4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶对间歇低氧PMN导致的血管内皮细胞损伤的影响

目的 探讨间歇低氧(IH)模式下多形核中性粒细胞(PMN)对血管内皮细胞造成氧化应激损伤的机制,以及抗氧化剂4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(Tempol)对减轻该损伤的作用.方法 通过向低氧仓中循环充入氮气和压缩空气模拟阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)患者IH病理生理过程,制造IH大鼠模型.将大鼠随机分为IH组、常氧组、IH+ Tempol组、IH十生理盐水(NS)组.IH组最低氧浓度为5％,低氧频率均为30次/h,8 h/d,IH+ Tempol 组及IH+ NS组每天低氧开启前腹腔分别注射Tempol 1 mg/10 g及与Tempol同等体积的NS(已经大鼠体质量校正),常氧组内皮细胞不经过IH处理.大鼠低氧暴露6周后取血分离PMN,将PMN和大鼠动脉内皮细胞共培养后,收集上清液,用ELISA法测过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的浓度.结果 与常氧组比较,IH、IH+ NS及IH+ Tempol组CAT和SOD低,MDA高(P均＜0.05);与IH及IH+ NS组比较,IH+ Tempol 组CAT和SOD高(P＜0.05),MDA低(P均＜0.05).结论 IH环境来源的PMN会对血管内皮细胞造成氧化应激损伤,抗氧化剂Tempol能缓解PMN的氧化应激攻击作用而保护OSA患者血管内皮.     

慢性间歇低氧对大鼠血压和交感神经兴奋性的影响

目的 通过观察不同程度慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)作用下大鼠血压与交感神经活性水平动态变化,探讨CIH对血压及交感神经活性的影响及血压与交感神经活性之间的相关性,并明确CIH诱发高血压发病的机制.方法 168只雄性6周龄Wistar大鼠,体重160 ～ 180 g,采用随机数字表法分为非暴露组(UD)、重度间歇低氧组(IH1)、中度间歇低氧组(IH2)、轻度间歇低氧组(IH3)、持续低氧组(CH)及对照组,分别给予不同程度和频率的低氧环境.UD组8只大鼠于实验前处死,其余各实验组每组32只大鼠,分别于2、4、6、8周时随机抽取8只处死,留取静脉血抗凝离心后- 80℃保存血浆,并于实验前、实验结束后分别测定动脉收缩压,实验结束后测定血浆中去甲肾上腺素(norepinephrine,NE).结果 各组大鼠实验前收缩压差异无统计学意义(F=0.008,P＞0.05),随着实验时间延长,各间歇低氧组大鼠收缩压逐渐升高,4周开始明显高于UD组、对照组及CH组(均P＜0.05)且血压水平与低氧程度正相关(F =9.844,P＜0.01),IH1组明显高于IH3组(P＜0.05),而对照组和CH组无明显改变.各间歇低氧组大鼠血浆NE随实验时间延长而逐渐升高,8周时明显高于UD组、SC组及CH组(均P＜0.05或P＜0.01),且NE水平与低氧程度正相关(F=11.537,P＜0.01),IH1组明显高于IH3组(P＜0.05),SC组和CH组大鼠血浆NE变化不显著.大鼠血浆NE与血压呈显著正相关(r=0.538,P＜0.01).结论 CIH作用可以引起大鼠血压增高和交感活性增强且存在明显的低氧程度依赖性和时间过程规律性,推测CIH引起大鼠血压增高可能与交感活性增强相关.     

p38MAPK、CARP在间歇低氧大鼠心肌重塑中的作用

目的 通过构建间歇低氧大鼠模型,检测模型大鼠心肌肥厚指数、心肌组织中p38MAPK、心锚重复蛋白(CARP)蛋白表达量的变化,探讨间歇低氧对心肌重塑的影响.方法 选取健康雄性SD大鼠24只,随机分3组:间歇低氧8周组(IH8)、间歇低氧4周组(IH4)、常氧组(NC)每组8只.测定各组体质量、左心室质量及左室肥厚指数;用免疫组织化学法测定各组心肌组织p38MAPK、CARP蛋白含量,并做HE染色,观察各组心肌组织形态学变化.结果 与NC组大鼠相比,IH4、IH8组大鼠心肌肥厚指数增加,IH8组更为明显(P＜0.05);IH8、IH4组p38MAPK、CARP蛋白表达均较NC组增加,IH8组较IH4组更为明显(P＜0.001);HE染色结果显示IH4、IH8组心肌细胞排列紊乱,IH8组更为明显.结论 间歇低氧与心肌重塑密切相关,p38MAPK通路与CARP的表达上调可能是其发生机制之一.     

