2例多数牙先天缺失患儿及其父母的Pax9基因突变检测

目的:探讨多数牙先天缺失患者的基因突变位点.方法:从两例多数牙先天缺失患者与家庭成员的静脉血中提取DNA,在Pax9基因内设计引物,采用PCR方法扩增Pax9基因的外显子2、3、4,而后通过对分段PCR纯化产物的测序,并结合系谱进行单核甘酸多态性分析.结果:外显子3的第88、89位点上发现两个单核甘酸多态性位点(single nucleotide polymorphisms,SNPs),其中第88位为C变为T,第99位为G变为C,前者是同义突变,后者是错义突变,由丙氨酸变为脯氨酸.结论:多数牙先天缺失可能与Pax9基因外显子3的第88、89位点上的两个SNPs有关.     

PAX9基因上新近发现的一个单核苷酸多态性位点的SNP分析

目的:研究位于PAX9基因外显子3的第89位点上的SNP与多数牙先天缺失的相关性.方法:分别从11名多数牙先天缺失病人,5名少数牙先天缺失病人和38名正常对照者的静脉血样品中提取DNA.采用TaqMan-MGB探针技术对该SNP位点进行单核苷酸多态性研究,利用软件对实验结果进行SNP分型,并行统计分析.结果:突变为纯合子C/C的绝大多数表现为先天缺牙(多数牙先天缺失5例,少数牙先天缺失2例,正常1例).但31例杂合子中只有7例表现为先天缺牙(多数牙先天缺失6例,少数牙先天缺失1例).13例野生型纯合子只有2例表现为少数牙先天缺失,11例完全正常.统计结果表明该位点与多数牙先天缺失相关(P<0.001).结论:多数牙先天缺失可能与PAX9基因外显子3的第89位点上的SNP有关.     

一个单纯性先天缺牙家系的临床及基因突变分析

目的探讨多数牙先天缺失患者的人类成对盒基因（PAX9）和肌节同源盒基因（MSX1）突变位点,为该疾病的病因学研究提供依据。方法对于该例患者与部分正常家庭成员进行口内检查及家系调查,取研究模型测量其牙冠宽度,并与正常值比较。拍摄曲面断层片和头颅侧位片进行头影测量分析,对比颅面形态和错畸形类型及特点。从静脉血中提取DNA,根据PAX9和MSX1的全序列设计引物,采用聚合酶链式反应（PCR）扩增PAX9基因的外显子1、2、3、4及MSX1基因外显子1、2,而后通过对分段PCR纯化产物的测序,并结合系谱进行突变分析。结果患者伴有牙齿形态畸形,与中国人正常值相比较,牙冠宽度较小。头影测量分析结果提示先证者在骨面型及颌骨形态等方面无明显遗传倾向。基因筛查结果显示先证者及其母亲的PAX9外显子3第718位点上由G变为C,属错义突变,导致与之对应的第240位氨基酸由丙氨酸变为脯氨酸;MSX1未见突变。结论多数牙先天缺失可能与PAX9基因外显子3的第718位点上的错义突变有关。     

PAX9基因在2个新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙家系中的表达

目的　通过对新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙患者PAX9基因突变的检测,为维吾尔族该病发病的分子机制提供依据。方法　采集2个新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙家系颊黏膜拭子,提取DNA,采用聚合酶链反应技术结合DNA双向测序技术对患者DNA进行检测。结果　PAX9基因外显子3的85、86位点检测出两个单核苷酸多态性（single nucleotide polymorphisms,SNPs）位点。结论　PAX9基因外显子3的85、86位点的改变可能与新疆维吾尔族非综合征型先天缺牙的发生有关。     

髁突骨软骨瘤患者EXT基因的突变检测

目的 ：对EXT1及EXT2基因在单发性髁突骨软骨瘤中的突变情况进行检测。方法 ：收集12例手术治疗患者的组织标本,提取基因组DNA,对包含5’UTR 区、编码区、外显子-内含子交界区及3’UTR 区的PCR 产物进行直接测序分析,并将结果与国际数据库中的数据进行对比。结果 ：发现4个不同的EXT1 基因的单核苷酸多态性（SNPs）,其中3个位于内含子区,1个位于编码区,位于编码区的突变为同义突变。该4个多态性位点以前均已报道。3个EXT2基因的SNPs,1个位于编码区,1个位于5’UTR区,1个位于内含子区。编码区突变为同义突变,内含子区突变以前未见报道。结论 ：EXT1 及EXT2基因突变与单发性髁突骨软骨瘤的相关性可能不大,但其致病情况有待于进一步研究。     

