微重力对血管内皮细胞生物学特性的影响

微重力状态下,人体将表现出一系列的心血管去适应性反应.由于血管内皮细胞是血管壁最重要的组成部分,因此血管内皮细胞生物学特性的改变将与去适也性反应直接相关.研究微重力状态下血管内皮细胞生物学特性的改变对预防和治疗航天员心血管的去适应性反应尤为重要.     

微重力对血管内皮细胞生物学特性的影响

微重力状态下,人体将表现出一系列的心血管去适应性反应.由于血管内皮细胞是血管壁最重要的组成部分,因此血管内皮细胞生物学特性的改变将与去适也性反应直接相关.研究微重力状态下血管内皮细胞生物学特性的改变对预防和治疗航天员心血管的去适应性反应尤为重要.     

微重力对血管内皮细胞生物学特性的影响

微重力状态下,人体将表现出一系列的心血管去适应性反应.由于血管内皮细胞是血管壁最重要的组成部分,因此血管内皮细胞生物学特性的改变将与去适也性反应直接相关.研究微重力状态下血管内皮细胞生物学特性的改变对预防和治疗航天员心血管的去适应性反应尤为重要.     

剪应力对血管内皮细胞与血小板形态功能的影响

１导言近二十年来的研究证实血管内皮不仅是机体重要的屏障和半透膜 ,而且还是机体重要的代谢和内分泌器官。血管内皮细胞 (ＶａｓｃｕｌａｒＥｎｄｏｔｈｅｌｉａｌＣｅｌｌｓ,ＶＥＣ)可以合成和释放几十种生物活性物质 ,在抗血栓形成、止血、物质转运、血管张力调节等方面起重要作用 ;在循环系统局部稳态维持、机体自身防病机制中扮演了非常重要的角色。而一直作用于内皮的血液流动剪应力对内皮细胞 (ＥＣ)形态及功能的改变起重要作用。本文从剪应力依赖的ＥＣ功能及其影响剪切诱导血小板聚集 (ＳｈｅａｒＩｎｄｕｃｅｄＰｌａｔｅｌｅｔ…     

血小板激活因子对内皮细胞形态参数影响的计算机量分析

利用具有大容量、高运算速度和高分辨率的计算机图像分析系统建立量分析内皮细胞面积、形状因子、细胞间距及细胞间空隙面积占细胞单层面积百分比的软件，并分析血小板激活因子对ＥＣ形态参数的影响。结果表明，对照组ＥＣ相互连接紧密，细胞间隙较窄。ＰＡＦ作用６０ｍｉｎ，细胞明显回缩，膜表面有很多粗细不等的突起，细胞间隙增大。计算机定量分析表明，ＰＡＦ（１０＾８ｍｏｌ／Ｌ）作用１０ｍｉｎ，就可使细胞间距和细胞间空隙     

冠心病患者血小板,内皮细胞功能测定的临床意义

近年研究表明,内皮细胞损伤、血小板活化是冠心病、动脉硬化发生、发展的关键过程。由血小板产生的收缩血管和促进血小板聚集的物质TXA_2和近年发现的血小板X-颗粒膜蛋白(GMP140)与由内皮细胞(EC)介导生成的内皮舒张物PGI_2、内皮收缩因子ET、和纤溶系统一对关键活性物质组织纤溶酶原激活物TPA、TPA的抑制物PAI等共同维持着血小板聚集性、血管紧张度和纤溶的平衡。本文通过对35例冠心病患者血浆KPAF_(1α)、TXB_2、GMP-140、ET、TPA、PAI的测定,探讨冠心病的血小板、内皮细胞功能的临床意义,现报告如下。     

