磁微粒化学发光法检测乙型肝炎6项血清标志物关键性能指标验证

目的对磁微粒化学发光法检测乙型肝炎6项血清标志物[乙型肝炎表面抗原(HBs Ag)、乙型肝炎表面抗体(HBs Ab)、乙型肝炎e抗原(HBe Ag)、乙型肝炎e抗体(HBe Ab)、乙型肝炎核心抗体(HBc Ab)、乙型肝炎前S1抗原(PreS1Ag)]的关键性能指标进行验证。方法参照相关标准,对磁微粒化学发光法检测乙型肝炎6项血清标志物的精密度、线性范围、临床可报告范围、参考区间和检出限进行验证,并比较检测系统使用前、后的样本周转时间(TAT)。结果磁微粒化学发光法检测乙型肝炎6项血清标志物的实验室内变异系数(CV)、批内s(重复性不精密度)和实验室内不精密度均低于标准规定范围。HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、PreS1Ag的临床可报告范围分别为0.01～400.00 IU/mL、0.57～1 948.90 mIU/mL、0.01～203.36 PEIU/mL、0.02～17.24 PEIU/mL、0.20～79.23 PEIU/mL和0.58～246.13 AU/mL,与厂商提供的临床可报告范围接近。参考区间验证通过,可使用厂商提供的参考区间。检测5份与厂家声明的检出限(LOD)水平相当的样本,所有检测结果均大于厂家声明的空白限(LOB),LOD验证通过。与使用免疫流水线前的TAT比较,使用免疫流水线后的TAT明显缩短(P0.000 1)。结论磁微粒化学发光法检测乙型肝炎6项血清标志物的关键性能指标均符合临床要求。使用免疫流水线后TAT明显缩短。     

Anytest 2000TRF检测乙肝两对半的性能验证

目的验证Anytest 2000 TRF时间分辨荧光免疫分析仪检测乙肝两对半(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb)的性能。方法对该仪器精密度、正确度、线性范围、生物参考区间及分析的灵敏度进行评估,并与厂家提供参考标准进行比较。结果该仪器HBsAg、HBsAb精密度CV均15%;HBeAg、HBeAb、HBcAb精密度CV均20%;检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb标准品低值和高值的在厂家提供标准品范围内,正确度验证通过;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb线性范围a值均在1±0.05范围内,相关系数r均≥0.975;检测我室所选20个参考个体HBsAg值均为0ng/ml,HBeAg值均为0PEIU/ml,HBsAb10m IU/ml,HBeAb0.2PEIU/ml,HBcAb0.9PEIU/ml;HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb分析的灵敏度(检测低限)值分别小于0.2ng/ml、5m IU/ml、0.5PEIU/ml、0.1PEIU/ml、0.5PEIU/ml。结论 Anytest2000TRF五个性能参数符合标准,满足临床需要。     

胶乳免疫比浊法检测肌酸激酶同工酶的性能评价

目的采用胶乳免疫比浊法对肌酸激酶同工酶(CK-MB)进行测定,以验证其性能是否满足厂家声明和临床诊断的要求。方法依据美国临床实验室标准化协会文件和卫生行业标准要求,对CK-MB的功能灵敏度、精密度、分析测量范围、临床可报告范围、生物参考区间和抗干扰能力进行验证评价,并与传统的化学发光法结果进行比较。结果验证后CK-MB功能灵敏度为1.30ng/mL。高、低浓度质控品的批内不精密度分别为1.05%、2.24%,日间不精密度分别为1.41%、2.88%。分析CK-MB检测范围为3.07～185.67ng/mL,临床可报告范围为1.30～1 485.36ng/mL,生物参考区间为0～5ng/mL。当标本血红蛋白≤15g/L,三酰甘油≤11.4mmol/L,胆红素≤684μmol/L时,对CK-MB检测结果无明显干扰。胶乳免疫比浊法与化学发光法总体符合率为88.0%,线性回归方程为Y=0.882 5 X-0.397 4,r2=0.985,相关性良好。结论在贝克曼库尔特AU5800全自动生化分析仪上采用胶乳免疫比浊法检测CK-MB的性能达到厂家声明,并且可满足临床需求。     

