小鼠皮层和海马Aβ前体蛋白表达的增龄性改变

目的 探讨年龄对小鼠皮层和海马神经元Aβ前体蛋白(APP) 695表达的影响.方法 C57BL/6J雄性小鼠按照年龄随机分为3组:2月龄组、12月龄组和20月龄组;采用免疫组织化学和免疫印迹方法观测各组皮层和海马神经元APP695蛋白的表达.结果 与2月龄相比,12月龄组海马和皮层神经元APP695蛋白水平明显升高(P＜0.05);20月龄组APP水平较12月龄组明显升高(P＜0.05,P＜0.01).结论 小鼠皮层和海马神经元APP695的表达随着年龄的增长而增高.     

老年小鼠突触可塑性和记忆功能变化与nNOS表达的关系

目的 对老年小鼠突触可塑性和记忆能力变化与海马nNOS表达变化之间的关系进行探讨.方法 2月龄(青年)和16月龄(老年)昆明小鼠分别用Y型迷宫测试自发交替和活动能力,离体脑片细胞外观测海马长时程增强(LTP)的变化,免疫组化检测海马nNOS阳性细胞表达的变化.结果 老年小鼠的自发交替的百分率和活动能力较青年小鼠明显下降(P＜0.01),离体海马脑片LTP诱发成功率和群峰电位振幅增大率明显下降(P＜0.01),海马CA1区、齿状回的nNOS阳性细胞的染色强度减弱(P＜0.01).结论 小鼠在衰老过程中会伴有突触可塑性和记忆功能降低,其病理机制和nNOS神经元丧失有关.     

老年性聋小鼠认知功能的下降及其机制

目的观察C57BL/6J老年性聋小鼠认知功能的改变并探讨其机制。方法雄性C57BL/6J小鼠分为3月龄(青年)组和12月龄(中年)组。听性脑干反应(ABR)检测小鼠听功能,Morris水迷宫观察小鼠的空间学习和记忆能力,Western印迹检测小鼠海马和听皮层BDNF和pTrk B的蛋白表达。结果 12月龄小鼠8、16、24 k Hz和32 k Hz的听阈值与3月龄组比较明显上升(P<0.01),提示听功能严重损失。Morris水迷宫实验结果显示,从训练的第3天开始直到第5天,12月龄组小鼠潜伏期均显著高于3月龄组(P<0.01,P<0.05),12月龄组小鼠穿越平台次数显著低于3月龄组(P<0.01)。Western印迹结果发现,与3月龄小鼠比较,12月龄小鼠海马和听皮层BDNF蛋白表达无明显变化,p-Trk B蛋白表达降低。结论12月龄C57BL/6J小鼠即显示明显的认知功能下降,可能与其早发的老年性聋有一定关系,海马和听皮层Trk B蛋白的磷酸化可能是主要机制之一。     

丁苯酞对慢性酒精中毒大鼠海马硫化氢及CA1、CA3区五羟色胺的影响

目的探讨丁苯酞(NBP)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力、海马硫化氢及CA1、CA3区五羟色胺(5-HT)含量的影响。方法将90只SD雄性大鼠随机平均分为五组,除对照组外,各组饮含6%(V/V)酒精水溶液42 d,酒精溶液每日9∶00配制,置换。42 d后,NBP低、中、高剂量组灌胃不同剂量NBP(大约14 d),于饮酒结束后采用Y型电迷宫测试酒精中毒大鼠的学习记忆能力,随后检测海马组织H_2S的含量及CA1、CA3区5-HT的表达情况。结果与空白对照组相比,模型组学习记忆和H_2S含量均显著升高,5-HT受体阳性表达显著降低(P0.01)。与模型组相比,NBP中、高剂量组学习记忆成绩和H2S含量均显著降低,5-HT受体阳性表达显著升高(P0.01)。结论 NBP能够减轻慢性酒精中毒大鼠的症状,改善大鼠学习记忆能力,可能与NBP影响H_2S和5-HT的含量有关。     

