酶联免疫吸附法测定人血清舒芬太尼浓度

目的建立酶联免疫吸附法(EUSA)检测人血清舒芬太尼浓度。方法应用舒芬太尼试剂盒(美国Neogen公司)拟合标准曲线,测定其检测限、精密度、回收率和交叉反应率,并检测开胸手术后行舒芬太尼自控静脉镇痛(PCIA)患者的血清样本36份。结果舒芬太尼浓度为0.07～1.50μg·L~(-1)时线性良好(R~2=0.996),检测限0.06μg·L~(-1),方法回收率100.5%,日内和日间RSD分别<10%和15%,与麻醉期间常用药物的交叉反应率低,羟乙基淀粉130/0.4存在时吸光度增加。结论ELISA测定人血舒芬太尼简便、快捷,可用于临床药动学研究。     

高效液相色谱法测定人全血中瑞芬太尼浓度

目的:建立测定人血中瑞芬太尼的高效液相色谱-紫外检测方法,为临床监测血药浓度提供方法学.方法:采用液-液萃取法,用1-氯丁烷提取全血中的瑞芬太尼,选用GI97559(瑞芬太尼乙基类似物)为内标定量.色谱柱为Zorbax SB-CN(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(1∶2∶0.43),柱温30℃,流速1.5mL*min-1,紫外210 nm检测,按内标法定量.结果:标准曲线在3～200 μg*L-1范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(r=0.9966).最低检测浓度为2μg*L-1.提取回收率77.34%～87.72%.方法回收率97.13%～100.99%,日内RSD小于5.3%,日间RSD小于6.3%.结论:本方法快速、准确、灵敏,可用于瑞芬太尼的临床药动学研究.     

舒芬太尼在体外人肝微粒体中代谢速率的测定

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定人肝脏微粒体中舒芬太尼的药物浓度,为进一步研究舒芬太尼的药物代谢提供新方法.方法:于人体肝组织微粒体孵育液中加入舒芬太尼,用HPLC测定孵育液中不同时点的舒芬太尼浓度,以芬太尼为内标,用正己烷—无水乙醇(19:1)进行萃取,采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×200...     

HPLC法测定人血浆中舒芬太尼的浓度

目的:建立测定人血浆中舒芬太尼浓度的高效液相色谱法。方法:血浆样品经正己烷-乙醇（95:5,）提取后,以乙腈-5 mmol·L^-1磷酸二氢钾缓冲液（40:60,pH 6.1）为流动相,流速1.0 ml·min^-1,色谱柱为Agilent Extend C₁₈（150 mm×4.6 mm,5μm）,柱温25℃,检测波长230 nm。结果:血浆内源性杂质不干扰待测物测定,舒芬太尼的线性范围为2.014～201.400 g·L^-1,定量下限为2.014 g·L^-1,日内、日间RSD均小于6%。样品3次冻融及在提取后,4℃下12 h内稳定性良好。结论:该法灵敏、快速、准确,操作简便,可用于舒芬太尼的血药浓度监测和临床药动学研究。     

HPLC法测定人血浆中的舒芬太尼浓度

目的:建立测定人血浆中舒芬太尼血药浓度的 HPLC 方法。方法:以丁丙诺啡为内标,采用正己烷-无水乙醇(19:1,v/v)进行液-液萃取。采用 Diamonsil—C_(18)柱(4.6 mm×200mm,5μm),以0.01 mol·L~(-1)KH_2PO_4-乙腈(65:35,v/v,pH 5.6)为流动相,流速为1.5 mL·min~(-1),检测波长230 nm。结果:舒芬太尼在7.8125～12500 ng·mL~(-1)范围内线性关系良好(r=0.9976),最低检测浓度为4 ng·mL~(-1)。高、中、低浓度(12500,625,31.25 ng·mL~(-1))样本方法的平均回收率均大于97%;高、中、低浓度(12500,625,31.25 ng·mL~(-1))样本日内变异分别为4.65%,6.72%,6.68%,日间变异分别为8.65%,7.49%,13.19%。结论:本方法简便,准确,稳定性好,能够满足血浆中低浓度舒芬太尼的测定及临床药代动力学研究的要求。     

HPLC同时测定镇痛泵中的格拉司琼-舒芬太尼及格拉司琼-曲马多-芬太尼

目的 建立同时测定格拉司琼-舒芬太尼及格拉司琼-曲马多-芬太尼含量的方法.方法 采用HPLC法,分析柱为Agilent hypersil C18柱(125 mm×4.0 nm,5μm),流动相为0.02 mol·L~(-1)磷酸二氢钾(加0.6%三乙胺,磷酸调pH4.0)-乙腈,梯度洗脱,流速为1 mL·min~(-1),检测波长为220 nm.结果 格拉司琼、舒芬太尼、曲马多、芬太尼的线性范围分别为5～50μg·mL~(-1)(r=0.9999)、0.25～4.00 μg·mL~(-1)(r=0.9994)、20～70 μg·mL~(-1)(r=0.9996)、2.5～20.0μg·mL~(-1)(r=0.9999);其平均回收率分别为99.97%、98.75%、99.80%、100.53%.结论 所建方法可同时测定格拉司琼-舒芬太尼及格拉司琼-曲马多-芬太尼混合溶液的含量,且简便、准确、灵敏.     

