6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型的建立与评价

目的 探讨提高6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型成功率的方法 ,并从行为学、黑质多巴胺神经元形态学角度对模型进行评价.方法 取SD大鼠90只,将6-羟基多巴胺立体定向微量注射于左侧黑质区及黑质纹状体通路,观察大鼠的行为及黑质细胞形态学变化.结果 ①90只大鼠中经阿朴吗啡诱导后有64只(占71.1%)恒定转向右侧且结果 稳定,旋转圈数>210r/30min,被认为是成功的帕金森病大鼠模型;②除旋转行为外,部分大鼠还出现震颤、活动迟缓、嗅探、觅食、竖尾等异常表现;③随机选取10只不同时期的成功帕金森病大鼠模型,免疫组化下观察发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少(P＜0.001),电镜观察发现大鼠中脑黑质神经细胞普遍存在变性坏死及不同阶段的凋亡样改变.结论 用6-羟基多巴胺选择性损毁黑质多巴胺能神经元可较快建立稳定的成功率较高的类似于人类中晚期帕金森病行为和病理的大鼠模型,但在病程和行为学等方面同帕金森病人仍有许多差异.     

单点注射6-羟基多巴胺成功建立帕金森病大鼠模型的实验研究

目的 探讨成功建立帕金森病（Parkinson＇s disease,PD）大鼠模型的快速有效方法.方法 将Wistar大鼠92只,随机分为实验组（80只）及对照组（12只）,采用脑立体定向术,实验组在大鼠右侧中脑腹侧被盖区（ventral tegmental area,VTA）注入6-OHDA,经阿朴吗啡（Apomorphine,APO）诱导表现为恒定左侧旋转且旋转圈数﹥210 r/30 min的视为成功PD大鼠模型,对照组则在脑部相应位置注入生理盐水.免疫组化法观察成功模型毁损侧黑质酪氨酸羟化酶（TH）阳性神经元的形态及数量变化.结果 （1）行为学检测：模型组与对照组手术后分别死亡2只及1只,实验组78只大鼠中36只左侧恒定旋转圈数﹥210 r/30 min,造模成功率为46.2%,并且维持时间长.（2）免疫组化：成功大鼠模型毁损侧黑质区TH阳性的神经元较对侧及对照组明显减少（P＆lt;0.01）.结论 大鼠中脑VTA单点注射6-OHDA制作PD大鼠模型,易于定位,操作简单,动物死亡率低,模型成功率较高,成本较低,是较快建立稳定PD大鼠模型的可行方法.     

6—羟基多巴胺帕金森病大鼠模型的建立与评价

目的：探讨提高6－羟基多巴胺帕金森病大鼠模型成功率的方法，并从行为学、黑质多巴胺神经元形态学角度对模型进行评价。方法：取SD大鼠90只，将6－羟基多巴胺立体定向微量注射于左侧黑质区及黑质纹状体通路，观察大鼠的行为及黑质细胞形态学变化。结果：①90只大鼠中经阿朴吗啡诱导后有64只（占71．1％）恒定转向右侧脯结果稳定，旋转圈 ＞210r /30min，被认为是成功的帕金森病大鼠模型；②除旋转行为外，部分大鼠还出现震颤、活动迟缓、嗅探、觅食、竖尾等异常表现；③随机选取10只不同时期的成功帕金森病大鼠模型，免疫组化下观察发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少（P＜0．001），电镜观察发现大鼠中脑黑质神经细胞普遍存在变性坏死及不同阶段的凋亡改变。结论：用6－羟基多巴胺选择性损毁黑质多巴胺能神经元可较快建立稳定的成功率较高的类似于人类中晚期帕金 森病行为和病理的大鼠模型，但在病理和行为学等方面向帕金森病人仍有许多差异。     

