中医药调控Wnt/β-catenin信号通路防治肝纤维化的研究进展

肝纤维化是多种肝脏慢性疾病的共同病理过程,且被认为是肝硬化、肝癌的必经阶段,因此,抗肝纤维化治疗对患者的预后具有重要的现实意义。Wnt/β-catenin信号通路是调控许多肝脏疾病的关键信号通路之一,可通过调控炎症反应、细胞凋亡、氧化应激干预肝纤维化的进程,而靶向干预该通路,如DDK1、Niclosamide、ICG-001、PRI-724、PSH等拮抗剂的长期有效性和负面作用尚未证实。大量研究表明中医药在抗肝纤维化的地位日益受到关注。基于肝纤维化虚实夹杂的中医病因病机,中药以补虚、解毒、化瘀和标本兼治等治法多靶点、多层次调节Wnt/β-catenin信号通路发挥肝保护作用。本文就Wnt/β-catenin通路与肝纤维化的关系阐述中医药延缓肝纤维化的潜在作用,以期为防治肝纤维化提供策略。     

基于Wnt/β-catenin信号通路探讨黑逍遥散对AD模型大鼠神经炎症的影响

目的 研究黑逍遥散是否可以通过调控激活Wnt β-连环蛋白（β-catenin）信号通路抑制阿尔茨海默病（AD）大鼠海马区炎症反应,改善AD大鼠认知和记忆功能障碍。方法 90只雄性Wistar大鼠先随机分别选择12只作为空白组和假手术组,剩余大鼠在左右两侧海马区注射β淀粉样蛋白₄₂（Aβ₄₂）制造AD模型大鼠,随机分为模型组、黑逍遥散低、中、高剂量组和多奈哌齐组,每组12只,并连续42 d给予相应剂量黑逍遥散和多奈哌齐灌胃。尼氏染色观察海马CA1区病理形态学变化;Morris水迷宫实验检测1~5 d大鼠逃避潜伏期的变化,第6天的空间探索能力。酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测大鼠海马组织和血清中白细胞介素-6（IL-6）、白细胞介素-10（IL-10）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测检测海马中海马区糖原合成激酶-3β（GSK-3β）、β-catenin、过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的蛋白表达水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测大鼠GSK-3β、β-catenin、PPARγ mRNA的水平。结果 与空白组比较,模型组大鼠海马CA1区神经元数量明显减少,排布不均,细胞体损坏比较明显,尼式小体不清;模型组大鼠第3~5天的逃避潜伏期均相比治疗组显著延长（P<0.01）,跨台次数显著减少（P<0.01）;模型组大鼠血清和海马组织中IL-10水平显著降低,IL-6、TNF-α水平显著升高（P<0.01）;模型组GSK-3β蛋白和mRNA显著升高,β-catenin、PPARγ蛋白表达显著降低（P<0.01）,差异较为明显;与模型组比较,黑逍遥散中、高剂量组和盐酸多奈哌齐组大鼠神经元细胞数量分布较多,排列整齐,结构完整,尼式小体清晰明确;黑逍遥散中、高剂量组和多奈哌齐组的第3~5天逃避潜伏期显著缩短（P<0.01）,跨越平台次数显著增多（P<0.01）;大鼠海马组织和血清中IL-10的表达水平明显升高,IL-6和TNF-α显著降低（P<0.01）;大鼠海马中GSK-3β蛋白和GSK-3β mRNA表达明显降低,β-catenin、PPARγ蛋白和β-catenin、PPARγ mRNA表达水平显著升高（P<0.01）。盐酸多奈哌齐组与黑逍遥散高剂量组之间各指标比较,差异无统计学意义。结论 黑逍遥散可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路抑制AD大鼠海马区炎症反应,改善AD模型大鼠认知和记忆障碍。     

