肾疾病肾穿刺活检病理诊断194例分析

目的:探讨肾活检病理诊断对明确肾脏疾病的病因、病变类型、肾脏损害程度及指导临床治疗和预后估计的意义.方法:肾穿刺组织按规定分割,部分石蜡切片,苏木精-伊红(HE)染色及PAS、PASM、Masson特染,个别加做刚果红染色;另部分做免疫荧光,标志物为IgG、IgM、IgA、C1q、C3、C4,少数病例加做FRA、HBV,阳性程度按统一标准判定.结果:肾穿刺活检194例中原发性肾小球肾炎157例(80.93%);继发性肾小球肾炎37例(19.07%).结论:肾穿刺活检病理诊断使临床诊断的修正率约60%,证实病理与临床相结合可提高诊断与治疗的准确性;肾穿刺病理活检是目前诊断肾脏疾病最可靠的方法.     

肾脏三色染色法

肾脏是机体的重要组织器官。肾脏在组织学实验课中也是比较重要的实习内容。为丁让初学音在显微镜下尽快地丁解和掌握肾脏的基本组织结构，我们经过反复实验采用三包染包法显示肾脏组织结构，收到丁比较满意的效果。对照常规HE染色、肾脏三色染包法、色彩鲜艳，肾血管球、近曲小管、远曲小管、髓放线等一目丁然。由于色彩鲜明，便于学生掌握肾脏基本结构、形态分布，现将染色方法介绍如下：     

卵巢切片制作方法体会

目的比较2种固定液,块染和片染,苏木精-伊红(HE)染色和masson染色对家兔卵巢切片制作的影响。方法采用HE整块染色法、HE常规片染法、Masson三色染色法对家兔卵巢切片进行染色,镜检。结果投入Bouin液固定的卵巢组织比10%甲醛液中HE染色法的染色要亮丽,结构分明。结论 Bouin液对组织固定均匀且收缩较小,染色效果艳丽。     

介绍一种改良Masson氏三色染色法

随着目前肾脏穿刺活检标本的不断增多 ,特殊染色Masson氏三色染色对判断免疫复合物沉积有着重要意义 .以往的Masson氏三色染色法操作程序多且染色效果往往不满意、不稳定 .我们根据自己的经验总结出一种简便、效果良好且稳定的改良的Masson三色染色方法 ,并对 1 0 0多例肾脏穿刺活检标本进行染色 ,取得了良好的效果 .现将我们的方法与体会介绍如下 .1　方法1 1　染液的配制丽春红酸性品红液 :丽春红 0 7g ,酸性品红0 3g ,蒸溜水 99mL ,冰醋酸 1mL .磷钼酸水溶液 :磷钼酸 1 g ,蒸溜水 1 0 0mL .亮绿水溶液 :亮绿 1 g ,蒸溜水 99mL ,冰…     

三种胶原纤维染色法评价宫腔粘连的比较

目的比较Masson染色、van Gieson染色、天狼猩红(Sirius red)染色三种胶原纤维染色方法在大鼠宫腔粘连模型中的评价效果。方法取24只成年雌性SD大鼠,暴露两侧子宫,左侧子宫剪开宫腔后使用机械性刮宫的方法损伤大鼠子宫内膜层,然后关腹,制作大鼠宫腔粘连模型。右侧子宫作为对照。术后14 d取材,行HE染色、Masson染色、van Gieson染色、天狼猩红染色,对子宫组织纤维化进行评估。结果刮宫后子宫组织HE染色显示子宫内膜上皮层消失,子宫内膜腺体数量显著减少(P0.01)。三种染色法均能清楚地染出胶原纤维。三种染色方法计算出的纤维化面积比,Masson染色(甲苯胺蓝)高于Masson染色(亮绿)、van Gieson染色和天狼猩红染色(P0.01)。天狼猩红染色法能够在偏振光显微镜下明确区分Ⅰ型和Ⅲ型胶原纤维,Masson及van Gieson染色法则不能区分。结论天狼猩红染色较Masson染色和van Gieson染色能够更好地显示宫腔粘连组织的纤维化程度,并能区分胶原纤维的类型。     