高效液相色谱-紫外检测法测定母体静脉及新生儿脐动、静脉血内瑞芬太尼血药浓度

目的建立高效液相色谱紫外检测法测定人血中瑞芬太尼(镇痛药)血药浓度。方法用1-氯丁烷提取全血中的瑞芬太尼,选用GI97559(瑞芬太尼乙基类似物)为内标定量。色谱柱为ZobarSE-CN(4.6mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-甲醇-磷酸二氢钾缓冲液,柱温30℃,流量1.5mL·min-1,紫外检测波长210nm,按内标法定量。结果标准曲线在1～20ng·mL-1范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(γ=0.956)。结论本方法操作简便、试剂成本低、灵敏度高、精密度好,为临床研究瑞芬太尼血药浓度提供一种较好的分析技术。     

液相色谱-质谱联用测定全身麻醉患者血浆中舒芬太尼浓度

目的建立液相色谱质谱联用法,测定全麻患者血浆中舒芬太尼(镇痛药)浓度,并用其进行全身麻醉患者靶控输注性能的评价。方法血浆中加入内标芬太尼后,用乙腈沉淀蛋白法处理,用AgilentXDBC18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),乙腈-醋酸铵(10mmol.L-1,pH3.0)85∶15,流量为1mL·min-1。质谱用APCI离子源,正离子模式,多反应监测模式(MRM)。结果舒芬太尼在0.1～2ng.mL-1内,呈良好的线性关系,γ=0.9994。精密度及稳定性均RSD<13%。结论本法是一种简单、快速、准确、灵敏的测定舒芬太尼血药浓度的方法,可用于全身麻醉患者靶控输注性能的评价。     

高效液相色谱紫外检测法测定人血瑞芬太尼血药浓度

目的采用高效液相色谱紫外检测法测定人血中瑞芬太尼血药浓度,为临床研究瑞芬太尼提供一种分析方法。方法采用液-液萃取法,用1-氯丁烷提取全血中的瑞芬太尼,选用 GI97559(瑞芬太尼乙基类似物)为内标定量。色谱条件包括色谱柱 Zorba×SB-CN(4．6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-甲醇-磷酸二氢钠缓冲液,柱温30℃,流速1．5 ml/min,紫外波长210 nm 检测,按内标法定量。结果标准曲线在2．5～160 ng/mL 范围内,浓度与峰面积比有良好的线性关系(r=0．998)。最低检测浓度为2 ng/ml。日内差异小于8．6%,日间差异小于9．2%。结论本方法具有操作简便、试剂成本低、灵敏度高、精密度好等优点,为临床研究瑞芬太尼药代-药效动力学提供一种较好的分析技术。     

HPLC法测定人血清中甲砜霉素浓度

目的:建立测定人血清中甲砜霉素浓度的RP-HPLC法.方法:以Hypersil ODS C18(150 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水(25:75),流速为1.0 ml·min-1,检测波长为225 nm,柱温35℃,血清样品以乙酸乙酯为提取剂.结果:甲砜霉素在0.05～20.00mg·L-1浓度范围内线性关系良好(r=0.999 2),高、中、低3个浓度的平均回收率分别为98.05%,100.10%,100.30%;最低检测浓度为0.01 mg·L-1.结论:该方法精密、准确,可用于甲砜霉素的药动学研究.     

柱前手性衍生化-HPLC法测定人血浆和尿液中D-谷氨酸和D-丝氨酸的浓度

目的:建立手性分离D-谷氨酸和D-丝氨酸的方法,测定人血浆和尿液中D-谷氨酸和D-丝氨酸的浓度。方法:12对极性氨基酸标准液混合后,加入衍生化试剂邻苯二甲醛、N-乙酰-L-半胱氨酸衍生化后,采用高效液相色谱法进样测定。色谱柱为大连依利特HypersilC18,流动相为甲醇-50mmol·L-1醋酸铵缓冲液(pH6.0),梯度洗脱,流速为1.0mL·min-1,柱温为室温,进样量为20μL,荧光检测波长为350nm(激发波长)、450nm(发射波长)。结果:D-谷氨酸、D-丝氨酸检测浓度分别在0.5～20、0.5～80nmol·L-1范围内线性关系良好,平均方法回收率分别为96.4%～103.6%、97.1%～100.5%,日内、日间RSD均<8%。测得正常人血浆中D-谷氨酸和D-丝氨酸平均含量分别为(2.43±0.37)、(1.07±0.11)nmol·mL-1,尿样中未能检测到2种D型氨基酸。结论:本研究建立的手性分离测定D-谷氨酸和D-丝氨酸的分析方法可行,可用于测定人血浆和尿液中二者的浓度。     

