人类白细胞抗原-G在临床医学中的研究进展

人类白细胞抗原(HLA)-G是一类非经典HLAⅠb类分子, 早期的研究主要集中在妊娠免疫, HLA-G可保护胎儿免受母体免疫系统的攻击。近几年越来越多的研究发现HLA-G在诱导器官移植物免疫耐受、协助肿瘤细胞以及病毒的免疫逃逸中发挥着重要作用。因此将HLA-G作为器官移植、恶性肿瘤和病毒感染等疾病诊断和治疗的靶点已逐渐成为学者关注的热点。本文就HLA-G的基因多态性与分子结构、HLA-G在临床医学中应用的最新进展做一总结。     

人类白细胞抗原-G与免疫耐受的研究进展

人类白细胞抗原(HLA)-G是位于人6号染色体短臂上的一群紧密连锁基因群,属于人类一种非经典的主要组织相容性复合体(MHC)的Ⅰ类分子,选择性高表达于侵入子宫蜕膜的绒毛外滋养细胞。母胎免疫耐受是天然的同种异体免疫耐受现象,虽然胎儿含有一半与母体基因无关的父源性基     

人类白细胞抗原-G和人类白细胞抗原-E在妊娠免疫耐受中的作用

人类白细胞抗原（HLA）-G、-E同属非经典主要组织相容性复合物（MHC）I类分子,于母胎界面滋养层细胞高表达,在妊娠免疫耐受中发挥重要作用。HLA—G和HLA—E主要通过和自然杀伤（NK）细胞、T淋巴细胞表面抑制性CD94／NKG2C受体或激活性CD94／NKG2A受体结合,抑制或激活免疫细胞效应,维持正常妊娠免疫耐受。HLA-G和HLA—E基因结构及表达异常可能与妊娠并发症相关,可作为判定正常妊娠和妊娠相关疾病指标。本文综述HLA-G和HLA—E结构和分布、与免疫细胞可能的作用机制以及相关临床应用,讨论其在维持母胎免疫耐受中的作用。     

人类白细胞抗原-G1蛋白纯化及其免疫耐受机制初探

目的原核体系诱导表达并纯化人类白细胞抗原-G1(human leukocyte antigen-G,HLA-G1)蛋白,研究HLA-G1分子对人B淋巴细胞内白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)表达水平的影响,进而探究HLA-G1在肾移植受者中B细胞介导的免疫耐受机制。方法通过原核表达体系,构建表达并纯化HLA-G1蛋白,经过蛋白免疫印迹试验(Western Blot)鉴定后,与人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)共培养,利用流式细胞仪检测B淋巴细胞内IL-10的表达情况。结果十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰氨凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electropheresis,SDS-PAGE)、Western Blot结果表明,纯化后的蛋白分子量大小约为38.2 kDa,符合HLA-G1蛋白的分子量;人PBMC与HLA-G1蛋白共培养后,随着HLA-G1蛋白浓度的升高(浓度梯度:0、50、100和200 ng/ml),B细胞内IL-10的表达水平明显增加,分别为0.1%、0.36%、0.57%、0.73%。结论通过原核表达系统获得HLA-G1蛋白,纯度达95%以上,HLA-G1蛋白与人PBMC共培养后,可诱导B淋巴细胞表达IL-10,并具有浓度依赖性,提示其对肾移植免疫耐受的建立具有重要作用。     

肝癌白细胞抗原-G的表达及其在肝癌肝移植预后中的价值

目的探讨人类白细胞抗原-G(human leukocyte antigen-G,HLA-G)在肝细胞肝癌组织中的表达及其在肝癌肝移植患者预后中的价值。方法回顾性分析2004年1月至2008年5月期间中山大学附属第三医院肝移植中心收治的83例肝癌肝移植患者的临床资料。应用免疫组化方法检测肝细胞肝癌组织及其癌旁组织中HLA-G的表达情况,应用Kaplan-Meier法计算累积生存率和无瘤生存率,采用log-rank检验和Cox回归模型分别进行无瘤生存率单因素和多因素分析。结果 83例肝癌肝移植患者中,35例(42.2%)肿瘤复发。全部病例1、3和5年累积生存率分别为97.2%、89.8%和43.1%,1、3和5年无瘤生存率分别为93.6%、68.9%和38.7%。肝癌组织中HLA-G表达阳性率(68.7%)明显高于癌旁组织(15.7%,P<0.01)。HLA-G的表达与肿瘤直径、病理分级和血管侵犯有关(P<0.05)。单因素分析显示,影响肝癌肝移植术后无瘤生存率的危险因素有HLA-G表达(P<0.01)、肿瘤直径(P<0.05)、肿瘤侵犯血管(P<0.01)及病理分化程度(P<0.01)。HLA-G表达阳性组移植后的无瘤生存率低于HLA-G表达阴性组(P<0.01)。Cox风险回归模型结果表明,HLA-G表达(P<0.05)、肿瘤侵犯血管(P<0.01)及病理分化程度(P<0.05)是影响肝癌肝移植患者术后无瘤生存率的独立危险因素。结论肝癌组织存在HLA-G表达。HLA-G表达、肿瘤侵犯血管及病理分化程度是影响肝癌肝移植患者术后无瘤生存率的独立危险因素。对HLA-G表达阳性患者采取干预治疗及严格筛选肝癌肝移植的适应证可有效降低术后肿瘤的复发率。     

