PC-3细胞中雄激素受体突变体的表达和转录激活功能的研究

目的:探讨不同时间点移植骨髓单个核细胞(bone marrow mononuclear cells,BMMCs)对心肌梗死后的心功能的影响.方法:取成年雄性近交系Wistar大鼠股骨和胫骨,常规抽取骨髓,分离制备BMMCs悬液.将成年雄性近交系Wistar大鼠64只随机分为空白对照组(组Ⅰ,n=10)、梗死对照组(组Ⅱ,n=18)、即刻移植组(组Ⅲ,n=18)和两周移植组(组Ⅳ,n=18).用结扎冠状动脉左前降支的方法建立大鼠心肌梗死模型,在建模后即刻和2周分别将10μl BMMCs液(6×106个细胞)植入组Ⅲ和组Ⅳ的梗死周边区,组Ⅱ于建模后14 d植入等量的磷酸盐缓冲液(PBS).用心脏超声和血流动力学检查观察细胞移植后4周的心脏功能改变.结果:骨髓单个核细胞移植4周后,与组Ⅱ、组Ⅲ相比,组Ⅳ左室功能重建指标[左室射血分数(EF)、左室短轴缩短率(FS)、左室前壁厚度(LVAWT)]和血流动力学检查指标[左室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP)和左室舒张压力时间变化最大速率±dp/dtmax]均明显改善(P＜0.05);而组Ⅱ、Ⅲ间上述指标相比无显著差异.结论:心肌梗死后2周骨髓单个核细胞移植治疗效果优于即刻移植,可能是由于在心肌梗死后1周时炎症反应最重,而2周时逐渐减弱.     

非甾体类雄激素受体拮抗剂的研究进展

研究发现,雄激素受体与前列腺癌的发生存在密切关系。雄激素拮抗疗法成为临床治疗早期前列腺癌的有效手段,近20年来已有多个药物上市（如氟他胺、羟基氟他胺和比卡鲁胺等）,但这些经典的药物在治疗中易产生抗雄激素撤除综合症等问题,因此其应用受到限制。目前,新近研发的非甾体类雄激素受体拮抗剂（如RD162、MDV3100和BMS-641988）活性更强,正进行临床试验,并有望解决过去雄激素受体拮抗剂存在的问题。查阅国内外相关文献,对已上市药物、当前临床研究的药物以及近年发现的小分子雄激素受体抑制剂的研究进展进行综述。     

雄激素受体反义RNA逆转录病毒载体的构建及其鉴定

目的　构建雄激素受体 (AR)反义RNA逆转录病毒载体pL AR SN并进行包装和鉴定。方法　PCR扩增ARcDNA片段并将之反向插入到逆转录病毒载体pLXSN ,用脂质体法转染PA31 7细胞 ,提取转染细胞基因组DNA和培养上清中重组逆转录病毒RNA ,用PCR和RT PCR法进行鉴定 ,NIH 3T3细胞测定病毒滴度。结果　限制性内切酶分析证明pL AR SN含有反向插入的ARcDNA目的片段 ;培养上清中病毒滴度为 2 .34× 1 0 5 CFU/ml,PCR和RT PCR分别从转染细胞基因组DNA和培养上清中的重组逆转录病毒RNA中扩增出了插入的目的片段。结论　成功构建了AR反义RNA逆转录病毒载体并包装出了高滴度的重组逆转录病毒。     

雄激素依赖性和非依赖性前列腺癌雄激素受体表达水平的变化

目的:从雄激素受体表达水平变化的角度,探讨雄激素依赖性前列腺癌向雄激素非依赖性前列腺癌转化的可能机理。方法:体外培养雄激素依赖性前列腺癌细胞株(LNCaP细胞)和雄激素非依赖性前列腺癌细胞株(PC-3细胞),应用流式细胞术测定两种细胞株在生理盐水和二氢睾酮(DHT)作用下雄激素受体(AR)的表达水平。结果:两种细胞株均有AR表达,两种条件下AR的表达水平分别为:LNCaP细胞生理盐水处理组85.99±4.97,DHT处理组93.74±3.63;PC-3细胞生理盐水处理组8.52±1.57,DHT处理组9.52±1.75,两种条件下LNCaP细胞的AR表达水平均高于相应条件下PC-3细胞的AR表达水平,两者有显著性差异(P<0.05)。DHT作用下LNCaP细胞的AR表达水平显著高于生理盐水作用下LNCaP细胞的AR表达水平(P<0.05);DHT作用下PC-3细胞的AR表达水平与生理盐水作用下PC-3细胞的AR表达水平无显著性差异(P>0.05)。结论:雄激素依赖性前列腺癌细胞过表达AR,并且二氢睾酮能促进其表达AR;雄激素非依赖性前列腺癌细胞AR表达较少,二氢睾酮对其AR表达无明显作用,雄激素依赖性前列腺癌向雄激素非依赖性前列腺癌转化可能与前列腺癌雄激素受体表达水平下降有关。     