代谢型谷氨酸受体5在老年小鼠及Fmr1敲除小鼠海马CA1区轴棘突触的配布

目的观察代谢型谷氨酸受体5(mGluR5)在老年小鼠及Fmr1基因敲除(FMR1-KO)小鼠海马CA1区轴棘突触的配布变化。方法选用3月龄(对照组)、22月龄(老年组)雄性C57BL/6小鼠以及3月龄雄性C57BL/6种系的Fm r1敲-除小鼠各3只。经心灌注固定、震动切片,以银加强纳金包埋前免疫电镜技术对mGluR5在海马CA1区腔隙分子层轴棘突触的突触后分布进行分析。结果 mGluR5标记颗粒主要分布于轴棘突触突触后树突棘质膜内面,突触后致密斑上未见mGluR5标记物的存在。对照组小鼠海马CA1区腔隙分子层轴棘突触mGluR5有29.87%的标记颗粒位于距突触后致密斑边缘60nm的区域内;老年组小鼠有27.02%的标记颗粒位于距突触后致密斑边缘60nm的区域内,与正常组小鼠比较无显著差异;而FMR1-KO小鼠有20.01%的标记颗粒位于距突触后致密斑边缘60nm的区域内,与正常组小鼠比较具有显著差异(P0.01)。结论衰老未改变海马CA1区轴棘突触mGluR5的配布,Fmr1基因敲除则引起海马CA1区轴棘突触mGluR5配布的改变。     

小鼠全脑缺血再灌注模型的制备及评价

目的 建立与评价一种小鼠全脑缺血再灌注模型.方法 采用三动脉阻塞(3-VO)的方法制备C57BL/6小鼠全脑缺血模型;分别应用F-JB染色检测海马神经元变性死亡情况和尼氏染色检测海马神经元存活情况.结果 ①C57BL/6小鼠全脑缺血8 min再灌注3 d,在海马CA1区有神经元死亡,缺血12和16 min后海马CA1、CA3、DG区神经元存活的数量明显少于假手术对照组(P＜0.01);②与假手术对照组比较,C57BL/6小鼠全脑缺血12 min再灌注3、7、28 d后CA1、CA3、DG区存活的神经元数量显著减少(P＜0.01);③缺血12 min再灌注3 d后,在C57BL/6小鼠大脑皮层、丘脑、纹状体均有神经元死亡.结论 3-VO小鼠全脑缺血模型是用于研究局部脑缺血再灌注损伤较为理想的动物模型.     

MTH2蛋白在快速老化P8小鼠海马中表达的增龄性变化

目的 观察8氧鸟嘌呤脱氧核苷三磷酸酶同源蛋白2(MTH2)在快速老化P8小鼠(SAMP8)海马中的表达,探讨其与SAMP8增龄性变化的关系.方法 该实验选用1、4、8、12月龄的SAMP8及同龄的抗快速老化R1小鼠(SAMRl)作为实验对象,每组8只,用免疫组化和免疫印迹法分别检测海马中MTH2蛋白的表达.结果 免疫组化结果显示,MTH2主要在SAMP8神经元胞浆内表达;海马不同区域均有表达,尤以CA1和CA3区表达最多.定量结果显示,SAMR1海马各区域MTH2的表达随增龄无显著性改变;而在SAMP8MTH2的表达随月龄增加而下降,8月龄海马CAl区的吸光度值(A值)为0.0473、CA3区为0.0510,显著低于4月龄海马CA1区的0.0619、CA3区的0.0680;12月龄海马CA1区的A值为0.0369、CA3区为0.0465,显著低于8月龄;8月和12月龄A值SAMP8分别显著低于同龄的SAMR1(P＜0.05).免疫印迹结果显示,4～12月龄SAMP8海马内MTH2表达的灰度值(grey level)分别为0.529、0.313、0.032,显著低于同龄SAMR1(P＜0.05).结论 MTH2蛋白的表达量在SAMP8随增龄而下降,8月龄和12月龄SAMP8的MTH2蛋白表达量与同龄对照组比较差异有统计学意义,提示MTH2蛋白表达量的减少与SAMP8的快速老化相关.     

