三七总皂苷对脑梗死大鼠神经细胞 Wnt/β-连环素信号通路的影响

目的探究三七总皂苷对脑梗死大鼠神经细胞 Wnt/β-连环素(β-catenin)信号通路的影响。方法该研究起止时间为 2018年1月至 2019年3月。 60只雄性 SD大鼠采用随机数字表法分为空白对照组、模型组、低剂量三七总皂苷组(75 mg/kg)和高剂量三七总皂苷组(150 mg/kg),各 15只。将模型组、低剂量三七总皂苷组和高剂量三七总皂苷组大鼠制成脑梗死模型;低剂量、高剂量三七总皂苷组均腹腔注射三七总皂苷,空白对照组和模型组注射等量生理盐水,每日 1次,注射 3d。使用改良神经功能缺损评分(mNSS)评价大鼠神经功能;使用 Z-Longa评分评价大鼠姿势反射情况;检测各组大鼠脑梗死面积及脑含水率;使用蛋白质印迹法检测 Wnt/ β-catenin信号通路蛋白及自噬相关蛋白表达情况。结果与空白对照组相比,模型组大鼠 mNSS评分、大鼠姿势反射评分、脑梗死率、脑含水率、微管相关蛋白轻链 3-Ⅱ(LC3-Ⅱ)蛋白表达水平升高(P<0.05)自噬蛋白 P62表达、 Wnt信号通路配体蛋白 Wnt3a蛋白表达(0.25±0.09比 1.68±0.25)和 β-catenin蛋白表达(0.40±0.10比 1.55±0.20),降低(P<0.05)。与模型组相比,低、高剂量三七总皂苷组大鼠 mNSS评分、大鼠姿势反射评分、脑梗死率、脑含水率降低, LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.05)P62蛋白、 Wnt3a蛋白(0.79±0.15,1.26±0.25比0.25±0.09)和β-catenin蛋白表达(1.23±0.25,0.90±0.15比0.40±0.10)升高(P<0.05)低剂量三七总皂苷组相比,高剂。与,量三七总皂苷组大鼠 mNSS评分、大鼠姿势反射评分、脑梗死率、脑含水率降低, LC3-Ⅱ蛋白表达降低(P<0.05)P62蛋白、 Wnt3a蛋白(1.26±0.25比 0.79±0.15)和 β-catenin蛋白表达( 1.23±0.25比 0.90±0.15)升高( P<0.05)。结论三七总皂可以,通过促进 Wnt/β-catenin信号通路蛋白表达激活 Wnt/β-catenin信号通路,发挥调节大鼠神经元细胞的自噬,改善脑梗死大鼠神经损伤的作用。     

养血清脑颗粒治疗血管性痴呆大鼠的实验研究

目的研究养血清脑颗粒对大鼠血管性痴呆的治疗机制。方法该研究起止时间为 2019年 2—6月。 24只 SD大鼠采用两血管阻断法制作血管性痴呆模型,以随机数字表法分为模型组和实验组,每组 12只,另取 12只未造模鼠设为对照组。实验组每日按 20 mL·kg?1·d?1的剂量分 2次用 6.4%的养血清脑颗粒混悬液灌胃治疗 3周,模型组和对照组灌等体积生理盐水对照。治疗结束后采用 Morris水迷宫分析系统分析大鼠学习和记忆能力,用 Zea Longa神经行为学评分评定治疗效果。然后处死大鼠,检测各组大鼠血清 S100B蛋白(S100B)及脑海马 CA1区 5-羟色胺含量、血管内皮生长因子(VEGF)胶质纤维酸性蛋白(GFAP)及 β-连环素( β-catenin)的表达。结果对照组逃避潜伏期为［(41.24±3.49)s］跨越平台次数为［(6.0、5±0.27)次］,Zea Longa评分为［( 0.04±0.00)分］,与对照组相比,模型组逃避潜伏期［( 86.95±6.34)s］明显延,长( P<0.05),跨越平台次数［( 2.92±     

PPAR-α的激活对心力衰竭早期心肌功能的机制研究

目的研究过氧化物酶体增殖物激活受体 -α(PPAR-α)的激活在心力衰竭早期中的作用,并揭示其作用机制。方法 2018年 1月至 2020年 1月,通过横向主动脉缩窄( TAC)手术构建心力衰竭模型,将 20只 C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为 TAC-DTG组、 TAC-tTA组、 Sham-DTG组、 Sham-tTA组,每组 5只。 TCA术后 5周用高效液相色谱法( HPLC)检测 ATP并计算磷酸肌酸 /ATP水平; TAC术后 8周用逆转录 -聚合酶链反应( RT-PCR)法检测 PPAR-α及其靶基因的 mRNA表达;用经胸超声心动图检测左心室舒张末期内径( LVDd)、舒张期 LV后壁( LVPWd)及射血分数( EF);检测心脏重量与体重和胫骨长度及肺部重量与胫骨长度的比值( HW/BW、HW/TL、LW/TL);用 Masson Trichrome染色检测心肌细胞横截面积、心肌纤维化程度; RT-PCR法检测脑钠肽( BNP)、 I型胶原 α1(Colla1)、 Ⅲ型胶原 α1(Col3a1)mRNA表达;用离体心脏灌流实验检测棕榈酸氧化速率、葡萄糖氧化速率。结果 TAC术后 5周, TAC-DTG组小鼠 ATP浓度［(13.33±0.83)nmol/mg比( 9.56±1.05)nmol/mg］和磷酸肌酸 /ATP水平［( 2.21±0.13)比( 1.66±0.09)］均明显高于 TAC-tTA组; TAC术后 8周, TAC组小鼠 PPAR-α［( 0.64±0.05)比( 1.00±0.04)］、 CPT1［(0.56±0.06)比( 1.00±0.06)］FATP1［(0.40±0.05)(1.00±0.07)］、 CD36［(0.76±0.15)(1.00±0.20)］mRNA表达水平均明显高于 Sham组小鼠; TAC组小鼠LV、Dd［(4.41±0.07)mm比比( 4.02±0.10)mm］、 LVPWd［( 0.87比±0.02)mm比( 0.74±0.01)mm］、 EF［( 37.22±1.90)%比( 64.91±2.34)%］较 Sham组小鼠明显减弱; TAC-DTG组小鼠 HB/BW［( 6.26±0.18)比( 7.21±0.29)］、 HW/TL［( 8.80±0.27)比( 10.56±0.54)］、 LW/TL［( 13.67±0.76)( 16.97±1.25)］较 TAC-tTA组小鼠明显减弱; TAC-DTG组小鼠心肌细胞横截面积［( 694.64±23.31)μm3比( 766.90±20.98)μm3］、心肌纤维化程度［( 4.25±0.99)%比( 8.24±1.08)%］较 TAC-tTA组小鼠明显减小; TAC-DTG组小鼠 BNP［( 5.29±1.02)比( 9.33±1.42)］、 Col1a1［( 2.76±0.19)比( 4.40±0.33)］、 Col3a1［( 3.08±0.21)比(7.80±2.05)］ mRNA表达水平较 TAC-tTA组小鼠明显降低; TAC-DTG组小鼠棕榈酸氧化速率［( 0.52±0.06)μmol/g比( 0.28±0.03)μmol/g］较 TAC-tTA组小鼠明显加快,而葡萄糖氧化速率［(237.31±8.96)nmol/g比( 267.16±14.93)nmol/g］较 TAC-tTA组小鼠明显减慢。结论心力衰竭早期激活 PPAR-α可通过调节脂肪酸氧化( fatty acid oxidation,FAO)维持其心肌功能和能量,并减轻心肌重塑,提示在心衰早期激活 PPAR-α可作为其早期治疗的有效策略。     