肝乐颗粒对肝纤维化大鼠TGF-β1/Smad信号通路的调控作用

目的:明确肝乐颗粒对转化生长因子(TGF)-β_1/Smad信号通路的干预作用,探讨其防治肝纤维化的分子学机制。方法:SD大鼠随机分为正常组,模型组,肝乐颗粒(1.5,3.0,6.0 g·kg~(-1))和秋水仙碱(1.0×10~(-4)g·kg~(-1))。采用50%四氯化碳每周2次,连续12周皮下注射的方法,诱导肝纤维化大鼠模型。造模第7周起,给药组分别灌胃给予相应剂量的肝乐颗粒和秋水仙碱,每天1次,连续6周。末次给药8 h后,处置大鼠,取固定部位肝脏组织,苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色观察肝脏病理组织学损伤程度,免疫组化和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测肝组织中Ⅰ型胶原(CollagenⅠ),Smad2,TGF-β_1或TGF-βI型受体(TβRⅠ)蛋白的表达,实时定量荧光PCR(Real-time PCR)检测肝组织中CollagenⅠ,Smad2,TGF-β_1mRNA的表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠肝纤维化损伤程度,肝组织中CollagenⅠ,TGF-β_1,Smad2,TβRⅠ蛋白及mRNA的表达明显增加(P0.01);与模型组比较,肝乐颗粒中、高剂量组不仅可减轻肝组织病理损伤程度,减少胶原沉积,还可显著降低CollagenⅠ,TGF-β_1,Smad2,TβRⅠ蛋白及mRNA的表达(P0.05,P0.01)。结论:肝乐颗粒对肝纤维化大鼠具有一定的保护作用,其机制可能与调控TGF-β_1/Smad信号通路,从而抑制HSC活化,减少细胞外基质过度沉积有关。     

肝豆汤对Wilson病模型铜负荷大鼠肝脏Wnt/β-catenin信号通路的调控作用

目的：探讨肝豆汤对铜负荷大鼠肝脏中分泌型糖蛋白（Wnt）/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路的调控作用及机制。方法：SD大鼠115只随机分为正常组（20只）、造模组。造模组予以1 g·kg^-1·d^-1的硫酸铜饲料及0.02 mL·g^-1·d^-1的0.185%硫酸铜溶液连续喂养12周;造模成功大鼠随机分为模型组（45只）,肝豆汤组（25只）和青霉胺（PCA）组（25只）;模型组、肝豆汤组和PCA组分别予以0.02 mL·g^-1·d^-1生理盐水,0.4 g·kg^-1·d^-1的中药肝豆汤和0.09 g·kg^-1·d^-1青霉胺灌胃,连续4周,末次灌胃后取各组大鼠肝脏组织检测：电感耦合等离子体原子发射光谱法（ICP-AES）检测各组大鼠肝铜含量;苏木素-伊红（HE）染色观察各组大鼠肝脏组织病理改变,免疫组织化学法检测肝脏组织氧化应激相关蛋白的表达,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白的表达水平。结果：ICP-AES法结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏铜含量显著升高（P<0.01）;肝豆汤可降低铜负荷大鼠肝脏铜含量（P<0.05）,PCA可显著降低模型组大鼠肝脏铜含量（P<0.01）;HE染色结果显示,与正常组比较,模型组大鼠肝脏组织镜下可见肝细胞大小不一、排列紊乱,部分肝索丧失;肝豆汤组和PCA组细胞损伤程度较模型组明显降低;免疫组化结果显示：肝豆汤和PCA可显著降低模型组8-羟基脱氧鸟苷（8-Hydroxyguanosine）,硝基酪氨酸（Nitrotyrosine）蛋白表达量（P<0.01）;Western blot结果显示,肝豆汤和PCA可使铜负荷大鼠肝脏内Wnt通路相关蛋白β-连环蛋白（β-catenin）,磷酸化糖原合成激酶3β（glycogen synthase kinase-3,p-GSK3β）,原癌基因（cellular myelocytomatosis oncogene,c-Myc）蛋白表达量显著增加（P<0.01）。结论：肝豆汤可通过促进过量铜排出减轻高铜诱导的肝脏损伤,并通过激活肝脏Wnt/β-catenin信号通路促进损伤的肝组织代偿性自愈以达到减轻高铜诱导氧化应激损伤的治疗效果。     