七氟烷对APP/PS1双转基因小鼠海马神经元蛋白质损伤和聚集的影响

目的探讨吸入麻醉药七氟烷对APP/PS1双转基因小鼠海马组织神经元蛋白质损伤和聚集的影响。方法 12月龄APP/PS1双转基因小鼠随机分为两组各30只:对照组小鼠给予2 L/min氧气吸入4 h;七氟烷组小鼠给予2%七氟烷吸入麻醉4 h。部分小鼠麻醉后6 h应用末端脱氧核苷酸转移酶(TUNEL)法检测海马神经元凋亡情况,应用二氯荧光黄双乙酸盐(DCFH-DA)检测活性氧(ROS)水平;部分小鼠麻醉后24 h应用免疫组织化学法(IHC)和Western印迹法检测海马神经元内氧化损伤蛋白质(蛋白羰基化合物、硝基化酪氨酸蛋白和Aβ42)的表达,应用TEM观察海马神经元内蛋白质聚集物。结果七氟烷组小鼠海马神经元凋亡率、ROS水平、蛋白羰基化合物、硝基化酪氨酸蛋白和Aβ42的表达水平均高于对照组,蛋白质聚集物增多(P<0.05)。结论 12月龄APP/PS1双转基因小鼠给予2%七氟烷麻醉4 h,能够加剧其海马神经元氧化应激损伤,促进蛋白质损伤和聚集,诱导海马神经元凋亡,加重阿尔茨海默病(AD)的神经病理损害。     

丁苯酞对慢性酒精中毒大鼠海马内硫化氢和纤维状肌动蛋白的影响

目的探究丁苯酞(NBP)对慢性酒精中毒大鼠学习记忆能力、海马内硫化氢(H2S)和纤维状肌动蛋白(F-actin)含量的影响。方法将50只SD雄性大鼠随机分为5组,除对照组外,将含酒的水作为大鼠唯一水来源,并逐渐增加酒精含量,采用自由饮用方法建立慢性酒精中毒模型。42 d后按慢性酒精中毒大鼠戒断评分表于末次饮酒后6 h检测大鼠模型,NBP低、中、高剂量组大鼠灌胃不同剂量NBP(大约14 d),饮酒结束后利用Y型电迷宫测试酒精中毒大鼠的学习记忆能力,随后检测海马组织H2S和F-actin的含量。结果与对照组大鼠学习记忆成绩(40.38±5.97)、H2S含量(23.25±3.61)和F-actin在阳性细胞中的表达相比,模型组大鼠学习记忆成绩(83.25±5.47)和H2S含量(43.86±6.95)均升高,F-actin的阳性表达降低(P<0.01)。与模型组大鼠相比,NBP中、高剂量组大鼠学习记忆成绩(64.75±4.71)、(70.00±4.72)和H2S含量(32.21±5.32)、(36.78±7.29)nmol/g均降低,F-actin的阳性表达升高(P<0.01)。结论 NBP能够减轻慢性酒精中毒大鼠对酒精的依赖,缓解酒精对大鼠学习记忆能力的影响,可能与NBP影响H2S和F-actin的含量有关。     

不同月龄大鼠大脑中低密度脂蛋白受体相关蛋白的表达

目的　探讨不同月龄大鼠大脑额叶、海马、纹状体低密度脂蛋白受体相关蛋白 (LRP 1)表达的变化。方法　雄性SD大鼠 15只 ,流式细胞技术检测并计算 1,3,10月龄大鼠大脑额叶、海马、纹状体匀浆单细胞悬液LRP 1表达的平均荧光指数 ;免疫组织化学技术测定大脑海马CA1区神经细胞、微血管LRP 1表达 ,并应用MIAS图像分析系统进行平均吸光度测定。结果　流式细胞研究显示 ,大鼠海马 1、3月龄LRP 1表达强度均显著高于 10月龄大鼠 ;而额叶及纹状体各月龄组间差异无显著性意义。 1、3月龄大鼠海马区LRP 1表达强度均显著高于额叶及纹状体。免疫组织化学结果显示 ,LRP 1在海马CA1区微血管、神经细胞均有表达。随着月龄的增加 ,LRP 1在微血管的表达显著下降 ,而在海马CA1区神经细胞的表达各月龄组差异无显著性意义。结论　随着月龄的增加 ,海马区LRP 1的表达有下降趋势 ,尤其是海马CA1区微血管LRP 1的表达显著下降。     

