miR-34a-5p抑制K562细胞红系分化

目的探索miR-34a-5p对K562细胞红系分化的影响。方法分别用miR-34a-5p模拟物和反义抑制寡核苷酸转染K562细胞,用real-time PCR法检测过表达或干扰效率,并进一步用流式细胞术和联苯胺染色法检测K562细胞向红系的分化情况;通过Western blot方法检测miR-34a-5p的靶基因。结果 miR-34a-5p在K562细胞红系分化过程中呈现表达下降趋势;在K562细胞中过表达miR-34a-5p可抑制hemin诱导的红系分化(P0.05);反之,干扰K562内源的miR-34a-5p表达会对K562红系分化产生促进作用(P0.01);另一方面,miR-34a-5p通过靶向抑制c-MYB的表达抑制细胞向红系分化。结论 miR-34a-5p通过抑制c-MYB在K562细胞早期红系分化过程中发挥促进作用。     

MicroRNA-144调控红系分化

目的研究microRNA-144(miR-144)通过调节视网膜母细胞瘤蛋白(RB)对红系分化的影响。方法用氯化高铁血红素(hemin)诱导人慢性髓系白血病细胞系K562可实现在体外模拟红系分化过程,使用Real-time PCR检测miR-144表达;利用体外合成的寡核苷酸(mimic-144)转染K562细胞,检测过量表达miR-144对红系分化的影响;结合生物信息学分析、双荧光素酶报告系统和Western blot寻找并确定miR-144的靶基因。结果 miR-144在hemin诱导的K562红系分化过程中表达显著升高(P<0.05),在K562细胞中过表达miR-144可以促进血红蛋白(γ-globin)和红细胞表面标志CD235a的表达和积累;RB为miR-144的靶基因之一;在K562红系分化中,RB呈先略升后降的趋势,以0 h为参照,12 h RB/GAPDH灰度值最低为:0.092±0.007(P<0.05)。结论 miR-144通过负调控RB的表达促进hemin诱导的K562红系分化。     

CDK2促进K562细胞早期红系分化

目的 探讨细胞周期调节蛋白CDK2对K562细胞红系分化的影响.方法 分别用CDK2表达质粒和干扰RNA分子转染K562细胞,用Western blot法检测过表达或干扰效率,使用real-time PCR和联苯胺染色法检测K562细胞分化.结果 CDK2在K562细胞红系分化早期呈现表达上升趋势;在K562细胞中过表达CDK2可促进hemin诱导的红系分化;反之,干扰K562内源的CDK2表达会对K562红系分化产生抑制作用.结论 CDK2在K562细胞早期红系分化过程中发挥促进作用.     

微小RNA miR-181a促进慢性粒细胞白血病K562细胞分化

目的探讨微小RNA miR-181a对慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞的作用。方法构建了miR-181a过表达的慢病毒载体,采用实时定量PCR方法检测CD235a和γ球蛋白的表达,评价K562细胞向红系分化的程度,检测CD61和CD41的表达,评价K562细胞向巨核系分化的程度,采用CCK实验检测细胞增殖情况。结果氯高铁血红素佛及波酯诱导后,miR-181a在K562细胞中过表达能够增强CD235a、γ球蛋白、CD61和CD41的表达水平(P0.05);miR-181a过表达能够明显抑制K562细胞的增殖(P0.05)。结论 miR-181a过表达促进K562细胞的分化并抑制其细胞的增殖。     