模拟微重力效应对骨细胞SOC通道功能的影响

目的探究模拟微重力效应下骨细胞钙池操纵Ca~(2+)通道(store-operated calcium channels,SOC)的活性变化以及其可能机制,阐明失重性骨丢失的发生机制。方法以小鼠骨细胞(MLO-Y4)为对象,分为回转模拟微重力效应组(simulated microgravity, SM)和正常重力组(control, CON)。分别旋转培养24、48 h后,激光共聚焦显微镜检测毒胡萝卜素引发细胞内质网钙库耗竭后胞内Ca~(2+)浓度水平,以反映SOC通道的活性;免疫荧光染色法观察膜骨架spectrin和内质网膜蛋白IP_3R的分布情况,研究SOC通道功能变化的可能机制。结果在内质网钙库释放Ca~(2+)时期,24、48 h SM组的胞内Ca~(2+)浓度水平与CON组相比均无显著差异,而在胞外Ca~(2+)经SOC通道内流时期,24 h SM组只在前4 min比CON组有显著性下降,48 h SM组在整个时期均比CON组有显著性下降。与CON组相比,SM组膜骨架spectrin向细胞边缘聚集,而ER膜蛋白IP_3R则向ER核被膜区域聚集,且48 h组更为显著。结论模拟微重力效应可抑制骨细胞SOC通道活性。骨细胞膜骨架spectrin以及内质网膜上蛋白IP_3R位置分布变化,可能影响SOC通道激活过程中蛋白间的构象耦合,进而降低骨细胞SOC通道的活性。     

血小板激活因子对内皮细胞形态参数影响的计算机定量分析

利用具有大容量、高运算速度和高分辨率的计算机图像分析系统建立定量分析内皮细胞(endothelial cell,EC)面积、形状因子、细胞间距及细胞间空隙面积占细胞单层面积百分比的软件,并分析血小板激活因子(platelet activating factor,PAF)对EC形态参数的影响。结果表明,对照组EC相互连接紧密,细胞间隙较窄。PAF作用60min,细胞明显回缩,膜表面有很多粗细不等的突起,细胞间隙增大。计算机定量分析表明,PAF(10~-?mol/L)作用10min,就可使细胞间距和细胞间空隙面积占细胞单层面积百分比增大,30min细胞面积减小,形状因子增大,证明细胞发生了回缩,这可能是PAF增加血管壁通透性的重要机制。计算机图像分析有助于迅速、准确地定量测定EC形态变化,为研究EC在血管屏障中的作用提供了新方法。     

模拟微重力条件对神经细胞分泌功能的影响

目的分析微重力条件下和正常重力条件下神经细胞培养的上清液中蛋白质表达的差异。方法用旋转细胞培养系统提供的微重力环境进行神经细胞微重力培养。应用表面增强激光解吸离子化（SELDI）蛋白质芯片技术检测微重力和正常重力条件下神经细胞培养上清液的蛋白质谱。用PBSII—C型蛋白质芯片阅读机读取数据,采用Ciphergen Protein Chip3．2．1软件分析数据。结果WCX2两种蛋白芯片共捕获246个蛋白峰,发现14个差异蛋白。与正常重力培养组蛋白谱相比,11个蛋白在微重力培养后高表达,3个蛋白在微重力培养后低表达。结论微重力条件下和正常重力条件下神经细胞培养的上清液中存在差异蛋白表达,这些差异蛋白为进一步了解失重对神经细胞的影响提供了重要线索。     

模拟微重力对人脐静脉内皮细胞血管生成素产生的影响

目的探讨模拟微重力对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）生成血管生成素（ANG）的影响。方法培养HUVEC，分为模拟微重力组、地面静止对照组及剪切力对照组，在培养第24h、48h、72h和96h分别收集培养上清液，用ELISA方法检测ANG的浓度变化；固定一部分细胞，应用免疫细胞化学方法检测ANG在HUVEC中的表达情况。结果无论是应用ELISA方法检测上清液中的ANG，还是应用免疫细胞化学的方法检测ANG在细胞内的表达，均发现与地面静止及剪切力对照组相比，模拟微重力组HUVEC的ANG生成增加（P〈0．05）。结论应用回转器模拟微重力能促进体外培养的HUVEC生成ANG。     

Effects of simulated microgravity on proliferation and chemosensitivity in malignant glioma cells

A three-dimensional (3D) clinostat is a device for generating multidirectional G force, resulting in an environment with an average of 10⁻³ G. We cultured human malignant glioma cell lines in a 3D-clinostat (CL group) and examined the growth properties and chemosensitivity of the cells compared to cells cultured under normal 1G conditions (C group). The growth rate was significantly inhibited in the CL group, but without cell cycle change. Mitochondrial activity was also inhibited in the CL group. Thus, inhibition of malignant glioma proliferation occurred that could be attributed to deceleration of mitosis. Chemosensitivity to cisplatin (cis-diamminedichloroplatinum(II), CDDP) in the CL group was significantly enhanced compared to the C group. This method has significant potential as a treatment of malignant gliomas and a tool for understanding developmental biology.     