大鼠海马CA3区谷氨酸能、γ-氨基丁酸能神经元的增龄性变化

目的 探讨大鼠海马CA3区谷氨酸能、γ-氨基丁酸(GABA)能神经元增龄性变化的规律.方法 SD大鼠分为1～2,4～5,11～12和≥24月龄4组,常规石蜡海马连续冠状切片,HE染色和谷氨酸、GABA免疫组织化学染色,图像分析仪测量谷氨酸、GABA免疫反应阳性产物的光密度及其阳性神经元的多种形态学参数.结果 大鼠海马CA3区谷氨酸、GABA免疫反应阳性产物的光密度及其阳性神经元多种形态学参数随增龄而减小.结论 海马CA3区谷氨酸、GABA能神经元随年龄增长而逐渐出现衰老性变化,为海马衰老病变的研究提供形态学依据.     

快速老化小鼠P8海马神经元突触结构与功能可塑性

目的从海马神经元突触结构与功能可塑性角度探讨阿尔茨海默病(AD)认知功能缺损的可能原因。方法以10月龄快速老化小鼠(SAMP)8为AD模型,同月龄抗快速老化小鼠(SAMR)1为正常对照,采用Morris水迷宫实验评价动物学习记忆能力,透射电镜观察海马CA1区神经元突触超微结构,在体长时程增强(LTP)记录观察海马前穿通纤维-齿状回(PP-DG)通路神经元突触传递效能。结果与SAMR1比较,SAMP8逃避潜伏期延长(P=0.000),穿越有效区次数减少(P=0.046);海马CA1区神经元突触后致密带变薄(P=0.000),突触间隙增宽(P=0.024),突触界面曲率下降(P=0.000);海马PP-DG通路LTP诱发率(P=0.362)、群峰电位(P=0.900)及潜伏期(P=0.394)差异无统计学意义。结论海马CA1区突触超微结构受损可能是导致SAMP8学习记忆能力下降的原因,CA1区与DG区在AD病理上可能扮演不同角色。     

年龄对胰腺部分切除的小鼠胰岛细胞再生和凋亡的影响

目的 探讨年龄对胰岛细胞再生的影响,初步揭示胰岛再生的机制以及与老龄性糖尿病的关系.方法 对清洁级3月龄[n=12,体重（16.7±1.9）g]、6月龄[n=12,体重（25.4±2.3）g]、12月龄[n=12,体重（28.5±3.0）g]近交品系C57B6小鼠胰腺切除65%～70%,在饮用水中加入BrdU以标记增殖细胞,各组动物分别于1、2、4周处死取材,通过测量空腹血糖、静脉糖耐量并应用免疫组织化学的方法对胰岛细胞的再生以及胰岛细胞的凋亡进行全面的研究.所得数据通过Graphpad Prism 5.0软件的2-way ANOVA进行统计学处理.结果 在3月龄的年轻小鼠部分胰腺切除后,术后1、2、4周胰岛β细胞再生率分别为15.1%±10.0%、25.5%±8.1%、45.7%±14.6%;6月龄小鼠胰岛再生率分别为23.9%±8.7%、28.3%±7.6%和27.2%±5.7%;而对于12月龄老龄的小鼠,胰岛细胞再生率分别为4.4%±6.9%、6.1%±5.8%和5.1%±7.0%,用GraphPad Prism 5.0软件进行2-way ANOVA分析表明时间、年龄对胰岛再生均有影响（P＜0.0001,P＜0.05）,各组间差异有统计学意义.3月龄的小鼠1、2、4周胰岛β细胞凋亡率分别为2.7%±2.4%、3.7%±3.4%、3.1%±3.6%,12月龄的小鼠1、2、4周胰岛β细胞凋亡率分别为5.6%±1.4%、5.8%±4.3%、6.7%±2.6%,3月龄小鼠凋亡的β细胞数量明显少于12月龄的小鼠（P＜0.05）.结论 随着年龄的增长,小鼠胰岛β细胞的再生能力明显降低,并且更易发生凋亡.这可能是导致老龄人群糖尿病发病率升高的主要原因之一.     