低氧下K562细胞向红系分化进程中GATA-1与miR-451a表达的相关性研究

目的:探讨低氧下人慢性髓细胞性白血病K562细胞向红系分化进程中GATA结合蛋白1(GATA binding protein-1,GATA-1)与微小RNA-451a(microRNA-451a,miR-451a)表达的相关性。方法:将K562细胞分为常氧组和低氧(1%O2)组,经40μmol/L氯化血红素分别诱导分化至48和72 h。RT-qPCR检测γ-珠蛋白(γ-globin)的mRNA表达,联苯胺染色观察细胞血红蛋白生成情况,流式细胞术检测CD235a的表达水平,验证K562细胞红系分化模型是否复制成功。在K562细胞向红系分化的不同时点,采用Western blot检测两组细胞GATA-1的蛋白表达情况;采用RT-qPCR检测两组细胞GATA-1 mRNA和miR-451a的表达水平并进行相关性分析。检测GATA-1过表达组、干扰组和阴性对照组K562细胞的红系分化指标,同时采用瑞氏-吉姆萨染色法分析上述组别细胞形态学的变化,明确GATA-1过表达和抑制后K562细胞的红系分化情况。RT-qPCR检测GATA-1过表达和抑制后miR-451a的表达变化。结果:两组细胞分化48 h和72 h后,γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率和CD235a表达量均显著高于0h(P<0.05),且低氧组72 h的γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率和CD235a表达量均显著高于常氧组(P<0.05)。低氧组GATA-1 mRNA和miR-451a的表达水平随红系分化过程均呈现上升趋势(P<0.05),并在72 h均显著高于常氧组(P<0.05)。相关性分析结果显示,低氧下GATA-1 mRNA与miR-451a的表达呈正相关(P<0.01)。GATA-1慢病毒感染K562细胞72 h后,低氧下过表达组γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率、CD235a表达量及体积增大、核偏移和核缩小的细胞数均显著高于阴性对照组(P<0.05);72 h干扰组γ-globin表达量、联苯胺染色阳性率、CD235a表达量及体积增大、核偏移和核缩小的细胞数均显著低于阴性对照组(P<0.05)。与阴性对照组相比,低氧下过表达GATA-1后,72 h时miR-451a的表达显著增高(P<0.05);干扰GATA-1后,72 h时miR-451a的表达显著降低(P<0.05)。结论:低氧通过诱导GATA-1表达增高而上调miR-451a,从而促进K562细胞向红系分化。     

当归多糖诱导K562细胞向红系样细胞分化及其信号转导通路研究

目的 探讨当归多糖(APS)诱导K562细胞向红系样细胞分化相关的信号转导通路. 方法 实验分组:对照组采用常规方法培养;APS组在常规培养基础上加入APS(终浓度100～500mg/L),分别培养12h、1d、2d、3d.联苯胺染色与分光光度法检测经APS诱导后K562细胞向红系样细胞分化的血红蛋白表达;激光扫描共焦显微镜观察JAK_2、信号转导和转录激活因子5(STAT_5)在各组细胞内的分布;Western blotting检测细胞核、质蛋白中JAK_2、STAT_5的表达变化;免疫沉淀法检测质蛋白中JAK_2的磷酸化改变. 结果 经APS诱导后K562细胞的联苯胺染色阳性率增高,随着APS诱导浓度增加K562细胞合成血红蛋白也增加;APS诱导K562细胞12h、24h和48h,核蛋白中STAT_5表达较对照组增加,质蛋白中STAT_5表达减少;APS组与对照组K562细胞的JAK_2表达未见显著差异,但APS组的JAK_2磷酸化强于对照组. 结论 APS可诱导K562细胞向红系样细胞分化,其机制可能与APS启动JAK_2的酪氨酸磷酸化,继而引起STAT_5核转位,通过信号转导通路的调控影响细胞的增殖分化.     

miR-296-5p 靶向 PLK1 调控 PI3K/ AKT 通路诱导骨肉瘤细胞中的自噬并抑制上皮-间质转化

目的 探讨 miR-296-5p 靶向 PLK1 对骨肉瘤 (osteosarcoma, OS) 细胞自噬及抑制上皮-间质转化 (EMT) 的作用机制。 方法 qRT-PCR 检测 miR-296-5p 在 OS 细胞中的表达。 采用生物信息学分析预测 miR-296-5p 的靶基因, 验证 miR-296-5p 对靶基因 PLK1 的直接靶向调控; 细胞转染构建 miR-296-5p 过表达 和干扰细胞, CCK-8、 克隆形成、 Transwell 小室、 流式、 蛋白免疫印迹实验检测 miR-296-5p 的不同表达对 U2OS 细胞中 PTBP1 表达水平及细胞增殖、 侵袭、 凋亡、 自噬及 EMT 的影响。 结果 与对照组比较, miR-296-5p 在 OS 中表达降低, 而 PLK1 则升高 (P< 0. 05); 与 miR-NC 组比较, mimic 组的克隆形成率、 侵袭 细胞数目及 PTBP1、 p62、 N-cadherin、 Vimentin、 p-PI3K/ PI3K、 p-AKT/ AKT 水平降低, 细胞凋亡率、 Beclin-1、 LC3-Ⅱ/ Ⅰ、 E-cadherin 水平升高 (P< 0. 05); 与 PLK1 组比较, PLK1 + mimic 组的克隆形成率、 侵袭 细胞数目及 PTBP1、 p62、 N-cadherin、 Vimentin、 p-PI3K/ PI3K、 p-AKT/ AKT 水平降低, 细胞凋亡率、 Beclin-1、 LC3-Ⅱ/ Ⅰ、 E-cadherin 水平升高 (P< 0. 05)。 结论 miR-296-5p 可能能够靶向 PLK1 调控 PI3K/ AKT 通路诱导 OS 细胞中的自噬并抑制 EMT。     

