多西紫杉醇PLGA/nHA复合微球的制备及体外释放研究

目的 制备多西紫杉醇(DTX)聚乳酸羟基乙酸(PLGA)/纳米羟基磷灰石(nHA)复合微球,研究纳米羟基磷灰石对复合微球的载药量,包封率和体外释放等性质的影响,以及抑制前列腺癌细胞的增长效应.方法 以疏水性抗癌药物多西紫杉醇作为模型药物,采用单乳化溶剂挥发法(S/O/W)制备PLGA/nHA-DTX复合微球,对载药前后的纳米羟基磷灰石进行透射电子显微镜观察和FTIR分析,并采用扫描电镜、激光粒度仪和高效液相色谱对微球的载药量、包封率、粒径及体外释药性质进行研究.结果 FTIR结果 表明纳米羟基磷灰石对多西紫杉醇有较强的吸附作用.PLGA/nHA-DTX复合微球的载药量和包封率分别为3.92%和88.7%,较之单纯的PLGA-DTX微球均有很大的提高.经过体外释放药物突释后,复合微球比单纯PLGA微球的药物释放慢.在第30 d时,复合微球和单纯的PLGA微球累积药物释率放分别为62.40%和72.70%.MTT实验结果 显示PLGA/nHA复合微球对癌细胞增长的抑制效果优于单纯PLGA微球和药物.结论 与单纯的PLGA-DTX微珠相比,由于纳米羟基磷灰石对多西紫杉醇存在较强的吸附作用,使PLGA/nHA-DTX复合微球的载药量和包封率得到了较大的提高,具有更好的药物缓释效果,抑制癌细胞增长的作用更有效.     

多柔比星长效注射微球的体外释放研究

目的:考察多柔比星(Dox)微球的体外释放特性及药物在制备工艺和体外释放过程中的稳定性.方法:以乳酸-羟乙酸共聚物(PLGA)为载体材料,用改进的复乳法(W/O/W)制备载Dox长效注射微球;考察粒径大小、外观、包封率、载药量等理化性质;用紫外分光光度法检测了体外释放溶液中的药物含量,考察了微球的体外释药特性及影响因素;用高效液相色谱法评价了微球制备工艺和体外释放过程对Dox稳定性的影响.结果:微球球形圆整,分散性好,平均粒径为85 μm,包封率为95.1%,载药量为14.8%.随着PLGA浓度的增加,W/O体积比的减小,微球释放速度减慢,突释效应减小.制备工艺对Dox的稳定性无明显影响,而Dox在体外释放过程中随着释放时间的延长逐渐有降解峰产生,10 d后降解峰面积占2.46%.结论:用复乳法制备载Dox微球,通过对PLGA浓度和油水体积比的调节,可以得到不同释放速度的微球.     

骨保护素-聚乳酸羟基乙酸缓释微球的制备及体外释药性能研究

目的 以聚乳酸羟基乙酸(PLGA)为载体构建载有骨保护素(OPG)的微球,筛选出缓释效果最佳的制备条件,并研究载药微球的体外释放特性.方法 采用复乳溶剂挥发法,以不同的搅拌速度、聚乙烯醇(PVA)浓度、PLGA浓度制备OPG-PLGA微球并测定其载药量和包封率,通过正交试验优化制备条件;以磷酸盐缓冲液作为释放介质考察载药微球的体外释放特性.结果 以PLGA聚合物浓度400 mg/ml、搅拌速度400 r/min、PVA浓度2％为条件制备的载药微球具有最优的载药量和包封率,分别为6.21×10-和75.10％,体外释药试验显示微球持续释放时间达到30 d,具有良好缓释效果.结论 采用优化条件制备的OPG-PLGA微球具有较高的包封率和载药量,同时具有良好的缓释效果,为用于拔牙位点保存术的缓释药物研究提供了基础.     

聚乳酸/羟基乙酸可降解药物释放支架的探索

目的:探索聚乳酸/羟基乙酸(PLGA)材料作为制备生物可降解药物洗脱支架的生物安全性和可行性.方法:将PLGA与紫杉醇(PTX)混溶于二氯甲烷中,制备生物可降解载药PTX-PLGA膜.将制备的膜片置入磷酸盐缓冲液(pH=7.4/4.0)中进行体外降解及药物释放测试.用PTX-PLGA膜的浸提液培养提取的兔食管成纤维细胞...     