胃电刺激对大鼠海马胃扩张反应神经元及胃动素和nNOS表达的影响

目的:观察胃电刺激(GES)对大鼠海马CA1区胃扩张(GD)相关神经元放电活动的影响及脑内一氧化氮合酶(nNOS)和胃动素(MTL)表达的改变,初步探讨GES的中枢作用机制.方法:选用成年Wistar大鼠58只,采用细胞外记录神经元单位放电方法,记录海马CA1区神经元自发放电活动,根据神经元对胃扩张刺激反应的不同,分为胃扩张兴奋性神经元(GD-E)和胃扩张抑制性神经元(GD-I).观察3组不同参数的胃电刺激(GES-A,GES-B和GES-C)对CA1区内GD-E和GD-I放电频率的影响:GES-A(6 mA,0-3 ms,40 Hz,2 s-on,3 S-off)为标准参数;GES-B的串刺激波宽增至3 ms;GES-C的串刺激频率减少至20 Hz,其他参数均同GES-A.采用放射免疫法检测胃电刺激对大鼠不同脑区MTL含量的影响;并采用免疫荧光组织化学染色方法观察胃电刺激2 h对大鼠海马内nNOS免疫阳性神经元的表达.结果:CA1区记录的87个神经元中有79个神经元(90.8%)对胃扩张刺激(GD,3-5 mL,10-30 s)有反应,其中40个(50.6%)为GD-E神经元,39个(49.4%)为GD-I神经元.GES-A,-B,-C分别兴奋了62.5%,100%和62.3%的GD-E神经元,GES-B对GD-E神经元的作用明显强于GES-C (神经元兴奋率GES-B 100%vs GES-C 62.3%,P<0.05).在GD-I神经元中有63.6%,85.7%和50%的GD-I神经元分别被GES-A,-B和-C所兴奋,其中GES-C的兴奋作用较弱(P=0.041,vs GES-A:P=0.021,vs GES-B).GES-A刺激胃窦部2h,下丘脑(48.93±6.98 fmol/mg vs 96.23±12.93 fmol/mg,P<0.01)、中脑(30.96±4.86 fmol/mg vs 53.17±8.96 fmol/mg,P<0.05)、延脑(46.27±7.83 fmol/mg vs 73.86±9.37 fmol/mg,P<0.05)和海马(32.23±6.51 fmol/mg vs 62.72±10.07 fmol/mg,P<0.05)中MTL免疫反应物(MTL-IR)的含量与假手术对照组相比明显减少,但脑桥内MTL-IR的含量与假手术对照组相比无显著差异;且海马CA1区(16.75±0.91 cells/mm~2 vs 20.46±1.30 cells/mm~2,P<0.05)和CA2-3区(14.91±1.17 cells/mm2 vs 18.73±1.10 cells/mm~2,P<0.05)nNOS免疫阳性神经元表达明显减少.结论:GES可兴奋海马CA1区内胃扩张反应性神经元,电刺激作用的强弱与GES刺激的频率和单个电刺激的持续时间有关;脑内MTL和海马内nNOS可能参与了GES的中枢作用机制.     

老年小鼠海马CA1区轴棘突触微细结构的定量分析

目的观察老年小鼠海马CA1区轴棘突触相关结构的改变,为衰老引起的学习记忆减退提供神经解剖学依据。方法利用Golgi染色、超薄连续切片及NIH图像分析系统测量海马CA1区锥体细胞树突棘的密度、树突棘头及突触后致密斑的大小。结果海马CA1第2、3级顶树突的树突棘密度在3月龄组与22月龄组分别为(1.056±0.049)/μm和(0.868±0.038)/μm;穿孔型突触的比率3月龄与22月龄组分别为12.7%和19%。结论老年小鼠海马CA1区锥体细胞树突棘的减少、穿孔型突触比率的增加可能是衰老引起学习记忆减退的形态学基础。     