miRNA-139调控Wnt/β-catenin信号通路探讨建中补肾消癥汤抗肾间质纤维化机制

目的 探讨建中补肾消癥汤在调控miRNA-139作用于Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路以调节肾间质纤维化的作用机制。方法 将120只小鼠随机分为假手术组,UUO组,建中补肾消癥汤低、中、高剂量组,尿毒清组,采用单侧输尿管梗阻（UUO）动物模型。造模术后3 d开始灌胃给药,假手术组,UUO组每天予以等量蒸馏水灌胃,建中补肾消癥汤低、中、高剂量组分别按6,12,24 g·kg^-1·d^-1给予建中补肾消癥汤水溶液灌胃,尿素清组予6.2 g·kg^-1·d^-1给予尿毒清颗粒水溶液灌胃,观察14,21,28 d后小鼠的形态变化,观察小鼠一般体征及梗阻侧肾间质纤维化指数,采用苏木素-伊红（HE）染色及马松（Masson）染色观察肾组织病理形态变化,实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测梗阻侧肾组织中miRNA-139的表达量,蛋白免疫印迹法（Western blot）检测梗阻侧肾组织中β-catenin,纤溶酶原激活物抑制剂-1（PAI-1）的蛋白表达,免疫组化检测梗阻侧肾组织中基质金属蛋白酶-7（MMP-7）蛋白的表达。结果 14,21,28 d后,与假手术组比较,UUO组小鼠β-catenin,PAI-1蛋白表达升高（P<0.05）,miRNA-139,MMP-7蛋白表达降低（P<0.05）,与UUO组比较,经尿毒清组及各中药组治疗后小鼠β-catenin,PAI-1蛋白表达明显降低（P<0.05）,miRNA-139,MMP-7蛋白表达明显升高（P<0.05）,且建中补肾消癥汤高剂量组的疗效优于其他剂量及尿毒清组（P<0.05）。结论 建中补肾消癥汤可能通过对miRNA-139的干预作用,调控Wnt/β-catenin通路起到抗肾纤维作用,达到保护肾功能,延缓慢性肾脏病（CKD）进展的效果。     

柴竭抑肝纤对硫代乙酰胺诱导的大鼠肝纤维化的影响

目的:研究中药复方柴竭抑肝纤(Chaijie Yiganxian,CJYGX)对抗大鼠肝纤维化的作用及其机制。方法:60只SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性组(鳖甲煎丸),CJYGX高、中、低剂量组。除正常组外,其余5组通过腹腔注射硫代乙酰胺(thioacetamide,TAA)诱导建立肝纤维化模型。自造模第4周开始,阳性组给予鳖甲煎丸1 g·kg~(-1)·d-1灌胃,CJYGX高、中、低剂量组分别给予CJYGX 7.96,3.98,1.99 g·kg~(-1)·d-1灌胃,模型组灌服生理盐水,每日灌胃1次,共5周。于末次灌胃24 h后,水合氯醛轻度麻醉大鼠,留取血清及肝组织,称肝脏湿重并计算肝脏指数;全自动分析法检测大鼠肝功能指标丙氨酸氨基转移酶(alanine transaminase,ALT),天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST),碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP);酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肝纤维化血清学标志物层粘连蛋白(laminin,LN),透明质酸酶(hyaluronidase,HA),Ⅳ型胶原(Ⅳcollagen,CⅣ),Ⅲ型前胶原(procollagenⅢ,PCⅢ);马松(Masson)染色观察肝脏纤维化程度;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测肝脏组织转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1),Smad2,Smad3,Smad4,Smad7 mRNA表达;免疫组化检测肝脏组织血小板源性生长因子(platelet derived growth factor,PDGF)和TGF-β1蛋白表达水平;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏TGF-β1和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组肝脏指数显著升高;肝功能指标ALP,AST,ALT的含量显著升高;肝纤维化指标LN,HA,Ⅳ-C,PCⅢ和HYP显著升高; Masson染色观察到肝纤维化程度显著增加; TGF-β1,Smad2,Smad3,Smad4 mRNA表达显著升高,Smad7 mRNA表达显著降低; TGF-β1,PDGF和α-SMA蛋白表达显著升高(P0.01)。与模型组比较,各剂量的CJYGX能不同程度的降低肝功能指标ALP,AST,ALT的水平;肝纤维化指标LN,HA,Ⅳ-C,PCⅢ和HYP都明显的降低; Masson组织观察到肝纤维化程度显著减轻; TGF-β1,Smad2,Smad3,Smad4 mRNA表达明显下调,Smad7 mRNA表达明显上调; TGF-β1,PDGF和α-SMA蛋白表达显著下调(P0.05,P0.01)。结论:中药复方"柴竭抑肝纤"可能通过干预TGF-β1/Smad信号通路,保护TAA诱导的大鼠肝纤维化损伤。     