时间分辨荧光法检测乙型肝炎病毒血清标志物的检出限探讨

目的确立时间分辨荧光方法检测血清乙型肝炎病毒(乙肝)表面抗原(HBsAg)、乙肝表面抗体(HBsAb)、乙肝e抗原(HBeAg)、乙肝e抗体(HBeAb)以及乙肝核心抗体(HBcAb)(俗称乙肝两对半)的检出限(LOD),以指导其检测结果的合理解释与应用。方法参考美国临床检验标准化委员会(CLSI)EP17-A文件提供的方案和相关文献,建立实验室时间分辨荧光分析仪检测血清乙肝两对半的空白限(LOB)及LOD。结果时间分辨荧光分析仪检测血清乙肝两对半中HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的LOB分别为0.042 5ng/mL、0.500 5mIU/mL、0.000PEIU/mL、0.997DRU/mL、0.091DRU/mL;LOD分别为0.163ng/mL、1.203 mIU/mL、0.401PEIU/mL、1.756DRU/mL、0.350DRU/mL。结论时间分辨荧光方法检测血清乙肝两对半,均有较低的检出限,可较敏感地检出血清乙肝两对半中的各项抗原及抗体,早期指导临床对乙型肝炎病毒感染的诊断、疗效的观察及预后的判断。     

β-人绒毛膜促性腺激素光激化学发光免疫分析方法的建立

目的建立一种检测人血清β-人绒毛膜促性腺激素（β-HCG）浓度的光激化学发光免疫分析方法。方法采用2株针对不同抗原表位的抗β-HCG抗体,其中一株抗体用来包被发光微粒,另一株抗体标记生物素,以双抗体夹心法检测人血清中的β-HCG浓度,并与Beckman-Coulter公司试剂（化学发光法）进行比较。结果发光微粒浓度为100μg/mL、生物素标记抗体浓度为7μg/mL时,检测范围为0~1 000 mIU/mL,灵敏度为0.16 mIU/mL,平均回收率为100.3%,批内变异系数（CV）为0.80%~3.99%,批间CV为2.25%,与TSH、FSH和LH的交叉反应率低,稳定性较好,与化学发光法的符合率好（r=0.99）。结论光激化学发光免疫分析方法测定β-HCG具有较高灵敏度、精密度和准确性,与化学发光法的符合率较好,适用于临床测定。     

1 010例乙型肝炎病毒血清标志物检测结果分析

目的 分析用化学发光微粒子免疫分析（CMIA）技术检测的乙肝两对半的模式特征。方法 用Architect i2000 SR全自动化学发光免疫分析仪对1010例血清标本进行乙肝两对半的定量检测，对于检测发现的少见模式（“1235”、“1245”、“1345”、“12345”）的38例标本再用ELISA法检测作对比分析。结果 CMIA法定量检测结果共15种模式，常见模式以“145”、“135”、“245”、“25”、“2”及全阴为主。ELISA法检测结果：少见模式中的“1345”主要表现为“145”；“1245”模式主要表现为“145”、“245”；“1235”模式主要表现为“135”；“12345”模式共2例，均表现为“15”。结论 乙肝两对半表现模式较为复杂，CMIA技术检测乙肝两对半的灵敏度、速度和自动化程度均较高。是目前临床检查乙肝两对半的较好方法。     

LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D分析性能评估

目的 对LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D的检测性能进行验证和评估,以确定是否满足临床检测要求.方法 依据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP5-A2文件评价精密度,依据EP17-A文件验证分析灵敏度和功能灵敏度,依据EP6-A文件评估线性范围和临床可报告范围,依据C28-A2文件验证参考区间.结果 精密度实验结果表明批内精密度为5.23%,总精密度为6.57%,在厂家提供的数据(批内精密度5.50%、总精密度12.90%)范围内,可以接受.灵敏度实验证实化学发光法测定25-羟基维生素D的分析灵敏度为2.5 ng/mL,功能灵敏度为3.0 ng/mL,与厂家提供的数据(仅提供功能灵敏度4.0 ng/mL)比较,差异无统计学意义,可以满足临床需要.线性实验结果表明线性范围为6～131 ng/mL,临床可报告范围为3～262 ng/mL,涵盖了健康者和绝大多数患者,可以满足临床需要.结论 LIAISON全自动化学发光仪测定25-羟基维生素D在精密度、分析灵敏度、功能灵敏度、线性范围、临床可报告范围等性能参数上均符合要求,可以应用于临床检测.     