黄芪通过微小 RNA-133a抑制 Janus激酶 /信号转导和转录激活因子信号通路抑制膀胱癌的迁移和侵袭

目的探讨黄芪对膀胱癌细胞迁移和侵袭的影响及分子机制。方法 2019年 8月至 2020年 2月,从美国模式培养物研究所( ATCC)购入膀胱癌 T24细胞,体外培养并分为对照( NC)组、黄芪组、 miR-133a模拟物( mimic)阴性对照( miR-NC)组、 miR-133a mimic(miR-133a)组、 miR-133a抑制剂( inhibitor)阴性对照( anti-miR-NC)组、 miR-133a inhibitor(anti-miR-133a)组、芪+anti-miR-NC组、黄芪 +anti-miR-133a组、黄芪 +anti-miR-133a+AG490组。蛋白质印迹法( western blotting)检测基质金属蛋白黄酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶 -9(MMP-9)磷酸化 Janus激酶 1(p-JAK1)、磷酸化信号转导和转录激活因子 6(p-STAT6)蛋白表达; Transwell检测细胞迁移和侵袭;实时荧光、定量 PCR(RT-qPCR)检测 miR-133a表达水平。结果与对照组相比,黄芪组 MMP-2、MMP-9蛋白表达水平降低,细胞迁移［(81.42±8.05)比( 175.43±16.02)］和侵袭［(71.23±8.01)比( 142.55±14.03)］数量降低, miR-133a表达水平［( 2.36±0.21)比( 1.00±0.11)］升高, p-JAK1［( 0.12±0.01)比( 0.55±0.04)］、 p-STAT6［( 0.08±0.01)比( 0.38±     

微RNA-27a介导3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制

目的研究微 RNA?27a(miR?27a)介导 3T3?L1脂肪细胞胰岛素抵抗的作用机制。方法将 3T3?L1细胞诱导分化为脂肪细胞,采用肿瘤坏死因子 ?α(TNF?α)法建立 3T3?L1脂肪细胞的胰岛素抵抗模型,检测 miR?27a对 3T3?L1细胞葡萄糖摄取的影响,蛋白质印迹法(Western Blot)检测 miR?27a对胰岛素信号通路的影响。实时荧光定量多聚核苷酸链式反应(qPCR)及双荧光素酶报告基因检测法检测 miR?27a的作用靶点。结果 miR?27a介导了 3T3?L1脂肪细胞的胰岛素抵抗［正常对照组,模型组, miR?27a mimics+模型组, miR?27a inhibitor+模型组四组的吸光度值分别为(2.03±0.20)(1.28±0.27)(1.43±0.20)(1.97± 0.18)P＜0.01］的磷酸qPCR?27a抑过氧化物酶体增殖物激活受体 γ(PPARγ)的表达［对照组和 mir?27a组的相对值分别为(1.00±0.08)和(0.59± 蛋白质印迹法显示miR?27a抑制了胰岛素信号通路中胰岛素受体底物1(IR,S1)及Akt蛋白,化。,显示miR,制了,0.14)P＝0.0048］,双荧光素酶报告基因检测验证了 PPARγ为miR?27a的作用靶点［PPARγ WT+miR?NC,PPARγ WT+miR?27a, Mut+miR?NC,PPARγ Mut+miR?27a四组的相对荧光值分别为(5.37±0.80)、(3.17±0.57)、(4.94±0.63)、(4.68±0.74),P＜PPARγ,0.01］。结论 miR?27a通过抑制胰岛素信号通路及靶向 PPARγ介导 3T3?L1细胞胰岛素抵抗。     