RP-HPLC法测定人血清中茶碱与多索茶碱的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法同时测定人血清中茶碱、多索茶碱浓度的方法。方法:血清采用15%高氯酸进行沉淀后测定,其中色谱柱为InertsilODS-SP,流动相为甲醇-水(25∶75),检测波长为273nm,流速为1mL·min-1,柱温为30℃,内标为巴比妥钠。结果:茶碱、多索茶碱血清浓度分别在0.24～30.69mg·L-1、0.25～31.83mg·L-1范围内线性关系良好(r均为0.9999),最低定量限分别为0.24、0.25mg·L-1;平均相对回收率分别为99.62%～103.92%、96.26%～102.22%;日内RSD分别为0.44%～1.79%、0.54%～1.68%;日间RSD分别为1.68%～2.15%、0.83%～1.57%。结论:本方法简便、快速、准确、灵敏,可用于临床茶碱、多索茶碱血药浓度监测。     

HPLC法测定人血清中丙戊酸钠的浓度

目的:建立测定人血清中丙戊酸钠浓度的方法。方法:血样采用2-溴-对硝基苯乙酮衍生化,以高效液相色谱法进行测定。色谱柱为Shimpack C18,流动相为甲醇-水(80∶20),流速为0.9 mL·min-1,检测波长为265 nm,柱温为30 ℃,内标为环己烷羧酸。结果:丙戊酸钠血药浓度在10～150 mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.999 7,n=6),最低检测浓度为1 mg·L-1;方法回收率为99.45%～103.24%,萃取回收率为98.12%～100.37%,日内与日间RSD均<8%(n=5)。结论:本方法快速、简便、准确,适用于临床丙戊酸钠的血药浓度监测。     

HPLC法测定人血浆中替米沙坦的浓度

目的:建立测定人血浆中替米沙坦浓度的方法。方法:采用高效液相色谱法,以地西泮为内标,无水乙醚为萃取溶剂进行m测i定n-,1,色检谱测柱波为长H为yp2e2r8sinlmC,18柱,流温动为相室为温甲。醇结-磷果酸:替盐米缓沙冲坦液血(0药.0浓1m度o在l.L0-.111N5H54～H27P.O394,2用μgH.3mPOL4-调1范p围H至内约线性3.0关)=系7良0:3好0(,流r=速0.为9919.08)m,L最.低定量浓度为0.1155μg.mL-1;高、中、低3种浓度的方法回收率为96.73%～103.55%;日内、日间RSD分别为2.12%～7.33%和2.98%～7.86%。结论:本方法灵敏度、准确度及回收率均能达到人体血药浓度测定的要求,也可用于临床人体药动学的研究。     

HPLC法同时测定人血浆中舍曲林与氯氮平的浓度

目的:建立同时测定人血浆中舍曲林、氯氮平浓度的方法。方法:血浆样品以乙酸乙酯-二氯甲烷(80:20)进行提取并测定,色谱柱为DiamonsilTMC18反相柱,流动相为30mmol.L-1醋酸铵-乙腈(22:78),流速为1.0mL.min-1,柱温为40℃,检测波长为210nm。结果:舍曲林、氯氮平血药浓度分别在20.0～600.0μg.L-1、50.0～1000.0μg.L-1范围内线性关系良好(r分别为0.9986、0.9993),分析方法的检测限为10.0μg.L-1;舍曲林、氯氮平的低、中、高3种浓度平均相对回收率均>95%,提取回收率均>70%。日内、日间RSD均<10%(n=5)。结论:该方法灵敏、准确、简单、快速,可用于临床舍曲林与氯氮平血药浓度监测和药动学研究。     

RP-HPLC法测定人血清中拉莫三嗪的浓度

目的:建立以反相高效液相色谱法测定人血清中拉莫三嗪浓度的方法。方法:色谱柱为KromasilC18,流动相为甲醇∶乙腈∶0.03mo·lL-1醋酸铵(乙酸调pH值至3.5±0.1)=12∶12∶27;流速为1.0mL·min-1,柱温为室温,检测波长为310nm,进样量为20μL。结果:拉莫三嗪血药浓度在0.5～30.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9986);方法回收率为99.00%～102.00%;日内、日间RSD分别为1.66%～2.50%、2.18%～2.98%。结论:本方法操作简便、快速、灵敏、重复性好、回收率及精密度高,可用于拉莫三嗪的治疗药物监测。     

