乙酰肝素酶在子痫前期孕妇胎盘中的表达研究

目的探讨乙酰肝素酶在子痫前期孕妇胎盘中的表达及其与病情轻重的关系。方法选取患者共43例,分为正常对照组13例,子痫前期轻度组15例,子痫前期重度组15例,采用Western-blot检测孕妇新鲜胎盘组织中乙酰肝素酶的表达情况。结果在3组标本中均有Hpa蛋白表达,子痫前期轻度及重度组明显高于正常对照组（P〈0.001）,且子痫前期重度组与轻度组比较差异有统计学意义（P〈0.001）。结论子痫前期孕妇胎盘中Hpa的含量明显高于正常对照组,且随病情加重而愈加显著。     

乙酰肝素酶在食管癌中的表达及其意义

目的：探讨乙酰肝素酶在食管癌中的表达及其意义。方法应用免疫组化法检测54例食管癌组织及32例正常食管组织中的表达情况。结果乙酰肝素酶（Heparanase；HPS）在54例食管癌中的阳性率61．11％，显著高于32例正常食管组织中的阳性率13．33％（P〈0．05）。乙酰肝素酶的表达与肿瘤浸润深度、淋巴结转移和病理分期相关（P〈0．05）。乙酰肝素酶的表达与患者的性别、年龄、肿瘤的部位、大小、组织学类型、分化程度无显著相关（P〉0．05）。结论本研究结果表明乙酰肝素酶的表达对血管生成、食管癌的侵入转移起到关键性的作用，其作为食管癌治疗中的一个新靶点对治疗及预后有相当好的理论价值。     

乙酰肝素酶在大肠癌的表达及其意义

目的探讨大肠癌组织中乙酰肝素酶(heparanase,HPA)的表达特征及其与大肠癌侵袭和转移的关系。方法采用免疫组化SABC法,检测64例大肠癌组织中乙酰肝素酶蛋白的表达情况。结果64例大肠癌组织中乙酰肝素酶蛋白的阳性率为57.8%;乙酰肝素酶蛋白的阳性率在不同浸润深度分组和有无淋巴结转移分组的差异具有显著性(P<0.05)。结论乙酰肝素酶蛋白的表达可能在大肠癌侵袭和转移的过程中具有重要作用。     

乙酰肝素酶在子宫内膜癌组织中的表达及意义

目的探讨乙酰肝素酶在子宫内膜癌组织中的表达及预后关系。方法采用S-P免疫组织化学法检测Hpa和CD34蛋白在子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的表达,并结合病理学分型、组织学分级、微血管密度(MVD)和临床分期探讨其意义。结果子宫内膜癌Hpa蛋白的表达显著高于正常子宫内膜(P<0.05),子宫内膜癌组织中Hpa蛋白的表达与子宫内膜癌组织血管生成、病理分型、分期有关(P<0.05)。结论Hpa蛋白在子宫内膜癌中呈高表达,并与子宫内膜癌血管生成、病理特征有关,检测其表达以对判断子宫内膜癌的生物学行为提供指标。     

乙酰肝素酶和上皮钙粘蛋白-E在恶性黑素瘤中的表达及意义

目的探讨恶性黑素瘤的发生和侵袭转移机制,检测乙酰肝素酶、上皮钙粘蛋白(E-cadherin)在恶性黑素瘤的表达及意义。方法应用免疫组织化学SP法检测30例恶性黑素瘤、30例黑素细胞痣和20例正常皮肤组织中乙酰肝素酶和E-cadherin蛋白的表达。结果乙酰肝素酶在恶性黑素瘤组织中表达的阳性率(63.33%)明显高于其在黑素细胞痣中的表达(6.67%),且其在正常皮肤组织中仅在皮脂腺腺体细胞中表达,其余细胞中不表达,两者比较有统计学意义(P<0.05);E-cadherin在正常皮肤组织表达(100%)与在黑素细胞痣中的表达(83.3%)无显著性差异,但明显高于其在恶性黑素瘤组织中的表达(43.33%),两者比较有统计学意义(P<0.05)。结论乙酰肝素酶和E-cadherin与恶性黑素瘤的转移有关,提示恶性黑素瘤组织中乙酰肝素酶和E-cadherin的检测可作为预测肿瘤转移的指标之一。     