肾脏PASM染色法的改进

目的探讨简单易行的肾脏PASM染色方法。方法调整部分染液,升高染色温度,缩短染色时间。结果改进后的方法能较好地显示出肾小球毛细血管基底膜和毛细血管间质的无细胞性物质及红细胞分布情况。结论能更好地显示出肾脏各种病变特征。     

肾穿刺标本的常规染色制作程序探讨

目的:探讨肾穿刺标本制作技术特点,制订一套较快而稳定的制作程序。方法:对本科室5千多例肾穿活检病例制作的技术和步骤进行比较和总结。结果:本科室5千多例肾穿刺活检标本的冰冻切片,HE切片,PAS,PASM,Masson三色以及刚果红和甲基紫等特殊染色都完全满足病理诊断。结论:本科采用的肾穿刺活体标本制作程序稳定而且较快。     

免疫组化染色、常规特染及组织化学套染技术探讨

<正> 免疫组化技术已日趋普及,随之发展的免疫酶标染色与常规特染及组化染色的套染技术亦屡见报道。我们在纤维组织细胞性肿瘤的组织学、组织化学、超微结构和免疫组化研究中,除制做免疫组化染色外,还需做HE染色、网状纤维、Pollak’s三重染色、弹力纤维染色、普鲁氏蓝铁反应、AB—PAS染色等多种染色。我们取其需要观察的切片,应用免疫酶标的常规ABC法,在其第六步DAB显色后,对上述特染及组织化学套染技术进行了初步探讨,现小结如下。     

Ⅲ、Ⅳ型胶原在人类系膜增生性肾小球肾炎中的作用

将临床确诊为系膜增生性肾小球肾炎(MsPGN)的118例分为轻、中、重3组,从每组中随机抽取10例作为实验组,取3例正常肾组织作为对照组。然后对所选取的33例分别进行光镜图像分析、免疫荧光检查。结果显示:在Masson染色的绿染部分分析结果中,中、重度MsPGN与正常比较有显著性差异(P<0.05),PASM黑染中,重度与正常比较有显著性差异(P<0.05)。间接免疫荧光见Ⅲ型胶原在中、重度MsPGN中出现,Ⅳ型胶原随着病变进展明显增加。以上结果表明,在MsPGN病变过程中Ⅲ、Ⅳ型胶原参与系膜基质扩增及肾小球硬化过程。     

双向电泳两种凝胶染色方法的比较

目的比较肾脏蛋白质双向电泳凝胶银染色法与考马斯亮蓝G-250染色方法的染色效果。方法利用蛋白质固相pH梯度双向电泳技术分离SD大鼠肾脏组织蛋白,应用银染色和考马斯亮蓝G-250染色两种染色方法,及ImageMaster 2D5．0凝胶分析软件对凝胶进行染色分析。结果银染后的可见蛋白点比考马斯亮蓝染色法多,银染色法与考马斯亮蓝染色法平均匹配率为49．42％。结论银染法比考马斯亮蓝染色法的灵敏度高。     

整合素血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa在系膜增殖性肾炎中的表达

目的：观察整合素血小板膜糖蛋白Ⅱb,Ⅲa(GPⅡb,GPⅢa)在人类系膜增殖肾炎（MsPGN)中肾内表达，探讨GPⅡb-Ⅲa在MsPGN的作用。方法：18例肾活检标本均行光镜HE，PAS，PASM Masson染色，电镜及免疫荧光检查，以SABC法测定肾组织中GPⅡb,GPⅢa,P-选择素（P－140），纤维连接蛋白（FN），粘连蛋白（LN）表达与正常对照组分别比较，并行计算机图像分析。结果：PAS阳性物（PAS），PASM阳性物（PASM）及FN，LN明显增生；GPⅡb,GPⅢa,P-140表达上调，肾小球细胞数（n)，平均肾小球体积（AVG）及肾小球硬化指数显著增加，肾小管，间质轻度受损。结论：GPⅡb,GPⅢa在肾小球及肾小管间质表达上调与系膜细胞基质增生，细胞浸润，肾小球硬化相关，可能与肾小球疾病中凝血功能紊乱，血小板在肾脏的致病作用相关。     

