N-甲基-D-天冬氨酸受体NR2B亚基与神经元凋亡

神经元凋亡是缺血性卒中神经元死亡的重要形式之一.在神经元凋亡过程中,民N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartate,NMDA)受体介导的兴奋性氨基酸毒性起着重要作用,是神经元凋亡的启动者和执行者.NR2B是该受体的主要调节亚基,其跨膜片段M2是一个面向胞质向膜内反折的膜襻区,形成离子通道的内壁,决定了NMDA受体离子通道对ca2+的通透性.谷氨酸主要通过钙超载介导细胞损伤,因此,NR2B亚基在缺血性卒中神经元凋亡中起着至关重要的作用.     

NMDA受体NR2B亚型基因对海马成年新生神经元形态发生的影响

目的研究NMDA受体NR2B亚型基因对海马成年新生颗粒细胞形态发生的影响。方法通过Cre-loxp重组酶系统构建NMDA受体NR2B亚型基因单细胞敲除模型。运用Neurolucida软件系统对野生型、NR2B基因敲除成年新生神经元进行形态重建,观察树突长度、树突复杂度以及棘突的变化。结果 NR2B基因敲除成年新生神经元外形与WT神经元相似,树突长度接近,棘突减少。Sholl分析显示在以胞体为中心,距胞体不同距离的树突亚区域内,树突复杂性(树突交叉)减低,与此同时棘突分布密度减低(P<0.05)。结论海马成年新生颗粒神经元NR2B基因敲除对新生细胞树突长度影响甚微,但降低了树突复杂性,减少棘突形成,从而导致了功能性整合入海马特定神经信息网络的障碍。     

电针对脑缺血再灌注模型大鼠纹状体NMDA受体NR2亚基蛋白表达的影响

目的 观察脑缺血再灌注模型大鼠受损侧纹状体组织中NMDA受体调节亚单位NR2A和NR2B蛋白表达及其电针干预后的变化,探讨电针对缺血再灌注兴奋性氨基酸毒性的拮抗作用,进一步阐明电针治疗缺血性脑血管疾病的机制.方法 用数字随机表将15只SD大鼠随机分成3组:假手术组、模型组、电针组,每组各5只.采用改良Longa线栓法制作大脑中动脉短暂性缺血再灌注模型,电针组大鼠在再灌同时电针“百会”、“大椎”两穴(连续波,频率3 Hz,电流强度1～3 mA),30 min,深度均为10 mm.免疫组织化学法及图像处理系统检测分析大鼠受损侧纹状体NR2A、NR2B蛋白表达情况.结果 与假手术组相比,模型组大鼠纹状体组织中NR2A的表达量明显下降,而NR2B的表达量明显升高,给予电针“百会”、“大椎”穴后的大鼠纹状体组织NR2A表达细胞数及含量均明显高于模型组,表达NR2B的细胞数及含量均明显降低.结论 电针可能通过激活NR2A受体蛋白表达,抑制NR2B受体蛋白的过量表达,从而调节NMDA受体复合物的整体功能活性,减少NMDA受体介导的兴奋性氨基酸毒性反应,减轻脑缺血再灌注引起的局灶性脑损伤,发挥一定的脑神经保护作用.     

舒芬太尼预处理对老年大鼠脊柱脊髓损伤后心肌的保护作用

目的探讨舒芬太尼预处理对老年大鼠脊柱脊髓损伤后心肌的保护作用。方法健康雄性SD大鼠120只随机分为空白对照组、模型组和干预组各40只。空白对照组大鼠自由饮水、摄食,模型组和干预组大鼠建立脊柱脊髓损伤模型,干预组采用舒芬太尼预处理。腹主动脉取血,测定肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激酶(CK)、肌钙蛋白(cTn)I、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD);采用伊文氏蓝-TTC法测定心肌梗死面积;苏木素-伊红(HE)染色法观察心肌细胞组织形态学变化。结果干预组心肌梗死面积较模型组明显更低(P<0.05);干预组CK-MB、CK、cTnI、MDA水平明显低于模型组,而SOD水平显著高于模型组(P<0.05)。结论老年大鼠脊柱脊髓损伤后存在明显的心肌损伤,而采用舒芬太尼预处理可明显改善脊柱脊髓损伤所致的心肌损伤程度,对心肌功能具有一定保护作用,其作用机制可能与舒芬太尼抑制氧化产物的产生、提高机体抗氧化能力有关。     