模拟微重力对NIH3T3细胞近日节律基因的影响

目的:研究模拟微重力对NIH3T3细胞近日节律基因表达水平的影响。方法:NIH3T3细胞按照模拟微重力的天数分为5组,RT-PCR检测节律基因mRNA的相对表达水平。结果:实验结果显示五组样品Per1、Per2、Cry1、Bmal1、Clock的相对表达水平存在显著性差异。Per1和Per2基因mRNA的相对表达水平在模拟微重力的第2天、第3天较0天显著升高(P0.05),Per2、Cry1和Clock基因mRNA的相对表达水平在模拟微重力的第4天较其他四组显著降低(P0.05)。结论:近日节律基因的相对表达水平在模拟微重力第2、3天升高,第4天后降低。模拟微重力影响近日节律基因的表达且具有时间依赖性。     

内皮细胞源性IL—8对人树突状细胞作用的研究

目的：探讨内皮源性白细胞介素－８（ＩＬ－８）对人树突状细胞（ＤＣ）的作用。方法：用ＴＮＦ－α分别诱导内皮细胞和单核细胞产生ＩＬ－８,并将这２种不同来源的ＩＬ－８分别加入ＤＣ常规诱导培养的早期（第３天）及后期（第７天）,培养至第９天收获细胞。采用流式细胞术（ＦＣＭ）分析ＤＣ的表型;体外混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）测定ＤＣ刺激Ｔ细胞增殖能力;ＥＬＩＳＡ检测培养上清中ＩＬ－１２的含量;ＰＩ染色观察ＤＣ凋亡。结果：在ＤＣ培养的早期（第３天）加入内皮源性ＩＬ－８可以抑制ＤＣ的成熟,ＦＣＭ分析表明：ＣＤ１ａ,ＣＤ４０,ＣＤ８０,ＣＤ８３,ＨＬＡ－ＤＲ等ＤＣ表面标志显著下降,而ＣＤ１４表达率明显高于常规培养组。同时,激发同种Ｔ细胞增殖的能力及分泌的ＩＬ－１２量均显著低于常规组（Ｐ〈０．０１）,而加入单核细胞来源的ＩＬ－８则无此     

微重力影响造血干/祖细胞生物学特性及其机制研究进展

造血干/祖细胞具有自我更新、增殖及多向分化的功能,从而使机体维持正常的造血.机体在微重力环境下会出现外周血细胞数量和功能的改变,其中有多方面的原因,而在微重力环境下造血干/祖细胞生物学特性的改变是这一改变的主要因素.对微重力如何影响造血干/祖细胞的迁移、增殖及分化等生物学特性进行了综合评述.     

微重力对干细胞增殖分化影响的研究进展

微重力环境会影响干细胞的生长、增殖和分化。既往的部分研究表明,微重力环境下培养的间充质干细胞的生长速度较正常重力条件下培养更快,其原因可能是细胞团体积的增大。但是有研究指出微重力能够通过影响细胞周期抑制间充质干细胞增殖。在分化方面,微重力能够抑制间充质干细胞的成骨分化,促进其成脂肪分化,但是对其成软骨分化影响仍存争议。有研究者对微重力培养的间充质干细胞进行基因测序提示其成骨分化相关基因表达降低,同时伴有成脂肪分化的基因表达增高。微重力可能通过整合素/丝裂原活化蛋白激酶和PPAR-这两条信号通路抑制干细胞成骨分化作用,而微重力如何影响成软骨分化以及成脂分化的机制仍缺乏相关研究。同时,微重力能够有效地维持间充质干细胞的多能性和自我更新能力。微重力对于间充质干细胞的影响为组织工程的进一步发展提供了探索依据。     