人类白细胞抗原-G阳性的脐带间充质干细胞 体外诱导调节性T细胞的实验研究

目的  探讨人类白细胞抗原（HLA）-G阳性的脐带间充质干细胞在体外诱导调节性T细胞（Treg）产生的效果。方法  从新生儿脐带中分离脐带间充质干细胞,采用脂质体转染的方式将PEGFP-N1-HLA-G质粒转染到脐带间充质干细胞中,设为PEGFP-N1-HLA-G组; 转染空载体PEGFP-N1质粒的脐带间充质干细胞设为PEGFP-N1组; 相同条件下,未加入空载体的脐带间充质干细胞设为空白对照组。采用流式细胞仪检测脐带间充质干细胞标志物; 采用蛋白质免疫印迹法鉴定各组细胞HLA-G蛋白的表达; 各组细胞与健康人外周血中CD4⁺T细胞混合培养24 h和48 h后,采用流式细胞仪检测CD4⁺ CD25⁺ Foxp3⁺Treg占全部T细胞的比例。结果  脐带间充质干细胞CD45、CD34和HLA-DR呈阴性表达,CD29、CD44和CD105呈阳性表达; PEGFP-N1-HLA-G组可以表达HLA-G蛋白,与空白对照组和PEGFP-N1组比较差异均有统计学意义（均为P < 0.01）。PEGFP-N1-HLA-G组细胞在与CD4⁺T细胞混合培养24 h后,CD4⁺ CD25⁺ Foxp3⁺Treg占全部T细胞的（15.3±1.9）%,在培养48 h后,CD4⁺ CD25⁺ Foxp3⁺Treg占全部T细胞的（14.3±2.1）%,与空白对照组和PEGFP-N1组比较,差异均有统计学意义（均为P < 0.05）。结论  HLA-G基因修饰后脐带间充质干细胞能够有效地在体外诱导CD4⁺ CD25⁺ Foxp3⁺Treg的产生。     

胰腺癌组织中Bax蛋白和Fas抗原表达及意义

目的研究胰腺癌组织中Ｂａｘ蛋白和Ｆａｓ抗原的表达及意义。方法ＡＢＣ免疫组织化学法。结果胰腺癌３９例中Ｂａｘ蛋白阳性１８例（４６％）和Ｆａｓ抗原阳性２２例（５６％）;高分化（７／２０,８／２０）、组织学分级Ⅰ级（４／１５,５／１５）和未转移（７／２０,８／２０）的胰腺癌Ｂａｘ蛋白和Ｆａｓ抗原阳性率明显低于低分化（１１／１９,１４／１９）、组织学分级Ⅲ级（７／９,８／９）和转移（８／１３,１０／１３）的胰腺癌（Ｐ均＜００５）。结论Ｂａｘ蛋白和Ｆａｓ抗原可能是反映胰腺癌生物学行为和预后的重要标记物,阳性表达者可能恶性度高和预后不良     

星形细胞肿瘤中PTEN蛋白表达与微血管密度的意义

<正>PTEN基因是近年研究发现的一个具有磷酸酯酶活性的抑癌基因,为抑制肿瘤生长所必需[1],而血管形成是实体肿瘤生长与增殖的基础,与许多恶性肿瘤的预后直接相关[2]。胶质瘤是成人最常见的脑肿瘤之一,其中以星形细胞肿瘤最多见[3]。     

肿瘤-睾丸抗原在胃癌组织中的表达

我们对MAGE 1、MAGE 3、BAGE、LAGE、NY ESO 1、SCP 1、SSX 2和SSX 4这 8种肿瘤 睾丸抗原 (CTA)在胃癌组织及其相应正常组织中的表达进行检测 ,旨在为特异性免疫治疗在胃癌中的应用提供依据。一、对象与方法1.组织标本 :42例胃癌组织标本取自上海瑞金医院普外科 2 0 0 3年 5月～2 0 0 3年 10月间手术治疗胃癌患者 ,同时取距离肿瘤边缘 5cm以上癌旁正常组织作为对照。标本经手术切除后立即放入液氮中 ,3 0min后保存于 -80℃直至RNA抽提。所有胃癌组织及相应正常组织均经术后病理证实。其中 ,男 2 8例 ,女 14例 ,低分化腺癌 2…     