靶向于雄激素受体的siRNA筛选及效能评价

目的 设计并合成新的靶向于雄激素受体(AR)的siRNA序列,转染前列腺癌细胞筛选最佳干扰序列.方法 设计并合成靶向于雄激素受体的siRNA,以不同浓度转染雄激素非依赖性前列腺癌细胞C4-2,确定最佳转染浓度.以最佳转染浓度转染细胞,分为siRNA Ⅰ组、siRNAⅡ组、siRNAⅢ组、阴性对照组、空白对照组和无关对照...     

自制抗人雄激素受体单克隆抗体检测肝癌标本中AR的表达

目的：探讨原发性肝癌病人雄激素受体表达，进一步评价自行研制抗人雄激素受体(androgen receptor,AR)单克隆抗体(McAb)。方法：采用免疫组化法检测35例原发性肝癌病人雄激素受体。结果：原发性肝癌病人雄激素受体71％为阳性，癌组织与癌周围组织相比，AR表达有显著差异(P＜0．01)。自制AR McAb与进口AR多抗存在正相关r＝0．87，P＜0．001。结论：原发性肝癌病人雄激素受体表达与肿瘤大小及分化程度存在相关性，可为原发性肝癌激素治疗提供初步资料；自制抗AR McAb可代替进口AR多杭应用于临床及科研工作。     

雄激素受体(AR)在浸润性乳腺癌中的表达及其与乳腺癌分子分型的相关性

目的:探讨浸润性乳腺癌患者的雄激素受体(AR)与乳腺癌分子分型的相关性.方法:选取本院2016年3月～2019年12月收治的60例浸润性乳腺癌患者,比较不同年龄、月经状态、肿瘤直径、临床分期、组织学分级、组织学类型、淋巴结状态、ER、PR、Ki-67、HER2表达患者的AR阳性率.AR表达与分子分型的相关性采用Spea...     

雄激素受体基因多态性与前列腺癌关系的研究

目的探讨前列腺癌与雄激素受体基因多态性(ARStuI)的关系.方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析的方法,对81例前列腺癌患者及90例同龄老年非前列腺癌男性ARStuI进行检测,分析ARStuI与前列腺癌之间的关系.结果前列腺癌患者和对照组中S1等位基因所占比例分别为12.3%和3.3%,差别具有显著意义(P=0.040);S1基因型与进展期(C、D期)肿瘤、高分级肿瘤(Gleason评分≥7)及高危险性肿瘤(进展期肿瘤或高分级肿瘤)均无显著性差异;S1在存在骨转移的患者中的比例为28.0%,而在无骨转移的患者中则为5.4%,其统计学差异具有显著意义(P=0.008).结论前列腺癌的易感性可能与ARStuI有关.     

雄激素受体参与去势抵抗性前列腺癌发生机制的研究进展

前列腺癌是老年男性多发的恶性肿瘤之一,去势治疗即雄激素剥夺疗法(ADT)成为目前治疗晚期前列腺癌的常用手段。然而随着疗程的推进,治疗效果越来越差,肿瘤会进一步发展为去势抵抗性前列腺癌(CRPC)。雄激素受体(AR)是雄激素与前列腺癌细胞结合、发挥激素生物活性、促进前列腺癌组织生长的必要物质,其在ADT治疗前列腺癌过程中起至关重要的作用。目前研究认为,AR及其介导的相关通路参与了CRPC的发生,但其具体表现及相关机制尚未完全研究清楚。本文将结合最新研究,对AR参与CRPC发生的途径及机制进行综述。     