卵巢癌中乙酰肝素酶蛋白的表达及临床意义

目的研究卵巢癌中乙酰肝素酶（HPSE）蛋白的表达状况及临床意义。结果采用免疫组化PV-6000法检测HPSE蛋白在卵巢癌、卵巢良性肿瘤和正常卵巢皮质中的表达,结合卵巢癌的临床病理特征进行分析。结果HPSE蛋白在卵巢癌组织的表达高于对照组（卵巢良性肿瘤和正常卵巢皮质）,差异有显著性（P〈0.05）,有淋巴结转移的癌组织HPSE高于无淋巴结转移组（P〈0.01）,TNM分期Ⅲ-Ⅳ的癌组织表达高于Ⅰ-Ⅱ组（P〈0.01）,均有高度统计学意义。结论HPSE的高表达可能在卵巢癌的发生发展中起重要作用,HPSE可作判断卵巢癌生物学行为和预后的参考指标。     

乙酰肝素酶系列表达载体的构建

构建了人乙酰肝素酶基因系列真核表达载体，并在NIH3T3细胞中表达，以研究乙酰肝素酶的结构与功能的关系。采用PCR及GeneSOE的方法从人乙酰肝素酶cDNA中扩增得到hpaFL(Met^1-Iles^543)，hpal09(Met^1-Glu^109)及hpasp50(pro，Met^1-Ala^35 Lys^158-Iles^543)，然后插入真核表达载体pcDNA3．1中。采用脂质体介导法将其转染NIH3T3细胞，48h后RT-PCR检测转染细胞中外源乙酰肝素酶基因的转录。结果：酶切鉴定、测序结果以及RT-PCR分析结果表明成功构建了重组表达载体pcDNA-hpaFL，pcDNA-hpa109及pcDNA-hpasp50，并在NIH3T3细胞中有效转录。构建成功的乙酰肝素酶系列表达载体可为乙酰肝素酶结构与功能关系的研究奠定基础。     

乙酰肝素酶在贲门癌中的表达及与临床病理的关系

目的检测乙酰肝素酶和低氧诱导因子1α在贲门癌中的表达,分析其与临床病理的关系并探讨低氧诱导因子1α对调节乙酰肝素酶的可能机制。方法用免疫组化分别检测48例贲门癌和26例癌旁组织中乙酰肝素酶(SP法)及低氧诱导因子1α蛋白(SABC法)的表达,并分析它们与临床病理因素之间的关系。结果乙酰肝素酶和低氧诱导因子1α在48例贲门癌中的阳性表达率分别为62.5%和45.9%,明显高于相应癌旁组织。乙酰肝素酶阳性表达与淋巴结转移、TNM分期密切相关;低氧诱导因子1α与远处转移、淋巴结转移密切相关。乙酰肝素酶与低氧诱导因子1α有明显的阳性共表达率(P=0.020)。结论乙酰肝素酶在贲门癌中表达增高,低氧诱导因子1α可能参与上调乙酰肝素酶的表达水平,促进乙酰肝素酶介导的贲门癌浸润及转移。     

乙酰肝素酶在肿瘤中的表达及其调控

乙酰肝素酶(heparanase,Hpa)是哺乳动物细胞中唯一能切割细胞外基质(extra cellular matrix,ECM)中硫酸乙酰肝素(heparin sulfate,HS)侧链的内切性糖苷酶,在肿瘤发生发展的各个阶段尤其是肿瘤转移中起到重要的作用。有关Hpa的研究近年来一直受到广泛关注,该文综述了Hpa在肿瘤组织中的表达及调控,旨在为以Hpa为靶点的肿瘤治疗提供依据。     

前置胎盘、胎盘粘连、胎盘植入与人工流产的关系

目的探讨前置胎盘、胎盘植入、胎盘粘连与人工流产的关系。方法对在本院分娩的4010例患者进行回顾性分析。结果 4010例分娩患者中,胎盘粘连、胎盘植入、前置胎盘发病率为10.3%（414/4010）,1628例无人工流产史者中,总发病率为3.6%,2382例有人工流产史者总发病率为14.9%,差异有统计学意义（P〈0.05）。随着人工流产次数的增加,胎盘粘连、胎盘植入、前置胎盘发病率呈明显上升趋势（P〈0.05）,胎盘粘连发病率最高。产后出血发生率为66.9%,胎盘植入者产后出血发生率最高。结论前置胎盘、胎盘植入、胎盘粘连发病率与人工流产次数成正比,均易导致产后出血。     