脑通胶囊对VD大鼠海马组织NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA表达的影响

目的观察脑通胶囊对血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆、海马组织N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体1亚基和2B亚基mRNA表达的影响。方法采用改良的四血管法(14-VO)制备VD模型,Morris水迷宫测定大鼠学习、记忆能力,实时荧光定量PCR检测NMDA受体1亚基和2B亚基mRNA的表达情况。结果与模型组比较,脑通胶囊大、中剂量组逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数增加,NMDA受体1亚基mRNA表达降低,NMDA受体2B亚基mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论脑通胶囊可降低NMDA受体1亚基mRNA的表达,提高NMDA受体2B亚基mRNA的表达,从而改善VD大鼠学习、记忆能力。     

毫针不同刺激强度对胃扩张疼痛大鼠脊髓背角NMDA受体和P物质的影响

目的:探讨毫针不同刺激强度针刺足三里穴后对胃扩张大鼠的拟痛行为学、脊髓背角N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体表达和P物质(SP)含量的影响.方法:50只大鼠按完全随机法分成5组, 分别为空白组、假手术组、模型组、轻手法组和重手法组. 采用胃内植入气囊并充气压40mmHg造成胃扩张疼痛模型, 轻手法和重手法针刺足三里穴为施治因素, 以拟痛行为学评分标准观察其拟痛行为学, 用免疫组织化学法检测脊髓背角中NMDA受体表达和SP含量.结果:与假手术组比较, 胃扩张造模后, 大鼠拟痛行为学评分和脊髓背角内NMDA受体均明显增加( P<0.01); 轻、重手法针刺均能明显降低胃扩张疼痛大鼠的疼痛反应, 与针前比较有非常显著性意义(11.77±2.16分vs22.83±1.87分, 14.73±2.19分vs 21.73±2.30分, 均P<0.01); 并能降低NMDAR受体(140.60±21.30 vs 240.20±25.59, 63.60±13.74 vs108.67±11.37, 均P<0.01)、SP阳性细胞数(63.60±13.74 vs 108.67±11.37, 82.67±12.13vs 108.67±11.37, 均P<0.01), 与模型组比较差异有非常显著性意义; 且轻手法组优于重手法组( P<0.01).结论:不同刺激强度针刺足三里后, 减轻了胃扩张疼痛大鼠的应激反应, 其作用机制是抑制脊髓背角内疼痛相关信息物质NMDA受体激活和SP的释放.     

等效小剂量芬太尼、瑞芬太尼、舒芬太尼诱导对BIS的影响

目的 比较等效小剂量芬太尼、舒芬太尼、瑞芬太尼在单独静脉推注或者联合丙泊酚静脉靶控时对脑电双频指数(BIS)的影响.方法 选择择期在全身麻醉下手术的患者80例,随机分为八组,每组10例:对照组(C组),盐水+丙泊酚组(C+P组),芬太尼组(F组),芬太尼+丙泊酚组(F+P组),瑞芬太尼组(R组),瑞芬太尼+丙泊酚组(R+P组),舒芬太尼组(S组),舒芬太尼+丙泊酚组(S+P组).所有患者首先丙泊酚按阶梯式靶控输注,待患者BIS≤65时停药,当BIS恢复到80开始第二次给药,C组、F组、R组、S组分别以2ml、2.4、2、0.2μg/kg的剂量静脉注射,或者复合靶控输注丙泊酚(血浆浓度3 μg/ml).分别记录麻醉前(T0)、BIS≤65(T1)、BIS≥80(T2)、第二次给药后1 min(T3)、2 min(T4)、3 min (T5)、5 min(T6)、10 min(T7)、15 min(T8)、20 min(T9)时患者的BIS,并记录诱导期间所有的不良反应.结果 R组在T4、T5时间点,BIS值降低,与T2比较差异有统计学意义(P＜0.01);F+P组、R+P组、S+P组在T9时间点,BIS值高于C+P组(P＜0.05).R+P组在T8时间点,BIS值高于C+P组(P＜0.05).结论 以血浆浓度为3μg/ml输注丙泊酚时静脉注射瑞芬太尼2μg/kg、芬太尼2.4μg/kg或舒芬太尼0.2μg/kg并不使BIS的抑制加深,反而在注药后第20分钟容易出现BIS值回升;单次静脉注射芬太尼或舒芬太尼未见对BIS值产生明显抑制作用,但静脉注射瑞芬太尼后出现短暂BIS值下降.     