载VEGF荧光PLGA亚微米缓释微球的制备及体外控释特性

目的 制备生物可降解聚乳酸羟基乙酸共聚物(PLGA)包裹的载血管内皮生长因子(VEGF)荧光缓释亚微米微球,了解微球装载以及释放VEGF的效率,体外观察荧光微球的降解.方法 采用双相溶剂挥发法制备PLGA载VEGF亚微球,激光共聚焦及扫描电镜观察荧光微球体外降解,ELISA法观察其载药效率及释药曲线.结果 双相溶剂挥发法成功制备了PLGA荧光载VEGF亚微米微球,扫描电镜观察及激光共聚焦显微镜观察微球形态正常,激光粒度分析仪观察粒径0.5～1.0 μm,分布均匀,定量ELISA检测微球载VEGF率与包封率分别为3.91％和51.42％,荧光显微镜观察其缓慢降解,定量ELISA检测VEGF释放平缓,呈线性零级释放趋势.结论 直径0.5～1.0μm的PLGA载VEGF荧光亚微米微球载药效率较高,呈线性零级释放,荧光能够直接观测.     

高载药诱导的聚2-噁唑啉胶束形态变化研究

目的 制备载紫杉醇的聚2-(噁)唑啉纳米胶束,通过改变投药量考察药物引起的胶束形态变化,以期构建新型的高荷载嵌段共聚物胶束递药系统.方法 采用薄膜水化法制备聚2-(噁)唑啉载药胶束,以粒径、包封率和载药量等评价其理化性质,采用膜透析法考察其体外释药特性,利用CCK-8法测定其细胞毒性.结果 随着投药比由80∶100(紫杉醇与聚2-恶唑啉质量比)增加至110∶100,胶束逐渐由球形延长,变为蠕虫状.投药比为80∶100时,球形胶束的平均粒径为(43.17±0.95) nm,包封率为(88.81±2.93)％,载药量为(40.49±2.03)％;投药比增加至110∶ 100后,所得蠕虫状胶束的平均粒径为(107.83±1.51) nm,包封率为(77.08±0.97)％,载药量为(40.34±0.51)％.球形和蠕虫状胶束在磷酸盐缓冲液中24 h的累积释放量分别达到(76.58±3.07)％和(77.66±1.00)％,在含2％小牛血清白蛋白的PBS溶液中 24 h的累积释放量高达(100.31±1.80)％和(99.73±2.56)％.球形胶束和蠕虫状胶束对人肺腺癌细胞A549的杀伤1C50值分别为0.336和0.342 μg/mL.结论 成功制备了高荷载的球形和蠕虫状载药胶束,体外细胞毒性实验证明其具备抗肿瘤活性.     

SOD口腔膜剂的研制及对口腔粘膜溃疡的治疗作用

考察超氧化物歧化酶(SOD)口腔贴膜制备过程中温度和保温时间对SOD活性的影响及不同厚度药膜药物释放度的差异测定药膜中SOD的活性及其回收率、体外溶出、皮肤刺激性及药膜中SOD稳定性;并进行药膜重量差异检查和卫生学检查;建立制备动物口腔粘膜溃疡模型,从溃面直径和愈合期两个方面考察药物的疗效。结果表明65°C下保温2h,SOD基本保持原有的活性;药膜厚度增加释药时间会延长;Cu,Zn-SOD和EC-SOD药膜的药物含量分别为(504.69±27.31)U/cm2和(489.0±22.4)U/cm2,并在15min内药物全部溶出;无皮肤刺激性,4°C下保存一个月药膜中药物含量稳定;与空白组比较,SOD药膜能显著减小溃面直径,缩短溃疡愈合期。     