血清催乳素光激化学发光法的建立及性能评价

目的基于光激化学发光技术平台初步建立血清催乳素(PRL)的分析方法,并评估其性能指标。方法将发光纳米微球和生物素分别标记于一对人PRL单抗,两者与血清中待检PRL、链霉亲合素标记的感光微球(通用感光溶液)在均相条件下形成双抗体夹心的检测体系,对该检测体系的性能指标和相关性进行评价。结果本方法的批内变异系数和日间变异系数分别为4.60%和5.25%;功能灵敏度为2.48μIU/mL,可报告范围为2.48～4 240μIU/mL;回收试验加入浓度为42.2、424、4 240μIU/mL PRL标准品时的回收率为96.25%～102.93%;胆红素20 mg/dL、血红蛋白200 mg/dL、三酰甘油3 000 mg/dL、生物素20 ng/mL时,均无干扰现象发生;该方法与贝克曼Unicel Dxi 800 Access 2增强化学发光酶免疫分析法具有良好的相关性。结论光激化学发光法检测血清PRL的方法具有良好的分析性能,可满足临床诊断需求。     

磁微粒化学发光法检测儿童IGF-1的方法学性能评价

目的对AutoLumo A2000检测系统应用磁微粒化学发光法检测IGF-1的分析性能进行评价。方法参考美国临床实验室标准化协会(CLSI)系列文件,制定方法学评价方案,通过AutoLumo A2000检测系统测定IGF-1的灵敏度、精密度、线性范围、回收实验和参考区间。结果低、高值混合血清分析内精密度CV分别为6.31%和5.65%,分析间精密度CV分别为6.46%和8.09%,灵敏度为5.81ng/mL,回收率为105.70%,线性相关系数为0.9929,参考区间偏差为-4.54%。结论 AutoLumo A2000检测系统测定IGF-1的方法学性能良好,能够满足临床检测的需要。     

乙型肝炎定量HBsAg阳性样本HBV-DNA与HBeAg定量值分析

目的：对696例同时检测HBV血清标志物和HBV‐DNA定量检测的结果进行回顾分析。方法HBV血清标志物采用免疫光激化学发光法;HBV‐DNA采用荧光聚合酶链式反应（PCR）技术。结果乙肝e抗原（HBeAg）阴性组中不同HBV‐DNA定量阳性率分别为56％、28％、13％、3％;HBeAg阳性组中不同HBV‐DNA定量阳性率分别为31％、19％、15％、35％;HBeAg定量值分析中当HBeAg≥65PEIU/mL时,随着HBV‐DNA检测拷贝数增大其构成比逐渐增大;当HBeAg＜65PEIU/mL时,随着HBV‐DNA检测拷贝数增大其构成比逐渐减少。结论单纯以HbeAg的转换和HBV‐DNA定量的变化来判断乙肝病毒复制与非复制状态存在一定局限性。     

人促卵泡激素酶催化化学发光免疫分析检测试剂的研发

目的利用化学发光免疫分析技术来开发人血清促卵泡激素(hFSH)的检测试剂,并对该试剂的各项指标进行评价。方法双抗夹心法检测人血清中的促卵泡激素的含量。结果人血清中hFSH的检测范围是1～150mIU/mL,灵敏度是0.25mIU/mL,批内和批间的精密度小于15%。与人黄体生成素(hLH),人促甲状腺素(hTSH)和人绒毛膜促性腺激素(HCG)的交叉率分别是0.2%、0.18%和0.035%。30份血清样本的测量值与进口试剂比对的相关系数是0.955。结论基于化学发光开发的免疫诊断试剂的各项指标符合要求。     

甲胎蛋白和游离β-绒毛膜促性腺激素双标记时间分辨荧光免疫滤纸干血片测定试剂盒的性能评价

目的 对研制的甲胎蛋白（AFP）和游离β人绒毛膜促性腺激素（fβ-hCG）双标记时间分辨荧光免疫分析（TRFIA）滤纸干血片测定试剂盒进行性能评价.方法 应用TRFIA法检测滤纸干血片中AFP和fβ-hCG的含量,并对干血片检测方法的精密度、分析灵敏度、特异性、Hook 效应等进行评价,与同类试剂盒进行方法学比对试验.结果 待评价试剂盒AFP和fβ-hCG的剂量-反应曲线线性相关系数（r）可达0.99以上;批内、批间CV（%）均小于10.0%;AFP和fβ-hCG的灵敏度均不高于1.5 U/mL和2.0 ng/mL;与同类试剂比对,AFP和fβ-hCG结果的线性r均可达0.99以上;临床研究评价一致程度百分比可达100%.结论 待评价试剂盒具有灵敏度高,精密度好,特异性强,样本需求量少的优点;与同类产品检测结果相关性好,能满足临床需要.     