七氟烷对 β淀粉样蛋白 1-40诱导的大鼠认知功能障碍影响及机制

目的探讨七氟烷吸入对 β淀粉样蛋白( Aβ)1-40诱发的大鼠认知功能障碍影响及其可能的机制。方法于 2021年 8月至 2022年 8月,将 32只成年雄性 Sprague-Dawley大鼠以随机数字表法分为生理盐水( NS)+氧气组、 NS+七氟烷组、 Aβ+氧气组和 Aβ+七氟烷组,每组 8只,分别给予双侧海马内注射 NS或 Aβ1-40。吸入 30%氧气或 2.5%七氟烷过程中监测生命体征,采用 Morris水迷宫实验检测大鼠认知功能;酶联免疫吸附测定检测海马 Aβ1-40水平;免疫组织化学法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和离子钙接头蛋白分子 1(IBA1)的表达;实时荧光定量逆转录聚合酶链反应检测白细胞介素 -1β(IL-1β)、核因子 -κB(NF-κB)、诱导型一氧化氮合酶( iNOS)的 mRNA表达;蛋白质印迹法检测 B淋巴细胞瘤 -xL(Bcl-xL)、胱天蛋白酶 -9(caspase-9)、脑源性神经营养因子( BDNF)和晚期糖基化终末产物受体( RAGE)的蛋白表达。结果维持吸入 2.5%七氟烷在 4个不同时间点( 1、2、3和 4h)对大鼠生命体征无影响。与 NS+氧气组比较, Aβ+氧气组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加;与 Aβ+氧气组相比, Aβ+七氟烷组大鼠原始平台探索时间减少,逃逸潜伏期增加( P<0.05)。 Aβ+七氟烷组大鼠海马区 Aβ1-40水平［( 42.18±5.72)ng/L］,GFAP和 IBA1阳性细胞数［( 24.33±1.21)个和( 37.82±3.23)个］,caspase-9和 RAGE蛋白表达( 0.74±0.11和 0.81±0.07)IL-1β、NF-κB和 iNOS mRNA表达( 28.98±12.32、25.91±12.31和 43.92±17.21)均高于 NS+七氟烷组［(18.13±2.89)ng/ L、(10.51±06)个、(17.17±1.77)个、 0.23±0.02、0.29±0.03、1.35±0.04、1.37±0.05、1.42±0.06］和 Aβ+氧气组［( 32.61±4.82)ng/L、.9(15.76±1.25)个、(24.76±2.31)个、 0.45±0.08、0.68±0.08、10.23±6.56、6.51±2.34、13.23±4.81］; Bcl-xL和 BDNF蛋白表达(0.13±0.04和 0.18±0.04)低于 NS+七氟烷组( 1.07±0.31和 0.58±0.07)和 Aβ+氧气组( 0.46±0.11和 0.33±0.04)(P<0.05)。而 NS+氧气组和 NS+七氟烷组之间各指标差异无统计学意义( P>0.05)。结论七氟烷通过启动大鼠海马的神经毒性、神经炎症和神经元凋亡,加剧了 Aβ1-40诱发的大鼠认知功能障碍。     

微小染色体缺陷维持蛋白3对黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响北大核心CSCD

目的探究微小染色体缺陷维持蛋白3(MCm3)通过Wnt/β-catenin信号通路对黑色素瘤细胞迁移和侵袭的影响。方法将人恶性黑色素瘤细胞A375分为对照组(空白对照),si-NC组(转染si-NC组)、si-MCm3组(转染si-MCm3组)。以噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞活力,以划痕实验和Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭能力,以蛋白质印迹(Western blot)法检测Wnt3a蛋白(Wnt3a)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达水平。结果对照组、si-NC组和si-MCm3组72 h的细胞存活率分别为(249.31±18.66)%,(253.26±12.63)%,(168.71±16.01)%,侵袭细胞数分别为(375.55±11.83),(366.94±20.04),(148.53±11.75)个,划痕愈合率分别为(53.64±5.71)%,(51.37±4.33)%和(22.37±2.07)%,si-MCm3组与对照组和si-NC组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。与对照组和si-NC相比,si-MCm3组细胞Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1均显著降低(均P<0.01)。结论敲低MCm3可抑制黑色素瘤细胞的迁移和侵袭,其机制可能与Wnt/β-catenin信号通路相关.     

微小 RNA?204?3p通过靶向调控 Krüppel样因子 6对高糖诱导小鼠足细胞损伤的保护作用

目的探讨微小 RNA?204?3p(miR?204?3p)对高糖诱导小鼠足细胞 MPC5损伤的保护作用及其分子机制。方法采用高糖(30 mmol/L D?葡萄糖)处理 MPC5细胞。实时定量 PCR(qPCR)检测细胞中 miR?204?3p与锌指蛋白 Krüppel样因子 6(KLF6) mRNA水平。 MPC5细胞分为 NG组(正常对照)HG组(高糖刺激)HG+miR?204?3p组、 HG+miR?NC组、 HG+si?KLF6组、 HG+si? NC组, HG+miR?204?3p+pcDNA?KLF6组和HG+m,iR?204?3p+pcDNA组,。蛋白质印迹法(Western Blot)检测肌动蛋白微丝偶联蛋白(synaptopodin)、结蛋白(desmin)、 B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白(Bax)与活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(cleaved?caspase?3)蛋白表达,流式细胞仪检测细胞凋亡,生物学信息预测和双荧光素酶报告基因分析 miR?204? 3p和 KLF6的靶向关系。结果与正常对照相比,高糖可显著降低 MPC5细胞中 miR?204?3p表达量［(0.41±0.04)比(1.02± 0.08)］上调 KLF6 mRNA［(2.86±0.27)比(1.03±0.08)］和蛋白［(0.89±0.08)比(0.46±0.04)］水平,还可上调 KLF6、desmin［(0.81± 0.07)比(,0.34±0.03)］、 Bax、cleaved?caspase?3蛋白表达及细胞凋亡率［(22.46±2.08)%比(5.26±0.64)%］下调 synaptopodin蛋白［(0.34±0.03)比(0.76±0.07)］及 Bcl?2蛋白表达量(P＜0.05)。与 HG+miR?NC组比较, HG+miR?204?3p组明,显提高 synaptopodin［(0.67±0.06)比(0.32±0.03)］及 Bcl?2蛋白水平,降低 desmin［(0.41±0.04)比(0.83±0.08)］、 Bax、cleaved?caspase?3蛋白水平及细胞凋亡率［(11.25±1.65)%比(24.58±2.47)%］(P＜0.05)。与 HG+si?NC组比较, HG+si?KLF6组明显提高 synaptopodin［(0.62±0.06)比(0.28±0.03)］及 Bcl?2蛋白水平,降低 desmin［(0.49±0.05)比(0.86±0.08)］、 Bax蛋白水平及细胞凋亡率［(14.69±1.87)%比(25.47±2.68)%］(P＜0.05)。 miR?204?3p直接靶向 KLF6。与 HG+miR?204?3p+pcDNA组比较, HG+miR?204?3p+pcDNA?KLF6组显著增加高糖刺激小鼠肾脏足 MPC5细胞中 KLF6、desmin［(0.68±0.06)比(0.36±0.04)］、 Bax蛋白表达量和细胞凋亡率［(18.41±1.67)%比(11.05±1.02)%］,显著减少 synaptopodin蛋白［(0.38±0.03)比(0.69±0.07)］和 Bcl?2蛋白表达量(P＜0.05)。结论 miR?204?3p通过直接靶向 KLF6抑制高糖刺激的足细胞凋亡,保护细胞损伤。     

罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制

目的探讨罗哌卡因对骨肉瘤细胞增殖和凋亡的影响及作用机制。方法体外培养骨肉瘤细胞 MG63,分为对照组、低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组、 anti?miR?NC组、 anti?miR?199b?5p组、中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组和中剂量罗哌卡因 +miR?NC组。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT法)检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,白质印迹法(Western Blot)检测细胞中细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)、 P21、B细胞淋巴瘤 /白血病 ?2(Bcl?2)、 Bcl?2相关 X蛋白蛋(Bax)表达水平,实时荧光定量逆转录 PCR(RT?qPCR)检测细胞中 miR?199b?5p表达水平。结果与对照组比较,低剂量罗哌卡因组、中剂量罗哌卡因组、高剂量罗哌卡因组 MG63细胞增殖能力［(0.88±0.08)、(0.49±0.05)、(0.34±0.03)比(0.92±0.09)］、 Cyclin D1蛋白［(0.85±0.08)、(0.66±0.06)、(0.41±0.04)比(0.95±0.09)］表达降低(P＜0.05),而 P21［(0.18±0.02)、(0.37±0.04)、(0.71±0.07)比(0.14±0.01)］蛋白表达升高(P＜0.05)中剂量罗哌卡因组 Bcl?2蛋白［(0.20±0.02)比(0.76±0.07)］及 miR?199b?5p［(0.13±0.01)比(0.82±0.08)］的表达降低(P＜0.05),而,MG63细胞凋亡率［(23.51±2.42)%比(7.66±0.75)%］和 Bax蛋白［(0.89±0.09)比(0.28±0.03)］表达升高(P＜0.05)。与 anti?miR?NC组比较, anti?miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.64±0.06)比(0.98±0.09)］及 Cyclin D1蛋白［(0.40±0.04)比(0.95±0.09)］和 Bcl?2蛋白［(0.36±0.03)比(0.76±0.07)］的表达降低(P＜0.05),而 MG63细胞凋亡率［(19.56±1.58)%比(7.66±0.75)%］及 P21［(0.53±0.05)比(0.14±0.01)］和 Bax［(0.71±0.07)比(0.28±0.03)］的蛋白表达升高(P＜0.05)。与中剂量罗哌卡因 +miR?NC组比较,中剂量罗哌卡因 +miR?199b?5p组 MG63细胞增殖能力［(0.58±0.06)比(0.36±0.03)］及 Cyclin D1蛋白［(0.71±0.07)比(0.40±0.04)］和 Bcl?2蛋白［(0.53±0.05)比(0.21±0.02)］的表达升高(P＜0.05),而 MG63细胞凋亡率［(12.68±1.23)%比(23.35±2.34)%］及 P21［(0.37±0.03)比(0.72±0.07)］和 Bax［(0.57±0.06)比(0.88±0.09)］的蛋白表达降低(P＜0.05)。结论罗哌卡因可能通过下调 miR?199b?5p降低了骨肉瘤细胞的增殖,并促进了其凋亡。     

选择性上调 pSmad 3C/3L基因对人肝星状细胞增殖及 α平滑肌肌动蛋白、纤维酶原激活物抑制剂?1和Ⅰ型胶原蛋白表达的影响

目的观察选择性上调 pSmad 3C/3L基因对人肝星状细胞(LX?2)增殖及 α平滑肌肌动蛋白(α?SMA)、纤维酶原激活物抑制剂 ?1(PAI?1)和 Ⅰ型胶原蛋白(Collagen?Ⅰ)表达的影响。以进一步探究 pSmad 3C/3L在肝纤维化进展中的作用机制。方法采用脂质体转染的技术(FuGENE? HD)向 LX?2细胞转染野生型 Smad3基因(Smad3 WT)、 Smad3连接区磷酸化位点突变的基因(Smad3 EPSM)及 Smad3 C末端磷酸化位点突变的基因(Smad3 3S?A)3种质粒,选择性上调 LX?2细胞中 pSmad 3C/3L的表达水平,以蛋白质印迹法(Western Blot)验证转染效率并检测 LX?2细胞中 α?SMA、PAI?1和 Collagen?Ⅰ的蛋白表达水平。 MTT法检测选择性上调 pSmad 3C/3L对 LX?2细胞增殖能力的影响。结果转化生长因子 ?β1与 LX?2对照组相(TGF?β1)刺激 1h后,比,转染 3种质粒组 Smad3蛋白表达水平均升高［(0.48±0.02)(0.57±0.03)(0.60±0.02),(0.59±0.03); P＜0.05］;与 Smad3 WT组相比,转染 Smad3 EPSM质粒组 pSmad3C蛋白表达水平明显,升高［(0.33±0,.02)比(0.44±0.01)P＜0.05］,转染 Smad3 3S? A质粒组 pSmad3L蛋白表达水平明显升高［(0.36±0.01)比(0.42±0.02),P＜0.05］。 MTT结果显示,转染,Smad3 EPSM质粒可抑制 LX?2细胞增殖,而转染 Smad3 3S?A质粒可促进 LX?2细胞的增殖［吸光度值(0.48±0.03)比(0.93±0.05)P＜0.05］。 TGF?β1刺激 12 h后, α?SMA、PAI?1和 Collagen?Ⅰ在 3种质粒转染组中呈现出差异表达(P＜0.05)。结论转染 3种质,粒成功地选择性上调了 LX?2细胞中 pSmad 3C/3L的表达,选择性高表达 pSmad3L可进一步促进 TGF?β1诱导的细胞增殖反应、促进 α?SMA、PAI?1和 Collagen?Ⅰ的表达,选择性高表达 pSmad3C可抑制细胞增殖反应、降低 α?SMA、PAI?1和 Collagen?Ⅰ的表达;提示 TGF?β1诱导的 Smad3不同位点磷酸化在 LX?2细胞增殖和 α?SMA,PAI?1,Collagen?Ⅰ蛋白表达的调控中发挥重要作用,为肝纤维化的逆转提供了新思路。     