白藜芦醇抑制Wnt通路活性改善糖尿病大鼠认知功能的研究

目的探讨白藜芦醇(RL)对糖尿病大鼠认知和记忆功能的影响及使海马CA1区域神经元细胞形态学的改变,分析Wnt通路的作用。方法 36只Wistar鼠随机分为糖尿病组(DM组)、RL组及正常对照(NC)组,每组各12只。腹腔注射STZ建立糖尿病模型,RL组行8周RL灌胃。通过新物体识别实验和定位实验评估大鼠非空间及空间认知能力;病理切片TUNEL染色观察大鼠海马CA1区域神经元细胞形态学改变;Western blot检测海马组织Wnt通路凋亡相关蛋白表达水平。结果RL干预逆转DM组新物体及新位置分辨指数的下调[(44. 71±11. 21)%vs(1. 57±0. 39)%,(28. 01±5. 37)%vs(3. 73±1. 07)%,P0. 05],降低海马CA1区域TUNEL阳性神经元密度[(20. 4±2. 65)vs(47. 0±4. 58)个/mm2,P0. 05];RL干预逆转DM组海马CA1区域细胞Wnt-3、TGF-1、Bax、caspase-3蛋白表达上调,Bcl-2表达下调;上调脑源性神经营养因子表达(P0. 05)。结论RL具有Wnt通路抑制作用,可促进神经营养因子分泌,减少神经细胞凋亡,改善糖尿病大鼠非空间及空间认知能力。     

羟基积雪草苷干预神经元退变的机制研究

目的 探讨羟基积雪草苷(madecassoside,MC)对慢性铝中毒所致小鼠海马神经元损伤的干预作用及机制.方法 按葡萄糖酸铝(400mg AI3+kg)给予NIH小鼠灌胃90d建立铝中毒神经元损伤小鼠模型.通过跳台和Moms水迷宫实验、生化实验、HE染色和免疫组化染色技术,观察MC大小剂量(每天30、60mg/kg)同步给药90d对小鼠学习记忆能力、脑丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、海马神经元病理形态学、海马Caspase-3和cox-2蛋白表达的影响.结果 与模型组相比,30和60mg/kg剂量MC可明显延长铝中毒小鼠跳台潜伏期(31.40±22.04 vs 124.10±74.38和138.80±90.85)(P＜0.05),减少跳台错误次数(3.00±1.15 vs 1.60±0.69和1.40±0.84)(P＜0.05),缩短第5天寻找平台潜伏期(36.2±11.2 vs 18.5±7.3和19.4±9.9)(P＜0.05)的时间;明显减少脑内MDA含量(nmol/mg prot)(3.73±0.38 vs 2.50±0.42和2.59±0.47)(P＜0.05),提高脑内SOD酶活性(U/mg prot)(362.8±37.6 vs 445.7±23.9和425.5±38.8);大小剂量的MC均能明显减轻铝中毒小鼠海马神经元损伤,下调海马神经元Caspase-3(0.255±0.079 vs 0.090±0.026和0.132±0.049)(P＜0.05)和COX-2(0.099±0.006 vs 0.038±0.004和0.045±0.008)(P＜0.05)蛋白表达.结论 MC可通过提高抗氧化应激、阻遏神经元凋亡和抗炎作用,减轻海马神经元损伤.     

大脑皮层神经元微管相关蛋白-2在人胚发育过程中的表达变化

目的 观察微管相关蛋白-2(MAP-2)在人胚胎大脑发育过程中的作用,为预防先天性神经系统疾病提供理论依据.方法 收集3、4、5、6、7个月胎龄人胚胎组织标本,采用免疫组织化学方法观察其大脑皮层神经元MAP-2(a、b、c)表达变化.结果 免疫反应阳性产物均定位于胞质,胞核不着色;随月龄增加,大脑皮层神经元MAP-2(a、b、c)表达逐渐增多,细胞阳性反应平均光密度(OD值)3月龄为0.129 7±0.005 1,4月龄为0.183 2±0.005 0,5月龄为0.259 7±0.005 8,6月龄为0.328 4±0.006 7,7月龄为0.390 9±0.003 9.结论 在人胚胎大脑发育过程中,MAP-2(a、b、c)可能参与神经元的发育、结构稳定及突起形成.     