地五养肝方基于肝肾同源对肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化的影响研究

目的:分析肝肾同源理论下地五养肝方对肝纤维化大鼠肝功能及肝纤维化影响。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠60只,随机数字表法将大鼠分成4组,分别为正常组、模型组、阳性对照组和地五养肝方组,除正常组外,其他各组大鼠制备肝纤维化模型,大鼠首次注射的第2 d起,阳性对照组灌胃0.11mg/kg的秋水仙碱混悬液,地五养肝方组灌胃2.2g/kg的地五养肝方药液,模型组和正常组灌胃等剂量生理盐水,1次/d,连续灌胃8周。观察大鼠肝组织病理形态和肝纤维化程度,ELISA法检测血清肝功能指标和相关细胞因子含量,Western-blot检测大鼠肝组织p-AKT、β-catenin、AKT、p-GSK-3β、GSK-3β蛋白表达。结果:模型组大鼠肝纤维化分级较正常组显著上升,阳性对照组、地五养肝方组大鼠肝纤维化分级较模型组显著下降,差异有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠血清GLB、ALB、TP含量降低,ALT、AST含量升高;和模型组相比,阳性对照组、地五养肝方组大鼠血清GLB、ALB、TP含量升高,ALT、AST含量降低,差异有统计学意义(P0.05);和正常组相比,模型组大鼠肝组织β-catenin、p-GSK-3β及p-AKT蛋白表达升高;和模型组相比,阳性对照组、地五养肝方组大鼠肝组织β-catenin、p-GSK-3β及p-AKT蛋白表达降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:地五养肝方可明显降低大鼠肝纤维程度,其作用机制可能和对Wnt/β-catenin信号通路的活化抑制有联系。     

探讨化纤汤对肺纤维化模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路影响研究

目的β观察化纤汤对肺纤维化(IPF)模型大鼠Wnt/β-catenin信号通路的影响研究。方法β将72只3月龄SPF级雄性SD大鼠采用随机数字表法分为空白对照组、模型组、中药组(高、中、低剂量组)、阳性对照组(吡非尼酮组)6组,每组各12只。通过气管内滴注博来霉素(5mg/kg)制备IPF模型,使用呼吸记录仪采集呼吸功能相关指标数据,HE染色观察肺组织病理结构,免疫印迹检测肺组织中β-连环蛋白(β-catenin)和Wnt3a蛋白的相对表达。结果与空白对照组比较,模型组大鼠呼吸功能明显减弱,HE染色结果显示肺组织结构破坏,纤维化程度严重,肺组织中β-catenin、Wnt3a表达量明显升高(β<0.01);与模型组比较,阳性对照组与高剂量组均能显著改善大鼠呼吸功能,改善肺组织破坏及纤维化样变,降低IPF大鼠肺组织中β-catenin、Wnt3a蛋白表达水平(β<0.05),与阳性对照组相比,高剂量组改善更为明显,差异具有统计学意义(β<0.05)。结论β相对于吡非尼酮治疗,高剂量的化纤汤更能有效改善IPF的症状,降低IPF大鼠的肺组织中β-catenin、Wnt3a的...     