长链非编码 RNA LINC00662靶向微小 RNA-103a-3p对黑色素瘤细胞增殖和周期的影响

目的探究长链非编码 RNA LINC00662对黑色素瘤细胞增殖和周期的影响,以及分子机制。方法本研究于 2018年 10月至 2020年 2月进行。以体外培养的人皮肤黑色素瘤细胞 A375为研究对象,然后将其分为四组,分别为 si-NC、si-LINC00662、si-LINC00662+anti-miR-NC和 si-LINC00662+anti-miR-103a-3p转染 A375细胞。采用 RT-PCR检测皮肤黑色素瘤组织中 LINC00662和 miR-103a-3p的表达水平, CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白质印迹法( western blot. ting)检测细胞周期蛋白 1(CyclinD1)、增殖细胞核抗原( PCNA)的蛋白表达。结果与正常组织和正常皮肤细胞相比,在皮肤黑色素瘤组织和细胞株中 LINC00662表达［ 1.24±0.50比 4.17±1.27］上调, miR-103a-3p表达［ 1.17±0.32比 0.64±0.21］显著下调。 LINC00662与 miR-103a-3p靶向结合。与 si-NC组相比, si-LINC00662组 LINC00662表达［ 1.00±0.06比 0.48±0.06］、 OD值和 S期细胞比例［( 34.7±3.5)%比( 20.5±3.0)%］降低, G0/G1期细胞比例［( 57.4±5.2)%比( 74.7±4.8)%］增高, Cyclin D1［1.00±0.01比     

侧脑室注射鼠神经生长因子对阿尔茨海默病转基因模型小鼠学习能力及行为学的影响

目的 探讨鼠神经生长因子(mNGF)侧脑室注射影响阿尔茨海默病(AD)转基因模型小鼠学习记忆能力及行为学的可能机制。方法 将20只老年痴呆转基因小鼠(C57BL/6J)采用随机数字表法分为AD转基因模型组(AD组)和实验组,每组10只小鼠,另取老年正常C57BL/6J小鼠10只设为老年组。AD组和实验组分3次(间隔10 d)侧脑室注射mNGF,老年组注射等量0.9％氯化钠注射液。用Morris水迷宫视频跟踪分析系统进行空间探索实验;采用全细胞膜片钳记录海马CA1区诱发的群峰电位(PS)和自发性动作电位(AP);采用免疫组化法检测小鼠海马CA1区脑源性神经营养因子(BDNF)和神经生长因子(NGF)表达水平;实时定量聚合酶链式反应检测海马CA1区中BDNF mRNA和NGF mRNA水平。结果 治疗第40天,实验组小鼠脑薄片海马回CA1区BDNF[(100.51±2.27) ng/mL]和NGF[(159.85±1.23) ng/mL]蛋白阳性表达及BDNF mRNA[(72.02±0.98) β-actin]、NGF mRNA[(67.08±1.16) β-actin]明显升高,PS[(63.02±1.25) mV]和AP[(58.57±0.93) mV]膜电位降低,三组间的治疗前和第40天比较均差异有统计学意义(均P<0.05)。实验组小鼠跨越平台次数(4.29±0.64)明显高于AD组和治疗前同组[(2.85±0.12),(2.68±0.24)](F=49.815,232.391,P<0.05),实验组逃避潜伏期[(21.73±0.54)s]较AD组[(68.59±2.01)s]明显缩短,与AD组和治疗前同组比差异有统计学意义(F=2 910.165,3 137.281,P<0.05)。老年组运动轨迹主要在原平台位置,AD组则主要分散在外周,而实验组运动轨迹在两者之间。结论 鼠神经生长因子能促进AD转基因模型小鼠学习记忆能力,其作用机制可能与mNGF稳定海马CA1区膜电位,上调BDNF和NGF蛋白及其基因表达以营养和修复神经有关。     

多奈哌齐联合丁苯酞对多发性脑梗死性痴呆的预后及血清中血管内皮生长因子、血管内皮生长因子受体水平的影响

目的探究多奈哌齐联合丁苯酞对多发性脑梗死性痴呆的预后及血清中血管内皮生长因子( VEGF)、血管内皮生长因子受体( VEGFR)水平的影响。方法选取 2018年 1月至 2019年 3月于江汉大学附属武汉市第六医院接受治疗的多发性脑梗死性痴呆病人 102例,采用随机数字表法分为观察组与对照组,每组 51例,两组病人均参照脑血管病二级预防接受常规治疗,观察组在常规治疗的基础上采用多奈哌齐联合丁苯酞治疗,对照组在常规治疗基础上采用丁苯酞治疗,比较两组治疗前后的精神状态( MMSE)评分、临床痴呆程度( CDR)评分、血清 VEGF、VEGFR水平、 Fugl?Meyer评分的上肢、下肢得分、日常生活能力(ADL)评分变化及不良反应发生情况。结果与治疗前相比,治疗后对照组与观察组 MMSE评分［(9.83±2.44)比( 14.72±2.31)分,(10.06±2.47)比( 18.87±2.22)分］、血清 VEGF［(438.36±41.85)比( 473.49±43.63)分,(443.17±43.53)比( 537.35±41.78)分］、 VEGFR［(403.14±40.63)比( 476.68±39.62)分,(406.37±41.25)比( 503.32±37.43)分］、 Fugl?Meyer评分的上肢、下肢得分均升高, CDR评分［( 2.01±0.77)比( 1.34±0.61)分,(1.98±0.76)比( 1.09±0.53)分］、 ADL评分［( 43.67±6.45)比( 41.11±6.03)分,(44.03± 6.37)比( 38.03±6.01)分］均降低,差异有统计学意义( P＜0.05);与对照组相比,治疗后观察组病人的 MMSE评分、血清 VEGF、 VEGFR、Fugl?Meyer评分的上肢、下肢得分升高, CDR评分、 ADL评分降低( P＜0.05);观察组不良反应发生率为 7.84%(4/51),对照组为 5.88%(3/51),两组病人不良反应发生率比较差异无统计学意义( P＞0.05)。结论采用多奈哌齐联合丁苯酞治疗多发性脑梗死性痴呆,可升高病人血清中 VEGF、VEGFR水平,改善病人预后,提高病人生活质量。     

