异硫氰酸苯酯柱前衍生化RP-HPLC法测定人血浆中10种氨基酸的浓度

目的:建立一种异硫氰酸苯酯柱前衍生化反相高效液相色谱同时测定人血浆中10种氨基酸的方法。方法:以正亮氨酸为内标物,异硫氰酸苯酯为柱前衍生剂,Venusil-AA柱为分析柱,柱温40℃,采用二元梯度洗脱,254 nm波长处检测。结果:氨基酸血浆浓度在15.6~250μmol/L时,其峰面积与内标物峰面积的比值和氨基酸血浆浓度的线性相关系数,均大于0.99;10种氨基酸的加样回收率在96.3%~103.4%;日间和日内变异系数均在4.8%以下。应用该方法对小儿血浆中氨基酸含量进行了测定,取得了满意的结果。结论:该法简便、稳定,并且分离效果好,可用于人血浆中氨基酸浓度的检测。     

柱前衍生UPLC法测定甜瓜籽中13种游离氨基酸的含量

目的测定黑龙江产地甜瓜籽中13种氨基酸的含量。方法采用异硫氰酸苯酯(phenyl isothiocyanate,PITC)为衍生试剂进行衍生。色谱柱为Shim-pack XR-ODSⅢC18(75mm×2.0mm,1.6μm);流动相A为乙腈-水(体积比为4∶1),流动相B为30mmol·L-1乙酸钠-乙腈(体积比为97∶3),梯度洗脱;流速为0.3mL·min-1;柱温为25℃;检测波长为254nm。结果 13种氨基酸线性关系良好(r=0.999 1~0.999 8);平均回收率在97.0%~104.0%内,回收率的RSD均小于3.0%。结论本方法可用于甜瓜籽中游离氨基酸的检测。     

15种氨基酸注射液HPLC DABS柱前衍生法测定

采用ＤＡＢＳ柱前衍生化，对１５种氨基酸进行ＨＰＬＣ含量测定，方法简便，衍生产物ＤＡＢＳ－氨基酸稳定，过量的ＤＡＢＳ水解产物对氨基酸定量测定无干扰，分析周期短，１５种氨基酸的回收率在９８．８７％～１００．７９％，ＲＳＤ为０．２９％～０．８３％。     

柱前衍生-高效液相色谱法同时测定可食药用葱属植物中18种游离氨基酸含量

目的:建立一种利用高效液相色谱法同时测定可食药用葱属植物中18种游离氨基酸含量的方法。方法:以异硫氰酸苯酯为柱前衍生化试剂,采用梯度洗脱,于254 nm波长处检测18种氨基酸。结果:在一定的浓度范围内,各种氨基酸峰面积和浓度呈良好线性关系,r值均大于0.998;加样回收率为91.5%～110.5%(n=9)。结论:应用该法对大蒜、洋葱、韭菜等几种常见可食药用葱属植物中18种游离氨基酸的含量进行了测定,准确、方便、快速,可用于不同葱属植物的质量控制研究。     

PITC柱前衍生化法测定保健食品中牛磺酸的含量

目的 建立液相色谱法测定保健食品中牛磺酸含量的方法.方法 采用C18色谱柱,以异硫氰酸苯酯(PITC)做为柱前衍生化试剂,以醋酸钠缓冲液-乙腈-水体系为流动相,流速为1.0mL·min-1,在254nm波长处检测.结果 牛磺酸在0.28～0.95μg范围内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9998),液体、固体保健食品的平均回收率均为95.6％,RSD分别为1.5％和0.8％(n=6).结论 该方法结果准确,稳定可靠,重复性好.     

柱前衍生化-HPLC法测定文冠果种仁油中脂肪酸含量

目的:建立文冠果种仁油中脂肪酸含量的HPLC 测定法.方法:以ω-溴苯乙酮为衍生化试剂,三乙醇胺为相转移催化剂,采用BDS C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),检测波长235nm,以甲醇∶乙腈∶水(58∶27∶15)为流动相等度洗脱,柱温30℃,流速1.0mL·min-1,一次性分离五种脂肪酸,建立文冠果种仁油中脂肪酸含量的测定方法.结果:亚麻酸的线性范围为9.54～63.6μg,相关系数为0.9990,加样回收率为102.2%、RSD 为2.78%(n=9).结论:本方法重现性好,测量准确,可作为文冠果种仁油中脂肪酸含量测定的定量方法,用于文冠果种仁油的质量控制.     