药物干预对6-羟基多巴胺制作帕金森病大鼠成功率的影响

目的　研究古拉定、川芎嗪、丹参对 6-羟基多巴胺 ( 6-OHDA)制作帕金森病 (PD)大鼠成功率的影响。方法　 6-OHDA注入大鼠黑质 ,观察损伤组、古拉定治疗组 ( 12mg/kg·d-1,ip)、川芎嗪治疗组 ( 5 0mg/kg·d-1,ip)、丹参治疗组 ( 2 .5mg/kg·d-1,ip) 14d后的PD模型成功率 ,用阿朴吗啡 (APO)诱发的旋转行为 ( >5r/min)表示PD模型成功。结果　单纯损伤组和 3个治疗组表现明显的APO诱发的旋转行为 ( >5r/min) ,其模型成功率无统计差异 (P >0 .0 5 )。结论　古拉定、川芎嗪、丹参不能影响 6-OHDA对大鼠DA神经元的毒性作用     

帕金森病大鼠Caspase-8及TH蛋白表达的相关性实验研究

目的利用动物模型探讨Caspase-8和TH蛋白表达与帕金森病(Parkinson disease,PD)的关系。方法60只SD大鼠随机分为两组,大鼠帕金森病模型组:随机分3、7、14、21、28d五组,均通过脑立体定向注入6-羟多巴,均在处死前腹腔注入阿卟吗啡观察30分钟大鼠旋转的次数,连续至第四周每分钟大于6次者为成功的帕金森氏病模型;正常对照组:立体定向注入抗坏血酸生理盐水。处死后制作石蜡切片用免疫组化法检测Caspase-8、酪氨酸羟化酶(TH)蛋白的阳性细胞数。结果纹状体和黑质神经细胞存在细胞凋亡,与对照组存在显著性差异,且Caspase-8蛋白表达在大鼠纹状体和黑质中细胞3d组为最高,其后很快下降,但显著高于对照组。而TH蛋白表达在大鼠纹状体和黑质细胞中对照组为最高,在PD组很快下降,但显著低于对照组。TH蛋白表达减少及Caspase-8蛋白表达增加呈正相关。结论6-OHDA能诱发大鼠黑质细胞凋亡,Caspase-8蛋白表达是帕金森病动物模型发病机制的重要启动因素。     

应用斜面汉密顿微量注射器针头脑内注射6-羟基多巴胺制作大鼠帕金森病模型

目的：探讨应用斜面汉密顿微量注射器针头代替平面汉密顿微量注射器针头,6-羟基多巴胺（6-hydroxydopamine,6-OHDA）中脑黑质单侧单点立体定向注射法制作单侧帕金森病（Parkinson＇sdisease,PD）模型的可行性。方法：采用雌性SD大鼠,在脑立体定位技术下,应用斜面汉密顿微量注射器针头将6-OHDA注入大鼠右侧的中脑黑质部位,用动物旋转行为监测仪记录阿扑吗啡（Apomorphine,Ap0）诱发的大鼠异常旋转行为,并测定脑组织液生化改变,并与平面汉密顿微量注射器针头注射组相比较。结果：实验组和对照组的PD动物模型成功率分别为73．33％（11／15）和80．00％（12／15）,两者比较差异无统计学意义（P〉O．05）。两种针头制作的PD鼠损毁侧脑组织液中多巴胺（Dopamine,DA）代谢产物3,4-二羟基乙酸（dihydroxyphenylaceticacid,DOPAC）和高香草酸（homovanillicacid,HVA）明显低于未损毁侧（P〈0．05）。而空白对照组的旋转行为、两侧脑组织液中多巴胺代谢产物均没有明显改变。结论：应用斜面汉密顿微量注射器针头代替平面汉密顿微量注射器针头可以制作可靠而稳定的PD大鼠模型。     

纹状体内注射6-羟基多巴胺制作帕金森病大鼠模型

[目的]研究帕金森病(PD)大鼠模型的制作方法.[方法]采用单点双注法将6-羟基多巴胺(6-OHDA)立体定向注入到大鼠右侧纹状体,观察大鼠的行为变化和中脑黑质区的形态学变化.[结果]注药后2周,大鼠经阿扑吗啡诱导出现向健侧旋转行为,在2个月的观察中见旋转行为稳定.形态学观察结果示,损伤侧黑质区致密部和中脑被盖腹侧区内酪氨酸羟化酶阳性神经元数量明显减少.[结论]6-OHDA单针道双点法是制作大鼠PD模型的可行方法.     