间歇低氧对大鼠胰岛素抵抗及骨骼肌细胞GLUT4、Akt2的影响

目的 检测不同间歇低氧暴露时间对骨骼肌葡萄糖转运蛋白(GLUT)4与蛋白激酶B(PKB/Akt)2表达的影响,探讨二者在间歇低氧导致胰岛素抵抗中的作用.方法 选取健康雄性Sprague-Dawley大鼠40只,按照随机数字表法分为5组:常氧对照组(NC组),间歇低氧2周组(IH2组),间歇低氧4周组(IH4组),间歇低氧6周组(IH6组),间歇低氧8周组(IH8组),每组8只.IH2组、IH4组、IH6组、IH8组每天给予8h间歇低氧暴露(9:00～17:00),NC组室内环境正常饲养.检测各组空腹血糖和空腹胰岛素水平,计算稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR).采用免疫组织化学法检测大鼠骨骼肌GLUT4及Akt2蛋白的表达,蛋白表达量用平均灰度值表示,并分析GLUT4与Akt2的相关性.结果 与NC组相比,IH2组、IH4组、IH6组、IH8组空腹血糖、HOMA-IR升高,骨骼肌GLUT4与Akt2灰度值升高,并且随间歇低氧暴露时间的延长而升高明显(F =87.67～288.63,P均＜0.05);与NC组相比,IH2组、IH4组、IH6组、IH8组空腹胰岛素升高,其中IH2组、IH4组、IH6组,随间歇低氧暴露时间的延长而升高明显,IH8组较IH6组下降(F=86.04,P＜0.01).Pearson相关分析显示GLUT4与Akt2的表达呈正相关(r=0.895,P ＜0.05).结论 随着间歇低氧暴露时间的延长胰岛素抵抗程度增加,GLUT4与Akt2蛋白表达水平下降,二者在间歇低氧导致胰岛素抵抗的过程中起协同作用.     

间歇低氧对大鼠肝脏GSK-3及mTOR表达的影响

目的 测定间歇低氧大鼠肝脏糖原合成酶激酶-3(GSK-3)及哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达,观察间歇低氧对胰岛素信号转导通路的影响.方法 将24只健康雄性Sprague-Dawley大鼠按照随机数字表法分成间歇空气组(NC组)、间歇低氧4周组(IH4组)、间歇低氧8周组(IH8组),每组8只.于上午9:00至下午5:00将IH4组及IH8组暴露于间歇低氧舱内,NC组则给予间歇压缩空气.检测各组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素(FINS),并以稳态模型评估-胰岛素敏感指数(HOMA-IS)及稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)评价胰岛素抵抗;免疫组化法测定大鼠肝脏GSK-3及mTOR的表达,以平均灰度值评价二者的蛋白表达量.结果 与NC组相比,IH4组、IH8组HOMA-IS降低,空腹血糖、FINS、HOMA-IR升高,以IH8组更为显著(F值分别为62.52,100.37,68.90,8549,P均＜0.01);与NC组相比,IH4组、IH8组GSK-3及mTOR蛋白表达均升高,以IH8组更明显(F值分别为72.25,148.01,P均＜0.01).Pearson相关分析显示GSK-3、mTOR平均灰度值与HOMA-IS呈正相关(r =0.786,0.811,P均＜0.01),与HOMA-IR呈负相关(r=-0.882,-0.889,P均＜0.01).结论 间歇低氧暴露使大鼠肝脏GSK-3、mTOR表达增加,从而引起胰岛素抵抗.     