单纯性先天缺牙患者BMP2/BMP4基因位点分析

目的对BMP2/BMP4基因在单纯性先天缺牙患者中的基因表达进行观察,探讨其在先天缺牙疾病中可能的发病机制。方法提取单纯性先天缺牙患者40例及其家系成员外周静脉血基因组DNA,另选择100例非先天缺牙患者作为对照,应用聚合酶链式反应（PCR）扩增BMP2/BMP4基因编码外显子,纯化、测序,应用DNASTAR软件对测序结果进行对比分析。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学处理。结果40例先天缺牙患者中,共检测到BMP2/BMP4基因 5个突变位点,其中BMP2基因4个突变点：3个错义突变c.109T>G, c.166C>G,c.570A>T,检出率分别为7.5%、2.5%和95%;1个同义突变（c.261A>G）,检出率为100%。3个为dbSNP 数据库中已报道过的多态位点：BMP2SNPs c.109T>G p.Ser37Ala; c.261A>G p.Ser87Ser;c.570A>T p.Arg190Ser;家系先证者BMP2 c.166C>G突变在正常对照组未检出,dbSNP 数据库未报道,也未被收录于致病基因数据库,为新突变位点。BMP4基因检测出错义突变c.455T>C,检出率为55%,为dbSNP 数据库中已报道过的多态位点。与对照组等位基因及基因型比较,无显著差异。结论单纯性先天缺牙可能与BMP2/BMP4基因检出SNPs相关。BMP2c.166C>G杂合突变是新发现的突变,可能是单纯性先天缺牙家系的致病突变。     

单纯性多数牙缺失家系的AXIN2基因突变分析

目的：通过对AXIN2基因多态性与单纯性多数牙先天缺失关系的探讨，寻找该病发病的可能基因因素。方法对单纯性多数牙先天缺失家系中患者进行临床和实验室相关检查；而后提取基因组DNA ，通过RT?PCR方法对AXIN2基因的外显子进行扩增、测序，同时分析基因突变类型。结果 DNA测序显示，在AXIN2基因的3号外显子及附近的内含子区2例患者出现3个相同类型的基因突变，分别是：c.1365A>G（p.Pro455=），c.956+16A>G（Ⅱ?1：纯合型；Ⅲ?1：杂合型），c.1200+71A>G（纯合型），同时先证者的母亲（Ⅱ?2）出现c.1365A>G和c.1200+71A>G的杂合突变类型。经生物信息软件分析认为均是多态性位点。结论 AXIN2基因的c.956+16A>G，c.1365A>G和c.1200+71A>G突变可能与该家系的单纯性多数牙齿缺失密切相关，但AXIN2在多数牙缺失发生发展各阶段的确切作用还需要进一步的研究。     

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目的检测一非综合征型多数牙齿先天缺失家系的AXIN2基因,探讨其与该家系成员多数牙齿先天缺失的关系。方法本研究于2011年3月至2013年3月在中国医科大学口腔医学院中心实验室完成。对一非综合征型多数牙齿先天缺失家系3代成员共17人,在患者和家属知情同意及中国医科大学口腔医学院伦理委员会批准的前提下,提取其外周静脉全血基因组DNA,用Primer Premier5．0软件设计引物,聚合酶链式反应（PCR）方法扩增AXIN2基因全部外显子后,纯化PCR产物,应用3730DNA序列分析仪双向测序,结合系谱图进行分析。结果该非综合征型多数牙齿先天缺失家系的临床表现符合常染色体显性遗传规律;AXIN2基因测序结果显示：存在1个与牙齿先天缺失相关的错义突变位点c．148C〉T（rs2240308）,以及3个单核苷酸多态（SNP）位点c．1201＋71（rs8078753）、c．1201＋82、c．1201＋100（rs56248738）,其中c．1201＋82为新发现的SNP位点。结论该家系多数牙齿先天缺失可能与AXIN2基因的多个SNP位点有关。     

琥珀酸脱氢酶基因B亚单位在散发性副神经节瘤中的突变

目的:探讨人线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)基因B亚单位(SDHB)基因突变与散发性副神经节瘤之间的关系。方法:取8例散发性副神经节瘤患者的肿瘤石蜡标本,提取基因组DNA,对SDHB基因的8个外显子进行PCR扩增和测序分析,与Genebank中人类SDHB基因序列及SNP数据库比对,寻找突变位点。结果:8例肿瘤组织标本中,在64个外显子中发现8例9个核苷酸改变。其中1例1个核苷酸改变为基因点突变,突变率为12.5%,为第2外显子第64位碱基C突变为T(c.136C>T),导致第2外显子编码的第22位密码子由精氨酸密码子突变为终止子(p.Arg46X)。另外8例8个为单核苷酸多态性改变。结论:散发性副神经节瘤患者中存在SDHB基因突变,可能与副神经节瘤的发生有关。     

AXIN2基因的3个SNP位点与新疆维吾尔族先天缺牙的相关性

目的：探讨维吾尔族单纯型先天缺牙患者标本中AXIN2基因的突变位点。方法：收集维吾尔族非单纯型先天缺牙家系3个,采集家系患者颊黏膜拭子提取DNA,采用聚合酶链反应技术,对分段纯化的PCR产物进行DNA双向测序检测患者的DNA。结果：3个家系的单纯型先天缺牙临床表型符合常染色体显性遗传规律,患者出现不同数量的缺失牙或伴发锥形牙。测序后检测出AXIN2的3个可能的SNP位点。结论：AXIN2基因片段中某些编码基因的改变可能与维吾尔族单纯型先天缺牙有关。