尿酸对6-羟基多巴胺致大鼠黑质纹状体系统毒性的影响

目的 评价尿酸对6-羟基多巴胺致大鼠黑质纹状体系统多巴胺能神经元毒性的影响.方法 30只雄性SD大鼠,分为生理盐水组(10只)、100 mg/kg尿酸组(5只)、200 mg/kg尿酸组(10只)和250 mg/kg尿酸组(5只).每天2次(间隔2 h),每次腹腔注射生理盐水或尿酸5 d,于第6天第1次腹腔注射生理盐水或尿酸后,在立体定向仪指导下,右侧纹状体内两点注射6-羟基多巴胺.此后继续给予大鼠腹腔注射生理盐水或尿酸5 d.于注射6-羟基多巴胺后第3、4周分别进行自主活动计数,安非他明旋转实验,前肢功能测定.注射6-羟基多巴胺后第5周进行纹状体多巴胺和高香草酸水平测定.结果 200 mg/kg尿酸组大鼠自主活动计数[(14±4)次/2 min]明显高于生理盐水组[(4±5)次/2 min,P＜0.01];安非他明诱导的旋转实验100 mg/kg尿酸组(11.2 ±4.2)和200 mg/kg尿酸组每分钟旋转次数(10.8±7.5)显著低于生理盐水组(19.3 ±5.2,P＜0.01).200 mg/kg尿酸组前肢功能测定5 s内移动90 cm的前患肢步数(9.89±3.41)明显高于生理盐水组(4.36±3.72,P＜0.01);200 mg/kg尿酸组毁损侧纹状体多巴胺(0.29±0.19)、高香草酸水平(1.22±0.5)显著高于生理盐水组多巴胺(0.05 ±0.03,P＜0.01)、高香草酸水平(0.24±0.13,P＜0.05).结论 适当提高体内的尿酸水平能减轻6-羟基多巴胺对SD大鼠黑质纹状体系统多巴胺神经元的毒性作用.     

应用6-羟基多巴胺建立帕金森病模型大鼠黑质神经组织病理学变化

] 目的 观察帕金森病(PD)模型大鼠黑质神经组织病理学及黑质神经元超微结构的变化,探讨这些变化在PD发病过程中的作用。方法 将6-OHDA分别注入实验组大鼠左侧黑质致密部和中脑被盖腹侧区以建立帕金森病模型,利用Nissl染色、酪氨酸羟化酶（TH）免疫细胞化学染色观察大鼠黑质神经组织病理学改变;利用电子显微镜观察黑质神经元超微结构的变化。结果 实验组大鼠在术后各时间点左侧（损毁侧）黑质TH阳性神经元均较右侧有显著减少,比较实验组各时间点大鼠左侧TH阳性神经元发现,术后14,28d均较同组术后7d有显著减少,实验组大鼠黑质神经元超微结构明显受损,出现核固缩,线粒体肿胀、嵴消失,粗面内质网扩张、脱颗粒,以及突触前后膜肿胀,突触间隙消失等改变;对照组大鼠无形态学改变。结论 PD大鼠损毁侧黑质TH阳性神经元显著减少,黑质神经元超微结构有明显改变,这种超微结构的改变可能是神经元坏死减少的原因之一。     

药物干预对6-羟基多巴胺处理后大鼠多巴胺神经元、多巴胺及其代谢产物的影响

目的:研究古拉定、川芎嗪、丹参对6-羟基多巴胺(OHDA)处理后大鼠的黑质多巴胺(DA)神经元及纹状体细胞外液DA的影响。方法;将6-OHDA注射入大鼠黑质,饲养2周后用阿朴吗啡(APO)诱发其旋转行为并计数,饲养2个月时利用微透析法采集大鼠纹状体细胞外液,然后大鼠灌注取脑,酪氨酸羟化酶(TH)单抗染色,观察正常对照组、单纯手术组、古拉定治疗组(古拉定12mg/kg腹腔注射每天1次,共14天)、川芎嗪治疗组(川芎嗪50mg/kg腹腔注射每天1次,共14天)、丹参治疗组(丹参2.5ml/kg腹腔注射每天1次,共14天)的黑质DA神经元的变化,用高效液相色谱电化学法检测细胞外液的DA及代谢产物的含量变化。结果:TH单抗免疫组化染色可见4个手术组的黑质DA神经元计数明显低于正常对照组,差异有极显著性(P<0.001),而4组组间无统计差异;4个手术组纹状体DA的含量低于对照组,差异有显著性(P<0.001),4组的二羟苯乙酸(DOPAC)/DA低于对照组(P<0.001),4组组间均无差异。结论:古拉定、川芎嗪、丹参不能阻止6-OHDA对黑质DA神经元的毒性作用,亦不能增加损伤侧纹状体的DA含量。     