草酸艾司西酞普兰联合左甲状腺素钠治疗亚临床甲状腺功能减退伴焦虑抑郁 30例

目的观察草酸艾司西酞普兰联合左甲状腺素钠治疗亚临床甲状腺功能减退伴焦虑抑郁的效果。方法选取 2015年 1月至 2018年 7月东海县人民医院亚临床甲状腺功能减退伴焦虑抑郁病人 90例,采用随机数字表法分为西酞普兰组、左甲状腺素钠组和联合组,每组 30例。分别予以草酸艾司西酞普兰、左甲状腺素钠和草酸艾司西酞普兰 +左甲状腺素钠联合治疗。 8周后,观察三组治疗前后游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)水平和汉密尔顿焦虑量表(HAMA)及汉密尔顿抑郁量表(HAMD)评分的变化。结果治疗后与治疗前相比,西酞普兰组 TSH［(7.70±1.09)μIU/mL比(7.77±1.03)μIU/mL］、 FT3［(4.28±0.73)pmol/L比(4.30±0.58)pmol/L］、 FT4［(9.72±1.03)pmol/L比(9.98±1.09)pmol/L］无变化(P＞0.05)TSH左甲状腺素钠组［(4.39±0.76)μIU/mL比(7.69±1.01)μIU/mL］和联合组［(4.30±0.51)μIU/mL比(7.78±0.98)μIU/ mL］下降,F,T3左甲状腺素钠组［(5.85±0.81)pmol/L比(4.34±0.67)pmol/L］和联合组［(5.63±0.54)pmol/L比(4.27±0.63)pmol/L］升高、 FT4左甲状腺素钠组［(13.22±1.56)pmol/L比(10.22±1.30)pmol/L］和联合组［(12.69±1.31)pmol/L比(9.89±1.12)pmol/L］升高(P＜0.05)。治疗后 HAMA和 HAMD评分与治疗前相比,西酞普兰组［(12.60±1.35)分比(21.90±2.56)分］、［(12.57±1.61)分比(22.16±1.72)分］左甲状腺素钠组［(14.50±1.54)分比(21.30±2.39)分］、［(13.90±2.64)分比(22.93±1.85)分］和联合组［(8.36±1.73)分比(20.4,3±3.08)分］、［(8.26±1.63)分比(21.96±1.62)分］下降(P＜0.05)。与西酞普兰组、左甲状腺素钠组相比,联合组 HAMA和 HAMD评分下降(P＜0.05)。结论草酸艾司西酞普兰或左甲状腺素钠均可以缓解亚临床甲状腺功能减退伴焦虑抑郁病人的焦虑抑郁症状,联合用药疗效优于单药治疗。     

柴胡皂苷 A通过抑制内质网应激信号通路减轻乌头碱中毒大鼠脑组织细胞凋亡的机制分析

目的探讨柴胡皂苷 A对乌头碱中毒大鼠脑组织细胞凋亡、内质网应激信号通路的影响。方法自 2018年 10月至2019年 7月,选取购自武汉大学中南医院动物实验中心 SPF级健康雄性 SD大鼠 100只,随机数字表法分为对照组、模型组、干预组 1、干预组 2、干预组 3,每组各 20只。采取乌头碱( 20 μg/kg)尾静脉注射制备乌头碱中毒大鼠模型,干预组 1、干预组 2、干预组 3分别注射不同剂量的胡皂苷 A(5 mg·kg.1 ·d.1、10 mg·kg.1 ·d.1、20 mg·kg.1 ·d.1),模型组与对照组注射等剂量的生理盐水。观察各组大鼠干预后 12 h、24 h脑组织的凋亡情况以及内质网应激信号通路相关蛋白水平变化。结果干预 12 h、24 h后,型组超氧化物歧化酶( SOD)活性低于对照组,丙二醛( MDA)、肿瘤坏死因子 -α(TNF-α)、白细胞介素 -6(IL-6)水平高于对照组,模模型组 B细胞淋巴瘤 -2(Bcl-2)蛋白表达［( 0.29±0.05)、(0.18±0.0)］低于对照组［( 0.84±0.07)、(0.86±0.06)］模型组凋亡率［(34.24±2.11)%、(54.65±4.68)%］、 Bcl相关 X蛋白( Bax)蛋白表达［(1.25±0.06)、(1.39±0.05)］、 CCAAT/增强子结合,蛋白同源蛋白( CHOP)蛋白表达［(0.98±0.08)、(1.26±0.06)］、葡萄糖调节蛋白 78(GRP78)蛋白表达［(1.45±0.08)、(1.62±0.07)］高于对照组［凋亡率( 2.33±1.03)%、(2.42±1.15)%,Bax蛋白表达( 0.33±0.06)、(0.35±0.07), CHOP蛋白表达( 0.54±0.06)、(0.53±0.05), GRP78蛋白表达( 0.68±0.06)、(0.69±0.06)］差异有统计学意义( P<0.05)。干预 12 h、24 h后,干预组 1、干预组 2、干预组 3的 SOD活性、 Bcl-2蛋白表达高于模型组, MDA、T,NF-α、IL-6含量、凋亡率和 Bax、CHOP、GRP78蛋白表达低于模型组(P<0.05)。结论柴胡皂苷 A可以降低乌头碱中毒大鼠脑组织凋亡及脑组织氧化应激反应,可能与抑制内质网应激信号通路有关。     