间歇低氧大鼠肝细胞GLUT-2、GCK表达与胰岛素抵抗的相关性研究

目的 检测葡萄糖转运蛋白-2(GLUT-2)、葡萄糖激酶(GCK)在间歇低氧大鼠模型肝细胞中表达的变化,探讨间歇低氧引起胰岛素抵抗的相关机制.方法 24只6周龄健康雄性SpragueDawley(SD)大鼠按照随机数字表法分为对照组、间歇低氧4周组(IH4组)和间歇低氧8周组(IH8组),每组8只.间歇低氧组按预设通气模式每天给予间歇低氧暴露8h,对照组给予间歇压缩空气,暴露时间同IH4组.实验结束后测定各组大鼠空腹血糖、空腹胰岛素,计算稳态模型评估-胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及胰岛素敏感性指数(ISI).免疫组织化学染色观察肝细胞GLUT-2、GCK蛋白表达变化,并利用平均灰度值对蛋白进行定量分析.结果 与对照组相比,IH4组及IH8组空腹血糖、空腹胰岛素、HOMA-IR均升高,ISI均降低,且IH8组更明显(F=161.92、51.46、126.99、83.87,P均＜0.05).与对照组相比,IH4组及I-H8组肝细胞GLUT-2、GCK蛋白表达均降低,且IH8组更显著(F=184.91、240.85,P均＜0.05).Pearson相关分析显示,GLUT-2、GCK平均灰度值与ISI呈负相关(r=-0.886、-0.906,P均＜0.05),与HOMA-tR呈正相关(r=0.894、0.869,P均＜0.05).结论 间歇低氧暴露使大鼠肝细胞GLUT-2、GCK蛋白表达下调,可能参与间歇低氧条件下胰岛素抵抗的发生.     

不同频率间歇低氧大鼠心脏炎症状态及抗氧化干预的研究

目的 通过观察不同间歇低氧(intermittent hypoxia,IH)模式下和抗氧化干预后大鼠心肌组织炎症标志物白介素6(IL-6)、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和C反应蛋白(CRP)水平的变化,探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(OSAHS)与心血管疾病的联系和影响机制,以及抗氧化剂4-羟基-2,2,6,6-四甲基哌啶(Tempol)的干预作用.方法 48只成年雄性Wistar大鼠采用随机排列表法分为6组,包括4个不同频率IH组(IH1组、IH2组、IH3组、IH4组)、1个持续常氧对照组(SC组)及1个Tempol干预组(IH3T组),每组8只大鼠.各组分别给予相应的低氧暴露,暴露6周后处死大鼠,立即分离心脏.采用酶联免疫吸附法测定心肌组织匀浆CRP、IL-6、IL-8及TNF-α水平.结果 ①所有IH组大鼠的心肌组织炎症标志物CRP、TNF-α、IL-8水平均高于SC组(P＜0.05).各IH组组间比较显示,低氧频率较高的IH3和IH4组的IL-6、CRP、TNF-α、IL-8水平高于低氧频率较低的IH1和IH2组(P＜0.05),提示随着低氧程度的加重,这4种炎症标志物水平也不断升高.②IH3T组的IL-6、IL-8、TNF-α及CRP水平仍然高于SC组(P＜0.05),但是与IH3组相比,其IL-8、TNF-α及CRP水平降低(P＜0.05).结论 ①慢性IH程度是影响大鼠心肌组织炎症标志物IL-6、IL-8、TNF-α及CRP水平的重要因素,其水平可随低氧程度的加重而升高,提示OSAHS可能是一个慢性炎症过程,炎症因子在OSAHS合并心血管疾病的发生发展中起着重要作用.②经Tempol干预后,IH大鼠心肌组织炎症标志物IL-6、IL-8、TNF-α及CRP水平有不同程度的下降,表明抗氧化干预能缓解IH所致氧化应激对大鼠心肌组织带来的损害,但并不能完全逆转这种损害.     