柱前衍生化高效液相色谱法测定复方氨基酸制剂的应用研究

研究了以２，４－二硝基氯茉（ＤＮＣＢ）作生化度剂在ＰＨ９．１的硼砂缓冲液中沸水浴加热１ｈ，制得１７种ＤＮＰ－氨基酸，用于反相高效液相色谱（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定复方氨基酸的方法。采用Ｃ８柱，以腈－醋酸盐缓冲系统梯度洗脱，２２ｍｉｎ内１７种氨基酸的ＤＮＰ衍生物及衍生剂水解峰可较邹分离；衍生化产物稳定，３６０ｎｍ处紫外检测，最低检出限为０．１μｇ。本法简便，重现性好，结果较为满意。     

柱前衍生RP-HPLC法测定桑叶中16种游离氨基酸的含量

目的:建立柱前衍生法测定桑叶中游离氨基酸的含量。方法:以水超声提取桑叶中的氨基酸,以异硫氰酸苯酯柱前衍生,采用反相高效液相色谱法测定氨基酸的含量。结果:桑叶中含有苏氨酸、缬氨酸、脯氨酸、蛋氨酸、谷氨酸、甘氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、酪氨酸、天门冬氨酸、γ-氨基丁酸、丙氨酸、组氨酸、胱氨酸、色氨酸、异亮氨酸等16种游离氨基酸;其中人体必需氨基酸有7种,人体半必需氨基酸有1种,含量占氨基酸总量的20%左右。结论:本法不需要专门的氨基酸分析仪,操作简便、灵敏度高,结果准确、可靠。桑叶中氨基酸的种类齐全、含量丰富,具有很高的开发利用价值。     

柱前衍生化法测定丽江产玛咖中18种氨基酸含量

目的测定丽江产玛咖中必需氨基酸的含量。方法以2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,与丽江产玛咖中18种氨基酸柱前衍生,用Waters 600高效液相色谱仪,菲罗门公司Symmetry C18色谱柱,以含1%N,N-二甲基甲酰胺的0.05mol/L醋酸钠-醋酸缓冲液(pH=6.4)及乙腈∶水(1∶1)进行梯度洗脱,检测波长为360nm,柱温为35℃,进样量为20μL。结果 18种氨基酸的线性回归方程r值为0.9995~1.0000(n=5),平均回收率为99.54%~101.84%,RSD值为0.38%~1.82%,n=6。结论本法快速、简便,结果准确。     

DTDPA-PITC联合柱前衍生化HPLC法同时测定复方氨基酸注射液中18种氨基酸的含量

目的:建立同时测定含有半胱氨酸或胱氨酸的复方氨基酸注射液中18种氨基酸含量的方法。方法:采用高效液相色谱法,以二硫代二丙酸(DTDPA)和异硫氰酸苯酯(PITC)联合作为柱前衍生化试剂。色谱柱为Kromasil C18,流动相[A为0.1 mol/L醋酸盐缓冲液(pH 5.38)-乙腈(93∶7,V/V)、B为乙腈-水(80∶20,V/V),采用梯度洗脱],检测波长为254 nm,流速为1.0 ml/min,进样量为3μl,柱温为35Ⅴ。结果:18种氨基酸在各自测定浓度的20%¹80%的范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r≥0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.91%;平均回收率在95.7%180%的范围内与各自峰面积积分值呈良好的线性关系(r≥0.999 0);精密度、稳定性、重复性试验的RSD≤1.91%;平均回收率在95.7%⁹9.7%之间,RSD≤1.99%(n=9)。结论:该方法准确、高效,实现了同时对复方氨基酸注射液中半胱氨酸以及其他17种氨基酸的准确定量。     

异硫氰酸苯酯柱前衍生RP-HPLC测定大鼠脑组织中9种氨基酸类神经递质含量

目的 建立一种脑组织中氨基酸类神经递质的测定方法。方法 醋酸钠-乙腈-水为流动相,反相高效液相色谱洗脱,异硫氰酸苯酯(PITC)柱前衍生和紫外检测器检测大鼠大脑皮质、海马、纹状体、中脑、小脑和下丘脑6个脑区中9种氨基酸类神经递质(谷氨酸、门冬氨酸、甘氨酸、牛磺酸、γ-氨基丁酸、谷氨酰胺、酪氨酸、色氨酸、丝氨酸)的含量。结果 9种氨基酸在50 min内洗脱完全,分离效果良好;浓度在5~400 μmol·L^-1内线性关系良好,且相关系数>0.99,平均回收率≥80%。结论 本方法简便、准确、灵敏度高、重复性好,适用于一般实验室脑组织中氨基酸类神经递质的测定。     

朱砂中汞的二乙基二硫代氨基甲酸盐柱前衍生化HPLC测定

建立了柱前衍生化HPLC法测定朱砂中的汞含量。以二乙基二硫代氨基甲酸钠(NaDDC)为衍生化试剂,样品经消解、衍生化和有机溶剂提取后测定。采用C18色谱柱,流动相为甲醇-水(含0.022mmol/LNaDDC)(90∶10),检测波长为272nm。结果Hg2 在8.4～42.0μg/ml浓度范围内线性关系良好,检测限为4.2ng,平均回收率为99.9%,RSD为2.2%。     

优化柱前衍生-HPLC法测定血清中丙戊酸的血药浓度

目的：优化柱前衍生-高效液相色谱法监测血清中丙戊酸浓度的方法。方法：以乙腈为蛋白沉淀剂,以弘溴苯乙酮为衍生化试剂进行测定。色谱柱为ANAX丙戊酸专用分析柱,流动相为乙腈-水（70：30）,柱温为40℃,流速为0．7mL·min-1,检测波长为266nm。结果：丙戊酸血药浓度在4．88-139．46μg·mL-1范围内线性关系良好（r=0．9996）,平均回收率为100．01％,日内、日间RSD均〈3％。结论：本法可简便、快速、稳定地测定血清中丙戊酸的浓度,能满足临床监测的要求。     