微小RNA-150 靶向c-Myb 表达对T 淋巴细胞白血病Jurkat细胞增殖的影响

目的探讨微小RNA-150(miR-150)靶向c-Myb表达对人T淋巴细胞白血病(T-LL)Jurkat细胞增殖的影响。方法体外培养人Jurkat细胞,分为空白对照组(不转染)、阴性对照组(转染negative control-miR-150)和miR-150过表达组(转染hsamiR-150 mimic)。实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测Jurkat细胞中miR-150 及c-Myb 表达;人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)法检测Jurkat细胞增殖;流式细胞仪检测各组Jurkat细胞凋亡情况;双荧光素酶报告基因实验检测miR-150和c-Myb的靶向关系;蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Jurkat细胞中c-Myb、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果空白对照组与阴性对照组Jurkat细胞中miR-150表达水平、c-Myb mRNA及蛋白表达水平、OD值、细胞凋亡率、及PCNA、Bax蛋白水平差异无统计学意义(P>0.05);与空白对照组相比,miR-150过表达组Jurkat细胞中miR-150表达水平［(1.42±0.14)比(1.03±0.09)］、凋亡率［(20.79±1.15)%比(8.76±0.74)%］、Bax蛋白表达水平［(0.65±0.18)比(0.42±0.13)］显著升高(P<0.05),c-Myb mRNA［(0.66±0.14)比(0.98±0.09)］及蛋白表达水平［(0.37±0.06)比(0.64±0.12)］、OD值［(0.25±0.06)比(0.46±0.09)］、PCNA蛋白表达水平［(0.33±0.07)比(0.56±0.11)］显著降低(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,c-Myb是miR-150的靶基因。结论miR-150靶向c-Myb表达抑制Jurkat细胞增殖并诱导其凋亡。     

微小RNA-146a 靶向调控Krüppel 样转录因子7对强直性脊柱炎T 细胞炎症反应及自噬的影响

目的探讨微小RNA-146a(miR-146a)是否通过靶向调控Krüppel样转录因子7(KLF7)的表达而影响强直性脊柱炎病人T细胞炎症反应及自噬。方法采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测强直性脊柱炎病人T细胞与健康人T细胞中miR-146a的表达量;分别将anti-miR-NC、anti-miR-146a、pcDNA3.1、pcDNA3.1-KLF7转染至强直性脊柱炎病人T细胞;采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-17(IL-17)、白细胞介素-23(IL-23)的水平;双荧光素酶报告实验验证miR-146a与KLF7的靶向结合关系;蛋白质印迹法(Western blotting)检测KLF7、自噬相关基因5(ATG5)、Beclin-1的表达量。结果与健康人T细胞比较,强直性脊柱炎病人T细胞中miR-146a的表达量升高［(1.00±0.08)比(2.74±0.13),t=53.54,P<0.05］;与anti-miR-NC组比较,anti-miR-146a组IL-6［(823.17±14.10)ng/L比(372.31±11.03)ng/L］、IL-17［(901.00±16.29)ng/L比(428.39±12.34)ng/L、IL-23［(886.38±15.11)ng/L 比(401.61±11.75)ng/L］的水平降低(t=43.62,40.06,43.87,P<0.05),ATG5［(0.33±0.03)比(0.79±0.07)］、Beclin-1［(0.42±0.04)比(0.91±0.08)］蛋白水平升高(t=10.46,9.49,P<0.05);双荧光素酶报告实验证实miR-146a可靶向结合KLF7;转染pcDNA3.1-KLF7可明显降低IL-6［(823.17±14.10)ng/L比(477.37±12.01)ng/L］、IL-17［(901.00±16.29)ng/L比(558.67±13.16)ng/L］、IL-23［(886.38±15.11)ng/L比(531.69±12.75)ng/L］的水平(t=32.34,28.31,31.07,P<0.05),提高ATG5［(0.32±0.03)比(0.60±0.06)］、Beclin-1［(0.44±0.04)比(0.78±0.07)］的表达水平(t=7.23,7.30,P=0.002)。结论抑制miR-146a表达可通过靶向KLF7而抑制强直性脊柱炎病人T细胞炎症反应及促进细胞自噬。     

肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨肿瘤蛋白翻译控制 1的反义 RNA 1(TPT1-AS1)在肺癌中的表达及其对肺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响和作用机制。方法收集于 2017年1月至 2018年12月在信阳市中心医院心胸外科行手术治疗的 46例肺癌组织和对应的癌旁组织,实时荧光定量 PCR(RT-qPCR)检测组织中 TPT1-AS1和微小 RNA-671-5p(miR-671-5p)表达, Pearson相关性分析肺癌组织中 TPT1-AS1和miR671-5p表达的相关性。同时,于2019年5月至 2020年4月期间,通过体外培养肺癌细胞 A549,双荧光素酶报告基因实验验证了细胞中 TPT1-AS1和 miR-671-5p调控关系。另将 A549细胞分为对照组、小干扰 RNA阴性序列(si-NC)组、 TPT1-AS1小干扰 RNA(si-TPT1AS1)组、 si-TPT1-AS1+抑制剂阴性序列(anti-miR-NC)组和 si-TPT1-AS1+miR-671-5p抑制剂(anti-miR-671-5p)组,甲基噻唑蓝染色法(MTT)检测细胞增殖, Transwell检测细胞迁移和侵袭,蛋白质印迹实验检测细胞周期蛋白 D1(CyclinD1)基质金属蛋白酶(MMP)-2和 MMP-9蛋白表达。结果肺癌组织中 TPT1-AS1表达量较癌旁组织显著升高［(1.88±0.12)(1.01±0.08)、P<0.05］,miR-671-5p表达量较癌旁组织显著降低［(0.45±0.04)(1.01±0.06)P<0.05］。Pearson相关性分析显示,肺癌组比织中TPT1-A,S1和 miR-671-5p呈负相(r= 0.63,P<0.05)。TPT1-AS1在A5比49细胞中负调,控 miR-671-5p表达。 si-TPT1-AS1组 A549细胞存活率、迁移数和侵袭数分别为(关53.24±2.81)%、(63.11±6.51)个和( 33.78±3.23)个,均低于 si-NC组［分别为( 98.78±2.57)%、(147.44±11.08)个和(101.67±9.95)个,均P<0.05］。CyclinD1、MMP-2和MMP-9蛋白在 si-TPT1-AS1组的表达量分别为(0.43±0.05)(0.21±0.03)(0.43±0.04),较si-NC组均降低［分别为(0.86±0.04)(0.55±0.05)(0.48±0.07)均P<0.05］。si-TPT1-AS1+anti-miR-671-、5p组A549细、胞存活率、迁移数和侵袭数及 CyclinD1、MMP-2和M、MP-9蛋白表、达分别为(8,5.43±2.94)%、(125.78±10.59)个、(88.78±7.19)个、(0.75±0.03)、(0.48±0.03)、(0.43±0.04),较 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组均升高［分别为(54.36±2.95)%、(63.78±6.48)个、(33.56±3.54)个、(0.41±0.03)、(0.22±0.03)、(0.21±0.04),均P<0.05］。对照组与 si-NC组、 si-TPT1-AS1组与 si-TPT1-AS1+anti-miR-NC组各检测指标比较均差异无统计学意义(P>0.05)。结论肺癌组织中 TPT1-AS1表达升高, miR-671-5p表达降低,且两者呈负相关。 TPT1-AS1可能通过靶向下调 miR-671-5p的表达促进肺癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