化瘀软肝胶囊对四氯化碳诱导肝纤维化大鼠的作用

目的 探讨化瘀软肝胶囊对肝纤维化大鼠的作用以及对肝组织Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法 将60只大鼠随机分为正常组(10只)和造模组(50只),造模组以CCl₄复合因素造模6周后,随机分为模型组、秋水仙碱组(0.2 mg/kg)和化瘀软肝胶囊低、中、高剂量组(0.27、0.54、1.08 g/kg),各组以相应的药物或生理盐水灌胃6周,每天2次。HE和Masson染色观察大鼠肝组织病理改变,生化法和化学发光法分别检测大鼠血清肝功能(ALT、AST、TG、TBIL)和肝纤维化指标(HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C),RT-qPCR和Western blot法检测大鼠肝组织Wnt1、Wnt3a、Wnt10、GSK-3β、β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达,免疫荧光法检测大鼠肝组织β-catenin和α-SMA蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组肝组织病理损伤,血清ALT、AST、TG、TBIL、HA、LN、PC-Ⅲ、Ⅳ-C水平升高(P<0.01),肝组织Wnt1、Wnt3a、Wnt10、β-catenin、c-Myc mRNA和蛋白表达...     

基于Wnt/β-catenin信号通路的中医药治疗糖尿病肾病的研究进展

糖尿病肾病（DKD）是糖尿病的常见并发症,也是造成终末期肾病的主要原因。其病理机制较为复杂,治疗难度较大,逐渐成为一个全球范围内的重大公共健康问题。DKD的主要病理改变之一是肾小管间质纤维化,临床表现为蛋白尿和肾功能下降,给患者日常生活造成了严重影响。目前临床上西医常用控制血糖血压、减少蛋白尿等方式治疗DKD,但疗效欠佳且存在诸多不良反应。研究表明,中医药（TCM）治疗DKD具有价格低廉、疗效明显、不良反应少等诸多优势,越来越多的DKD研究者将目光投向TCM,国内外相关研究取得了一定进展。Wnt/β-连环蛋白（β-catenin）信号通路较为进化保守,在生物正常发育和整个生命过程中都至关重要。有研究证明,Wnt/β-catenin信号异常激活与肾脏纤维化有关,这与TCM的“络病理论”不谋而合。通过查阅相关文献,对Wnt/β-catenin信号通路概况及其在DKD中的作用,中药单体、单味中药提取物及中药复方通过改善肾小球系膜细胞、肾小管上皮细胞和足细胞损伤等方式来改善肾纤维化治疗DKD的研究现状进行综述,以期为TCM治疗DKD提供新的思路和方向。     

滋阴益气活血复方对糖尿病大鼠血流动力学改变的影响

目的：观察滋阴益气活血复方对糖尿病大鼠肾功能及血流动力学改变的影响,并初步探讨其作用机理。方法：随机把实验动物分成滋阴益气活血复方组、模型组、西药对照组和正常对照组,并观察β2MG、Cr、NOS、ET、BS、尿量等指标。结果：滋阴益气活血复方能有效地降低β2MG的排泄量,降低血Cr(P<0.05);使早期糖尿病大鼠血NOS、EF增高的状态得到改善(P<0.05)。结论：以滋阴益气活血为法对于防治糖尿病肾病具有一定的疗效。其作用机制是通过降低NOS、EF等以改善血液流变学异常,从而改善肾小球的高滤过状态,达到防治糖尿病肾病的目的。     