间歇低氧程度与频率对血管内皮细胞超氧化物歧化酶和丙二醛分泌水平的影响

目的 探讨不同程度和频率间歇低氧对人血管内皮细胞超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)分泌水平的影响.方法 采用人脐静脉内皮细胞(ECV304细胞株)建立细胞模型.实验细胞株分为间歇正常氧组和间歇低氧(IH)组,根据低氧程度设立3个亚组:轻度低氧组、中度低氧组和重度低氧组,根据低氧频率不同设立5个亚组.分别以不同程度和不同频率间歇低氧环境暴露细胞,采用酶联免疫法测定细胞胚基中SOD和MDA水平.结果 不同程度间歇低氧组中MDA水平均高于间歇正常氧组(P＜0.01),随低氧程度增加呈逐渐升高(P＜0.01).SOD水平在3个不同程度IH组均低于间歇正常氧组(P＜0.01),SOD随IH程度减低逐渐下降(P＜0.01).SOD水平在IH频率为40和20次/h之间差异无统计学意义(P＞0.05),随IH频率降低,SOD水平逐渐降低,至9.2次/h达到最高,至6.3次/h再次下降(P＜0.01).MDA水平在IH频率为40次/h与20次/h间差异无统计学意义(P＞0.05),之后随IH频率降低,MDA水平逐渐升高,至9.2次/h达到最低,至6.3次/h再次轻度上升(P＜0.01).正常氧与3个不同程度IH组,SOD与MDA均值呈负相关(r=0.932,P＜0.01).不同频率IH暴露,5个不同频率IH组SOD与MDA均值呈负相关(r=0.832,P＜0.01).结论 间歇低氧暴露人脐动脉内皮细胞氧化应激反应增强,抗氧化能力减低,其减低和增高具有低氧程度依赖性.不同频率间歇低氧暴露,脐动脉上皮细胞氧化应激反应增强,抗氧化能力减低随频率减低逐渐增强和减低的趋势.低氧程度对氧化应激反应的影响高于频率,间歇低氧暴露上皮细胞出现氧化和抗氧化平衡的失调.

Abstract：

Objective To investigate the effect of different degrees and frequencies of intermittent hypoxia on levels of superoxide dismutase(SOD)and malondialdehyde(MDA)in vascular endothelial cells.Methods Umbilical vein endothelial cell ECV304 was used to set up the cell model.The experiment consisted of 1 control group(normal air)and 8 experimental groups,in which the cells were exposed to 3 different degrees and 5 different frequencies of intermittent hypoxia.The levels of SOD and MDA were measured by ELISA in cytoblastema.ResulIs The levels of MDA in the 3 different degree intermittent hypoxia groups were higher than that in the control group(P＜0.01)The levels of SOD in the 3 different degree hypoxia groups were lower than that in the control group(P＜0.01).The level of SOD decreased and the level of MDA increased with decreasing degrees of hypoxia(P＜0.01).The level of MDA was not different between the groups with hypoxia for 40 times/h and 20 times/h(P＞0.05).With decreased hypoxia frequency,the level of MDA increased;the MDA level of the 9.2 times/h subgroup was the lowest, but the level of MDA increased slightly when the frequency reached 6.3 times/h(P＜0.01).When hypoxia frequency decreased.the level of SOD decreased,and the level of the 9.2 times/h group was the highest,but the level of SOD decreased again when the hypoxia frequency reached 6.3 times/h(P＜0.01).The level of SOD was negatively correlated to that of MDA under different degrees of hypoxia exposure(r= 0.932,P＜0.01).and the level of SOD was negatively correlated to that of MDA under difierent frequencies of exposure(r=0.832,P＜0.01).Conclusion Intermittent hypoxia activates oxidative stress in endothelial cells,leading to increase of reactive oxygen species,with the antioxidant capacity impaired.The decrease and increase of oxidative stress reaction depended on the degree of hypoxia and were correlated to the frequency of hypoxia.With exposure to intermittent hypoxia,the balalice between oxidative stress and antioxidative system in endothelial cells was disturbed.     