前列腺癌组织中雄激素受体剪接变异体7的表达及临床意义

目的探讨雄激素受体剪接变异体7 (AR-V7)在前列腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集2017年3月至2019年3月大连医科大学附属大连市中心医院泌尿外科48例患者的组织标本。其中良性前列腺增生18例(良性增生组)、局限性前列腺癌18例(局限癌组)、前列腺癌骨转移12例(骨转移癌组)。免疫组化染色检测各组AR-V7阳性表达;qRT-PCR检测各组AR-V7mRNA的表达。结果免疫组化结果显示3组比较AR-V7阳性表达存在统计学差异(P <0.05)。qRT-PCR检测结果显示,与良性增生组比较,局限癌组AR-V7 mRNA表达增高(P<0.05);与良性增生组和局限癌组比较,骨转移癌组AR-V7 mRNA表达增高(P <0.05)。结论前列腺癌组织中AR-V7表达增高,且与前列腺癌的临床进展相关,提示AR-V7可能参与前列腺癌的临床进展和骨转移的发生。     

雄激素受体调控基因组表达与去势抵抗性前列腺癌关系探索

目的 探索雄激素受体调控基因与前列腺癌发生去势抵抗的关系.方法 选取80例经病理检查和临床资料证实并采用内分泌治疗的前列腺癌患者,随访获取发生去势抵抗时间,定量即时聚合酶链锁反应(qRT-PCR)检测确诊时穿刺标本的六个雄激素受体调控基因KLK3(PSA),PMEPA1,NKX3.1,ODC1,AMD1和ERG表达并分...     

人前列腺不同生长发育期雄激素受体表达变化

目的检测雄激素受体(AR)在人前列腺不同生长发育时期表达的变化,探讨它们变化的病理意义。方法采用免疫组化两步法检测10例胎儿前列腺(EP)、10例正常前列腺(NP)、20例前列腺增生(BPH)、20例雄激素依赖性前列腺癌(ADPC)和15例激素非依赖性前列腺癌(AIPC)组织的AR表达。结果 EP细胞浆和细胞核均有AR表达,且间质细胞AR表达先于腺上皮AR表达。NP组织的AR表达主要集中在上皮细胞核,与EP相比,基底细胞和间质细胞AR表达明显减少,而BPH组织的腺上皮细胞和间质细胞均有AR的较强表达。AR在前列腺癌(Pca)的表达位于癌细胞核,AIPC的AR表达比ADPC明显增强。结论 AR表达的变化与人前列腺不同生长发育时期和前列腺癌的发生发展密切相关。     

胰岛素样生长因子Ⅰ对三维培养兔关节软骨细胞增殖和表型的影响

目的:探讨前列腺癌中发现的4种雄激素受体(androgen receptor,AR)的点突变对AR转录激活功能的影响.方法:将野生型AR(wtAR)或AR突变体的表达载体与报告基因(pMMTV-LUC)及内参照基因(pRLSV40-LUC)质粒共转染入PC-3细胞中,分别用雄激素受体的激动剂二氢睾酮(DHT)以及其他甾体激素(雌二醇及孕激素)处理细胞,24 h后用双荧光素酶报告基因分析系统检测报告基因的活性,同时用Western印迹法检测AR蛋白.结果:在DHT作用下,G142V、D221H突变体对报告基因的诱导水平高于wtAR,是wtAR的近1.30倍(P＜0.05),其余突变体与wtAR相比对报告基因的诱导水平无显著差异;在雌二醇(E2)与孕激素(PROG)作用下,E872Q对报告基因的诱导水平高于wtAR,分别为wtAR的1.27、1.47倍(P＜0.05).结论:G142V、D221H点突变使AR突变体转录激活功能增强,E872Q点突变可能影响了AR的配体结合特异性,上述结果有助于阐明前列腺癌由雄激素依赖性转为非依赖性的机制.     

雄激素受体反义RNA对前列腺癌细胞雄激素受体表达的抑制作用研究

目的 观测雄激素受体（AR）反义RNA逆转录病毒表达载体在前列腺癌细胞中的表达及其对AR表达的影响。方法 将AR反义RNA逆转录病毒表达载体导入前列腺癌细胞株LNCaP，PCR检测AR目的片段在重组LNCaP细胞基因组中的存在，RT－PCR检测AR反义RNA表达和AR mRNA水平，Western blot检测AR蛋白表达水平。结果 PCR在LNCaP^as-AR基因组DNA中扩增出了AR目的片段，表明AR目的片段整合到了细胞基因组。RT－PCR证实LNCaP^as-AR有AR反义RNA表达，且其AR mRNA水平较LNCaP和空载体转染的LNCaP^Neo显著下调（P＜0.05)，Western blot证实LNCaP^as-AR细胞AR蛋白含量显著下降（P＜0.05)。结论 AR反义RNA可抑制前列腺癌细胞AR表达。     