RP-HPLC法测定氨茶碱血清浓度

目的:建立测定氨茶碱血清浓度的方法。方法:采用反相高效液相色谱法,色谱柱为BDS C18,流动相为甲醇-水(15∶85),柱温为35 ℃,流速为1 mL·min-1,检测波长为275 nm。结果:氨茶碱有效成分茶碱血药浓度在0.5～42.5 μg·mL-1范围内线性关系良好(r=0.999 9),最低检测限为0.5 μg·mL-1;方法回收率为91.60%～95.00%,提取回收率为68.04%～70.77%;日内RSD≤2.20%,日间RSD≤3.28%。结论:本方法简便、准确、灵敏、重复性好,可用于氨茶碱血药浓度监测。     

HPLC法测定人血清中万古霉素的浓度

目的:建立以高效液相色谱法测定人血清中万古霉素浓度的方法。方法:血清样品以20%偏磷酸溶液沉淀蛋白,离心后取上清液直接进样测定。其中,色谱柱为Hypersil C18,流动相为乙腈-0.0125mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(10∶90),流速为0.8mL·min-1,柱温为25℃,检测波长为236nm。结果:万古霉素血药浓度在2.0～170.0mg·L-1范围内线性关系良好(r=0.9998),最低检测浓度为2.0mg·L-1;低、中、高(2.5、30.8、150.4mg·L-1)3种浓度的平均相对回收率分别为99.8%、101.1%、98.9%,日内及日间RSD均<2.5%(n=5)。结论:本方法简便、准确、快速,适用于人血清万古霉素浓度的监测和药动学研究。     

LC-MS/MS法测定大鼠血浆中他莫昔芬与其活性代谢物4-羟基他莫昔芬的浓度及其药动学研究

目的:建立大鼠血浆中他莫昔芬与其活性代谢物4-羟基他莫昔芬浓度的测定方法,并研究其在大鼠体内的药动学。方法:取大鼠8只灌胃给予他莫昔芬10mg·kg-1,检测给药前和给药后48h内他莫昔芬和4-羟基他莫昔芬的血浆浓度,并计算其药动学参数。采用液相色谱-串联质谱法,以维拉帕米为内标,色谱柱为PhenomenexGeminiC18,流动相为甲醇-0·025%甲酸水溶液(梯度洗脱),流速为0·25mL·min-1,柱温为40℃;电喷雾正离子源,他莫昔芬、4-羟基他莫昔芬和维拉帕米的选择检测离子质荷比(m/z)分别为372·3→129·1、388·4→128·9、455·3→165·0。结果:他莫昔芬和4-羟基他莫昔芬检测浓度的线性范围分别为1～500(r=0·9998)、0·5～50(r=0·9995)ng·mL-1,最低检测限分别为0·05、0·1ng·mL-1;药动学参数分别为t1/2β:(8·9±0·5)、(8·6±0·7)h,cmax:(112·2±39·2)、(31·1±5·6)ng·mL-1,AUC0～48h:(1501·1±213·8)、(431·2±31·8)ng·h·mL-1。结论:本方法专属性强、灵敏度高、准确性好,可用于他莫昔芬和4-羟基他莫昔芬的血药浓度测定。他莫昔芬和4-羟基他莫昔芬在大鼠体内的药动学符合一室模型特征。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定大鼠血浆中替诺福韦的浓度

目的:建立大鼠血浆中替诺福韦浓度的测定方法。方法:采用超高效液相色谱-串联质谱法。取6只大鼠单次灌胃给予富马酸替诺福韦酯100mg.kg-1,检测给药45min后血浆中药物浓度,以恩替卡韦为内标,选用阳离子固相萃取柱除去血浆中的蛋白质。色谱柱为AcquitybenUPLC-C18,流动相为0.2%甲酸水溶液(含40mmo.lL-1醋酸铵)-乙腈=97:3,流速为0.25mL.min-1,柱温为40℃,电喷雾正离子(ESI+)源,监测离子对分别为质荷比(m/z)287.9→175.7(替诺福韦)和m/z277.9→151.7(恩替卡韦)。结果:替诺福韦检测浓度的线性范围为10～800ng.mL-1(r=0.9992),最低检测限为10ng.mL-1,回收率为(100.22±9.47)%～(102.76±4.99)%,日间、日内RSD均小于9.4%;给药45min后血浆样品中替诺福韦的平均浓度为819.2ng.mL-1。结论:该方法操作简便、专属性强、灵敏度高,可用于血浆中替诺福韦的浓度测定。