不同频率间歇低氧暴露后兔颈动脉体的炎症状态和窦神经传入活性

目的 建立不同间歇低氧/再氧合(IH/ROX)模式家兔颈动脉体在体模型,探讨不同频率IH/ROX暴露后家兔颈动脉体的炎症状态、内皮素水平和颈动脉体窦神经传入活性. 方法 49只成年雄性大耳白家兔(2.5～3.0 kg)分为7组,每组7只,分离右侧颈总动脉和右窦神经,窦神经去包膜显露髓鞘,游离化学感受性神经细束记录窦神经传入活性.结扎近心端,远心端内插入导管,经程控蠕动泵交替灌注以发泡法预平衡的低氧灌注液和(或)正常氧灌注液,在右侧颈总动脉内模拟睡眠呼吸暂停模式IH/ROX暴露条件或持续低氧条件.按灌注频率分组为:间歇正常氧组(21%0:,15 s;21%02,1 min 45 s)、10次/h组(21%02,5 min 45 s)、30次/h组(21%02,1 min 45 s)、50次/h组(21%02,57 s)、60次/h组(21%02,45 s)、90次/h组(21%02,25 s),均反复灌注60次;持续低氧组:间歇正常灌注1 h 45 min,随后给予5%O2持续15 min.静置30 min,采集窦神经传入活性频率(Charge F),游离收集右侧颈动脉体,酶联免疫吸附法(ELISA法)测定颈动脉体裂解液中白细胞介素-6(IL-6)、内皮素-1、低氧诱导因子-1(HIF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)浓度并标准化.整体比较时采用单因素方差分析,配对比较用Tamhane T2法. 结果 随着间歇正常氧频率增加,IL-6、内皮素-1和Charge F整体均数呈现出先升后降趋势(F=25 601.39,2390.48,6945.84,均P＜0.05),50/hr组IL-6、内皮素-1和Charge F水平均高于其余各组.且Charge F与IL-6和内皮素-1相关(r=0.736,0.757,均P＜0.05);而组间IL-6、内皮素-1和Charge F水平差异不明显.随着间歇低氧频率增加,HIF-1水平逐渐增加(F=5241.10,P＜0.01),持续低氧组HIF-1水平最高.VEGF水平呈现出先升后降再升趋势(F=5931.30,P＜0.05),持续低氧组VEGF水平增加最明显. 结论 IH/ROX暴露后颈动脉体窦神经传入活性明显增强并与颈动脉体炎症和血管收缩密切相关,颈动脉体的炎症来源于再氧合时段而非来源于间歇低氧时段,这一过程受到IH/ROX频率的影响.随着IH/ROX频率的不断增加,颈动脉体炎症状态、内皮素水平和窦神经长期易化先是逐渐增加,而后再逐渐下降.15 min的持续低氧未造成明确的炎性损伤,而HIF-1和VEGF是IH/ROX适应性通道成员.     

间歇低氧大鼠脂肪因子chemerin的表达与糖脂代谢关系研究

目的通过检测间歇低氧大鼠血清chemerin的表达水平,探讨脂肪因子chemerin在OSAHS相关糖脂代谢紊乱中的作用。方法选取健康雄性Wistar大鼠24只随机分4组:常氧+普通饮食组(NC+ND组)、常氧+高脂饮食组(NC+HFD组)、间歇低氧+普通饮食组(IH+ND组)、间歇低氧+高脂饮食组(IH+HFD组)。ND组给予基础饲料喂养,HFD组予以高脂饲料喂养。IH组暴露于8h/d的间歇低氧环境中,同时NC组给予间歇压缩空气。检测大鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FPG)、空腹胰岛素(FINS)水平,用稳态模型胰岛素抵抗指数(IRI)及胰岛素敏感指数(ISI)系统评价胰岛素抵抗,ELISA法检测大鼠血清chemerin的表达。结果与NC+ND组比较,IH+ND组大鼠FPG、FINS、IRI、TC、TG、LDL-C升高有统计学意义(P0.01);IH+HFD组大鼠血清FPG、TC、LDL-C水平高于IH+ND组,血清FINS、IRI水平高于NC+HFD组,差异均有统计学意义(P0.05)。与NC+ND组比较,IH+ND组大鼠血清chemerin水平升高有统计学意义(P0.01);IH+HFD组大鼠血清chemerin水平高于IH+ND组和NC+HFD组,差异均有统计学意义(P0.01)。Pearson分析显示:IH组大鼠血清chemerin与FPG(r=0.751,P0.01)、FINS(r=0.764,P0.01)、IRI(r=0.765,P0.01)、TC(r=0.791,P0.01)、LDL-C(r=0.818,P0.01)呈正相关,与ISI(r=-0.692,P0.01)呈负相关。结论间歇低氧大鼠存在血糖、血脂代谢紊乱,且间歇低氧合并高脂饮食时,大鼠糖脂代谢紊乱更为严重;间歇低氧大鼠血清chemerin水平有升高趋势,合并高脂饮食时这种趋势更为显著;血清chemerin水平变化与糖脂代谢紊乱相关,脂肪因子chemerin可作为OSAHS相关糖脂代谢紊乱的预测因子之一。     