雄激素对大鼠前列腺不同分叶雄激素受体及其mRNA表达的影响

目的 探讨雄激素对大鼠前列腺腹叶及侧叶1(Lateral lobe part1，LP1)、侧叶2(Lateral lobe part2，LP2)、雄激素(Androgen receptor，AR)及AR mRNA表达的影响。方法 选用健康成年雄性Wistar大鼠，随机分成以下3组：正常对照组(N组)；雄激素去势组(C组，共56只)：经阴囊手术切除双侧睾丸，制成雄激素去势动物模型，再分成去势后1d(C1)、3d(C3)、7d(C7)及14d(C14)四个时相点；雄激素替代组(T组，共28只)：双侧睾丸切除后14d，丙酸睾丸酮0．5ml(2．5mg/只)皮下注射，1次／d，分成雄激素替代后1d(T1，14只)，7d(T7，14只)两个时相点。应用免疫组织化学及半定量PCR方法分别检测大鼠前列腺121及LP2 AR、AR mRNA的表达。结果鼠前列腺腹叶、LP1及LP2对雄激素调节的敏感性不同，在腹叶及LP1，雄激素与AR表达呈正相调节关系，雄激素去势后，AR表达下调，AR mRNA呈一过性上调；而在LP2，情形与前者明显不同，雄激素去势后，AR mRNA表达持续上调，而对AR表达无明显影响。结论 鼠前列腺不同分叶对雄激素调节敏感性与其AR表达的调节方式不同有关。     

113例前列腺癌AR与凋亡相关因子表达的研究

目的 探讨113例人前列腺癌AR与凋亡相关因子表达的相关性.方法 应用免疫组化标记AR及细胞凋亡相关因子bcl-2、Bax及Tunel标记等,结合光镜、电镜观察及图像分析等方法,研究不同AR表达与Pca凋亡的相互关系.结果 AR(-)组较AR( )组bcl-2阳性表达明显增强,Bax表达增强,bcl-2/Bax比值增高,前列腺癌AR(-)组细胞凋亡作用较AR( )组明显增强.结论 AR表达缺失促进了bcl-2和Bax的表达, Bax表达上调促进细胞凋亡的发生,而bcl-2有癌基因的作用,其表达上调则促进了的细胞增殖,导致前列腺癌凋亡及增殖作用均增强.     

E3泛素连接酶接头蛋白SPOP抑制前列腺癌的研究进展

前列腺癌（prostate cancer,Pca）是男性最常见的肿瘤之一,发病率和病死率呈逐年上升趋势,发生发展的遗传因素复杂多样。随着靶向治疗广泛应用于临床,新靶点的探索与研究在Pca的精准治疗中至关重要。研究发现E3泛素连接酶斑点型锌指结构蛋白（speckle-type POZ protein,SPOP）在Pca的发生发展中起重要抑制作用。本文重点介绍SPOP的结构、功能及其在Pca中的突变情况及相关底物;总结SPOP抑制Pca发生发展的分子机制：调控雄激素受体（androgen receptor,AR）介导的信号通路,DNA损伤修复及免疫应答;探讨SPOP在Pca中的临床意义及研究中存在的机遇与挑战。     

PCa患者前列腺与睾丸组织中AR表达相关性

目的探讨雄激素受体（AR）在前列腺癌（PCa）患者前列腺组织与睾丸组织中的表达情况。方法16例PCa患者,于前列腺切除术（或前列腺穿刺活检）后行双侧睾丸切除,按临床分期、病理分级、年龄分组,采用免疫组化方法分析各组织AR表达情况。结果前列腺组织AR表达：早期组表达低于晚期组（P〈0.05）;低分化组表达高于其它病理分级组间（P〈0.01）;AR表达与临床分期及病理分级正相关（P〈0.05）。睾丸组织中早期组AR表达高于晚期（P〈0.05）,AR表达与临床分期负相关（P〈0.05）;前列腺与睾丸组织AR表达间无相关性（P〉0.05）。结论 PCa患者前列腺与睾丸组织间AR表达彼此独立;前列腺AR阳性表达程度与PCa分级、分期有关,其睾丸AR阳性表达程度PCa分期有关,对判断PCa生物学行为有参考价值。