过表达miR-299-3p抑制人肾癌细胞系增殖和迁移

目的探讨miR-299-3p在肾癌细胞系增殖、迁移和侵袭的作用及机制。方法 RT-qPCR检测肾癌细胞系(786-O、769-P、ACHN和A498)和人正常肾小管上皮细胞系(HK-2)中miR-299-3p的表达;MTT法、细胞划痕实验、Transwell小室法检测miR-299-3p mimic对肾癌786-O细胞系增殖、迁移和侵袭的影响;在线生物信息学数据库对miR-299-3p的靶基因进行了预测。Western blot检测E-cadherin,N-cadherin、vimentin和MAP3K12的蛋白表达。结果 miR-299-3p在肾癌细胞系中均低表达(P0.05),且在786-O细胞中表达最低。过表达miR-299-3p可显著抑制肾癌细胞系786-O增殖、迁移、侵袭、体外成瘤和上皮间质转化(EMT),综合4个数据库的结果,发现预测的miR-299-3p的共同靶基为MAP3K12,荧光素酶报告基因验证了miR-299-3p与MAP3K12的靶向关系。miR-299-3p+MAP3K12共转染786-O细胞后,能够有效降低miR-299-3p mimic诱导的细胞迁移和侵袭的抑制作用。结论 miR-299-3p在肾癌细胞中的作用机制可能是通过miR-299-3p靶向下调MAP3K12表达,调控EMT途径影响肾癌细胞增殖、迁移和侵袭。     

miR-491-5p参与调节 人膀胱癌细胞系EJ对5-氟尿嘧啶的敏感性

目的探讨miR-491-5p对人膀胱癌细胞系EJ 5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)敏感性的影响及初步机制。方法 RT-qPCR检测miR-491-5p在膀胱癌化疗敏感与耐药组织中表达水平。构建5-FU耐药的EJ/5-FU细胞系,并分别用RT-qPCR和Western blot检测miR-491-5p表达和AKT与STAT3磷酸化水平。将miR-491-5p抑制剂转入细胞系EJ或将miR-491-5p模拟物转入EJ/5-FU细胞,并在5-FU存在的条件下分别用CCK-8法、Annexin V-FITC/PI染色法、划痕法、Transwell小室法和Western blot检测细胞活性、凋亡、伤口愈合、迁移、侵袭和AKT与STAT3磷酸化水平。结果 miR-491-5p在化疗耐药组织和EJ/5-FU细胞系中表达显著降低(P0.01)。下调miR-491-5p表达后,5-FU对细胞系EJ的细胞活性、伤口愈合、迁移和侵袭的抑制作用和凋亡的促进作用均显著减弱(P0.01);上调miR-491-5p表达后,5-FU对EJ/5-FU细胞系的细胞活性、伤口愈合、迁移和侵袭的抑制作用和凋亡的促进作用均显著增加(P0.01)。AKT及STAT3磷酸化水平在EJ/5-FU细胞系中显著升高(P0.01);下调miR-491-5p后,细胞系EJ中AKT及STAT3磷酸化水平显著升高(P0.01);上调miR-491-5p后,EJ/5-FU细胞系中AKT及STAT3磷酸化水平显著降低(P0.01)。结论下调miR-491-5p表达降低细胞系EJ对5-FU的敏感性;上调miR-491-5p表达抑制EJ/5-FU细胞系对5-FU耐药性。miR-491-5p调节细胞系EJ 5-FU耐药性的过程中伴随着AKT及STAT3磷酸化的改变。     