阿司匹林、肝素联合预防性抗凝治疗复发性流产的疗效分析

目的 探讨阿司匹林、肝素联合预防性抗凝治疗对复发性流产患者的临床治疗效果.方法 收集2015年1月至2016年1月入院的100例复发性流产患者随机分为两组,对照组患者给予传统治疗,实验组患者则加施阿司匹林、肝素联合的预防性抗凝治疗,比较两组患者治疗前后相关临床指标、妊娠结局、并发症与药物不良反应发生率.结果 实验组患者治疗后血小板计数(PLT)[(185.25±2.07)×109/L]、凝血酶原时间(PT)[(10.31±0.29)s]、活化部分凝血酶时间(APTT)[(30.12±0.67)s]、纤维蛋白原(FIB)[(2.20±0.33) g/L]与纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平[(0.58±0.15) AU/ml]均显著低于对照组[(189.75±2.13)×109/L、(11.60±0.35)s、(33.31±0.70)s、(2.95±0.47)g/L、(1.01±0.22)AU/ml],血浆组织型纤溶酶原活化因子(T-PA)水平[(0.61±0.17) U/ml]显著高于对照组[(0.43±0.14)U/rnl];抗心磷脂抗体清除率显著高于对照组(70.00％比33.33％),两组比较差异有统计学意义(P＜0.01);活产率明显高于对照组(88.00％比68.00％),流产率明显低于对照组(12.00％比28.00％),总体妊娠期并发症发生率明显低于对照组(20.00％比42.00％),差异有统计学意义(P＜0.05);两组患者总体药物不良反应发生率不存在明显差异(22.00％比18.00％),差异无统计学意义(P＞0.05).结论 阿司匹林、肝素联合的预防性抗凝治疗对复发性流产患者的临床治疗效果显著,安全性较高,借鉴意义重大.     

协同刺激分子B7-H1在自发性流产患者的表达及其生物学意义

目的研究协同刺激分子B7‐H1在自发性流产患者的表达及其生物学意义。方法 ELISA法检测正常未孕者（A组,52例）、正常妊娠者（B组,49例）、自发性流产患者（C组,52例）和自发性流产后再妊娠者（D组,17例）血清可溶性B7‐H1（sB7‐H1）的含量。免疫组化法检测正常妊娠行人工流产术患者（E组,20例）和自发性流产患者（F组,21例）绒毛膜和蜕膜中B7‐H1的表达。结果 A、B、C、D组血清sB7‐H1含量无统计学差异（P＞0．05）。E组蜕膜中B7‐H1的表达高于F组（P＜0．05）,但两组绒毛膜中B7‐H1的表达无统计学差异（P＞0．05）。结论 B7‐H1参与了正常妊娠过程;其异常表达对自发性流产的发生有重要意义。     

1483例自然流产患者细胞遗传学分析

目的应用染色体核型分析技术对自然流产患者进行遗传学分析,探讨其临床表型与异常染色体核型的关系。方法2008年在我院行外周血染色体检查的患者总计4010例,其中自然流产患者1483例,对其进行染色体核型分析。结果染色体核型分析1483例自然流产患者中,共发现平衡易位携带者32例。结论对自然流产患者的染色体检查,可以对优生优育起到指导作用,避免和预防遗传性疾病传给下一代。     

NSCLC乙酰肝素酶及C—erbB-2表达分析

目的:探讨非小细胞肺癌(nonsmall-cell lung cancer,NSCLC)乙酰肝素酶(HPA)和C-erbB-2表达与NSCLC发生发展和浸润转移的关系。方法:NSCLC组为56例非小细胞肺癌保存蜡块,其中临床分期Ⅰ期15例、Ⅱ期28例、Ⅲ期13例。病理分级高分化16例、中分化22例、低分化18例,对照组为18例癌旁组织。采用免疫组织化学染色法检测两组HPA和C-erbB-2蛋白表达情况。结果:NSCLC组HPA表达阳性率(43/56例,76.8%)显著高于对照组(2/18例,11.1%),淋巴结转移NSCLC组显著高于无淋巴结转移NSCLC组,不同临床分期、不同病理分化程度NSCLC组HPA阳性表达率差异有显著性。NSCLC组C-erbB-2阳性率(40/56例,71.4%)显著高于对照组(2/18例,11.1%),NSCLC组不同临床分期、不同病理分化程度的C-erbB-2阳性表达率差异有显著性。结论:HPA和C-erbB-2高表达与NSCLC的发生、发展及浸润转移有显著关系。     

自然流产与T淋巴细胞及IL-2、IL-10的关系

目的 分析自然流产者外周血T淋巴细胞亚群(CD3 T、CD4 T、CD8 T细胞)及血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素10(IL-10)的水平变化,探讨其在自然流产发病中的作用.方法 应用免疫荧光标记技术和流式细胞仪检测42例自然流产患者外周血T淋巴细胞亚群,ELISA法定量检测血清IL-2、IL-10,化学发光法检测血孕酮水平,并进行相关分析,同时与健康早孕组比较.结果 (1)自然流产者外周血CD3 T、CD4 T、CD8 T细胞水平明显高于健康早孕组(P＜0.05).细胞因子IL-2水平在自然流产组较健康早孕组明显升高,而IL-10和孕酮水平明显下降.(2)孕酮水平与细胞因子IL-2及CD4 T淋巴细胞呈显著负相关(P＜0.05),与IL-10呈正相关(P＜0.05).结论 细胞免疫异常可能与孕酮的减少相关,并可能是导致自然流产的重要原因之一.     