骨肉瘤细胞HLA表达及其生物学意义的研究

目的探讨HLA在骨肉瘤细胞上的表达与其生物学意义的关系。方法采用免疫组化技术对骨肉瘤标本的HLA表达进行检测。结果骨肉瘤组与正常对照组相比，HLA-Ⅰ类抗原表达下降(P＜0.01)，HLA-DR抗原表达增强(P＜0.01)。典型骨肉瘤组与皮质旁骨肉瘤组相比，HLA-Ⅰ类抗原表达下降(P＜0.01)，而HLA-DR抗原表达却无统计学差异(P＞0.05)。典型骨肉瘤HLA表达与肺转移和生存期之间无统计学差异(P＞0.05)。结论骨肉瘤细胞与癌细胞一样，HLA-Ⅰ类抗原表达降低与其恶性程度相关；HLA-DR抗原有限的表达增强，不能产生有效的免疫应答而杀伤肿瘤细胞。因此。HLA-Ⅰ类抗原降低或缺失是骨肉瘤细胞免疫逃逸的原因之一。     

睾丸肿瘤组织HLA—I抗原表达与预后的关系

为探讨睾丸肿瘤组织ＨＬＡ－Ｉ抗原表达与预后的关系，采用免疫组织化学方法（ＡＢＣ法）对５５例睾丸肿瘤组织的石蜡切片进行检测，以观察其ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达情况。结果：正常睾丸组织、间质组织Ｌｅｙｄｉｇ细胞呈深棕黄染色，在曲细精管内Ｓｅｒｔｏｌｉ细胞染色（＋＋）。５５例睾丸肿瘤组织中，精原细胞瘤Ｉ期的７２．０％，Ⅱ期的５４．６％染色；非精原细胞瘤仅Ⅰ期折７５．０％染色，ＨＬＡ－Ｉ抗原的表达随肿瘤临床分期     

HLA-DR抗原在结肠癌组织中的表达及其意义

目的　探讨HLA DR在结肠癌组织及正常结肠上皮中的表达及其意义。方法　采用免疫组织化学ABC法检测 32例结肠癌和正常结肠上皮组织中HLA DR的表达情况 ,分析其表达水平与结肠癌Dukes分期的关系。数据处理采用多个样本率的 χ2 检验。结果　 34 3%的结肠癌及 93%的正常结肠上皮组织表达HLA DR ,且结肠癌中表达的阳性率随其病程发展而降低 ,在不同Dukes分期之间的阳性率差异有显著意义 (χ2 =6 2 4,P <0 0 5 )。结论　HLA DR可能作为结肠癌发生发展不同时期的一个标志物 ,参与抗癌免疫应答。     

Clusterin蛋白在肾癌组织中的表达及临床意义

目的 探讨clusterin蛋白在肾癌组织中的表达及临床意义。方法 制作87例肾癌组织芯片，应用免疫组织化学方法检测肾癌组织中clusterin蛋白表达，应用TUNEL方法检测细胞凋亡情况，分析clusterin蛋白表达与肾癌细胞凋亡及临床病理学参数之间的相关性。结果 68例有效检测的肾癌组织标本中，clusterin蛋白过度表达15例（22％），且其表达与肿瘤浸润有显著相关性（P=0．004），71％（5／7）的T3肿瘤clusterin蛋白呈过度表达，84％（51／61）的T1、T2肿瘤clusterin蛋白为正常表达。57％（4／7）伴有淋巴结转移的肾癌组织标本clusterin蛋白呈过度表达，阳性率高于无淋巴结转移者（18％，11／61，P=0．059）。clusterin蛋白表达与肿瘤凋亡指数（AI）呈负相关（P=0．0138），61％（8／13）clusterin过度表达的肿瘤表现为低水平的AI值，78％（39／50）clusterin正常表达的肿瘤AI值为高或中水平。结论 肾癌组织中clusterin蛋白过度表达可能与其抗凋亡作用有关，与肾癌的恶性临床表型相关，可作为判断肾癌恶性程度的指标之一。     

前列腺干细胞抗原和PTEN蛋白在前列腺癌组织中的表达及其相关性

<正>~~     

肝细胞癌人白细胞ABC和DR抗原的表达及意义

目的探讨人白细胞抗原(HLA)Ⅰ类和Ⅱ类分子在肝细胞癌(简称肝癌)的表达情况及其意义.方法采用免疫组化法分别检测HLA-ABC和HLA-DR抗原在46例人肝癌组织、10例人正常肝组织以及SMMC-7721、HHCC、HCC-9204和BEL-7402等4种人肝癌细胞系和人正常肝细胞系QZG的表达情况,并以图像分析仪进行定量分析.结果肝癌和正常肝组织及其相应细胞系的HLA-ABC和HLA-DR抗原阳性信号均主要定位于细胞浆.肝癌组织表达HLA-ABC的强度明显弱于正常肝组织(P<O.05),而对HLA-DR的表达明显强于正常肝组织(P<0.05).4种肝癌细胞系的HLA-ABC表达强度均明显低于QZG细胞(P<0.05),但对HLA-DR的表达与QZG细胞未见明显差异(P>0.05).结论肝癌组织和肝癌细胞系中HLA-ABC抗原表达有所下降.肝癌组织有HLA-DR抗原表达增强,而肝癌细胞系基本上不表达HA-DR.     