乙型肝炎e抗体定量在慢性乙型肝炎中的临床研究

目的探讨乙型肝炎(简称乙肝)病毒e抗体在慢性乙肝中的临床价值。方法采用时间分辨免疫荧光分析法(TR-FIA),对494例慢性乙肝的标志物(HBV M)定量检测,对HBsAg发生变化了的慢性乙肝患者采用荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)定量检测HBV DNA载量。结果 494例慢性乙肝e抗体阳性者常见的HBV M有5种模式,以"HBsAg>0.2 ng/mL、抗-HBe>0.2 PEIU/mL、抗-HBc>0.9 PEIU/mL、抗-HBs<10 mIU/mL、HBeAg<0.5 PEIU/mL"模式为主(74.7%),其次为"HB-sAg<0.2 ng/mL、抗-HBs<10 mIU/mL、HBeAg<0.5 PEIU/mL、抗-HBe>0.2 PEIU/mL、抗-HBc>0.9 PEIU/mL"模式(18.1%);两种模式中,抗-HBe与HBsAg定量值各组差异无统计学意义(P>0.2),但抗-HBe定量与HBsAg的阳性率各组差异有统计学意义(χ2=29.86,P<0.01);持续高含量的抗-HBe,HBsAg发生变化的概率明显升高,HBsAg变化值与HBV DNA变化值呈正相关(r=0.784,P<0.01)。结论慢性乙肝在"HBsAg<0.2 ng/mL、抗-HBs<10 mIU/mL、抗-HBe>2.0 PEIU/mL"时,提示有低含量HBsAg或隐匿性乙型肝炎的可能性;同时,在"HBsAg<10 mIU/mL、抗-HBe>2.0 PEIU/mL"的慢性乙肝发生活化可能性大。因此,对慢性乙肝抗-HBe定量持续很高的患者密切观察,及时给予干预性治疗显得非常重要。     

血清心肌肌钙蛋白Ⅰ光激化学发光免疫测定法的建立

目的采用光激化学发光免疫测定法（LICLIA）建立血清心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTnI）的定量检测方法。方法使用2株特异性的cTnI单克隆抗体,一株包被发光微粒,另一株进行生物素化,与包被有链霉亲合素的感光微粒共同构成检测试剂,优化检测条件并评价检测性能。结果方法的分析灵敏度为0.05 ng/mL,在1.10～29.36 ng/mL范围内线性良好。批内和日间变异系数（CV）分别为4.89%～5.93%和6.76%～8.96%。cTnI浓度为161 ng/mL时方法无Hook效应。与Biocheck cTnI酶联免疫吸附试验（ELISA）具有较好的相关性（r=0.964）。结论血清cTnI的LICLIA定量检测方法的建立有助于急性心肌梗死诊断试剂盒的研制。     

电化学发光免疫分析仪检测TSH的性能验证

目的验证Roche Cobas e411电化学发光免疫分析仪的系统性能。方法以促甲状腺激素(TSH)检测为例,参考美国临床实验室标准化协会(NCCLS)文件,制定了一套实验方法验证方案,对方法的精密度、正确度、线性范围、分析灵敏度、干扰能力、参考范围等方面进行验证。结果批内不精密度(CV)1.44%～1.84%、批间CV2.01%～2.44%;正确度相对偏倚为4.60%～4.73%;分析灵敏度0.017μIU/mL;线性范围0.017～92.04μIU/mL;干扰:血红蛋白小于或等于24.00mg/mL、三酰甘油小于或等于4.2mg/mL、总胆红素小于或等于0.50mg/mL;参考范围0.27～4.21μIU/mL。结论 Roche Cobas e411精密度好、分析灵敏度高、线性范围宽、正确度高,其参考区间大致与厂家提供的一致;各项验证指标均符合厂家提供的要求,验证全部通过。     