正交设计优化川芎嗪乳酸-羟基乙酸共聚物微球处方与制备工艺

目的 制备川芎嗪PLGA微球并考察其物理化学性质及体外释药性.方法 采用O/W型乳化-溶剂挥发法制备川芎嗪PLGA微球,正交试验设计优化处方组成和制备工艺,对微球的外观形态、粒径及粒度分布、包封率和载药量等理化性质进行了检测.结果 以优化处方制备的川芎嗪PLGA微球为圆球形,粒度分布较均匀,平均粒径为(10±2.2)μm,包封率为(81.36±1.15)%,载药量为(8.2±0.43)%,药物体外释放可延长至768h,释药特性符合Weibull方程,经差示扫描量热法(DSC)分析证明,形成了新的物相,表明载药微球确已形成.结论 采用O/W型乳化-溶剂挥发法制备的川芎嗪PLGA微球包封率和栽药量高,粒径均匀,具有明显的缓释作用.     

胰岛素缓释载体聚乙二醇-聚己内酯-聚甲基丙烯酸-N,N-二乙氨基乙酯的制备及评价

目的 制备pH敏感聚乙二醇-聚己内酯-聚甲基丙烯酸-N,N-二乙氨基乙酯(mPEG-PCL-PDEAEMA)载胰岛素缓释纳米粒,考察其体外释放效果和体内降糖活性.方法 结合开环聚合反应和原子转移自由基聚合反应合成具有不同疏水链段的mPEG-PCL-PDEAEMA,用傅里叶红外光谱和核磁共振氢谱表征其结构;采用纳米沉淀技术制备聚合物载胰岛素纳米粒,动态光散射法测定粒径,透射电子显微镜观察其形态;BCA法测定载药情况,并考察其体外释放行为;建立糖尿病大鼠模型,监测给药后血糖水平.结果 在pH1.2~7.4时,聚合物纳米粒的粒径随pH增大而减小.以90%wt投药比制备mPEG5k-PCL13k-PDEAEMA10k和mPEG5k-PCL10k-PDEAEMA10k载胰岛素纳米粒时的包封率和载药率为最佳,包封率分别为(81.99±1.77)%和(53.12±0.62)%,载药率分别为(42.46±0.53)%和(32.34±0.26)%,粒径分别为181.9±6.67 nm和169±7.1 nm.体外释放结果显示聚合物载胰岛素纳米粒具有出色的缓释行为,并且随着疏水链段的增长,药物释放速度减慢.体内药效实验表明mPEG5k-PCL13k-PDEAEMA10k载胰岛素纳米粒能够在体内保持48 h的降血糖效果,较游离胰岛素的降糖作用时间明显延长.结论 pH敏感三嵌段聚合物mPEG-PCL-PDEAEMA有望成为理想的胰岛素缓释载体.     

乳酸-羟基乙酸共聚物包载匹伐他汀纳米粒的制备及其对内皮祖细胞的增殖作用

制备乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)包载匹伐他汀纳米粒,检测其形貌、粒径、载药量、包封率及体外释药特点,研究其对内皮祖细胞的增殖作用。采用溶剂扩散法制备PLGA包载的匹伐他汀纳米粒,扫描电镜观察纳米粒形貌,激光粒度仪测定粒径,高效液相色谱法检测并计算载药量、包封率,体外药物释放实验检测纳米粒的缓释效能,CCK8法检测空白PLGA纳米粒及匹伐他汀纳米粒对内皮祖细胞的活性影响。扫描电镜下匹伐他汀纳米粒呈圆球形,平均粒径在(230.1±45)nm,载药量与包封率分别为(10.00±1.83)%、(35.54±5.40)%,具备缓释性能,不同浓度空白PLGA纳米粒对内皮祖细胞活性均无影响,匹伐他汀纳米粒组(0.01、0.1 μmol/L)可显著改善内皮祖细胞的增殖活性,与同浓度匹伐他汀原药组相比差异显著。结果表明,溶剂扩散法可制备形态较好的匹伐他汀纳米粒,具备缓释性能,载体材料具有较好的细胞生物相容性,匹伐他汀纳米粒显著改善内皮祖细胞增殖活性。     

The Construction and Investigation of PLGA Artificial Bone by Biomimetic Mineralization