甲状腺滤泡细胞的自噬活性参与慢性淋巴细胞性甲状腺炎的发病机制

目的探讨甲状腺滤泡细胞自噬对慢性淋巴细胞性甲状腺炎( CLT)的影响及炎性因子干扰素 ?γ(IFN?γ)对甲状腺滤泡细胞自噬参与 CLT的作用。方法 2018年 1—7月,选取新疆喀什地区第二人民医院 24例 CLT甲状腺切除的病人作为 CLT组,并选择同期入院的 24例单纯甲状腺肿( SG)甲状腺切除病人作为 SG组;对人甲状腺滤泡细胞分离、培养、鉴定;流式细胞技术检测甲状腺组织中 CD3+T细胞占比;放射性免疫法检测甲状腺滤泡细胞三碘甲状腺原氨酸( T3)、甲状腺素( T4)、甲状腺球蛋白(Tg)的水平,酶联免疫吸附试验( ELISA)试剂盒检测 IFN?γ、环磷酸腺苷( cAMP)水平;蛋白质印迹法检测自噬相关蛋白 Be? cline、微管相关蛋白 1轻链 3?Ⅱ(LC3B?Ⅱ)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白( mTOR)及不同浓度 IFN?γ对 Becline、LC3B?Ⅱ、mTOR蛋白的影响。结果成功分离出人甲状腺滤泡上皮细胞,倒置显微镜下观察,可见人甲状腺滤泡细胞在贴壁之前呈圆形或椭圆形或不规则形状, CLT病人组织切片可见多个淋巴生发中心,大量淋巴细胞浸润,甲状腺滤泡细胞萎缩。 SG病人甲状腺组织甲状腺滤泡细胞未见明显炎症浸润。流式细胞分析结果显示, CLT组甲状腺滤泡上皮细胞内浸润的 CD3+淋巴细胞数所占百分比( 25.76±4.05)%明显高于 SG组( 10.35±4.21)%,两组间比较差异有统计学意义( n＝24,P＜0.001)。与 SG组比较, CLT组中 T3、T4、Tg、INF?γ及 cAMP水平［甲状腺组织:(6.70±0.32)nmol/L,(44.05±0.39)nmol/L,(0.65±0.01)μg/L,(15.84±1.43)μg/L,(3.680±0.046)μmol/L;血清:(9.89±0.32)nmol/L,(39.25±0.27)nmol/L,(1.86±0.42)μg/L,(16.32±0.31)μg/L,(4.325±0.012)μmol/L］均升高,差异有统计学意义。 CLT组织与 SG组织相比自噬水平低下,表现为 Becline,LC3B?Ⅱ蛋白低表达［Becline蛋白:(7.16±0.15); LC3B?Ⅱ蛋白:(0.82±0.01)］,mTOR蛋白高表达( 12.26±0.16)。 IFN?γ干预后,甲状腺滤泡细胞中自噬蛋白 Be? cline,mTOR,LC3B?Ⅱ被诱导,表现为 Becline,LC3B?Ⅱ水平高表达［250 U/mL组:(7.80±0.07),(1.51±0.05); 500 U/mL组:(8.50±0.10),(1.82±0.04); 1 000 U/mL:(9.16±0.14)(2.47±0.09)］mTOR水平低表达［250 U/mL组:(12.26±0.16); 500 U/mL组:(0.84±0.13); 1 000 U/mL组:(9.66±0.07)］N?γ浓度的诱导作用愈明显。结论甲状腺滤泡细胞自噬参与 CLT的发展,且作用机制可能与炎性因子 IFN?γ关。     

黄芪总皂苷对薄型子宫内膜的修复作用及机制探究

目的探讨黄芪总皂苷( total saponins of astragalus，TSA)对薄型子宫内膜的修复作用及相关机制。方法 2022年 1— 4月，将 36只雌性小鼠分为三组( n=12):假手术组( Sham组)、模型组( Model组)、治疗组( Model+TSA组)。宫腔灌注无水乙醇进行造模，治疗组小鼠腹腔注射 TSA溶液( 45 mg·kg?1·d?1)共 3周。苏木精 -伊红( HE)染色观察小鼠子宫内膜厚度及形态；扫描电子显微镜观察子宫内膜胞饮突；蛋白质印迹法检测各组，小鼠子宫内膜容受性因子血管性血友病因子( vWF)、血管内皮生长因子( vEGF)、同源异型盒 A10(HoxA10)、白血病抑制因子( LIF)；观察小鼠妊娠胚胎数以评估生育力。结果与 Sham组［( 410.56±21.47)μm、(7.58±4.87)个、 100.00±13.32、100.00±8.43、100.00±5.91、100.00±11.97、(10.98±1.24)个］相比， Model组小鼠子宫内膜厚度［( 169.10±34.33)μm］、腺体数量［( 1.00±0.86)个］、内膜容受性相关因子 vWF(31.29±10.17)、 vEGF(22.17±3.92)、 HoxA10(30.26±6.37)、 LIF(51.83±6.01)，以及妊娠胚胎数［( 2.42±1.37)个］明显降低( P<0.05)；与 Model组［( 169.10±34.33)