间歇缺氧大鼠海马神经元凋亡及其机制

目的探讨间歇缺氧对大鼠海马组织氧化应激状态及海马神经元凋亡的影响及其可能的机制。方法将36只雄性Wistar大鼠随机分为间歇缺氧组、持续缺氧组和正常对照组，每组12只。采用化学比色法测定海马组织丙二醛和超氧化物歧化酶（SOD）水平，应用Western免疫印迹法检测海马CA1区磷酸化C—JUN氨基末端激酶（p-JNK）、磷酸化c-jun（p-c-jun）的表达水平，应用缺口末端标记（TUNEL）法检测海马CA1区神经元凋亡率。结果间歇缺氧组大鼠海马CAl区丙二醛水平为（1．61±0．39）nmol／mg蛋白，显著高于正常对照组的[（1．25±0．29）nmol／mg蛋白]和持续缺氧组的[（1．34±0．24）nmol／mg蛋白]；间歇缺氧组大鼠海马CAl区SOD水平为（45±13）NU／mg蛋白，显著低于正常对照组[（58±12）NU／mg蛋白]和持续缺氧组[（56±10）NU／mg蛋白]；持续缺氧组与正常对照组的差异均无统计学意义。间歇缺氧组p-JNK、p—c-jun表达显著增高，分别是正常对照组的2．1倍及2．3倍；间歇缺氧组海马CA1区神经元凋亡率为（0．30±0．16）％，显著高于正常对照组[（0．12±0．07）％]和持续缺氧组[（0．17±0．09）]。结论间歇缺氧可导致海马CA1区氧化应激状态，从而激活JNK信号传导通路，介导海马神经元凋亡，这可能是阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征患者神经功能障碍的病理生理基础之一。【     

还原型辅酶Ⅱ氧化酶抑制剂对慢性间歇缺氧大鼠血压的影响及相关机制

目的 探讨还原型辅酶Ⅱ(NADPH)氧化酶抑制剂罗布麻宁对慢性间歇缺氧(CIH)模型大鼠血压可能的影响及相关作用机制.方法 使用随机数字表法将30只雄性SD大鼠分为健康对照组、CIH组及罗布麻宁治疗组,每组10只.采用气囊加压法测定大鼠尾动脉收缩压,应用实时PCR检测外周血单核细胞NADPH氧化酶亚基p22phox的mRNA表达,并用Western blot检测胸主动脉组织匀浆中p22phox蛋白的表达,采用比色法测定胸主动脉组织匀浆中一氧化氮及超氧阴离子含量,采用化学比色法测定大鼠外周血丙二醛及超氧化物歧化酶(SOD)水平.各组均数之间比较采用单因素方差分析,组内两两比较采用SNK-q检验.结果 CIH组p22phox mRNA(2.85±0.47)及其蛋白(0.63±0.15)的表达明显高于健康对照组(2.26±0.48,0.27 ±0.13,q值分别为3.202、6.522,均P＜0.05),罗布麻宁治疗组p22phox mRNA(2.75±0.50)及其蛋白(0.57±0.16)的表达与CIH组比较两组无明显差异,但治疗后可显著逆转由慢性间歇缺氧导致的丙二醛、超氧阴离子及尾动脉收缩压的升高以及SOD和一氧化氮水平的降低.结论 NADPH氧化酶亚基p22phox的过度表达在慢性间歇缺氧导致的高血压发生过程中起重要作用,这可能是OSAHS患者并发高血压的病理生理基础之一;抑制NADPH氧化酶的活性可能对OSAHS合并高血压的治疗有一定积极的意义.     

不同程度慢性间歇低氧诱发大鼠高血压发病过程中血管内皮功能改变的作用

目的 通过观察不同程度慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)诱发大鼠高血压过程血管活性物质水平动态变化,来探讨CIH诱发高血压发生过程中血管内皮功能改变的作用及在不同程度CIH之间差异性.方法 将168只Wistar大鼠随机分为零暴露组(UD)、不同程度间歇低氧组(重度:IH1...     

重度间歇低氧大鼠学习记忆功能与氧化应激的关系

目的 通过建立重度间歇低氧动物模型,探讨OSAHS大鼠学习记忆功能与氧化应激的关系.方法 成年雄性Wistar大鼠48只,体重(170±10)g,采用随机数字法分为5％间歇性低氧组和对照组,每组又分为2、4、6和8周时间组,每组6只,其中实验组给予5％间歇低氧,并分别在2、4、6、8周进行Morris水迷宫检测学习记忆功能,随后处死大鼠,取脑组织于透射电子显微镜下观察海马区超微结构的变化,通过化学比色法测定海马组织超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛水平.结果 与对照组比较,实验组大鼠水迷宫测试大鼠逃避潜伏期时间延长、跨越目标象限时间缩短、穿台次数减少,与对照组相比差异具有统计学意义(P＜0.05);随着间歇低氧持续时间延长,实验组各时间点学习功能的改变差异组间比较差异均有统计学意义(均P＜0.05).对照组大鼠海马组织于电子显微镜下神经元结构完整,细胞器丰富,而实验组大鼠海马组织的神经元和突触数量明显减少,细胞核皱缩,突触结构模糊,突触间隙增宽,且随着暴露时间的延长,细胞损伤改变愈加明显.与对照组比较,实验组海马组织丙二醛含量明显增高,而SOD活性降低,且随间歇低氧时间延长其变化更为明显,差异有统计学意义(均P＜0.05).结论 间歇重度低氧大鼠海马组织存在氧化应激损伤,可能通过引起神经元及突触数量与结构的改变,从而导致学习记忆功能障碍,且随着缺氧时间的延长逐渐加重.     