时间分辨荧光免疫法乙型肝炎病毒e抗原定量测定试剂盒的研制与性能评价

目的 对自研时间分辨荧光免疫法(TRFIA)乙型肝炎病毒e抗原(HBeAg)定量测定试剂盒进行性能评价.方法 2株单克隆抗体分别用于固相包被和铕标记,固相双抗体夹心二步分析法检测人血清HBeAg,并对自研试剂盒线性范围、精密度、分析灵敏度、特异度等进行评价,与对照试剂盒平行检测1 020例样本,检验结果采用线性回归分析,一致性采用Kappa检验.结果 自研试剂盒线性范围为0.60～160 NCU/mL,相关系数达0.99,批内和批间变异系数均小于10%,灵敏度达0.05 NCU/mL,检测国家标准物质或自制参考品的效价比为0.90～1.10,检测国家参考品符合国家的质量检定标准,37 ℃恒温箱烘烤6 d后检测性能无明显改变,与同类试剂检测结果线性相关系数达0.95,临床研究试验总符合率达100%,Kappa指数为1.结论 自研试剂盒精密度好、灵敏度高、准确性好、线性范围宽、符合率高,可取代对照试剂盒,值得推广应用.     

IFCC促甲状腺激素国际溯源和检测一致性系列研究

目的考察迈瑞促甲状腺激素(TSH)测定试剂盒(化学发光免疫分析法)精密度、最低检测限、功能灵敏度、抗类似物干扰、抗内源性干扰和校准一致性等性能。确认各项性能均符合国际临床化学甲状腺功能检测标准化委员会(IFCC)促甲状腺激素一致性研究的基本要求。方法参照相关EP文件等性能评估指导,使用迈瑞全自动化学发光免疫检测系统CL2000i,对TSH试剂盒的最低检测限、功能灵敏度、线性、抗类似物干扰、抗内源性物质干扰、精密度以及校准一致性进行测试。结果最低检测限为0.001 5μIU/mL,功能灵敏度为0.013μIU/mL,在0~98.95μIU/mL范围内梯度稀释,线性相关系数r=0.999。终浓度500mIU/mL的促黄体生成素、500mIU/mL的促卵泡生成素及200 000mIU/mL的人绒毛膜促性腺激素分别加入TSH空白校准品(C_0)中,TSH测定结果均不大于0.2μIU/mL。三酰甘油(1 800mg/dL)、胆红素(10mg/dL)、血红蛋白(500mg/dL)或人血清清蛋白(10g/dL)对TSH测试结果的干扰介于-6.91%~8.60%。使用两个浓度水平的质控和3个浓度水平的血清样本测得TSH总不精密度介于3.24%~5.34%。使用两个浓度水平的质控测得校准一致性介于-6.58%~5.26%。结论迈瑞全自动化学发光免疫检测系统CL2000i测定TSH的基础性能均满足行业标准,具备进行IFCC国际溯源和检测一致性评估的条件。     