金属硫蛋白3对快速老化痴呆模型小鼠海马CA1区神经元细胞凋亡的影响

目的 研究金属硫蛋白3(MT3)对快速老化痴呆模型小鼠(SAMP8)海马CA1区神经元细胞凋亡的影响及其机制.方法 将7月龄SAMP8小鼠随机分成6组,分为痴呆组、3种浓度的MT3组、MT1组、空白对照组.快速老化小鼠对照(SAMR1)小鼠为正常对照组.连续腹腔注射28 d后灌注取脑,进行海马CA1区原位末端标记(Tunel)试剂盒和免疫组化(SP)试剂盒染色.结果 痴呆组海马CA区神经元细胞凋亡指数明显高于正常对照组.高浓度MT3组凋亡指数最低,Bcl-2蛋白表达增强,Bax蛋白表达最低(P＜0.01,P＜0.05).MT3组对Bax蛋白表达的抑制作用强于MT1对照组,而二组对Bcl-2蛋白表达的差异不显著.结论 SAMP8小鼠海马结构存在大量神经元细胞凋亡,MT3通过减少Bax表达和增加Bcl-2表达,减少细胞凋亡,并有浓度依赖关系;且作用强于MT1.     

丁基苯酞对血管性痴呆大鼠记忆及海马Bcl-2、Bax的影响

目的 研究丁基苯酞(NBP)对血管性痴呆(VD)大鼠记忆、海马病理变化及抗凋亡蛋白(Bcl-2)和促凋亡蛋白(Bax)蛋白表达的影响.方法 采用永久性结扎双侧颈总动脉方法制备VD大鼠模型.SD大鼠被随机分成假手术组、VD模型组、NBP治疗组、尼莫地平治疗组.应用Morris水迷宫检测大鼠记忆能力,苏术精-伊红(HE)染色观察海马神经元形态,免疫组化检测海马Bcl-2和Bax的表达.结果 VD模型组与假手术组大鼠比较记忆能力显著下降,逃避潜伏期分别为(78.79±21.93) s与(16.96±7.44) s (P＜0.05),海马神经元病理改变严重,免疫阳性细胞数量显著增加,其中Bax变化更为显著 (43.00±6.72与6.00±1.29,P＜0.05),Bcl-2与Bax的比值较对照组明显降低;NBP治疗组与模型组比较记忆能力显著改善,逃避潜伏期分别为(47.13±21.75) s与(78.79±21.93) s (P＜0.05),海马神经元病理形态明显改善,Bcl-2免疫阳性细胞数显著增多(33.14±8.05与21.81±4.97,P＜0.05),Bax免疫阳性细胞数显著减少(32.93±4.99与43.00±6.72,P＜0.05).NBP治疗组与尼莫地平治疗组之间比较,各项指标均无显著差异 (P＞0.05).结论 NBP能改善VD大鼠记忆能力,抑制海马细胞凋亡,对VD大鼠有一定的治疗作用.

Abstract：

Objective To study the effects of butylphthalide (NBP) on memory and apoptosis related protein as well as neuronal pathology in hippocampus of vascular dementia (VD) rats. Methods VD model was generated by the permanent occlusion of bilateral common carotid arteries in SD rats to produce the forebran ischemia. Male SD rats were randomly allocated into sham-operation group, VD model group, NBP treatment group and nimodipine treatment group. The function of memory was tested by the Morris water maze. The neuronal pathological changes and the expression of Bcl-2 and Bax proteins in the hippocampus were observed with hematoxylin-eosin (HE) staining and immunohistochemical staining, respectively. Results The impaired memory of VD rats was proved by the lengthened mean escape latency [(78.79±21.93)vs.(16.96±7.44),P＜0.05] and the neuron in hippocampus was severely damaged. The decveased ratio of Bcl-2/Bax resulted from the overexpression of Bax proteins in VD model group versus the sham-operation group [(43.00±6.72)vs.(6.00±1.29),P＜0.05]. The treatment of NBP notably improved the memory function of VD rats and reduced the hippocampus pathological injury (P＜0.05). The expression of Bcl-2 protein raised [(33.14±8.05)vs.(21.81±4.97),P＜0.05] along with reduced expression of Bax protein [(32.93±4.99)vs.(43.00±6.72),P＜0.05] after NBP treatment. However, there was no significant difference in the treatment effects between nimodipine and NBP group (P＞0.05). Conclusions NBP treatment could improve memory of VD rats and reduce the hippocampus pathological lesion by inhibiting the apoptosis related protein.