帕金森病小鼠相关脑区内钙结合蛋白D28k mRNA的表达

目的　研究钙结合蛋白D28k(CaBP)在帕金森病（PD）发病机制中的作用.方法　将1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氢吡啶（MPTP）按30mg     

Expression and significance of IL-6 mRNA and its protein in liver after injury in rats

Thereisagraduallyincreasedinterestoninterle'ukin--6(II---6)anditbecomesahotspotofresearchbecauseofitsrelationshipwithothercytokines,itsparticipationinthesynthesisofacutephaseproteinsanditseffectsontheearlydamagesoforgansinsystemicinjury['j.ThisstudywasdesignedtoobservethedistributionandcelllocalizationofII---6andIL--6mRNAinliverafterburninjury,endotoxemiaorthecombinationofthetwoinrats1andtheeffectsofII---6onthedevelopmentofliverdamageswereinvestigated.MATERIALSANDMETHODSOnehundreda…     

Expression and cellular localization of interleukin-6 mRNA in ovariectomized rats

Deficiency of the female hormone, caused by either menopause or removal of the ovaries, results inan accelerated bone loss by stimulating osteoclasticbone resorption over bone formation. Consequently,bone mass declines after menopause, which is themajor factor contributing to the high rate of disablingbone fracture in postmenopausal women. Indeed,about one--third of all postmenopausal women will experience at least one osteoporostic fracture duringtheir livesll]. The molecular mechanism by whi…     

糖尿病大鼠血管损伤后纤连蛋白的表达

目的 :观察糖尿病大鼠血管损伤后纤连蛋白 (FN)mRNA和蛋白的表达。方法 :Wistar大鼠 32只 ,随机分为正常对照组 (n =8) ,手术对照组及糖尿病组 (均n =12 ) ,糖尿病组单次腹腔注射链脲佐菌素 (STZ)制成糖尿病模型。后 2组大鼠均行胸主动脉至左髂总动脉球囊损伤后 ,每组选 8只用于试验。术后 14d用Northern印迹杂交测定血管平滑肌细胞FNmRNA的表达 ,用免疫组化检测FN在血管壁的表达。结果 :与手术对照组相比 ,糖尿病组FNmRNA和蛋白表达均明显增高 (P <0 .0 1) ,而此 2组又均高于对照组 (P <0 .0 1)。结论 :糖尿病患者PTCA后再狭窄的发生与FNmRNA及蛋白水平高表达有关     

慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织中树突状细胞的变化

目的 了解慢性阻塞性肺疾病（COPD）大鼠肺组织中的DCsmRNA表达变化.方法 通过烟熏＋脂多糖（LPS）方法建立COPD大鼠模型.HE染色观察气道及肺组织病理学的改变,同时用荧光定量RT-PCR检测CD86mRNA及OX-62mRNA在肺组织中的表达变化.结果 COPD模型组大鼠肺组织HE染色符合慢性支气管炎及肺气肿的病理改变.与正常对照组相比,COPD模型组大鼠CD86mRNA及OX-62mRNA表达均增加（P＜0.01）.结论 COPD模型组大鼠第28天病理表现符合人类COPD的特征性病理改变,提示COPD大鼠模型建立成功.COPD模型组大鼠肺组织中CD86mRNA及OX-62mRNA的表达较正常对照组明显升高,提示树突状细胞（DCs）在COPD大鼠肺部表达增加,这可能是COPD发生发展的重要因素.     

新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的 观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽(PYY) mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系.方法 选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-time PCR法和免疫组织化学法测定胃底组织Ghrelin mRNA和蛋白、结肠组织PYY mRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达.结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠(P<0.05),结肠PYY mRNA表达则低于7日龄大鼠(P<0.01).0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY 蛋白表达均高于7日龄大鼠(P<0.05).0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义(P>0.05).结论 未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYY mRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性.     