不同低氧状态下大鼠颞叶皮层Kir4.1表达的变化及其意义

目的 本研究旨在通过探究不同的低氧模式对大鼠颞叶皮层Kir4.1表达量的影响,以揭开OSAHS与癫痫内在联系的分子机制.方法 将16只8周龄的健康SD雄性大鼠随机分为四组:正常对照组(normal control,NC),持续低氧组(continuous hypoxia,CH),间歇低氧组(intermittent hypoxia,IH),间歇低氧伴高二氧化碳组(intermittent hypoxia with hypercapnia,IHH),每组4只,使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测颞叶皮层Kir4.1 mRNA的表达量,比较4组大鼠Kir4.1 mRNA表达量的差异.结果 CH组、IH组、IHH组颞叶皮层Kir4.1 mRNA表达量分别为0.53±0.12,0.35±0.19,0.69±0.05,均低于NC组(0.96±0.17),差异有统计学意义(CH vs NC,P＜0.01;IHvsNC,P＜0.01;IHHvsNC,P＜0.05).结论 不同的低氧模式均可以下调Kir4.1的表达,其中以间歇低氧的影响最为显著,这可能是OSAHS与癫痫相关的一个内在机制,其具体的信号通路还有待进一步的研究.     

慢性间歇低氧对大鼠糖代谢及肝脏 TRB3、P-AKT 表达的影响

目的：通过建立慢性间歇低氧(chronic intermittent hypoxia,CIH)大鼠模型,观察CIH 对大鼠糖代谢的影响以及肝脏胰岛素相关信号通路 Tribbles 同源蛋白3(TRB3)、磷酸化蛋白激酶 B (P-AKT)的变化。方法将40只健康雄性 SD 大鼠随机分为5组,每组8只。正常对照组(NC组)、慢性间歇 低 氧 2 周 组(CIH2组)、慢 性 间 歇 低 氧 4 周 组(CIH4组)、慢性间歇低氧6周组(CIH6组)、慢性间歇低氧8周组(CIH8组),实验组每天给予8 h 间歇低氧处理。实验结束后检测5组大鼠空腹血糖,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测空腹胰岛素,用稳态模型胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)系统评价胰岛素抵抗。采用 HE 染色观察各组肝脏组织形态变化,SABC 法免疫组织化学试剂盒检测大鼠肝细胞 TRB3蛋白以及胰岛素信号通路中关键激酶蛋白激酶 B (AKT)磷酸化水平蛋白的表达,以平均灰度值表示 TRB3、P-AKT 的蛋白表达量。结果随着间歇低氧暴露时间延长,各组与 NC 组比较,其空腹血糖水平(F =116.185,P <0.05)、胰岛素水平(F =45.189,P <0.05)、HOMA-IR (F =110.876,P <0.05)、TRB3蛋白表达水平(F =11 5.253,P <0.05)升高,而 P-AKT 蛋 白 表 达 水 平(F =99.553,P <0.05) 降 低,且以 CIH8组 最 为 显 著 (P <0.05)。Pearson 相关分析显示： HMOA-IR 与 TRB3平均灰度值呈负相关(r =-0.828,P <0.05),与P-AKT平均灰度值呈正相关(r =0.903,P <0.05)。结论 CIH 可导致大鼠肝细胞受损,糖代谢异常,发生胰岛素抵抗,并随着间歇低氧暴露时间的延长,胰岛素抵抗程度加重。CIH 使肝脏中 TRB3蛋白表达增加,P-AKT 显著降低,且与 HOMA-IR 具有明显的相关性,TRB3的激活可能在 CIH 所致的糖代谢异常中起重要作用。