miR-138-5p靶向HIF-1α影响人白血病K562细胞增殖和侵袭转移

目的探索miR-138-5p与缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)对人白血病K562细胞增殖和侵袭转移的影响。方法以体外培养的人白血病K562细胞为研究对象,将其分为K562组、miR-138 mimic组、pc-HIF-1α组和mimic+pc-HIF-1α组。荧光素酶报告实验确认miR-138-5p与HIF-1α的靶向关系;qRT-PCR法检测miR-138-5p和HIF-1α的mRNA水平;Western blot检测HIF-1α的蛋白水平;CCK-8检测细胞存活率;Transwell检测细胞侵袭能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Western blot检测增殖和上皮间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。结果miR-138-5p能靶向HIF-1α,与K562组相比,miR-138 mimic组HIF-1α的mRNA和蛋白水平均显著较低(P<0.01),而pc-HIF-1α组HIF-1α的蛋白水平则显著较高(P<0.01);同时,与pc-HIF-1α组相比,mimic+pc-HIF-1α组HIF-1α的蛋白表达显著较低(P<0.01)。与K562组相比,miR-138 mimic组细胞增殖倍数、细胞迁移和侵袭能力均显著较低(P<0.01),pc-HIF-1α组则显著较高(P<0.01);与pc-HIF-1α组相比,mimic+pc-HIF-1α组细胞增殖倍数、细胞迁移和侵袭能力均显著较低(P<0.01)。同时,mimic+pc-HIF-1α能部分逆转pc-HIF-1α对肿瘤细胞增殖和EMT能力的上调作用(P<0.01)。结论miR-138-5p可通过靶向HIF-1α,进而降低人白血病K652细胞增殖和侵袭转移能力。     

IFN-γ促进红系终末分化

目的探索IFN-γ对体外红系终末分化的调节作用。方法用real-time PCR法检测IFN-γR1/R2在血红素(hemin)诱导K562细胞红系分化过程中的表达变化。以IFN-γ处理hemin诱导的K562细胞和人脐血CD34+细胞来源的红系细胞,用real-time PCR检测红系分化标志物CD235a和CD71表达。用联苯胺染色展现IFN-γ处理的K562细胞中血红蛋白含量,通过Western blot和real-time PCR检测红系相关转录因子GATA1和NFE2的表达。结果 Hemin诱导下分化的K562细胞中IFN-γR1/R2 mRNA先减少后增高,IFN-γ促进K562及造血干祖细胞红系分化晚期CD71及CD235a的表达,增加联苯胺阳性染色率。IFN-γ对红系分化的促进作用具有时间依赖性。机制研究表明IFN-γ可促进红系关键转录因子NFE2的表达。结论 IFN-γ促进K562细胞及人脐血造血干祖细胞的红系终末分化。     

HER2高表达胃癌细胞中miR-4728-3p表达及生物信息学分析

目的 探讨HER2高表达的胃癌细胞中miR-4728-3p表达状况及其调控靶基因所涉及的信号通路,旨在初步分析miR-4728-3p在胃癌中的作用机制及其与HER2的相关性.方法 首先采用Real-time PCR技术检测胃癌细胞株NCI-N87中miR-4728-3p及HER2 mRNA,然后通过miRanda、DIANA-microT、Targetscan和Targetmine软件预测miR-4728可能的靶基因,并通过DAVID数据库进行靶基因功能富集分析及信号转导通路富集分析.结果 miR-4728-3p及HER2 mRNA在胃癌细胞中均高表达,二者呈正相关(r=0.990,P=0.000).miR-4728-3p预测靶基因共有54个,靶基因功能主要富集于转录活性调节(P=0.014)、DNA结合(P=0.019)及蛋白质磷酸化氨基酸结合(P=0.036)等分子功能,RNA聚合酶Ⅱ启动子的转录调控(P=0.001)、转录调控(P=0.003)及细胞内信号级联(P=0.021)等生物学过程以及轴突部分(P=0.008)等细胞组分上;信号转导通路则主要富集于肿瘤通路(P=0.013)和卵母细胞减数分裂通路(P=0.041).结论 miR-4728-3p在HER2高表达的胃癌细胞中表达上调,二者表达呈正相关;生物信息学分析提示miR-4728-3p通过调控其靶基因参与胃癌的发生发展.     

转录因子Sp1抑制K562细胞红系分化

 目的 研究转录因子Sp1在K562细胞诱导向红系分化过程中的表达变化,并确定其对于红系分化及珠蛋白表达的影响。方法 用定量PCR及Western blot的方法确定Sp1在红系分化过程中的表达情况。通过RNAi的方法抑制Sp1的表达,并通过联苯胺染色确定K562细胞中血红蛋白的表达情况,同时定量PCR的方法分析红系分化相关基因的表达,流式细胞技术检测红系分化过程中表面标志蛋白的表达情况。结果 在hemin诱导的K562细胞以及促红细胞生成素EPO诱导的造血干细胞向红系分化过程中,Sp1的mRNA及蛋白水平均呈明显下降,提示其可能负调节红系分化过程。在K562细胞中抑制Sp1的表达则可明显提高K562细胞中的血红蛋白含量,促进γ-,ε-珠蛋白,CD71,CD235a基因的表达,同时CD71,CD235a阳性细胞比例明显增加。结论 以上结果说明转录因子Sp1负调节红系分化过程,抑制Sp1的表达可提高K562细胞中珠蛋白的表达,并促进K562细胞向红系分化。     