5-氨基酮戊酸的柱前衍生化HPLC-荧光法测定

建立了柱前衍生化HPLC-荧光法测定5-氨基酮戊酸.以荧光胺为荧光衍生化试剂,使用C18柱,以乙腈-0.1％三氟乙酸溶液(30∶70)为流动相,激发波长和发射波长为398和480 nm.5-氨基酮戊酸在0.047 5～47.5 μg/ml浓度范围内线性关系良好.回收率为99.2％,RSD为1.46％.     

高效液相色谱法测定酶促反应液中的L-半胱氨酸含量

目的建立高效液相色谱法检测酶促反应液中L-半胱氨酸含量。方法采用异硫氰酸苯酯柱前衍生高效液相色谱法测定。色谱柱:Waters Symmetry C18(5μm,250 mm×4.6 mm);流动相A:醋酸钠缓冲溶液-乙腈(40∶3),流动相B:乙腈-水(4∶1);梯度洗脱,流速1.0 mL/min;柱温38℃;检测波长254 nm。结果线性范围为0.01~0.1mg/mL,r=0.9995(n=6);平均回收率为100.03%,RSD为0.21%(n=6)。结论此法简便易行,重现性好。     

复方α-酮酸片中氨基酸的柱前衍生化-HPLC法测定

采用柱前衍生化法同时测定复方α酮酸片中——L-醋赖氨酸、L-苏氨酸、L-色氨酸、L-组氨酸、L-酪氨酸五种氨基酸的含量。采用ODS柱，以流动相乙腈-水（1：1）和0．14mol／L磷酸盐缓冲液（pH8．2）梯度洗脱，检测波长360nm。衍生化试剂为2，4-二硝基氯苯。五种氨基酸的平均回收率为99．6％～100．9％，RSD小于1．1％。     

柱前衍生化HPLC测定复方谷氨酰胺肠溶胶囊中的L-谷氨酰胺

目的 建立柱前衍生化HPLC测定复方谷氨酰胺肠溶胶囊中L-谷氨酰胺的含量。方法 采用CAPCELL PAK C₁₈色谱柱(150 mm×4.6 mm,5 μm),以乙酸钠缓冲液(pH 6.4)-乙腈为流动相,梯度洗脱,检测波长为254 nm。以牛磺酸为内标物质,异硫氰酸苯酯为衍生剂,采用单因素和正交试验确定衍生反应最佳条件。结果 L-谷氨酰胺在0.015 9~0.143 mg·mL^-1内线性关系良好(r²=0.999 9),加样回收率为100.3%,RSD为0.8%(n=9)。结论 本方法准确、重复性好,可用于复方谷氨酰胺肠溶胶囊中L-谷氨酰胺的含量测定。     

FMOC柱前衍生化HPLC法测定阿仑膦酸钠片含量及有关物质4-氨基丁酸

目的建立9-氯甲酸芴甲酯（FMOC）柱前衍生化高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠片的含量及其有关物质4-氨基丁酸。方法碱性条件下供试品与FMOC衍生化反应,采用ODS-2HYPERSILC18色谱柱,乙腈-0.4%EDTA（pH=7.2）（35∶65）为流动相,测定阿仑膦酸钠的衍生化产物;以乙腈-0.4%EDTA（pH=7.2）（40∶60）为流动相,测定4-氨基丁酸衍生化产物,紫外检测器（λ=265nm）,荧光检测器（λex=260nm,λem=310nm）。结果阿仑膦酸钠浓度在10～60μg·mL-1范围内（UV265nm）线性关系良好（r=0.9996）;平均回收率100.3%（n=9）。有关物质4-氨基丁酸浓度在1～5μg·mL-1范围内（UV265nm）线性关系良好（r=0.9998）。结论本方法简单、准确、灵敏。     

柱前衍生化HPLC法测定复方氨基酸注射液(20AA)中氨基酸含量

目的: 建立柱前衍生高效液相色谱法测定复方氨基酸注射液（20AA）中包括门冬酰胺和盐酸鸟氨酸在内的18种氨基酸含量的方法。方法: 以6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯（AQC）为衍生化试剂,以γ-氨基丁酸为内标,采用Kromasil C18(250 mm × 4.6 mm, 5?m)色谱柱,以140 mmol?L-1醋酸铵缓冲液(pH5.10)和乙腈-水(57∶43)溶液为流动相进行梯度洗脱,检测波长为248 nm,进样量5?L。结果: 18种氨基酸在1.2～108.8 ?g?mL-1范围内浓度与峰面积线性相关,相关系数为0.994 7～0.999 7;在标示浓度的80％、100％、120％三个浓度水平的平均回收率为97.4％～103.1％,RSD为1.3％～3.7％(n=9)。结论: 本法操作简便,结果准确,优于现行标准的方法。