新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、PYY mRNA和蛋白及其下丘脑中受体mRNA的表达

目的观察新生大鼠胃肠道组织Ghrelin、酪酪肽（PYY）mRNA和蛋白以及两者位于下丘脑的受体mRNA的表达变化,并探讨其与胃肠道成熟程度的关系。方法选取0日龄和7日龄的新生大鼠各10只,分别采用Real-timePCR法和免疫组织化学法测定胃底组织GhrelinmRNA和蛋白、结肠组织PYYmRNA和蛋白、下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达。结果 0日龄大鼠胃底Ghrelin mRNA表达高于7日龄大鼠（P〈0.05）,结肠PYYmRNA表达则低于7日龄大鼠（P〈0.01）。0日龄大鼠胃肠道Ghrelin和PYY蛋白表达均高于7日龄大鼠（P〈0.05）。0日龄与7日龄大鼠下丘脑Ghrelin和PYY受体mRNA的表达比较,差异均无统计学意义（P〉0.05）。结论未成熟胃肠道组织Ghrelin和PYY蛋白合成分泌增加,起到促进胃肠道发育成熟的作用;而PYYmRNA与蛋白质表达的不平行状态提示该基因表达调控可能具有多样性。     

Noggin mRNA在新生大鼠脑内的表达

目的 研究Noggin mRNA在新生大鼠脑内的表达。方法 采用地高辛标记的cRNA探外原位杂交法。结果 Noggin mRNA在新生大鼠的多个脑区均有较强的表达,其中在延髓的舌下神经核与楔束核、丘脑的侧核与网状核、下丘脑的室旁核、胼胝体、海马的前下托表达最强,下 脑的视上核、室周区、丘脑的背内侧核与腹内侧核亦有较强的阳性信号、而皮层和海马的阳性信号较弱,仅有部分散在而淡染的阳性神经元。结论 Noggin与新生大鼠脑的发育和功能活动有关。     

针灸对帕金森病动物模型行为及次级体感觉区皮质神经细胞的电活动性的影响

目的 观察针灸刺激对帕金森病(Parkinsen,s disease,PD)大鼠旋转行为及脑细胞神经电活动性的影响,探讨针灸刺激治疗PD的作用机理.方法 在大鼠双侧次级体感觉区皮质(SII),种植8频电极,并采用6-OHDA建立纹状体毁损PD大鼠模型,观察针灸刺激后随时间的PD鼠旋转行为的变化,并同时检测脑部神经细胞电活动性的改变.结果 针灸刺激后,治疗组经针灸治疗后较治疗前旋转次数明显减少(P<0.05),脑部神经细胞电活动性的明显改变(P<0.01).假手术组、模型组均无变化(P>0.05).结论 本研究表明,针灸刺激干预可明显改善PD大鼠的旋转行为,减慢了双侧纹状体多巴胺细胞的凋亡速度,增加TH阳性神经元数量,代偿性的改变损伤侧及健侧大脑半球前扣带皮质神经细胞活动性.     

Hepa1-6肝癌细胞经丝裂霉素处理后对survivin表达的影响

目的 探讨经丝裂霉素(MMC)处理后Hepa1-6肝癌细胞survivin表达的变化.方法 体外培养Hepa1-6经1.0、3.0和9.0μg/ml浓度的MMC处理后1和3 d,MTT法测定Hepa1-6生长抑制率,RT-PCR法检测survivin mRNA和Western blot法检测survivin蛋白的表达.结果 9.0μg/ml浓度的MMC对Hepa1-6的抑制率明显高于1.0和3.0μg/ml浓度组,1.0和3.0μg/ml的MMC作用3 d后对Hepa1-6生长无抑制.各浓度MMC处理第1天的Hepa1-6表达survivin mRNA以及survivin均降低,1.0和3μg/ml的MMC处理第3天,Hepa1-6表达survivin mRNA以及survivin升高,9μg/ml组survivin mRNA以及survivin表达于第3天仍低.结论 低浓度MMC能诱导Hepa1-6细胞内survivin表达增加.可能是Hepa1-6对化疗药物产生耐药性的因素之一.