Tissueengineeringstrategieshavebeenpro posedtotreatbonetissueloss.Comparedwithotherbiomaterials,PLGAissatisfactorytoclinicalusebecauseofitsabsorbabilityandsufficientbio compatibility.However,thehighlyhydrophobicsurfaceofPLGAlimitscellsurfaceadhesion[1].Itisimportanttoimprovecellularattachment,sprea dingandgrowthfortheclinicaluseofPLGA.Oneapproachtomakebiomaterialsactivelyinteractwithsurroundingtissuesistoprovidebiologicalcoatingtomimicextracellularmatrix.Apatitecoatingonthesurfaceofbioma…     

复方总黄酮聚乳酸-羟基乙酸共聚物微囊的制备及体外释药特性

目的：以聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）作为载体材料制备复合骨碎补总黄酮（TFRD）和野菊花总黄酮（TFC）的TF-PLGA缓释微囊,探讨微囊的最佳制备工艺及其体外缓释特性。方法：以PLGA、TFRD和 TFC为原料,采用复乳-溶剂挥发法制备TF-PLGA缓释微囊;以包封产率（EE）为评价指标,通过单因素实验及正交实验进行工艺优化,筛选最佳的工艺参数;光学显微镜（LM）和扫描电子显微镜（SEM）下观察微囊的形态特征、粒径大小和分布情况;采用提取法测定TF-PLGA微囊的体外累计释药率并绘制累计释放曲线。结果：单因素实验和正交实验优化的最佳制备工艺,PLGA浓度为140 g·L^-1,油相体积为1.4 mL,乳化速度为1500 r·min^-1,乳化时间为5 min。优化后微囊平均EE为（83.89±2.30）%,平均实际载药量（DL）为（5.90±0.07）%;LM和SEM下观察,微囊形态圆整,平均粒径为（44.34±14.68）μm,粒径分布较窄;体外释放实验检测,24h累计释药率达40%,第50天后累积释药率超过90%。结论：TF-PLGA缓释微囊具有优良的载药及缓释效果,制备工艺简单,重复性良好。     

载IR-780与多柔比星温敏脂质体的制备与表征

目的 制备同时包封IR-780和多柔比星(DOX)的温敏脂质体并进行表征.方法 采用薄膜水化法及硫酸铵梯度法制备载IR-780和DOX温敏脂质体(DOX-IR-780 thermo-sensitive liposome,DITSL).采用Malvern激光粒度仪检测各脂质体的粒径、表面电位及多分散系数(PDI);采用激光诱导DITSL升温释药,检测各脂质体的释药特性.结果 IR-780和DOX同时被包封于温敏脂质体,成功制备得DITSL.IR-780和DOX的包封率分别为(94.47±8.57)％、(92.52±7.61)％;平均粒径(138.98±8.74) nm;略带负电位;PDI为0.32±0.02.激光0.8 W/cm2照射5 min,温度最高升到54.2℃,1OX释药率达80.1％.结论 DITSL具有药物包封率较高、粒径大小适宜、光热转化效率高、温度敏感性好的优点,并可通过激光控制释药,为下一步光热-化疗联合治疗肿瘤的研究奠定了基础.     