miR-144和miR-502—3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义

目的探讨miR-144和miR-502-3p在原发性肝细胞癌术后复发患者中的表达及临床意义。方法从我院肝癌数据标本库中挑选82例原发性肝癌深低温冻存组织标本。其中50例早期复发组（术后1年内肝内出现复发病灶）；32例非早期复发组（术后超过2年未出现肝内复发病灶）。运用实时荧光定量PCR验证miR-144、miR-502—3p在两组肝癌组织中的表达水平。结果相对于非早期复发组，miR-144在肝癌早期复发组中表达上调[（43．893±107．890）VS（6．321±6．845），P=0．018]；其在肝癌组织中的表达仅与肝癌术后早期复发有关（P〈0．05）。而miR-502—3p在肝癌早期复发组中表达下调[（6．702±9．775）VS（26．467±39．613），P=0．009]；其在肝癌组织中的表达与肿瘤直径、肝癌术后早期复发、脉管癌栓、肝硬化、Edmonson病理分级有关（P〈0．05）。结论miR-144、miR-502-3p与肝癌的早期复发转移密切相关，并且可能是肝癌早期复发的分子标记物以及未来肝癌靶向治疗的有效靶点。     

人细胞增殖相关激酶plk3基因逆转录病毒载体的构建及对细胞增殖的影响

目的构建人细胞增殖相关激酶基因plk3的逆转录病毒载体(RV),观察该基因对细胞增殖和细胞周期的影响。方法将plk3基因亚克隆至pMSCV-puroR载体中,经酶切和测序鉴定,制备高滴度的RV,以流动感染法高效感染,半固体集落培养法测定基因导入率。用嘌呤霉素筛选后,获得K562-plk3-puroR和HL60-plk3-puroR细胞。以野生型细胞和导入空载体的K562-puroR和HL60-puroR细胞作为对照,用PCR鉴定基因的导入,并测定细胞周期及凋亡率等,研究plk3基因导入对细胞的影响。结果获得pMSCV-plk3-puroR质粒并经酶切和测序证实。对K562和HL60细胞的基因导入率,分别达82.3%±3.70%和62.9%±4.94%(n=3)。经嘌呤霉素筛选后,转基因细胞的阳性率>99%。K562-plk3-pu-roR和HL-60-plk3-puroR转基因细胞的增殖曲线比对照细胞降低(P<0.01);而导入空载体的K562-puroR和HL60-puroR细胞的增殖曲线与野生型细胞相比较无显著差异。与K562细胞相比较,常规培养时,处于G0~G1期的K562-plk3-puroR细胞增多[(49.7±3.38)%vs(43.9±2.34)%,P=0.03]。以无血清培养基培养10h后,进入S期的K562-plk3-puroR细胞减少[(43.6±3.74)%vs(54.5±1.52)%,P=0.02],凋亡率降低[(1.3±0.31)%vs(3.4±0.37)%,P=0.01]。结论构建了plk3基因的逆转录病毒载体,发现plk3基因的导入可延缓细胞增殖,并抑制细胞进入增殖周期。     

Protective effects of heme oxygenase-1 against oxidant-induced injury in the cultured human tracheal epithelium.