PSA在睾丸肿瘤、肾细胞癌、肾上腺肿瘤组织中的表达及其意义

目的探讨前列腺特异性抗原（ＰＳＡ）在前列腺外肿瘤组织中的表达及其意义。方法用免疫组化法分别对５５例睾丸肿瘤（ＴＴ）、４６例肾细胞癌（ＲＣＣ）和５１例肾上腺肿瘤（ＡｄＴ）组织中ＰＳＡ和类固醇激素受体（ＡＲ、ＰＲ、ＥＲ）进行监测。结果ＰＳＡ在ＴＴ、ＲＣＣ、ＡｄＴ组织中表达率分别为４１％、４１％和４４％。其表达均与ＡＲ和（或）ＰＲ的存在有关。ＰＳＡ在功能性ＡｄＴ组织中的表达高于非功能性者。ＰＳＡ阳性ＴＴ及ＲＣＣ患者５年生存率明显高于ＰＳＡ阴性者。结论ＰＳＡ在前列腺外肿瘤组织中亦有表达,可以是ＴＴ及ＲＣＣ患者的预后指标,ＰＳＡ的存在可能与ＡｄＴ的功能性有关。     

增殖细胞核抗原表达在肾细胞癌侵袭和转移性评估中的价值

侵袭和转移是影响肾细胞癌预后的重要因素 ,我们采用免疫组织化学技术检测 10 2例肾癌患者的癌细胞增殖细胞核抗原 (ＰＣＮＡ)表达 ,探讨其在肾癌侵袭和转移能力评估中的价值。1.资料和方法 :10 2例肾癌患者经根治术 ,取其肾癌标本 10 2份 ,根据是否存在浸润或转移 ,分为浸润转移组与非浸润转移组。远隔脏器转移 ,肾包膜外、肾外脏器浸润或肾、腔静脉癌栓依据术前影像学及术中探查、术后病理诊断 ;肾门淋巴结、镜下癌周组织及微静脉浸润由病理组织学检查 (图 1～ 3)确认 ,方法见李泉林等[1] 报道。应用标准过氧化物酶 链霉卵白素 (ＳＰ)免疫…     

少枝胶质细胞肿瘤星形细胞上调基因-1表达及其临床意义

目的 探讨少枝胶质细胞肿瘤AEG-1的表达,及其与肿瘤恶性程度和预后的关系.方法 回顾性复习42例经病理证实的少枝胶质细胞肿瘤患者的病史资料,随访患者的预后,采用免疫组织化学法检测42例肿瘤标本和4例正常脑组织AEG-1表达.结果 AEG-1总阳性率为45.2%(19/42),OG(WHOⅡ)组和AOG(WHOⅢ)组的表达率分别为35.5%(11/31)和72.7%(8/11)(x2=4.55,P<0.05),表达水平与肿瘤的级别呈正相关(r=0.392,P<0.05),4例正常脑组织中均无AEG-1表达.42例患者中,失访率14.3%(6例),AEG-1(-),(+)和(艹)组中位生存期分别为7.6、2.3、1.6年(x2=32.74,P<0.01),表明AEG-1的表达水平与少枝胶质细胞肿瘤患者的生存时间呈负相关(r=-0.876,P<0.01).结论 AEG-1可能是少枝胶质细胞肿瘤恶性程度的分子标志物之一,可作为临床评估预后的潜在指标之一.     

P73和c-fos蛋白在血管瘤组织中的表达及意义

目的　探讨p73和c fos蛋白在血管瘤组织中的发生、发展及临床意义。方法　采用免疫组织化学检测增生期血管瘤、退化期血管瘤及正常皮肤组织中p73和c fos蛋白的表达。结果　在血管瘤增生期中p73和c fos蛋白有较高表达 ;退化期血管瘤和正常皮肤组 ,p73和c fos表达极弱。增生期血管瘤与退化期血管瘤、正常皮肤组分别相比 ,p73和c fos蛋白阳性表达均有统计学意义 (P <0 0 1) ,退化期血管瘤与正常皮肤组 ,p73和c fos蛋白阳性表达的差异均无统计学意义 (P >0 0 5 )。结论　p73和c fos蛋白在血管瘤的发生、发展及其演变过程中起着重要的作用。