舒芬太尼对老年手术患者全麻诱导期应激反应的干预作用

老年患者由于其心血管代偿功能减弱,因此在施行全麻诱导时要求既能很好地抑制插管引起的应激反应,又能很好地维持整个全麻过程中血流动力学的稳定性[1].阿片类镇痛药芬太尼及其衍生物舒芬太尼能有效抑制全麻诱导时的心血管反应[2].本文采用舒芬太尼在老年患者麻醉诱导插管时对患者进行干预,同时以芬太尼作为对照,以期寻求最佳的麻醉方法.     

舒芬太尼后处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的实验研究

目的 观察不同剂量舒芬太尼(SFT)后处理的心肌保护作用.方法 健康SD雄性大鼠24只,体重250 g～300 g,随机分为假手术组、缺血再灌注组、舒芬太尼后处理低剂量组、舒芬太尼后处理高剂量组.采用结扎左冠状动脉前降支30 min再灌注120 min的方法制备心肌缺血再灌注模型.假手术组完成模型仅穿线,不结扎;假手术组穿线后腹腔注射生理盐水1 mL,缺血再灌注组缺血再灌注前2 min腹腔注射生理盐水1 mL,舒芬太尼后处理低、高剂量组分别腹腔注射舒芬太尼稀释液1 mL,2 μg/kg、10μg/kg.于实验结束时制作心肌组织匀浆,检测心肌组织中的超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量;右心室采血常温离心分离检测血清心肌酶(CK)、血清乳酸脱氢酶(LDH)、血清一氧化氮(NO)含量,取左心室切5块,来用氯化硝基四氮唑蓝(N-BT)染色法区分正常和梗死区,用梗死区重量占左心室重量百分比观测梗死程度.结果 与假手术组比较,缺血再灌注组心肌组织SOD活性下降,MDA增高,血清CK及LDH水平增高,血清NO含量减少;与缺血再灌注模型组比较,舒芬太尼后处理组,心肌组织SOD活性升高,MDA降低,血清CK及LDH释放减少;血清NO含量增加;再灌注心律失常明显减少;心肌梗死程度降低;以舒芬太尼后处理高剂量组更为明显.结论 舒芬太尼后处理能够减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤的程度,并且呈剂量依赖性.     

舒芬太尼预处理对脑死亡大鼠肝细胞凋亡的影响

目的:观察舒芬太尼预处理对脑死亡大鼠导致的肝细胞凋亡的影响.方法:将18只SD大鼠随机分为假手术组(Sham组)、脑死亡组(BD组)、舒芬太尼预处理组(SUF组).采用缓慢颅内加压法建立大鼠脑死亡模型,诱导脑死亡前1 h皮下给予舒芬太尼10冚g/kg.利用免疫组织化学及Western blot检测细胞色素c(cytochrome c,Cyt-c)及Caspase3的表达,并且利用TUNEL检测肝细胞的凋亡.结果:通过实验发现:BD组与Sham组相比,Cyt-c与Caspase3表达明显增加,肝细胞凋亡增加,差异具有统计学意义(P0.05);SUF组与BD组相比,Cyt-c与Caspase3表达明显降低,肝细胞凋亡减少(P0.05).结论:舒芬太尼的预处理能显著减轻脑死亡大鼠肝细胞的凋亡.     