To examine whether increases in heme oxygenase (HO)-1 activity have protective effects on the oxidant-induced injury of airway epithelial cells, human tracheal epithelial cells were cultured on a porous filter membrane, and electrical conductance (G) and mannitol flux across epithelial membrane were measured with Ussing's chamber methods and D-[(3)H]mannitol, respectively. Hydrogen peroxide (H(2)O(2); 1 mM) increased G with time from the baseline value of 6.0 +/- 0.6 to 17.8 +/- 0.9 mS/cm(2) at 6 h after administration (P < 0.001). Likewise, H(2)O(2) significantly increased mannitol flux through the cultured epithelium (P < 0.01). Pretreatment of cultured epithelial cells with hemin (10 microM; 8 h) or interleukin (IL)-1beta (10 ng/ml; 16 h) completely inhibited increases in G and mannitol flux induced by H(2)O(2). Tin protoporphyrin IX (50 micrometer) and zinc protoporphyrin IX (10 microM), inhibitors of HO-1, reduced hemin-induced and IL-1beta-induced inhibitory effects. Hemin treatment increased HO-1 messenger RNA expression, HO-1 protein production, and HO activity and bilirubin content as well as ferritin content in the cultured epithelial cells. Pretreatment with hemin and desferoxamine, which, like ferritin, can bind iron, inhibited H(2)O(2)-induced increases in G and mannitol permeability. Although exogenous bilirubin mimicked hemin-induced inhibitory effects, exogenous apoferritin failed to inhibit H(2)O(2)-induced effects on G and mannitol permeability. These findings suggest that HO-1 induction provides protection against H(2)O(2)-induced injury of the cultured human airway epithelial cells in part via the HO-bilirubin pathway.     

HLA-G mRNA差异表达对细胞膜表面HLA-G异构体分子表达的影响

目的 探讨HLA-G异构体(HLA-G1～6)mRNA差异表达对HLA-G分子在细胞表面表达的影响.方法 通过RT-PCR方法分析卵巢癌细胞株HO-8910、H0-8910PM、OVCAR-3,白血病细胞株Jurkat、K562、HL60、MUTZ-1,绒癌细胞株JEG-3、JAR内HLA-G异构体mRNA的表达种类,采用流式细胞术分析上述细胞株细胞表面及细胞内HLA-G分子的分布及表达水平.结果 阳性对照JEG-3细胞内表达HLA-G1～6 mRNA,阴性对照JAR不表达HLA-G1～6 mRNA.HLA-G1 mRNA在HO-8910、HO-8910PM、OVCAR-3、MUTZ-1、Jurkat细胞内表达.除阳性对照JEG-3外,其他细胞均不表达HLA-G2 mRNA;表达HLA-G3 mRNA的细胞有HO-8910、HO-8910PM、K562、HL60、MUTZ-1、OVCAR-3、Jurkat;表达HLA-G4 mRNA的细胞有HO-8910、HO-8910PM、HL60、Jurkat;表达HLA-G5mRNA的细胞为Jurkat.FACS分析显示在JEG-3、HO-8910PM、Jurkat细胞膜表面表达HLA-G分子,而除JAR细胞外,其他细胞内均表达HLA-G分子.结论 HLA-G2、-G3、-G4、-G5、-G6均不能在细胞表面表达,而HIJA-G1分子则能在特定的细胞表面表达.     

氨基甾体H42649对K562白血病细胞的抑制增殖和诱导分化作用

目的观察氨基甾体H42649对人慢性粒细胞白血病K562细胞系的抑制增殖和诱导分化作用。方法采用液体培养实验,MTT实验,集落培养实验观察10-8～10-4mol/L浓度的H42649对K562细胞增殖能力的影响;采用Wright-Giemsa染色,联苯胺染色和流式细胞术评价10-6mol/L浓度的H42649对K562细胞的诱导分化作用。结果不同浓度的H42649连续作用K562细胞1～5 d后,细胞计数和集落计数明显减少;第5 d处理组的MTT值显著低于对照组,并呈剂量依赖关系;10-6mol/L浓度的H42649对K562细胞作用5d后,联苯胺染色A值升高(P<0.01),形态学观察其趋向成熟分化,流式细胞术检测药物处理4 d后K562细胞膜上CD71表面标记表达阳性率为84%。结论氨基甾体H42649能显著抑制K562细胞的增殖并诱导其向红系分化,提示该药可作为一种新型慢粒白血病细胞的诱导分化剂。     

As_2O_3逆转K_(562/ADM)细胞多药耐药的研究

目的　阐述As2 O3 (三氧化二砷 )治疗人红白血病机制。方法　采用人红白血病多药耐药株K562 / ADM作为实验模型 ,研究As2 O3 对该细胞MDR逆转的可能性。结果　①K562 / ADM 细胞对ADM具有明显的抗性 ,与K562 细胞相比 ,抗性倍数约为 4 0倍 ,而两者对As2 O3 的IC50 接近 ,无显著差异 ;②低毒剂量的As2 O3 (1 0 μmol/L)与ADM(4 0 μg/ml)联合运用 ,可升高细胞内ADM的浓度 ,降低细胞对ADM的IC50 ,使该细胞对ADM的抗性有数倍逆转。结论　As2 O3 是一种有效的MDR逆转剂。