登革病毒对人血管内皮细胞分泌ET-1及PGI2的影响

目的　研究登革病毒感染对人血管内皮细胞分泌重要的血管活性物质ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的影响,以了解登革出血热及登革休克综合征（ＤＨＦＤＳＳ）的发病机制。方法　用登革病毒Ⅱ型,感染人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ） ,于感染后４ 、２４ 、４８ 、７２ 及９６ 小时,分别收集病毒感染上清液,用放射免疫检测法测定ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的含量。结果　登革病毒感染可使ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的能力受到明显抑制。在病毒感染早期（４ 小时）,ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的能力即受到明显抑制。登革病毒对ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 抑制作用强烈而持久,至感染后９６ 小时,ＨＵＶＥＣ分泌ＥＴ１ 的能力与未受感染的阴性对照组比较,差异仍有显著性。然而,登革病毒对ＨＵＶＥＣ 分泌ＰＧＩ２ 的抑制作用,可随时间的推移而减弱,至感染后９６ 小时,ＨＵＶＥＣ分泌ＰＧＩ２ 的能力已达正常水平。结论　登革病毒感染可影响血管内皮细胞分泌血管活性物质ＥＴ１ 及ＰＧＩ２ 的功能,导致血管通透性增加和凝血、止血功能障碍。因此,登革病毒所致的血管内皮细胞功能障碍,可能是ＤＨＦＤＳＳ重要的发病机制     

Alterations in the activity and expression of endothelial NO synthase in aged human endothelial cells

This study was to investigate factors underlying the age-related decrease in NO production in vascular endothelial cells. The age-related changes in NO production, the activity and expression level of eNOS, and eNOS binding proteins, were studied in HUVECs.NO production in HUVECs significantly decreased in an age-dependent manner. The potentiation of NO production by l-Arg was significantly suppressed by L-NIO (eNOS-specific inhibitor) in young HUVECs and was suppressed by 1400W (iNOS-specific inhibitor) in aged HUVECs. The aged HUVECs had lower eNOS protein levels than young cells. eNOS phosphorylation at Ser-1177 (active) decreased gradually from PDL 23 through 40, and eNOS phosphorylation at Thr-495 (inactive) increased in aged cells. Changes of intracellular eNOS binding proteins, such as caveolin-1, pAkt, and Hsp90, as well as interaction between eNOS and eNOS binding proteins, indicated decreasing enzyme activity in aged HUVECs.Aging might decrease the activity as well as expression level of eNOS in HUVECs. And the decrease in eNOS activity probably implicated to the alterations in the regulatory binding proteins. For further study, it needs to be confirmed that the age-related change in the intracellular distribution of eNOS and the relative contribution of eNOS and iNOS on vascular dysfunction in aged endothelial cells.     

Egocentric references and human spatial orientation in microgravity

This article describes the results of the ellipses experiment conducted during the second French-Soviet spaceflight (project Aragatz). The realization of oriented motor tasks, on the basis of internal body representation and without visual feedback, was chosen as a paradigm for studying the determinants of spatial orientation under weightlessness. The process of drawing ellipses in the air, using arm movements with axes parallel or perpendicular to the longitudinal body axis, was studied under normal gravity and in weightlessness, and recorded using a video computer motion-analyzing system (Kinesigraph). On Earth, the experiments were performed in standing and lying positions, and in flight, in the erect position with the feet fixed to the floor. In general, performance of the task in microgravity was not disturbed. Under conditions of spaceflight, the longitudinal ellipse was inclined forward in accordance with the inclination of the whole body relative to the fixed feet. On Earth, the angle between the long axes of longitudinal and transverse ellipses deviated from 90° by 20–30°. The same deviation persisted under microgravity conditions. The distinctive features of ellipses traced by individual subjects were also preserved. It is concluded that an egocentric reference system ensures normal performance of sensorimotor tasks in the absence of a gravitational reference.     

金粉蕨素对甲萘醌损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用

目的: 探讨金粉蕨素对氧化应激损伤人脐静脉内皮细胞的保护作用。方法: 以甲萘醌损伤人脐静脉内皮细胞,作为氧化损伤模型;采用MTT法,测定内皮细胞的生长抑制率;用硝酸还原酶法测定培养液中NO₂^-／NO₃^-含量;以Westernblot方法检测细胞内皮型一氧化氮合酶(eNOS)活性及小凹蛋白(caveolin-1)表达。结果: 金粉蕨素呈剂量依赖性地降低甲萘醌对内皮细胞的生长抑制率,增加培养液中NO₂^-／NO₃^-含量,保护eNOS活性、阻止caveolin-1表达下降。结论: 金粉蕨素可能通过caveolin-1/eNOS通路介导对抗甲萘醌对内皮细胞的氧化损伤作用。