舒芬太尼对培养大鼠乳鼠缺氧心肌细胞损伤保护作用的研究

目的探讨舒芬太尼对原代培养心肌细胞缺氧损伤的影响。方法将原代培养成活48h的大鼠乳鼠心肌细胞分为3组:A组为对照组(氰化钠造成心肌细胞细胞内缺氧模型),B组为suf1组(缺氧+0.1ng/mL舒芬太尼),C组为suf2组(缺氧+0.2ng/mL舒芬太尼)。比较3组心肌细胞形态学(倒置相差显微镜,透射电镜观察)的变化及吸光度A值的改变。结果缺氧12h后,对照组细胞搏动功能变化明显,呈散在性搏动,而实验组搏动频率减慢。随着时间的延长,细胞形态学变化逐渐明显,对照组较实验组变化更显著。结论舒芬太尼对原代培养大鼠乳鼠心肌细胞缺氧损伤有一定的保护作用。     

舒芬太尼用于无痛胃镜的临床观察

胃镜检查是上消化道疾病的基本检查,由于是侵入性检查,咽喉部强烈刺激必然引起咽喉部不适,诱发呛咳、恶心、呕吐,甚至躁动,还会产生不同程度的紧张、焦虑和疼痛.无痛胃镜已在临床开展多年,且多采用芬太尼、咪唑安定复合异丙酚来完成.舒芬太尼是一种新型的阿片类镇痛药,我们采用舒芬太尼结合异丙酚麻醉用于胃镜检查,并与芬太尼比较观察其用于无痛胃镜的安全性和可行性.     

NR2B受体拮抗剂及其在缺血性脑血管病中的应用

脑缺血时的神经损伤与谷氨酸过度兴奋N-甲基-D-天门冬氨酸（NMDA）受体有关。由于非选择性NMDA受体拮抗剂能影响所有NMDA受体而产生不良反应,其临床应用受到很大限制,因此选择性NMDA受体在近年来受到越来越多的重视。NR2B亚单位拈抗剂主要分为哌啶衍生物、酰胺衍生物、脒衍生物、氨基喹啉衍生物等,主要代表药物有艾芬地尔、依利罗地。它们能选择性作用于NMDA受体NR2B亚单位,有望成为临床上安全有效的神经保护剂。     

舒芬太尼用于冠心病手术的疗效观察

目的观察舒芬太尼用于冠心病手术的疗效。方法选取我院2014年1月~2016年1月收治的冠心病患者9 1例为研究对象,按照随机抽取的方式分为研究组4 6例与对照组4 5例。所有患者术前1 2 h禁食,术前半小时肌肉注射东莨菪碱、吗啡、苯巴比妥钠、阿托品,开放静脉通路、吸氧,常规检测生命体征。研究组、对照组患者分别给予舒芬太尼、芬太尼进行麻醉诱导。比较观察两组不同时刻血流动力学指数、麻醉用药情况。结果诱导后,所有患者的H R、M A P均降低,C V P均升高,研究组诱导后、气管插管后1 m i n、气管插管后5 min、气管插管后10 min HR、MAP均低于对照组,CVP均高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);两组患者的苏醒时间、拔管时间比较,差异无统计学意义(P0.05);研究组诱导浓度低于对照组,麻醉总量少于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。结论与芬太尼相比,舒芬太尼用于冠心病手术,对患者血流动力学影响较小,在保证相同麻醉效果的前提下,麻醉诱导浓度较低,用药量较少,更值得临床推广。     

二氮嗪预处理对Aβ_(1~42)作用神经元NR2B亚基蛋白表达的影响

目的研究ATP敏感的钾离子通道开放剂二氮嗪(diazoxide)预处理对Aβ1~42作用原代培养神经元N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受体2B(NR2B)亚基蛋白表达的影响。方法原代培养大鼠皮层海马神经元并进行鉴定,将细胞随机分为对照组、单纯Aβ1~42干预组、二氮嗪预处理1h后Aβ1~42干预组(Aβ1~42+diazoxide)、单纯二氮嗪预处理组,并采用免疫印迹检测不同时间点(24 h、72 h)细胞NR2B亚基蛋白表达水平的变化。结果 Aβ1~42(2μmol/L)作用神经元24 h后,与对照组相比,单纯Aβ1~42干预组和Aβ1~42+diazoxide组的NR2B亚基蛋白表达均无明显改变。Aβ1~42作用神经元72 h后,与对照组比较,单纯Aβ1~42组NR2B亚基蛋白表达量显著升高(P0.05);而与单纯Aβ1~42干预组相比,Aβ1~42+diazoxide组NR2B亚基蛋白表达明显降低(P0.05)。结论 Aβ1~42作用原代培养神经元72 h,能够显著增加神经细胞NR2B亚基蛋白的表达量;同时,二氮嗪能拮抗Aβ1~42所引起的NR2B亚基蛋白表达量升高,提示二氮嗪可能通过NMDA受体通路影响Aβ1~42的细胞毒性作用。     