A sample size calculation for spontaneous abortion in observational studies

Spontaneous abortion (SAB) is an important endpoint in studying the effects of drugs or vaccines on pregnancy outcomes. Such studies are typically observational in nature. Evaluation of the risk for SAB is often conducted as part of a prospective exposure cohort study, or pregnancy registry, where women are recruited into the study at some point after recognition of pregnancy. Subjects accrued in this way are left truncated, in the sense that the time to SAB is not followed from the start of pregnancy, and the observed data is conditional on the fact that a woman has not had SAB by enrollment. Due to left truncation the estimation of SAB rates needs to use survival analysis methods. A further complication occurs when there is loss to follow-up, so that for those individuals it is not known whether they have SAB. These factors necessarily lead to complex modeling of the SAB data, and the calculation of sample size is not straightforward. In this communication we consider a simple sample size calculation that only requires minimum assumptions on the population SAB rates and the anticipated observed SAB rates. The method is exemplified on a hypothetical prospective study of risk for SAB.     

Lectin reactivity of expanded mouse blastocysts after exposure to sera from women with unexplained recurrent spontaneous abortion

Embryotoxic factors existing in maternal sera may influence their effects via specific binding to, or alteration of cell surface molecules in the conceptus. This study was undertaken to determine the effects of sera from women with unexplained recurrent spontaneous abortion (URSA) on cell surface glycoconjugates of the early conceptus. Four cell stage embryos were cultured in medium supplemented with sera from women with URSA, from normal women, or in medium without serum. Developmental competence was assessed as the stage distribution of embryos advancing to during 96 h in culture. Hatched (expanded) blastocysts were stained with wheat germ agglutinin (WGA), peanut agglutinin (PNA) and dolichos biflorus agglutinin (DBA) to detect surface glucoconjugates. We observed that patient sera could be divided into high- and low-risk groups on the basis of the ability to decrease the number of four-cell embryos reaching the expanded blastocyst stage. Furthermore, the intensity of reactivity to PNA changed after exposure to high-risk sera. Morula formation was reduced and blastocyst formation was delayed. Although the sera from women with URSA had embryotoxic effects, no influence on the glycoconjugate patterns were evident in hatched blastocysts, aside from PNA reactivivity. We suggest altered developmental display of PNA-reactive proteins was a biomarker for poor developmental quality due to emrbyotoxic factors in serum from URSA patients.     

叶酸联合低分子肝素和小剂量阿司匹林治疗复发性流产的临床研究

目的探讨叶酸片联合低分子肝素钙注射液和小剂量阿司匹林肠溶片治疗复发性流产的临床疗效。方法选取2016年1月—2016年8月绵阳中心医院收治的复发性流产患者94例为研究对象,按照数表法将患者随机分为对照组和治疗组,每组各47例。对照组皮下注射低分子肝素钙注射液,5 000 IU/次,1次/d;且口服阿司匹林肠溶片,75 mg/次,1次/d。治疗组在对照组基础上口服叶酸片,0.4 mg/次,1次/d。所有患者均于确定妊娠后开始治疗,并持续至临产或发生流产、早产。观察两组的临床疗效,比较两组的激素水平、凝血指标、叶酸和同型半胱氨酸(HCY)的情况。结果治疗后,对照组、治疗组的活产率分别为85.11%、93.62%,两组活产率比较差异无统计学意义。治疗后,两组人绒毛膜促性腺激素(HCG)、孕酮(P)、雌二醇(E2)水平均显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组这些观察指标明显高于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组血浆纤溶酶原激活物抑制剂-1(PAI-1)水平明显降低,治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组PAI-1水平明显低于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。治疗后,治疗组HCY水平明显下降,而叶酸水平明显升高,治疗前后比较差异有统计学意义(P0.05);且治疗组这些观察指标的改善程度明显优于对照组,两组比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论叶酸片联合低分子肝素钙注射液和小剂量阿司匹林肠溶片治疗复发性流产具有较好的临床疗效,可改善激素水平,降低PAI-1和HCY水平,具有一定的临床推广应用价值。