国产外周动脉洗脱支架药膜制备及体外药代动力学研究

目的评价国产雷帕霉素-聚丙交酯乙交酯（PLGA）外周动脉洗脱支架药膜性能及其药物释放特点。方法采用自制PLGA与雷帕霉素制成雷帕霉素-PLGA药膜,并用该药膜涂层12枚国产镍钛合金外周血管支架。用OLYMPUS体式显微镜观察支架表面药物涂层的宏观形貌,NanoscopeⅢa原子力显微镜观察和分析涂层表面的三维形貌和表面粗糙度。并对洗脱支架进行血液相容性,体外降解行为及体外药代动力学研究,数据进行了标准曲线测定,释放曲线拟合测定,并进行LPMS／PLGA涂层多支架释放曲线测定等统计学分析。结果12枚支架药膜表面光整,层厚均一,未见皲裂、脱落、翘起现象。雷帕霉素-PLGA洗脱支架的OLYMPUS体式宏观形貌,涂层支架无缠绕、粘连,且涂层表面均匀、光滑。Nano ScopeⅢa原子力显微镜示金属支架表面略粗糙,存在机械划痕微坑。但PLGA载药涂层将基体的微坑覆盖后,表面平滑PLGA涂层表面黏附的血小板有个别变形伸出伪足,血小板部分激活,没有产生聚集;含雷帕霉素涂层表面黏附的血小板数量明显减少,没有变形和聚集,血小板处于未激活状态。在体内环境模拟系统中,PLGA在2周之内降解约20％,在2至6周降解速度逐渐加快直至完全降解。雷帕霉素-PLGA洗脱支架体外药代动力学实验结果显示,药物洗脱支架药物释放可持续50d。在0、1、3、5、7、9d取样测定释放量,释放曲线符合Higuchi方程：Mt/M∞（％）=3．1722＊t1／2（h）-5．682（r=0．9944,n=5）。实测曲线与拟合曲线拟合很好,r=0．9944。在30d时仍存在较为稳定的药物释放。24h突释量11．02％;9d累积释放量41．23％;30d累积释放量79．44％。结论国产雷帕霉素-PLGA外周动脉洗脱支架药膜涂层均匀光滑,可有效控制药物释放,具有进一步临床应用价值。     

Co-transplantation of neural stem cells and Schwann cells within poly (L-lactic-co-glycolic acid) scaffolds facilitates axonal regeneration in hemisected rat spinal cord

Background  Various tissue engineering strategies have been developed to facilitate axonal regeneration after spinal cord injury. This study aimed to investigate whether neural stem cells (NSCs) could survive in poly(L-lactic-co-glycolic acid) (PLGA) scaffolds and, when cografted with Schwann cells (SCs), could be induced to differentiate towards neurons which form synaptic connection and eventually facilitate axonal regeneration and myelination and motor function.

Methods  NSCs and SCs which were seeded within the directional PLGA scaffolds were implanted in hemisected adult rat spinal cord. Control rats were similarly injured and implanted of scaffolds with or without NSCs. Survival, migration, differentiation, synaptic formation of NSCs, axonal regeneration and myelination and motor function were analyzed. Student’s t test was used to determine differences in surviving percentage of NSCs. One-way analysis of variance (ANOVA) was used to determine the differences in the number of axons myelinated in the scaffolds, the mean latency and amplitude of cortical motor evoked potentials (CMEPs) and Basso, Beattie & Bresnahan locomotor rating scale (BBB) score. The χ² test was used to determine the differences in recovery percentage of CMEPs.

Results  NSCs survived, but the majority migrated into adjacent host cord and died mostly. Survival rate of NSCs with SCs was higher than that of NSCs without SCs ((1.7831±0.0402)% vs. (1.4911±0.0313)%, P <0.001). Cografted with SCs, NSCs were induced to differentiate towards neurons and might form synaptic connection. The mean number of myelinated axons in PLGA+NSCs+SCs group was more than that in PLGA+NSCs group and in PLGA group ((110.25±30.46) vs. (18.25±3.30) and (11.25±5.54), P <0.01). The percentage of CMEPs recovery in PLGA+NSCs+SCs group was higher than in the other groups (84.8% vs. 50.0% and 37.5%, P <0.05). The amplitude of CMEPs in PLGA+NSCs+SCs group was higher than in the other groups ((1452.63±331.70) µV vs. (428.84±193.01) µV and (117.33±14.40) µV, P <0.05). Ipsilateral retransection resulted in disappearance again and functional loss of CMEPs for a few days. But contralateral retransection completely damaged the bilateral motor function.

Conclusions  NSCs can survive in PLGA scaffolds, and SCs promote NSCs to survive and differentiate towards neurons in vivo which even might form synaptic connection. The scaffolds seeded with cells facilitate axonal regeneration and myelination and motor function recovery. But regenerating axons have limited contribution to motor function recovery.

