胞白介素－２受体（ＩＬ－２Ｒ）基因及ＩＬ－２在ＡＭＬ中的作用，用逆转录－聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）对４１例ＡＭＬ患者化疗前白血病细胞ＩＬ－２Ｒα ｍＲＮＡ和ＩＬ－２ＲβｍＲＮＡ进行检测，并对部分ＩＬ－２Ｒ基因阳性表达细胞用＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入法测定其对重组人ＩＬ－２（ｒＨＩＬ－２）的反应。结果显示，ＡＭＬ组织ＩＬ－２Ｒα和ＩＬ－２β基因表达是一普遍现象，４１例中白血病     

WWOX和p73基因在急性髓细胞白血病中的表达

目的研究WWOX(WW domain-containing oxidoreductase)和p73基因在急性髓细胞白血病(AML)中异常表达的临床意义及其机制。方法收集AML患者骨髓58例,非白血病患者骨髓31例作为对照组,采用RT-PCR检测WWOX和p73基因mRNA的表达情况、甲基化特异性PCR检测WWOX基因启动子区和p73基因第一外显子区的甲基化情况。结果 58例AML患者中,28例WWOX基因mRNA阳性表达,30例p73基因mRNA阳性表达;23例WWOX基因启动子区存在甲基化,21例p73基因第一外显子区存在甲基化。对照组中WWOX与p73基因mRNA均有表达29例,均未见甲基化现象。WWOX和p73基因在AML中mRNA的表达以及甲基化状态与对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 WWOX与p73基因的甲基化可能导致其基因的沉默,使其mRNA表达减少或缺失,在AML的发病机制中起一定作用,WWOX与p73基因甲基化的检测对AML的诊断和疗效有一定意义。     

The expression of WWOX and p73 in acute myeloid leukemia

目的 研究WWOX(WW domain-containing oxidoreductase)和p73基因在急性髓细胞白血病(AML)中异常表达的临床意义及其机制.方法 收集AML患者骨髓58例,非白血病患者骨髓31例作为对照组,采用RT-PCR检测WWOX和p73基因mRNA的表达情况、甲基化特异性PCR检测WWOX基因启动子区和p73基因第一外显子区的甲基化情况.结果 58例AML患者中,28例WWOX基因mRNA阳性表达,30例p73基因mRNA阳性表达;23例WWOX基因启动子区存在甲基化,21例p73基因第一外显子区存在甲基化.对照组中WWOX与p73基因mRNA均有表达29例,均未见甲基化现象.WWOX和p73基因在AML中mRNA的表达以及甲基化状态与对照组比较差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 WWOX与p73基因的甲基化可能导致其基因的沉默,使其mRNA表达减少或缺失,在AML的发病机制中起一定作用,WWOX与p73基因甲基化的检测对AML的诊断和疗效有一定意义.     

FBXO22在急性髓系白血病中的表达分析

目的检测急性髓系白血病（AML）病人骨髓细胞FBXO22基因表达水平,分析其与病人临床指征的相关性。方法收集AML病人92例,其中初发组41例,完全缓解（CR）组28例,部分缓解（PR）组23例,另选取肾性贫血、缺铁性贫血病人30例作为对照组。实时荧光定量PCR法测定并比较各组病人骨髓细胞中FBXO22 mRNA相对表达量。分析初发组病人FBXO22 mRNA相对表达量与病人性别、年龄、血常规参数、临床分型的相关性。结果各组病人FBXO22 mRNA表达水平间差异有统计学意义（P<0.01）,其中PR组和初发组均低于对照组和CR组（P<0.05）,而对照组和CR组、PR组和初发组间差异均无统计学意义（P>0.05）。初发组病人中,不同血小板计数病人的FBXO22 mRNA表达水平差异有统计学意义（P<0.05）。相关分析显示,初发组病人血小板计数与FBXO22 mRNA相对表达水平呈明显正相关关系（r=0.492,P<0.01）。结论AML病人骨髓细胞FBXO22表达降低,且与血小板计数呈正相关关系。