整合素血小板膜糖蛋白IIb、IIIa在系膜增殖性肾炎中的表达

目的 :观察整合素血小板膜糖蛋白Ⅱb、Ⅲa(GPⅡb、GPⅢa)在人类系膜增殖肾炎 (MsPGN)中肾内表达 ,探讨GPⅡb Ⅲa在MsPGN的作用。方法 :18例肾活检标本均行光镜HE、PAS、PASM Masson染色 ,电镜及免疫荧光检查 ,以SABC法测定肾组织中GPⅡb、GPⅢa、P 选择素 (P 140 )、纤维连接蛋白 (FN)、粘连蛋白 (LN)表达与正常对照组分别比较 ,并行计算机图像分析。结果 :PAS阳性物 (PAS+ )、PASM阳性物 (PASM+ )及FN、LN明显增生 ;GPⅡb、GPⅢa、P 140表达上调 ;肾小球细胞数 (n)、平均肾小球体积 (AVG)及肾小球硬化指数显著增加 ;肾小管、间质轻度受损。结论 :GPⅡb、GPⅢa在肾小球及肾小管间质表达上调与系膜细胞基质增生、细胞浸润、肾小球硬化相关 ;可能与肾小球疾病中凝血功能紊乱、血小板在肾脏的致病作用相关     

肾淀粉样变性病理分析

目的 研究肾脏淀粉样变病理特点．方法 对我院近年经皮肾活检病理确诊的7例肾淀粉样变患者,均行HE、PAS、PASM、Masson、免疫荧光和刚果红染色,部分患者行轻链染色、高锰酸钾刚果红染色以及电镜检查。结果 7例患者肾小球体积正常或偏大,均存在系膜淀粉样变,4例存在毛刺,4例伴内皮下沉积,3例出现肾小球缺血,3例出现动脉淀粉样变,1例伴间质淀粉样变,刚果红染色均阳性,4／4例高锰酸钾刚果红染色抵抗,其中2／2例X链阳性．结论 肾淀粉样变可累及肾小球、血管、间质,以系膜病变最常见,可伴动脉和间质沉积。肾小球缺血可能与动脉淀粉样变有关。     

青海地区61例肾活检病理与临床分析

目的:探讨肾穿活检的病理、临床意义。方法:对61例肾活检组织进行HE、Masson、PASM光镜观察及免疫荧光镜观察。结果:61例肾脏疾病患者以男性略多(57.37%),患者中以(31~40)岁较多(34.42%)。本组患者病理分型以MsPGN为多(36.06%),其它类型比例较小。结论:肾脏疾病好发于青壮年男性。肾活检资料以原发性肾小球疾病最常见(93.44%),病理类型以MsPGN最多,临床表现以CGN最多。     

Wegener's肉芽肿病的临床病理学分析

目的:探讨Wegener's肉芽肿病的临床病理学特点,提高对本病的认识.方法:分析16例Wegener's肉芽肿病患者的临床资料,采用常规病理技术(HE切片、Masson三色染色、PAS染色、PASM染色)与免疫组织化学EnVisionTM法及电子显微镜相结合的方式,观察其组织病理、免疫病理及超微结构形态特征.结果:16例患者中男性5例,女性11例.平均年龄39.4(18～76)岁.从初发到确诊的时间为0.8～48.0(平均16.5)mo.耳、鼻和咽喉部是病程初期最容易受累的部位,累及耳、鼻和喉部者11例(69%);在初发或在整个病程中肺脏受累者14例(87%);出现肾脏损害者3例(19%).最常见的病理学表现为坏死性肉芽肿性炎和血管炎,并以鼻腔黏膜活检组织中最普遍.肾脏主要病理学改变为灶性肾小球肾炎.肾脏超微结构改变为上皮细胞轻度增生、足突融合,毛细血管内皮细胞轻度增生,内皮下少量电子致密物沉积.结论:Wegener's肉芽肿病最重要的组织病理学特点为坏死性肉芽肿性炎和血管炎.其临床表现复杂,确诊困难,需与多种疾病鉴别.临床表现和病理学变化的密切结合是明确诊断的前提,特别是上呼吸道、肺脏和肾脏病理检查是     