肾衰灵方作用于SHH信号通路对UUO大鼠肾间质纤维化的影响＊

目的 探讨当代名医国医大师郑新经验方——肾衰灵方对单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠肾间质纤维化的抑制作用。方法 1. 50只雄性SD大鼠随机分为五组：假手术组、模型组、肾衰灵方低剂量组、肾衰灵方中剂量组、肾衰灵方高剂量组。除假手术组，其余各组结扎单侧输尿管建立肾间质纤维化动物模型，肾衰灵方低中高剂量组予肾衰灵方（10、20、30 mg·kg^-1）连续灌胃14天。检测各组大鼠血清肌酐（SCr）、尿素氮（BUN）、谷丙转氨酶（ALT），谷草转氨酶（AST），碱性磷酸酶（ALP），乳酸脱氢酶（LDH）。采用real-time PCR检测结缔生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)核酸水平，采用Masson染色方法检测肾组织观察肾小管和间质病理形态变化。2. 根据结果选择肾衰灵中剂量组为治疗组，再将30只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、肾衰灵方治疗组共3组。用Western blot方法检测音猬因子（Sonic hedgehog，SHH）、神经胶质瘤相关癌基因同源蛋白-1（Glioma related cancer gene homologous proteins 1，Gli1）、锌指转录因子（Snail Family Zinc Finger 1，Snail）蛋白的表达。结果 1.与模型组相比，模型组和肾衰灵各剂量组大鼠血清SCr和BUN的表达水平均明显下调，其中肾衰灵中剂量组疗效最佳（P < 0.05）；Masson染色发现相较模型组，肾衰灵方各剂量组肾间质纤维化明显减轻，其中肾衰灵中剂量组疗效最佳（P < 0.05）；real-time PCR结果发现肾衰灵各剂量组CTGF核酸水平均较模型组下调，其中肾衰灵中剂量组核酸水平最低（P < 0.05）。 2. 相较假手术组，模型组与肾衰灵方组SHH、Gli1、Snai1蛋白的表达均升高（P < 0.05）；与模型组相比，肾衰灵方组SHH、Gli1、Snai1蛋白水平明显降低（P < 0.05）。结论 单侧输尿管梗阻（UUO）大鼠模型中，肾衰灵方可以通过抑制肾间质纤维化改善大鼠肾功能，其作用可能与其阻断SHH信号通路相关。     

益气活血方对糖尿病大鼠p38MAPK通路的影响

目的:观察益气活血方对糖尿病大鼠基于p38丝裂原活化的蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对血管内皮功能受损的综合调节作用机制。方法:采用高脂高糖饮食和应用链脲佐菌素(STZ)建立大鼠糖尿病模型,将大鼠随机分成7组,分别为正常组,模型组,丹蛭降糖胶囊高、中、低剂量组(1.08,0.72,0.54 g·kg-1·d-1),盐酸吡格列酮胶囊组(10 mg·kg-1·d-1),丹蛭降糖胶囊+盐酸吡格列酮胶囊结合组(1.08 g·kg-1·d-1+10 mg·kg-1·d-1)。大鼠造模成功后分别按相应剂量药物ig给予,每日1次,连续8周,后腹主动脉采集血液样本和腹主动脉进行相关检测,蛋白质免疫印迹(Western blot)法测定p38MAPK,上游MAPK激酶3/6(mitogen activated protein kinase kinasse3/6,MKK3/6),下游核转录因子c AMP反应元件结合蛋白1(c AMP response element-bingding protein,CREB1)以及其丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(mitogen-activated protein kinase phosphatase-1,MKP-1)信号蛋白在内皮细胞的蛋白表达量;实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)方法测定单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1),血管内皮细胞抵抗素在血管内皮中的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组p38MAPK,MKK3/6,CREB1蛋白及MCP-1,血管内皮细胞抵抗素mRNA表达水平明显升高(P0.01),MKP-1蛋白表达水平明显降低(P0.01);各给药组p38MAPK,MKK3/6,CREB1蛋白及MCP-1,血管内皮细胞抵抗素mRNA表达水平均明显降低,MKP-1蛋白表达水平均明显升高,与模型组大鼠比较差异均有统计学意义(P0.05)。结论:益气活血方通过调节糖尿病大鼠血管p38MAPK信号通路蛋白表达水平,从而达到降低血管内皮功能损伤的作用。     