Axceed 260检测系统精密度和正确度性能验证

目的评价Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析系统测定前列腺特异抗原(PSA)、游离前列腺特异性抗原(fPSA)、甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)的精密度和正确度,以验证其厂家声明的检测系统性能。方法利用CLSI EP15-A3《用户对精密度的验证和偏倚的评估-批准指南第3版》对Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪进行一系列肿瘤标志物检测,分析其系统精密度和偏倚。以高、中、低3个水平浓度伯乐质控371、372、373作为精密度和正确度验证标本,采用Axceed260对4项肿瘤标志物检测项目进行测定,每份标本重复测定5次,持续5d,收集有效数据排除离群值,计算4项肿瘤标志物检测试剂盒的重复性、实验室内不精密度、正确度验证区间,并与厂家提供的指标比较,如果实验室数值低于厂商数值或精密度验证上限,则精密度验证通过,如果测量结果平均值在正确度验证区间内则正确度验证通过。结果在该实验条件下,Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪的精密度和偏倚与厂商声明的性能一致。测定PSA、fPSA、AFP、CEA 4个项目的371重复性分别为3.15%、4.21%、4.26%、2.20%,实验室内不精密度分别为3.15%、4.45%、4.26%、5.01%;测定372的重复性分别为4.95%、4.62%、5.64%、0.96%,实验室内不精密度分别为4.95%、5.07%、8.68%、1.70%;测定373的重复性分别为2.03%、2.10%、2.85%、0.89%,实验室内不精密度分别为2.29%、3.14%、4.05%、1.77%。与同厂家的对应指标(重复性6.25%,实验室内不精密度12.5%)相比精密度验证通过。正确度验证中,测定371时,PSA、fPSA、AFP、CEA的均值分别为0.83ng/mL、0.41ng/mL、2.48ng/mL、21.40ng/mL,偏倚验证区间分别是0.01~1.59ng/mL、0~0.95ng/mL、0.92~3.66ng/mL、14.42~23.38ng/mL;测定372时,PSA、fPSA、AFP、CEA的均值分别为3.19ng/mL、2.24ng/mL、15.8ng/mL、115.47ng/mL,偏倚验证区间分别是1.62~4.84ng/mL、0.72~3.12ng/mL、11.45~18.35ng/mL、104.51~125.49ng/mL;测定373时,PSA、fPSA、AFP、CEA的均值分别为18.0ng/mL、10.6ng/mL、34.7ng/mL、230.6ng/mL,偏倚验证区间分别是14.8~22.4ng/mL、8.74~14.46ng/mL、25.87~34.93ng/mL、229.61~260.39ng/mL;全部项目的测定结果均值均在验证区间内,通过正确度验证。结论运用CLSI EP15-A3标准指南评价Axceed 260磁微粒全自动化学发光免疫分析仪检测4项肿瘤标志物的精密度及正确度性能,均通过验证,EP15-A3提供了一种简便的精密度和正确度验证方案,可较好的应用于临床肿瘤标志物检测性能的验证中。     

应用CLSI EP15-A2文件评价BNP和NT-proBNP测定的精密度性能

目的评价西门子ADVIA Centaur化学发光免疫系统检测B型利钠肽(BNP)和罗氏Cobas E601检测N末端B型利钠肽原(NT-proBNP)的精密度性能。方法使用美国临床与实验室标准化协会(CLSI)EP15-A2文件,选用5个不同浓度的BNP和NT-proBNP样本,每个样本每天批内重复测定4次,持续5天,计算批内不精密度(批内CV)和总不精密度(总CV),并与厂商声明的不精密度进行比较。结果 BNP浓度为30.6、70.3、452.2、1069.4、1736.8pg/mL时批内CV分别为2.3%、1.7%、1.8%、1.3%、1.1%,总CV分别为3.5%、3.2%、2.7%、2.6%、2.3%,均低于厂家声明的不精密度;NT-proBNP浓度为72.9、123.9、466.8、2123.9、4322.0pg/mL时批内CV分别为2.2%、1.3%、1.9%、1.2%、1.1%,总CV分别为2.9%、1.9%、2.3%、1.8%、1.5%,NT-proBNP浓度为72.9pg/mL时的不精密度虽高于厂商声明的不精密度,但小于经计算得到的验证值,说明与厂家声明的不精密度无差异,其他浓度均低于厂家声明的不精密度。结论化学发光免疫法测定BNP和电化学发光免疫法测定NT-proBNP测定的精密度性能良好,可满足临床要求。应用EP15-A2文件验证厂商声明的不精密度性能操作简便,经济实用。     

牛奶过敏单组分特异性IgG4抗体光激化学发光定量检测方法的建立和评价

目的建立并评价基于光激化学发光分析(LICA)平台的牛奶过敏单组分(Bos d 5)特异性IgG_4抗体(sIgG_4)定量检测方法(sIgG_4-LICA)。方法以生物素标记的Bos d 5抗原、待检血清、抗人IgG_4抗体包被的发光微球和链霉亲合素包被的感光微球组成分析体系,基于LICA平台,采用间接法模式,建立Bos d 5 sIgG_4抗体定量检测方法(sIgG_4-LICA),并对其进行条件优化和性能评价。结果 sIgG_4-LICA方法的批内精密度、日间精密度和批间精密度分别为1.78%～3.13%、6.65%～8.41%和7.94%～12.30%,功能灵敏度为4.71 ng/mL,线性范围为28.13～1 800 ng/mL,线性回归方程为Y=0.98X-1.31(r~2=0.997),最大稀释度为1∶64,血红蛋白、三酰甘油、总胆红素、抗坏血酸及生物素的干扰率为-6.38%～8.60%。结论本研究建立的Bos d 5 sIgG_4抗体定量检测方法性能良好,可满足临床监测sIgG_4抗体的需要。