 

     

PLGA新型纳米支架的制备及其生物相容性

目的探讨和比较应用不同参数静电纺丝技术制备复合型聚乳酸-羟基乙酸[poly(lactic-co-glycolicacid),PLGA]纳米纤维缓释膜片的可行性,检测其表面特性以及生物相容性。方法使用不同参数制备纳米纤维膜,扫描电镜观察膜片表面形态;人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,hPLDCs)培养及鉴定后接种于空白膜上,扫描电镜观察细胞与膜的附着情况,以MTT[3-(4,5-dimethylthiaozol-2-yl)-2,5-dip henyltetrazolium bromide]实验检测不同浓度材料浸提液对细胞增殖变化情况的影响。结果随着PLGA流量增加,纳米纤维直径增加;细胞与PLGA膜复合后粘附良好且增殖状态无明显变化;不同浓度材料浸提液对牙周膜细胞增殖的影响无明显差异。结论通过不同参数静电纺丝制备的新型纳米纤维膜具有良好的生物相容性,可进一步作为多种药物及细胞因子载体构建缓释型支架,从而用于引导性牙周组织再生(guided tissue regeneration,GTR)或者牙周组织工程。     

利福平-聚乳酸-羟基乙酸-磷酸钙骨水泥缓释复合体的实验研究

目的：制备利福平(rifampicin,RFP)-聚乳酸-羟基乙酸(polylactic-co-glycolic acid,PLGA)-磷酸钙骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)缓释复合体(RFP-PLGA-CPC复合体),并研究其理化性质及体外释药性能。方法：采用乳化-溶剂挥发法制备RFP-PLGA缓释微球。实验分为CPC组、包埋了RFP的CPC组(RFP-CPC组)、载有RFP的PLGA缓释微球与自固化CPC复合体组(RFP-PLGA-CPC复合体组)。测定3组材料的凝固时间﹑孔隙率。通过体外药物释放实验观察释药前后的抗压强度、断面形态的变化以及体外释药情况。结果：CPC组的凝固时间最短,RFP-PLGA-CPC复合体组的凝固时间最长。CPC组的孔隙率同RFP-CPC组比较,差异有统计学意义(P<0.05);CPC组和RFP-CPC组的孔隙率与RFP-PLGA-CPC复合体组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01)。RFP-PLGA-CPC复合体组的抗压强度与CPC组比较,差异有统计学意义(P<0.01);而RFP-CPC组和CPC组之间的抗压强度随着时间的变化逐渐表现出显著性差异(3 d： P<0.05;30和60 d：P<0.01)。CPC组在降解过程中的抗压强度的变化不大。PLGA微球的大小均一,粒径基本在100~150 μm之间,微球的形态呈现出球体或是类球体,微球的表面圆润光滑,无杂质附着; CPC组的断面空隙在浸泡3 d直至60 d都没有明显变化;而RFP-CPC组的微结构变化亦不大,其断面均是小的微粒形成的;RFP-PLGA-CPC复合体组断面的孔隙明显增多,一直到60 d时PLGA微球逐渐消失,剩下空洞。RFP-PLGA-CPC复合体组无明显短时间内药物大量释放现象,60 d累计释药率达到近95%,将该复合体释药行为进行线性拟合,发现药物以恒速进行局部释放,符合零级动力学方程F=0.168×t。结论：RFP-PLGA-CPC复合体孔隙率显著高于CPC,能够持续缓慢释放有效抗结核药物,并能较长时间维持一定的力学强度。     

正丁苯酞-聚乳酸聚羟基乙酸微球的制备及性能评价

目的 优选正丁苯酞 聚乳酸聚羟基乙酸（PLGA）微球的制备工艺,并对制备微球的性能进行检测。 方法 使用O/W型乳化溶剂挥发法制备正丁苯酞-PLGA微球,以载药量、包封率为观察指标,通过单因素实验优选制备工艺,并观察体外释药性能。采用生物显微镜观察微球的表面形态并测量粒径。结果 最佳制备工艺为投药量15 mg,PLGA 50 mg,聚乙烯醇质量分数为 2%,搅拌转速为700 rpm。正丁苯酞的载药量 （14.49±0.56）,包封率 （82.89 ± 1.46）。所制备的微球光滑圆整、粒径均一,平均粒径约为 （23.6±0.87）nm。体外释药实验表现为突释。结论 采用O/W型乳化溶剂挥发法初步制备了正丁苯酞 PLGA微球,优选的制备工艺条件稳定,制备方法重现性良好。