黄芪汤对大鼠酒精性肝纤维化的保护作用

目的:探讨黄芪汤对酒精性肝纤维化的保护作用。方法:75只大鼠随机分为3组,对照组,模型组和黄芪汤治疗组。用连续灌服酒精的方法建立大鼠酒精性肝纤维化模型,在造模同时给予治疗组灌服黄芪汤。共12周,之后处死大鼠,取肝组织标本,光镜观察肝脏的病理变化,测定血清一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)、IL-6和ICAM-1表达,及肝脏匀浆一氧化氮(NO)和一氧化氮合酶(NOS)的表达。结果:黄芪汤能减轻酒精性肝纤维化的组织病理改变。酒精性肝纤维化中,血清和肝脏匀浆NO和N 0S,血清IL-6和ICAM-1及其表达增加。结论:黄芪汤可显著抑制NO、NOS和IL-6及ICAM的表达(P<0.01),黄芪汤对酒精性肝纤维化有治疗作用。     

益气软肝方与肝刺激因子对大鼠免疫性肝纤维化保护作用的对照研究

目的：通过与肝刺激因子(HSS)保肝作用的比较，评估益气软肝方(PGSL)对肝纤维化的保护作用。方法：大鼠肝纤维化模型由人血清白蛋白制备。PGSL保护组予PGSL中药汤剂每日两次灌目，HSS保护组同时予HSS每周两次腹腔内注射，共8周。结果：PGSL及HSS均可以降低肝纤维化大鼠的死亡率；肝组织羟脯氨酸测定、大体标本、HE染色、嗜银及VG染色，提示二者均可以降低大鼠肝纤维化的增生程度。上述两个保护组比较均无统计学差异。结论：益气软肝方预防肝纤维化的作用与肝刺激因子相似。     

益气活血利水方治疗冠心病心力衰竭25例

目的:探讨益气活血利水方药治疗冠心病心力衰竭的临床疗效及其作用机制。方法:将50例患者随机分为治疗组与对照组,对照组口服地高辛片、双氢克尿噻、补达秀治疗;治疗组用益气活血利水方药(西洋参、赤芍、厚朴、茯苓、泽泻、黄芪等)。结果:益气活血利水方药可明显改善冠心病心力衰竭患者中医证候、心功能及心力衰竭症状,其改善心功能疗效与对照组相当,但其改善中医证候及心力衰竭症状均优于对照组。提示:本方药的作用机制与在改善心肌缺血、强心、利尿的基础上还能对抗炎症反应、增强心肌自分泌功能有关。     

血府逐瘀汤联合茵栀黄对肝纤维化大鼠的保护作用研究

目的:研究血府逐瘀汤联合茵栀黄对二甲基亚硝胺(DMN)致肝纤维化大鼠的保护作用。方法:将68只雄性SD大鼠按体重随机分为6组:正常对照组、秋水仙碱0. 00 012 g/kg组、血府逐瘀汤8. 0 g/kg组、茵栀黄9. 0 g/kg组、血府逐瘀汤联合茵栀黄组(4. 0 g/kg+4. 5 g/kg),每组10只,模型对照组18只。除正常对照组外,其余各组大鼠均按1. 5 ml/kg腹腔注射0. 5%DMN溶液,隔天1次;造模同时用药组按5 ml/kg灌胃相应体积药物进行干预,共60 d。末次给药后,禁食不禁水16 h,摘除眼球取血,采集肝组织。采用生化法检测血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)以及肝组织中丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性或水平; ELISA法检测血清中层粘连蛋白(LN)、透明质酸(HA)、Ⅲ型前胶原(PCⅢ)以及肝组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)和白介素-1β(IL-1β)的含量; Western blot检测肝组织中转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平;以Masson染色法验证肝组织损伤程度。结果:与正常对照组相比,模型对照组肝组织SOD、GSH-Px活力显著降低,其余检测指标均显著上升(P <0. 01)。与模型对照组相比,除血府逐瘀汤组对血清HA、肝组织MDA、SOD、GSH-Px的含量或活性变化无统计学意义外,其余各给药组,特别是血府逐瘀汤4 g/kg联合茵栀黄4. 5 g/kg组对大鼠肝组织SOD、GSH-Px活性明显增强和其余检测指标的水平降低程度尤为明显(P <0. 05或P <0. 01)。结论:血府逐瘀汤和茵栀黄均对DMN致肝纤维化大鼠具有保护作用,且在剂量减半情况下,联合应用二者的综合疗效优于或与单独应用相当。     