固定剂对肾组织染色的影响

众所周知,组织的正确固定具有重要意义。选择理想的固定剂不仅能保持细胞与生活时的形态相似,成份相仿,而且对染色也有良好的、微妙的助染作用。本文用三种固定剂对人、大鼠肾组织固定后,在 HE,PAS,Masson 及 PASM-Masson 等染色方面进行观察比较,借以探讨不同固定剂对肾组织染色的影响。     

病理半薄切片几种特染及套染的点滴体会

<正> 近年来,病理开展半薄切片先进技术。将各种穿刺组织应用于临床病理诊断,特别是肾穿刺活检组织,它对肾脏疾病的诊断、预后估计及疗效观察有着十分重要的意义。半薄切片主要采用甲基丙酸乙烯丁酯包埋法制出1—2μm薄切片,这种方法的优点切片平整无皱、组织结构完整,特别是肾小球毛细血管清晰可见无挤压较有利于各种染色。本文主要介绍上法特染及套染的几点体会。     

特殊染色及免疫组化双重染色在恒河猴糖尿病模型中的应用

目的 在链脲佐菌素（STZ）诱导恒河猴糖尿病动物模型基础上,用特殊染色、免疫组化双染方法显示胰腺等组织中的特征性病变。方法 健康恒河猴5只,小剂量（30mg/kg）多次静脉注射STZ,濒死状态时将动物安乐死。取胰腺、心脏、肾脏、脾脏、肝脏、眼球、脑等器官制成石蜡切片,用H.E,PAS,masson,天狼星红和甲苯胺蓝等方法进行特殊染色,用免疫组化双重染色法同时显示胰岛A、B细胞。结果 模型动物的胰岛萎缩,数量减少。Masson染色见外分泌部间质内纤维增生。局灶性慢性肾炎,病变区肾间质纤维组织增生,部分肾小球及肾小管萎缩。天狼星红染色见脾脏中央动脉管壁增厚。免疫组化双染见胰岛A胰高血糖素表达增多,胞浆呈棕褐色。B胰岛素表达减少,胞浆粉红色。结论 H.E染色结合特殊染色和免疫组化双重染色可较好地对STZ诱导糖尿病动物模型进行组织学评价。     

Masson三色染色常见问题分析与质量控制

目的 分析Masson三色染色关键缺陷问题,并探讨主要原因及解决方案。方法 选取海军军医大学附属东方肝胆外科医院病理科2020年病理诊断为结节性肝硬化的石蜡标本5 例。将5例石蜡标本连续切片,制成4 μm 厚的切片,分发至各参评医院,进行Masson三色染色,根据评分标准将结果进行定级。结果 本次Masson三色染色室间质量控制测评,共发放切片50张,最终48家医院提交了染色切片。根据2位专家的评分结果,其中甲级片17张,乙级片25张,丙级片4张,丁级片2张。出现常见的染色缺陷主要包括：细胞核淡染,与细胞质对比差;细胞核染色过深而模糊,细胞胞浆呈灰蓝色;细胞质淡染或过深;肌纤维未染色或染成灰色而不是红色;组织结构呈现错误的染色或染色不均匀,如胶原蛋白未着色或整个切片染成蓝色等假象。对上述染色缺陷问题进行分析讨论,提供解决方案。结论 三色染色操作流程中需严格掌握和控制染色过程中的染色温度、染色时间、PH 值、试剂配制及保存等有关细节,才能保证三色染色的质量,保持染色的稳定性和可靠性。     

大鼠5／6肾切除慢性肾衰竭模型的制作

目的：制作大鼠5／6肾切除建立慢性肾衰竭模型。方法：大鼠5／6大部分肾切除诱发慢性肾衰竭,测定血清中肌酐、尿素氮的含量,取肾组织进行Masson染色,评价模型的制作效果。结果：5／6肾切除后大鼠血清中尿素氮（blood urea nitrogen,BUN）、血肌酐（se-rum creatinine,SCR）的含量明显增高,肾脏病理 Masson 染色组织学检查发现肾小球节段性硬化、肾小管萎缩、肾间质节段性纤维化。结论：成功建立大鼠5／6肾切除慢性肾衰竭模型,血液生化指标及形态学符合肾衰竭病理生理特点。