舒芬太尼分娩镇痛对母婴一氧化氮和内皮素的影响

将100例足月初产妇随机分为F、S1、S2、S3、S4组,F组给予0.1%罗哌卡因复合2 μg/ml芬太尼,S1～S4组分别给予0.1%罗哌卡因复合0.3、0.4、0.5、0.75 μg/ml舒芬太尼镇痛.观察其镇痛效果及镇痛前后母婴一氧化氮(NO)及内皮素(ET)的变化.发现各组镇痛后VAS评分较镇痛前明显下降,S2、S3、S4组镇痛后5～10 min VAS评分低于S1、F组;镇痛后各组母血ET水平明显下降.认为舒芬太尼分娩镇痛延缓母婴NO水平降低,降低ET水平,有利于母儿安全.     

NMDA受体NR1、NR2A/B在丘脑前核-海马CA1、CA3脑区和齿状回的分布与表达

目的 探讨NMDA受体NR1、NR2A/B在丘脑前核-海马CA1、CA3脑区和齿状回的分布与表达,以及丘脑前核-海马神经元的学习记忆功能及作用机制.方法 运用原位杂交检测技术观测丘脑前核及海马CA1、CA3和齿状回内NMDA受体NR1、NR2A 及NR2B mRNA的分布特点.结果 ①原位杂交阳性产物呈棕黄色,主要分布在神经元的胞浆中,胞核基本不着色.②在丘脑前核,阳性神经元分布较密集,细胞形态较一致.③在海马锥体层阳性神经元分布较多,呈带状.在分子层、多形层分布少.④NR1、NR2A/B在丘脑前核和海马CA1、CA3脑区及齿状回均有表达,其中NR1在齿状回表达水平最强,NR2B在丘脑前核、海马CA1、CA3和齿状回表达水平基本相同.结论 在丘脑前核-海马的局部神经元环路中NMDA受体NR1、NR2A及NR2B mRNA分布广泛.其中NR2B mRNA在丘脑前核和海马CA1、CA3脑区及齿状回表达水平基本相同,可能与此环路学习记忆有关.     

丙泊酚联合舒芬太尼或瑞芬太尼用于老年人纤维结肠镜检查的临床观察

目的探讨丙泊酚联合舒芬太尼和瑞芬太尼用于老年人纤维结肠镜检查的安全性。方法应用丙泊酚联合舒芬太尼或瑞芬太尼对老年人行无痛纤维结肠镜各40例,均静注丙泊酚0.5~1 mg/kg,然后舒芬太尼组静注舒芬太尼0.2μg/kg,瑞芬太尼组静注瑞芬太尼0.4μg/kg,维持0.1μg.kg-1.m in-1;观察其术前、术中、术后的平均动脉压(MAP)、心率(HR)、脉搏氧饱和度(SpO2)变化,术中、术后的不良反应、应用纳洛酮情况及术毕恢复情况。结果两组病例间MAP、HR、SpO2、不良反应、术毕恢复情况无显著差异,但术中较术前MAP、HR、SpO2低,两组不良反应均有一定发生率;同时舒芬太尼组应用纳洛酮情况明显多于瑞芬太尼组。结论丙泊酚联合舒芬太尼或丙泊酚联合瑞芬太尼应用于老年人纤维结肠镜检查均存在一定风险,而应用丙泊酚联合瑞芬太尼恢复得更好。     

异丙酚联合舒芬太尼用于人工流产的临床观察

目的 探讨一种安全有效、毒副反应小、镇痛效果好的终止早孕的麻醉方法.方法 自愿参加该项工作项目的 早孕妇女90例,实行无痛人工流产术.结果 镇痛效果满意,宫颈松弛良好,生命体征平稳,人工流产综合征发生率低.结论 异丙酚、舒芬太尼在人工流产术中应用具有安全可靠、操作简单、镇痛效果确切等优点,是一种较好的、可广泛应用的镇痛方法.