益气除湿活血汤对肥胖大鼠糖、脂代谢的影响

目的:研究中药益气除湿活血汤对肥胖大鼠糖、脂代谢的影响及其分子机制。方法:40只SD大鼠随机分为对照组、肥胖组、肥胖+益气汤组和肥胖+二甲双胍组,每组各10只。以高脂、高糖饲料喂养大鼠12周制备肥胖大鼠模型,对照组大鼠给予基础饲料喂养。肥胖+益气汤组、肥胖+二甲双胍组和肥胖组动物分别给予8周益气除湿活血汤、二甲双胍、生理盐水灌胃处理。测定动物体质量并计算Lee′s指数,取血测定空腹血糖(FBG)及血胆固醇和三酰甘油浓度、胰岛素抵抗指数(IRI)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和脂联素水平。结果:与对照组大鼠相比较,肥胖组大鼠体质量、Lee′s指数、FBG、总胆固醇、三酰甘油和IRI均显著升高(P<0.05,P<0.01),血清脂联素明显降低(P<0.01),TNF-α明显升高(P<0.01)。与肥胖组大鼠相比较,肥胖+二甲双胍组大鼠体质量、Lee′s指数、FBG和IRI明显降低(P<0.05,P<0.01),脂联素水平明显升高(P<0.05);肥胖+益气汤组大鼠体质量、Lee′s指数、FBG、IRI、总胆固醇和三酰甘油明显降低(P<0.05)外,血清TNF-α明显降低,脂联素明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:益气除湿活血汤可改善肥胖大鼠糖、脂代谢紊乱和胰岛素抵抗,此作用可能通过升高血脂联素、降低TNF-α所实现。     

茵陈蒿汤对肝纤维化大鼠肝组织内质网应激caspase-12通路的影响

目的:观察茵陈蒿汤对胆汁瘀积性肝纤维化大鼠肝组织内质网应激caspase-12通路的影响,探讨茵陈蒿汤抗胆汁瘀积性肝纤维的作用机制。方法:将35只SD大鼠分为假手术组和造模组,采用胆总管结扎法复制胆汁瘀积性肝纤维化大鼠模型,1周后将造模组动物分为模型组和中药组,中药组予以3.5 g/kg茵陈蒿汤灌胃,4周后处死动物,HE、Masson染色观察肝脏组织病理学变化;Western blot法检测各组大鼠肝脏GRP78、eIF2α和Caspase-12蛋白表达变化。结果:肝脏组织病理学变化显示模型组大鼠肝纤维化程度较假手术组明显增加(P<0.05),中药组大鼠肝纤维化程度较模型组减轻(P<0.05),但仍重于假手术组。Western blot结果显示,模型组肝脏GRP78、eIF2α和Caspase-12蛋白的表达与假手术组相比显著升高(P<0.01),中药组较模型组eIF2α和Caspase-12明显降低(P<0.01)。结论:抑制eIF2α和Caspase-12的活化,从而减少肝细胞凋亡,进而抑制内质网应激在胆汁瘀积性肝纤维化中的促进作用,是茵陈蒿汤抗胆汁瘀积性肝纤维化的作用机制之一。